如何確保生物活性

㈠ 用什麼方法去掉植物細胞的細胞壁，並且保證細胞膜及內容物的生物活性

去掉細胞壁的植物細胞叫原生質體，保留有細胞活性。
用於植物原生質體游離的酶組成主要是纖維素酶和果膠酶，有時再加入半纖維素酶。酶液濃度一般為纖維素酶1% ~ 2%，果膠酶0.5% ~ 1%。濃度過低，去壁率低，影響原生質體分裂；濃度高則破裂多，產率低，褐化嚴重，分裂頻率低。酶液pH 5.1 ~ 5.8，酶解時間幾小時至幾十小時不等，以獲得足以滿足所需原生質體的數量為准。但是，酶解時間過長會造成先前已經游離的原生質體解體、破碎或非目的融合，所以，一般不超過24 h。酶解溫度以45 ~ 50℃最佳，但對植物細胞來說太高，一般都在25℃左右酶解。這有利於保持原生質體的活力。酶解處理通常靜置在黑暗中進行，偶爾用手輕輕搖晃即可。對於愈傷組織、懸浮細胞等難游離原生質體的材料，可置於低速（30 ~ 50 rpm）的搖床上促進酶解。

㈡ 生物活性的活性檢測

材料表面在 SBF 中形成磷灰石的能力能夠反應材料在體內的生物活性，具體檢測方法如下：
1.SBF 配置
由於SBF 溶液對於磷灰石過飽和，所以配備方法不恰當會導致溶液中磷灰石沉澱產生。整個配備過程需要確保溶液無色、透明，容器表面無沉澱出現，如果過程中產生沉澱，倒去溶液，洗凈儀器重新配製。准備一個 1000ml 的塑料燒杯。首先於塑料燒杯中裝好 700ml 離子交換蒸餾水、一個適當大小磁子，杯口密封以蒸發皿或塑料薄膜。攪拌並調節水溫至 36.5±1.5C。
按表1所列順序在 36.5C 恆溫下逐個溶解第一到第八個化合物，溶解過程
表1 配置1000 ml SBF 溶液時試劑添加順序、添加量 Order Reagents Amounts Containers Purities（%） Formula weights 1 NaCl 8.035 Weight paper 99.5 58.4430 2 NaHCO3 0.355 Weight paper 99.5 84.0068 3 KCl 0.225 Weight bottle 99.5 74.5515 4 K2HPO4·3H2O 0.231 Weight bottle 99.0 228.2220 5 MgCl2·6H2O 0.311 Weight bottle 98.0 203.3034 6 1.0 M-HCl 39ml Graated cylinder — — 7 CaCl2 0.292 Weight bottle 95.0 110.9848 8 Na2SO4 0.072 Weight bottle 99.0 142.0428 9 Tris 6.118 Weight paper 99.0 121.1356 10 1.0 M-HCl 0-5ml Syringe — — 2.磷灰石形成能力測試
對於密質薄片材料，測出樣品尺寸並計算樣品表面積精確到 2mm 應用如下公式計算出 SBF 用量：
Vs=Sa/10,
Vs（ml）是 SBF 的體積量，Sa（mm）表示樣品的表面積。
對於多孔材料，SBF 的用量應大於上式計算量准備好塑料瓶或燒杯，裝入計算出的 SBF 體積量加熱到 36.5C， 然後按示意圖往裡放置樣品。 筆記：樣品在容器中放置有兩種情況，如圖 1(a)，1(b)。少數情況下，SBF 溶液會生成同 質磷灰石沉積於樣品表面。所以如果樣品放置是圖 A1(b)種情況，表徵實驗應該檢測樣品的 下表面。 四個星期內，分別取出恆溫浸透不同時長的各組樣品，純水輕盈洗凈。然後將樣品放入乾燥 器中常溫乾燥。
圖1 SBF中樣品浸泡示意圖 1.四唑鹽（MTT）比色法：
檢測細胞存活和生長的方法除前面所介紹的方法外，還可用四唑鹽比色法試驗（MTT）。此法的原理是：活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性的MTT還原為難溶性的藍紫色結晶物，並沉積在細胞中，而細胞無此功能。二甲基亞碸（DMSO）能溶解細胞中的藍紫色結晶物，用酶聯免疫檢測，以在490nm波長處測定其光吸收值，可間接反應活細胞數量。在一定細胞數范圍內，MTT結晶物形成的量與細胞數成正比。
●0.25%胰蛋白酶消化細胞使其成為單細胞，用含0.1%胎牛血清的RPMI培養基配成1x10^9個/L的但細胞懸液，將細胞接種於96孔培養板中，每孔100ul。
●將培養板置CO2培養箱中，在37℃、5%CO2條件下，培養3-5天。
●培養3-5天後，每孔加入MTT溶液10ul，繼續置培養箱孵育3-6h，終止培養，加10%SDS-HCl 100ul/孔，37℃培養數小時，將細胞內與細胞周圍的MTT顆粒充分溶解。
●用酶聯免疫檢測儀測定每孔吸光度（OD），選波長490nm。以時間為橫軸，OD值為縱軸繪制細胞生長曲線。
用此法測細胞活力，為保證結果的准確性，最好在試驗前測定每種細胞的貼比率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線，再確定每孔細胞接種數和培養時間，以保證培養終止時不會過滿。另外，實驗時設空白對照，比色時，以空白孔調零。
3.2.2 CCK-8 法
Cell Counting Kit-8（簡稱CCK-8）試劑可用於簡便而准確的細胞增殖和毒性分析。其基本原理為：該試劑中含有WST-8【化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產物（Formazan dye）。生成的甲瓚物的數量與活細胞的數量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。
● 制備細胞懸液：細胞計數
● 接種到96孔板中：根據合適的鋪板細胞數，每孔約100ul細胞懸液，同樣的樣本可做3個重復。
● 37℃培養箱中培養：細胞接種後貼壁大約需要培養2-4小時，如果不需要貼壁，這步可以省去。
●加入10ul CCK8：由於每孔加入CCK8量比較少，有可能因試劑沾在孔壁上而帶來誤差，建議在加完試劑後輕輕敲擊培養板以幫助混勻。或者直接配置含10%CCK8的培養基，以換液的形式加入。
●培養1-4小時:細胞種類不同，形成的Formazan的量也不一樣。如果顯色不夠的話，可以繼續培養，以確認最佳條件。特別是血液細胞形成的Formazan很少，需要較長的顯色時間（5-6小時）。
●測定450nm吸光度：建議採用雙波長進行測定，檢測波長450-490nm，參比波長600-650nm。

