① 要做一個土壤微生物實驗,如何取其土樣
具體問題具體分析。這要看你的實驗目的。
一般情況下,我們是這樣取樣的。
譬如我們要選育一株耐高糖的菌株,就會在葡萄糖或乳糖廠家的附近采樣。
采樣時,鏟除表土,在距離地表5-20cm深處用無菌的不銹鋼勺子挖土,盛入事先准備的無菌防水紙袋或取樣袋中。然後記錄采土時間,地點,植被情況、環境情況等等。
② 實驗室該如何無菌采樣
液體樣品
液體樣品比較容易獲得,液態食品一般盛放在大罐中,取樣時可連續或間歇攪拌。對於較小的容器,可在取樣前將液體上下顛倒,使其完全混勻。取得的樣品應放在已滅菌的容器中送往實驗室,實驗室在取樣檢測之前應當把液體再徹底混勻一次。
固體樣品
固態樣品常用的取樣工具有解剖刀、勺子、軟木鑽、鋸、鉗子等,使用前均須滅菌。如奶粉等已經混勻的食品,其成分質量均勻穩定,可以抽取少量樣品檢測;散裝樣品要從多個點取樣,且每個點都要單獨處理,在檢測前要徹底混勻;肉類、魚類或類似食品既要在表皮取樣,又要在深層取樣,深層取樣時要小心不要被表面污染。
水樣
取水樣時,最好選用帶有防塵磨口瓶塞的廣口瓶。
如果樣品時從水龍頭上取得,龍頭嘴的里外都應擦乾凈。打開水龍頭讓水流幾分鍾,關上水龍頭並用酒精燈灼燒,再次打開水龍頭讓水流1-2min後再接樣並裝滿取樣瓶。如果檢測的目的是用於追蹤微生物的污染源建議還應在水龍頭滅菌前取樣會在龍頭的里外用棉拭子塗抹取樣,以檢測水龍頭自身污染的可能性。
從水庫、河流、井水等取水樣時,用無菌的器械或工具拿取瓶子和打開瓶塞,在流動水中取樣品是瓶嘴應直接對著水流。
帶包裝食品
直接食用的小包裝食品盡可能取原包裝,直到檢測前不要開封防止污染;桶裝或容器包裝的液體或固體食品應用無菌取樣器由幾個不同部位採取,一起放入滅菌容器內;冷凍食品抽樣之後送達實驗室前,要始終保持樣品處於冷凍狀態。若樣品一旦融化,不可使其再冷凍,保持冷卻即可。
無菌抽樣的規范性是保證樣品檢測准確性的前提,因此我們在取樣時應規范操作,確保從源頭杜絕污染。
③ 垃圾場的地質環境微生物細菌樣品的採集與分析
微生物樣品採集以能准確反映垃圾場對周邊地下水、地表水、土壤和空氣影響為目的,與其他採集樣品同時進行。采樣過程中要防止人為污染,確保檢測樣品的真實性、可靠性和准確性。
一、采樣工具、樣品容器的滅菌
在採集樣品之前要對所涉及到的微生物樣品的所有工具進行滅菌,滅菌方法以化學和物理方法為主。
化學滅菌方法主要用於較大采樣工具和不易用物理方法滅菌的器皿,如塑料製品等。滅菌用化學滅菌劑,以醫用滅菌液為主,如75%~85%的醫用消毒酒精等消毒液。滅菌方法為表層擦拭和浸泡,浸泡一般為5~10min,而後晾乾即用,不現用的要用無菌裝置包裝好,一般保存期不超過5天。但一般以現用現滅為好。
物理滅菌方法主要用於樣品容器,如水樣瓶、土樣鋁盒等的滅菌。滅菌方法是,將取樣容器刷洗干凈晾乾,用專用清潔紙將取樣容器包好,蒸汽高溫滅菌(121℃,30min),或高溫滅菌(160~180℃2h),一般保存期不超過一周。
二、取樣方法
微生物細菌水樣的野外取樣要求:微生物細菌水樣的野外取樣盡量使用專用的原位微生物細菌采樣器,地下水采樣在專用采樣器不能使用時,可用水泵抽水取樣,一般在抽水20~30min後進行取樣,並注意無菌取樣瓶口不要碰到任何使之污染的物質。
三、樣品採集量
(1)微生物細菌水樣。要求取兩瓶,一瓶取滿,取樣量為120~250mL,另一瓶不裝滿,取樣量為120~250mL,玻璃瓶取樣,瓶要洗凈涼干高溫滅菌(121℃,30min),取樣時不需要沖洗,直接取樣,不加固定劑,低溫0~4℃保存。
(2)土壤樣品。微生物細菌分析的樣品用滅菌鋁盒或塑料袋裝100~300 g密封,低溫0~4℃保存。
(3)微生物細菌樣最好在現場測試,如條件不允許,則應盡快送微生物實驗室。
④ 在食品微生物檢驗中,對樣品的採集方案有哪些要求
食品衛生微生物檢驗樣品的採集和處理
一、范圍
適用於各類食品樣品的采樣。
二、采樣用品
滅菌探子、鏟子、匙、采樣器、試管、吸管、廣口瓶、剪子、開罐器等。
三、樣品的採集
在食品檢驗中,所採集的樣品必須有代表性。食品中因其加工批號、原料情況(來源、種類、地區、季節等)、加工方法、運輸、保藏條件、銷售中的各個環節(例如有無防蠅、防污染、防蟑螂及防鼠等設備)及銷售人員的責任心和衛生認識水平等均可影響食品衛生質量,因此必須考慮周密。
1、采樣數量
每批樣品要在容器的不同部位採取,一般定型包裝食品採取一袋/瓶(不少於250g)及散裝食品採取250g.
