A. 菌種選育的方法有哪些
較簡單的方法 是生產篩選育種法，較復雜的方法是誘變育種法，最復雜的方法 是雜交育種法。
1。生產篩選育種法這種方法實際上和微生物菌種復壯一 樣，只不過目的不同。
菌種復壯只要求菌種的性能恢復到原有的 水平就可以了，而生產篩選育種法要求其菌種是比原有菌種更佳 的新菌種，必須加大工作的重復性才能實現這個目的。
2。誘變育種法能顯著誘發微生物細胞變異（基因突變） 的因素稱為誘變劑。
誘變劑分為物理誘變劑及化學誘變劑。常用 的物理誘變劑有紫外線、X射線、y射線、6°CO和快中子，常用 的化學誘變劑有氮、芥子氣、亞硝酸、磷酸二乙酯、甲基磺酸乙 酯、甲基硝基亞硝基胍、5—溴尿嘧啶、2 —氨基嘌呤。
誘變劑引 起微生物細胞變異的頻率要比自然的變異高得多，所以誘變育種 能為我們提供更多的獲得優良菌種的機會。
B. 菌種復壯的主要原理
首先，我們要知道為什麼要菌種復壯。因為菌種保存久了，會自發的產生變異，自發突變對微生物來說很常見，發生變異後，微生物的特性就會改變，變成不是我們想要的特性。但是，在保存的菌種中，發生突變的微生物不可能是全部，總有一部分微生物還是原來的特性，所以復壯就是要把這些未變化的微生物再次篩選出來，再進行純化、保存。篩選的標準是原保存菌種的特性。
C. 微生物菌種保藏的方法有哪些
菌種的優劣是食用菌生產成敗的關鍵。菌種是國家重要的生物資源，也是微生物工廠首要的生產資料。由於微生物繁殖快、易變異，因此微生物菌種特別需要妥善保藏。世界各國對微生物菌種都很重視。中國科學院微生物研究所專門設立了菌種的保藏機構，為各生產單位收藏和供應各種優良菌種。當然就具體的生產單位而言，大量的生產用菌種還得靠自己來生產和保藏。
菌種保藏的目的：是使優良菌種經過較長時間後，仍能保持菌種的優良性狀、生活能力及純度，降低菌種的衰亡速度，確保菌種的純一，防止雜菌污染及絕種。
保藏菌種的方法：人們在長期的生產實踐中，積累了不少保藏菌種的經驗，常用的保藏方法有：斜面低溫保藏法、液體石蠟保藏法、砂土管保藏法、濾紙片保藏法、穀粒保藏法等。常用保藏菌種的方法有以下幾種：
（1）斜面低溫保藏法這是最簡單最普通的保藏方法。首先將菌種在適宜的斜面培養基（一般PDA）上培養成熟後，選擇菌絲生長粗壯，邊緣保存。一般保存溫度4～6℃，除草菇和銀耳菌種外（10～15℃），此方法對其他食用菌都適宜，一般菌種可保藏2～4個月，所以需定時移接。此法保藏雖然方便，但是保藏時間短，需經常轉管，也很容易發生衰退變異現象。因此，不能用作長期保藏，最好與其他方法結合起來保藏。
另外，為了減少保藏期間培養基水分蒸發，瓊脂最好加到2.5%。為防止菌種在保藏過程中產酸分的積累，應加入0.2%的磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀等緩沖鹽類，同時，培養成熟後，最好將棉塞管口外剪平，並用礦蠟封或換以無菌木塞，這樣做也可以減少培養基水分的散失，延長保存時間。
在農村如果沒有冰箱，可採用土法保藏。即把保藏用的斜面菌種換上無菌橡皮塞，並用礦燭蠟封後密閉的廣口瓶中，懸入井底保藏。（2）貯藏室保藏法原種和栽培種一般只在貯藏室短期保藏，貯藏室溫度0～10℃為好。室內應清潔、乾燥、無光，應經常檢查溫度和濕度，以降低其生活力，減少變異退化，防止雜菌污染，避免過早出菇。溫度越高，保存的時間越短。
D. 何謂菌種的退化和復壯
簡而言之,菌種退化就是基因變異的結果,菌種出現生長衰退.復壯就是找出未退化的菌種分離除來,重新培養,達到原來的生長水平不過哲學吧不該討論這種問題
E. 怎樣判斷菌種已復壯
復壯的判斷方法：
1.生化指標:比如一些能夠利用特殊物質作為生長必須物質的菌株，你可以通過其生活過程中某些中間代謝物的產量作為指標。或者是這個菌株產生的酶或者是這個菌株產生的次生代謝物。
2.生理指標：菌株如果復壯，那麼他的生長量就會恢復到原來的水平或者更高，適合用於群體研究。
3.通過特殊的生化反應篩選出復壯的菌株：比如說你的菌株能夠分解澱粉，那麼你可以使用澱粉培養基進行培養，培養後通過碘液顯色，粗略判斷其是否復壯。
F. 微生物學中菌種復壯的主要原理是什麼
我們看到和使用的菌種都是由以億計量的相同的細胞組成，與動物和人相比，微生物結構簡單，很容易繁殖，也很容易變異，所以，隨著時間，有些細胞的活性就會減弱，表現為「菌種」這個集合的活力就減弱了。在這種情況下，採用純培養技術，把單個細胞分離開來，讓他們在特定培養基上成長，把生長快，活性高的細胞挑出來，形成一個新的「菌種」集合體，也就是所謂的單細胞克隆吧。菌種復壯是發酵生產過程最常用的一個技術，也是靠微生物吃飯的企業賺錢的最基本方法。
G. 如何對微生物菌種進行活化
方法如下：
1 定期移植法的菌種復甦較簡單，直接轉接即可；
2 液體石蠟法保存的菌種在復甦時，挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上，生長繁殖後，再重新轉接一次；