㈢ 蛋白質具有生物活性的充分條件是什麼啊要說到點上啊！

具有生物活性，
要使蛋白質具有活性多肽鏈要進行修飾、加工等，還要進行折疊具有一定的空間結構
剛合成的多肽鏈是沒有生物活性的。
蛋白質的結構可以分為四個等級。
一級結構：構成蛋白質的單元氨基酸通過肽鍵連接形成的線性序列，為多肽鏈。
二級結構：一級結構中部分肽鏈的彎曲或折疊產生二級結構。
三級結構：在二級結構基礎上進一步折疊成緊密的三維形式。三維形狀一般都可以大致說是球狀的或是纖維狀的。
四級結構：由蛋白質亞基結構形成的多於一條多肽鏈的蛋白質分子的空間排列。
形成肽鏈只是完成了蛋白質的一級結構。
須經高爾基體和內質網加工後，達到三級結構才有功能。
希望我的解釋能對你有幫助。
參考資料： ke..com/view/380971.htm

㈣ 什麼是生物活性

1、生物活性，在材料領域里主要指能在材料與生物組織界面上誘發特殊生物、化學反應的特性這種反應導致材料和生物組織間形成化學鍵合；
2、在生物礦化過程中，主要指生物材料與活體骨產生化學鍵合的能力，是衡量生物材料的一個重要指標，可通過材料表面在人體模擬體液中形成磷灰石的能力能夠反應材料在體內的生物活性；
3、此評價材料生物活性方法的應用可以減少實驗所需動物數量，同時增加動物實驗的可持續時間。

㈤ 我現在需要一種PH在4左右的緩沖溶液，關鍵要能保持生物活性，問問什麼情況會影響生物活性

PH在4的溶液是酸性較強的溶液，可用於緩沖偏鹼性的溶液，要保持生物活性，不能只看溶液的酸鹼度，還要結合生物適合在什麼環境下生長，有些是適合在偏酸性的環境下生長，有些是適合在偏鹼性環境下生長的。另外就是溫度和氧氣了

㈥ 如何驗證一個新化合物的生物活性

這個問題較難。得通過化合物的結構與組成元素等，推知化合物可能有的活性然後加以驗證。跟蛋白質比較像就推知有催化等。

㈦ 提取蛋白質時,如何保持它的生物活性

首先是提取物的助劑和提取劑要沒有毒性。然後提取時要保證相對平穩的提取環境，避免過酸過鹼，高溫。低溫使提取時間變長，但是低溫可以保證其不變性。同時，要注意提取過程中雜質的進入，以及器材盡量低毒無毒

㈧ 高中生物實驗中需要保持生物活性才能進行的歸納全一點

觀察葉綠體和細胞質流動，植物細胞的質壁分離和復原，觀察線粒體

㈨ 能立‎多奶‎粉是如何保護免疫物質生物活性的

它採用了TACHS收奶系統，原奶追‎溯，淘‎汰劣‎質牛奶；針孔冷凍乾燥技術，真空環境和低溫確保乳鐵蛋白和免疫球蛋白活性；離子交換色譜技術，在酸性條件下成功從牛乳中分離出高純度乳鐵蛋白和免疫球蛋白。

㈩ 保存微生物活性的最佳方法是哪一種

低溫保存微生物是最好的方法，因為低溫會降低微生物的活性減少不必要的能量消耗，所以低溫是保存微生物或者生物體最好的方法！