① 細胞保存液的特點
優點:
1、本試劑盒有裂解紅細胞功能。能快速裂解採集樣品中的紅細胞,裂解能力強,能完全裂解體積比為1/10(血液/液基)紅細胞量,相比同類產品裂解更完全,完全去除血液對檢驗結果造成的干擾。
2、試劑盒含有細胞固定劑成分,能快速對樣品中的白細胞、脫落上皮細胞等有檢驗價值的細胞進行固定保存,防止有效細胞發生自溶。經試劑盒固定保存的細胞,細胞形態完好,能保持樣品採集時細胞的原始形態,不會發生膨脹、固縮等形態變化,保證檢驗對有效細胞的數量和質量要求。
3、試劑盒能粘液具有稀釋作用,能分離出大量包埋在粘液中的有效細胞。使更多有檢驗價值的細胞被保存下來,提供充足的細胞數量,為檢驗結果的准確提供保證;同時,處理後的樣品經低速離心過濾後能徹底清除樣本中的粘液,有效防止粘液對樣品檢驗結果的干擾。
4、處理過的樣本經過低速離心後可製成均勻單層的細胞薄片,達到檢驗要求。
5、經本試劑盒處理的脫落細胞對生物染色劑具有親和性,有利於生物染色劑著色,為檢驗人員後續的工作提供方便。
6、本試劑盒使用簡單,操作方便,大大節省了制備樣品標本的時間,同時克服了傳統檢查方法的不足,是當前市場上推廣TCT保存液的最好產品。
液基薄層細胞學檢測技術(TCT技術)研究發展背景:液基薄層細胞學檢測技術(Thin-Cytologic Test TCT),液基薄層細胞製片檢查系統處理技術誕生於1991年美國等國家,率先應用於婦科細胞學檢查,國內從2001年開始作液基細胞學篩查宮頸癌的研究,使該項技術得到迅速發展,被稱之為一場細胞學製片技術的革命。
② 菌種保存方法甘油是什麼
微生物在甘油中生長和代謝受到抑制的原理從而達到保藏目的。而且,甘油管冷凍保藏法適用於一般細菌的保存,同時也適用於鏈球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌種,適用范圍廣,操作簡便,效果好,無變異現象發生。
甘油-生理鹽水保存液保存菌種優於甘油原液,其原因是加入生理鹽水適當降低了甘油的高滲作用,且有肉湯培養物適量增加保存液的營養成分,從而更好地保護了待保存的菌株。
甘油管冷凍保藏法的具體步驟(供參考):
1、配製30%甘油(100%甘油:無菌水=3:7),高壓滅菌後備用。
2、取lEP管一隻,用接種環無菌刮取菌落若干,涮洗在盛有PBS的EP管中(也可用PBS洗滌培養基上的菌落製成懸液,再吸取懸液置於EP管中)。
3、在盛有菌懸液的EP管中加等量30%甘油。
4、封蓋好,作好標記,置於-70℃凍存。也可以用生理鹽水取代PBS。
③ 病毒保存液是什麼
病毒保存液適用於病毒、流感病毒、手足口病毒等常見病毒樣本採集保存運輸工作,是采樣管內浸末采樣拭子病毒樣本一種保護病毒的被檢測物質的液體,可採集咽拭子、鼻拭子或特定部位組織樣本,儲存的樣本可用於後續的核酸提取或純化等臨床實驗。 通常分為兩種,一種是非滅活型,能夠保護病毒的蛋白和核酸,另一種是滅活型,通常含有滅活病毒的裂解鹽,裂解蛋白而保護核酸。 1、滅活型:添加有裂解鹽的病毒保存液就是滅活型的病毒保存液,裡面含有的Tris、裂解鹽、EDTA等主要目的是裂解核酸而釋放出核酸,從而通過後續的實時熒光RT-PCR進行核酸檢測,以此判斷樣本是否含病毒特徵核酸,即是否感染病毒。核酸是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)兩類,是生命的最基本物質之一。 病毒結構單一,就只含有一種核酸和蛋白質,因此檢測出特徵核酸就檢測除了病毒。病毒屬於寄生生物,采樣後體外無法存活,如果不能及時檢測,就需要放入病毒保存液中。為了保護病毒檢測環境的安全性,就需要加入裂解鹽來滅活病毒,釋放出可以被檢測的核酸即可。 2、非滅活型:除了滅活型的病毒保存液,此外還有非滅活型病毒保存液,不含裂解鹽,但是保存的病毒完整性更好,檢出率更高,除了核酸檢測外還可以用於其他研究。 滅活型病毒保存液則使用上更安全,操作環境要求也不用那麼嚴格,各有各的優勢,目前研究的非滅活病毒保存液的成分主要為Hank's液基礎,在Hank's液基礎之上,還添加了諸如慶大黴素、真菌抗生素、BSA(牛血清白蛋白第五組分)、生物緩沖劑HEPES、氨基酸、冷凍保護劑、甘油等多種組分
④ 微生物的保藏技術各自特點
1.傳代培養保藏,方法簡便但是其缺點也很明顯菌種管棉塞經常容易發霉,菌株遺傳性狀易變異,需定期轉種,工作量大,且易被污染;2.冷凍保藏,適用抗凍能力強的微生物,注意保藏過程中菌種的退化。3.乾燥保藏,主要適用於能形成孢子或孢子囊的微生物菌種,其中有包括沙土管保存和冷凍真空保藏。前者簡單易行,適合實驗室以及放線菌為菌種的保存,後者適合絕大部分菌種的保藏包括噬菌體和立克次氏體等的保藏。望採納
⑤ 微生物學知識點
簡述致病菌引起全身感染後,常見的幾種類型?