3 沙土管法保存菌種在復甦時，在無菌條件下打開沙土管，取部分沙土粒於適宜的斜面培養基上，長出菌落後再轉接一次。或取沙土粒於適宜的液體培養基中，增殖培養後再轉接斜面；
4 真空冷凍乾燥法保存菌種在復甦時先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部，將安瓿管頂部燒熱， 用無菌棉簽沾冷水，在頂部擦一圈，頂部出現裂紋，用挫刀或鑷子頸部輕叩一下，敲下已開裂的安瓿管的頂端，用無菌水或培養液溶解菌塊，使用無菌吸管移入新鮮培養基上，進行適溫培養；
5 -80℃ 冰箱凍結法保存菌種復甦時，從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置38℃-40℃水浴中快速復甦並適當快速搖動。直到內部結冰全部溶解為止，約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內容物移至適宜的培養基上進行培養
6 液氮超低溫凍結法保存菌種復甦與-80℃ 冰箱凍結法保存菌種復甦相似，從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置在38℃-40℃水浴中快速復甦並適當搖動。直到內部結冰全部溶解為止，一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內容物移至適宜的培養基上進行培養。
H. 如何對退化的菌種進行復壯
如果一個菌種因遺傳變異而呈現退化，我們是無法通過改變環境條件使其恢復原狀的。因此，所謂「復壯」，是指從衰退的群體中找出尚未衰退的少數個體，以達到恢復菌種的優良性狀的目的；或通過改變某些內（如菌種的生理狀況）、外（如營養成分）因素，使因長期在人工條件（尤其是不適的條件）下培養，生活力和生理機能下降的菌種恢復生活力和正常生理機能的一種措施。
菌種復壯最好在菌種的生產性能尚未衰退之前及時進行，並定期對菌種進行復壯處理，以防衰退。主要通過淘汰已衰退的個體和定期重新分離菌種措施來完成。常有以下幾種方法：
（1）純菌種分離
自然界里，食用菌大都與細菌、黴菌、酵母菌等微生物混雜生活在一起，因此，為了獲得純菌種，就必須進行純菌種的分離培養。所謂純菌種分離是指採用無菌操作技術，將食用菌的菌種從混雜的微生物群中單獨地分離出來。常用的分離方法有孢子分離法、組織分離法、基內菌絲分離法和土中菌絲分離法。
在自然條件下，菌種的復壯，只有靠產生新一代才能實現，經有性繁殖所產生的孢子，是食用菌生活史的起點，具有豐富的遺傳特性。要有計劃的把無性繁殖和有性繁殖的方法交替使用，最好每年進行一次組織分離，3年進行一次有性繁殖。新分離的菌種，必須經過試驗，性能符合要求後，方能用於生產。
（2）更換培養基
在菌種的培養、保藏、繼代過程中，每隔一個時期，注意改變培養基成分（改變、調整、增加某種碳源、氮源或礦質元素等），或在原有的培養基中添加酵母膏、麥芽汁、氨基酸類物質和維生素等，或採用麥粒、穀粒、玉米粒等顆粒菌種，以刺激菌絲生長，提高菌種活力。
（3）適當添加維生素
在高溫的夏季，培養雙孢菇、鳳尾菇等食用菌母種時，在瓊脂培養基中加入適量維生素E或維生素B1，可延緩細胞衰老，而且產量還有增加的趨勢。
（4）菌絲液培養
從已退化的菌群中分離出仍保持原菌種典型性狀的單個菌體細胞，經生長測定後進行擴大培養，以恢復原菌種的優良性狀。具體操作是：在無菌條件下，將試管中菌絲體刮下，放入裝有100毫升無菌水的三角瓶中，充分振動搖勻，使菌絲分散，然後用注射器吸取10毫升菌絲液，注入裝有90毫升無菌水的三角瓶內，充分搖勻後，接入平板培養基上，每個平板接入2～3滴菌絲液，使菌絲液分散在平板上，在適宜溫度下培養使菌絲萌發，從中挑選健壯的菌絲接入斜面試管。等到菌絲長滿斜面，經試驗證明符合原菌種的性狀後，即可用於生產。
（5）尖端菌絲切取復壯
菌絲體的生長點位於菌絲的尖端，取菌絲的尖端旺盛生長點，進行分離培養，以得到優良的菌種。
（6）原基復壯分離法
此法適宜木腐菌的菇類，原基分離能保持母本性狀。由於原基形成的物質條件更優越化，因而更易篩選到優良菌株。如用滅菌的尖頭鑷子在無菌條件下鑷取金針菇原基，接入斜面培養基中，恆溫培養7～10天。選取菌絲濃密、氣生菌絲旺盛的斜面種再轉管，生長性狀穩定的即為復壯後的分離種。
（7）芽孢復壯
呂作舟、蔡衍山（1992）提出，銀耳菌種出耳率下降，可加入芽孢進行復壯。具體做法是：將約500毫升含5克葡萄糖和數滴乳酸滅菌營養液（pH5.5左右），分注入30～40支銀耳芽孢試管中，將芽孢菌落洗脫，即得芽孢懸液。芽孢懸液應隨配隨用，每瓶木屑種加 20毫升芽孢懸液，段木栽培的出耳率可明顯提高。
（8）種木分離
袋料栽培的木生菌類，要定期接入木材中，待長出子實體後，挑選菇木或耳木進行種木分離，從而達到復壯作用。
I. 菌種如何復壯呢
栽培種如果保存時間太長，是沒有辦法復壯的。如果菌絲體已經出現老化現象，最好不要再使用。