2、采樣方法
(1)
采樣必須在無菌操作下進行。
(2)
根據樣品種類,袋裝、瓶裝和罐裝食品,應采完整的未開封的樣品。如果樣品很大,則需要無菌采樣器
取樣;固體粉末樣品,應邊取邊混合;液體樣品通過振搖混勻;冷凍食品應保持冷凍狀態(可放在冰內、冰箱的冷盒內或低溫冰箱內保存),非冷凍食品需在1℃~5℃中保存。
3、
采樣標簽
采樣前或後應貼上標簽,每件樣品必須標記清楚(如品名、來源、數量、采樣地點、采樣人及采樣時間等)。
四、送檢
樣品送到微生物檢驗室應越快越好。如果路途遙遠,可將不需冷凍樣品保持在1℃~5℃環境中(如冰壺)。如需保持冷凍狀態,則需保存在泡沫塑料隔熱箱內(箱內有乾冰可維持在0℃以下)。送檢時,必須認真填寫申請單,以供檢驗人員參考。
五、檢驗
微生物檢驗室接到送檢申請單,應立即登記,填寫實驗序號,並按檢驗要求,立即將樣品放在冰箱或冰盒中,積極准備條件進行檢驗。
各食品微生物檢驗室必須備有專用冰箱存放樣品。一般陽性樣品,發出報告後3d(特殊情況
適當延長),方能處理樣品。進口食品的陽性樣品,需保存6個月,方能處理。陰性樣品可及時處理。
檢驗完後,檢驗人員應及時填寫原始記錄,簽名後,送質控辦出具檢驗報告。
⑤ 高中生物中如何進行微生物的取樣和培養
你好!我現在在大學里學習生物專業,希望我淺薄的知識能給你提供參考:(以某細菌為例)
原理:1.單個微生物過小,一般採取菌落培養法進行培養觀察.
2.由於不同的微生物生長環境不同,種群間有明顯界限.一個菌落可認為是同一菌種的集合.
儀器:接種鏟和接種針(用於陸生菌種) 接種環(用於水生菌種) 酒精燈 培養皿
步驟:1.配置不同濃度的營養液稀釋液:取營養液1ml溶於9ml無菌水中,振盪 5min配成10%的溶液.
2.將容器口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰用吸管從此溶液中吸取1ml加入到裝有9ml無菌水的試管中.以此類推製成1%,0.1%,0.01%等不同濃度的稀釋液.
3.將試管口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰,左手拿試管,右手托培養皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰).將溶液倒入培養皿中,在各培養皿上標上濃度.
4.將有細菌生長的樣品容器口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰,用接種環挑取菌落上的少量菌體加入10%的營養液中.把接種環放在酒精燈上灼燒滅菌,再次取樣加入盛1%的營養液的培養皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰)中.重復這個操作,將各濃度的營養液接上種.
5.輕輕搖勻接上種的培養皿,置於恆溫箱內37攝氏度保存,2~3天後就有菌落出現.