答:①毒血症②菌血症③敗血症④內毒素血症⑤膿毒血症
試述構成細菌侵襲力的物質基礎。
答:①莢膜②黏附素③侵襲性物質
簡述病原菌感染機體後,機體如何發揮抗菌免疫功能?
答:首先遇到機體的非特異性免疫包括皮膚與粘膜構成的屏障結構,血腦屏障,胎盤屏障及吞噬細胞對細菌的非特異性的吞噬和體液中殺菌抑菌物質對細菌的攻擊。7-10天後,機體產生特異的細胞免疫和體液免疫與非特異性免疫一起殺滅病原菌
簡述細菌耐葯性產生的主要機制。
答:①鈍化酶的產生②葯物作用靶位發生改變③胞壁通透性的改變和主動外排機制④抗菌葯物的不合理使用形成了抗菌葯物的選擇壓力,在這種壓力的作用下,原來只佔很少比例的耐葯菌株被保留下來,並不斷擴大。
舉例說明細菌命名的原則。
答:細菌的命名一般採用國際上通用的拉丁文雙命名法。一個細菌種的學名由兩個拉丁字組成,屬名在前,用名詞,首字母大寫;種名在後,用形容詞,首字母小寫;兩者均用斜體字。中文譯名種名在前,屬名在後。如Mycobaterium tuberculosis (結核分枝桿菌)。屬名亦可不將全文寫出,只用第一個大寫字母代表,如M. tuberculosis
如何確定從標本中分離的細菌為葡萄球菌?並確定其有無致病性。
答:①直接鏡檢,經革蘭染色後鏡檢發現革蘭染色陽性呈葡萄狀排列的球菌,可初步報告疑為葡萄球菌,需進一步分離培養鑒定。②分離培養:血培養需經增菌後轉種血平板進一步鑒定,若無細菌生長,需連續觀察7天,並以血平板確定有無細菌的生長。膿液、尿道分泌物、腦脊液沉澱物可直接接種血平板,37℃過夜,可形成直徑約2-3mm、產生不同色素的菌落。金葡菌菌落周圍有透明溶血環。③試驗鑒定:血漿凝固酶試驗,甘露醇發酵試驗,耐熱核酸酶試驗,腸毒素測定,SPA檢測。致病性葡萄球菌菌落周圍有透明溶血環,血漿凝固酶試驗陽性,甘露醇發酵試驗陽性,耐熱核酸酶試驗陽性,SPA檢測有A蛋白的存在。
什麼是不耐熱腸毒素(LT)?它的物理性質、基本結構、致病機理及與霍亂毒素(CT)的關系如何。
答:LT是腸產毒型大腸桿菌產生的致病物質,因對熱不穩定,故稱為不耐熱腸毒素。其65℃30min可被破壞。LT分為LT-Ⅰ和LT-Ⅱ,LT-Ⅱ與人類疾病無關,LT-Ⅰ是引起人來胃腸炎的致病物質。其結構包括1個A亞單位和5個B亞單位,其中A亞單位是毒素的活性部分。B亞單位與腸粘膜上皮細胞表面的GM1神經節苷脂結合後,使A亞單位穿越細胞膜與腺苷環化酶作用,令胞內ATP轉變為cAMP。胞質內cAMP水平增高後,導致腸粘膜細胞內的水、氯和碳酸氫鉀等過度分泌到腸腔,同時鈉的吸收減少,導致可持續幾天的腹瀉。LT-Ⅰ與霍亂腸毒素兩者間的氨基酸的同源性達75%,他們的抗原高度交叉。
⑥ 跪求:微生物保存方法,各種保存方法的保存時間
1斜面低溫保藏法:有芽孢細菌存半年,無則一個月。2液體石蠟保藏:兩年。3沙土保藏:十年。4麩皮保藏:一年。5懸液保藏:一到兩年。6冷凍真空乾燥法:五到十五年。7液氮超低溫法:十到二十年。8低溫保藏法:一年。9甘油保藏法:半年
⑦ 什麼是微生物菌種保藏
1.傳代培養保藏法
又有斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基培養等(後者作保藏厭氧細菌用),培養後於4—6℃冰箱內保存。
2.液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養的變相方法,能夠適當延長保藏時間,它是在斜面培養物和穿刺培養物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養基水分蒸發而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進入,以減弱代謝作用。
3.載體保藏法
是將微生物吸附在適當的載體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而後進行乾燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。