**你的問題說得不是很清楚,沒告訴是什麼環境下生長的微生物~~如你有不明白的地方,跟我說一下. 我的QQ:57163188
⑥ 採集土壤中的厭氧微生物,要怎樣做
厭氧菌的培養方法
厭氧菌在有氧的情況下不能生長。要培養厭氧菌,必須創造一個無氧的環境。通常用培養基中加入還原劑,或用物理、化學方法去除環境中的游離氧,以降低氧化還原電勢。如皰肉培養基、硫基乙酸鈉培養基,牛心腦浸液培養基等。常用的厭氧培養方法有許多,可根據實際情況選用。
1.厭氧缸法接種好標本的平板或液體培養基試管,可放入厭氧缸內培養,厭氧缸是普通的乾燥缸,用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境,從而將厭氧菌培養出來。
2.厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌。塑料袋透明而不透氣,內裝氣體發生管(有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、乾燥劑。放入已接種好的平板後,盡量擠出袋內空氣,然後密封袋口。先折斷氣體發生管,後折斷美蘭指示劑管,命名袋內在半小時內造成無氣環境。如不突變表示袋內已達厭氧狀態,可以孵育。
3.厭氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今為止國際上公認的培養厭氧菌最佳儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱,箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板,板上裝有兩個手套,可通過手套在箱內進行操作,故名。箱側有一交換室,具有內外二門,內門通箱內先關著。欲放物入箱,先打開外門,放入交換室,關上外門進行抽氣和換氣(H2,CO2,N2)達到厭氧狀態,然後手伸入手套把交換室內門打開,將物品移入箱內,關上內門。箱內保持厭氧狀態,也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。該箱可調節溫度,本身是孵箱或孵箱即附在其內,還可放入解剖顯微鏡便於觀察厭氧菌菌落,這種厭氧箱適於作厭氧細菌的大量培養研究,大量培養基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環境和溫度等均系自動調節。
4.厭氧盒:原理同厭氧袋,有成品銷售。
5.生物耗氧法:在一密閉的容器內放以生物(多是植物),消耗氧氣,同時產生二氧化碳,供細菌生長用。我沒見過。
6.焦性末食子酸法:在一潔凈的玻片上鋪上紗布或濾紙,均勻撒上焦性末食子酸,然後再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液,迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面,用融化的白蠟封邊,造成一個封閉空間。焦性末食子酸與鹼反應後耗氧。該法用於厭氧不嚴格的厭氧菌的培養,簡單。如有梭狀芽孢桿菌。
7.皰肉培養基:本身就是一個不需特殊設備的厭氧培養法。皰肉和肉湯裝入大試管,液面封凡士林,造成無氧環境。
⑦ 土壤微生物怎麼取樣
(1) 採集植株,去除根周較鬆散的土,仍附著在根系表面的視為根際土。將植物置於裝有冰袋或乾冰的保溫箱中,避光條件,0℃以下運回實驗室;
(2) 准備無菌容器,將植物根系部分置於緩沖液(PBS或生理鹽水)中震盪,震盪時間和強度依據樣本實際情況調整,洗下根際土;
(3) 將洗滌液進行高速離心,收集土壤沉澱,若沉澱較少,也可過濾膜,同一樣方取樣的樣本進行多點等量混合;
(4) 將樣本分裝至離心管中,密封,標記樣本信息後液氮速凍,置於-80℃冰箱保存,乾冰寄送。
⑧ 怎樣的取樣閥用怎樣的微生物取樣方法
微生物取樣方法
舉例一:
一、 空氣采樣及檢驗方法
1培養基:普通營養瓊脂平板,按GB4789.28中3.7條配製
2采樣(空氣沉降法)
2.1布點:面積小於30平方米的車間,設一對角線,在線上取3點,即中心一點,兩端在距牆1米處各取一點;面積大於30平方米的車間,設東、西、南、北、中5個點,其中東、西、南、北點均距牆1米。
2.2采樣高度:與地面垂直高度80-150厘米。
2.3采樣方法;用直徑為9厘米的普通營養瓊脂平板在采樣點上暴露20分鍾蓋上送檢培養。 3培養:於37℃培養24小時。
4檢測頻率:每周
空氣質量標准:
生車間、熟車間、成品車間:低於100個
半成品庫、成品庫:低於10個
二、設備的采樣與檢驗方法
根據生產過程所要求的重點衛生部位,實驗室對其進行塗抹采樣,進行細菌總數檢驗。 1采樣方法
1.1塗抹法(適用於表面平坦的設備和工器具產品接觸面)
取經過滅菌的鋁片框(框內面積為50平方厘米)放在需檢查的部位上,用無菌棉球蘸上無菌生理鹽水擦拭鋁片中間方框部分,擦完後立即將棉球投入盛有10毫升無菌生理鹽水的試管中,此液每毫升代表5平方厘米。
1.2貼紙法(適用於表面不平坦的設備和工器具接處面)
將無菌規格紙(5×5厘米,紙質要薄而軟)用無菌生理鹽水泡濕後,於需測部分分別貼上兩張