4.寄主保藏法
用於目前尚不能在人工培養基上生長的微生物,如病毒、、螺旋體等,它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內感染並傳代,此法相當於一般微生物的傳代培養保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍乾燥保藏法進行保藏。
5.冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、乾冰酒精快速凍結(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6.冷凍乾燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然後在減壓下利用升華現象除去水分(真空乾燥)。
⑧ 外泌體細胞保存液是做什麼的
細胞保存液起到保持、固定細胞原形態結構的作用,是病理細胞診斷基礎,因為如果細胞形態結構發生變化,可能會帶來診斷結果的誤差,所以需要細胞保存液進行固定細胞形態,細胞保存液也是液基細胞試劑的核心構成。
液基薄層細胞製片檢查系統處理技術誕生於1991年美國等國家,率先應用於婦科細胞學檢查,國內從2001年開始作液基細胞學篩查宮頸癌的研究,使該項技術得到迅速發展,被稱之為一場細胞學製片技術的革命。
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細胞保存液適用於宮頸脫落細胞檢查、胸腹水脫落細胞檢查、尿沉渣檢查、痰液脫落細胞檢查、針吸細胞檢查,基本上病理科、婦科、內科、外科、泌尿科等科室會用到。液基薄層胞學檢測技術特別適用於所有的女性的宮頸癌的早期診斷,是一項非常值得推廣應用的臨床檢驗技術。
脫落細胞保存液適用於各類脫落細胞如宮頸粘液、陰道分泌物、痰、鼻咽分泌物及其它粘稠性標本的處理,以佳效果進行細胞形態學檢查,可以溶解、去除各類脫落細胞標本中影響顯微鏡下可見的粘液、雜質,便於病理學及細胞學檢查。
液基細胞檢測試劑盒主要由細胞保存液、細胞裂解液、提取液、稀釋液、消化酶、防腐劑等及必要的細胞承載或製片器具組成,用於臨床檢驗分析前細胞或微生物的保存、運輸、提取、分離、沉澱、固定、製片等,用於各類脫落細胞如宮頸粘液、陰道分泌物等標本的處理,以佳效果進行宮頸癌篩查、炎症、HPV滴蟲、黴菌等細胞形態學檢查。
綜上所述,細胞保存液是液基細胞檢測試劑盒的成分之一,主要作用是為了保存和穩固細胞。
⑨ 病毒保存液具體是做什麼作用的呢
通常在病毒采樣後,樣本並不是都能在樣本採集處進行PCR檢測,因此需要對採集到的病毒拭子進行運輸和保存,病毒在體外環境是很難長時間保留的,很快降解後就無法檢測到核酸了,因此需要往采樣管內加入病毒保存液,我們單位實驗室用的德晟的保存液。
⑩ 細胞外泌體保存液是什麼
外泌體細胞保存液
外泌體是指包含了復雜 RNA 和蛋白質的小膜泡 (30-150nm),現今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年,外泌體首次於綿羊網織紅細胞中被發現, 1987年Johnstone將其命名為「exosome」。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源於細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合後釋放到胞外基質中 。
液基細胞保存液 是液基細胞學檢測技術(Thin-Cytologic Test TCT)主要耗材。液基薄層細胞製片檢查系統處理技術誕生於1991年美國等國家,率先應用於婦科細胞學檢查,國內從2001年開始作液基細胞學篩查宮頸癌的研究,使該項技術得到迅速發展,被稱之為一場細胞學製片技術的革命。