『壹』 結晶紫指示劑配方
根據葯典,用冰乙酸配
『貳』 結晶紫溶液如何配製如題,本人要配製結晶紫溶液
葯典上邊說的磷酸鹽緩沖液pH7.0的配製方法為取磷酸二氫鉀0.68g,加入0.1mol/L氫氧化鈉溶液29.1ml,用水稀釋成100ml即得0.1mol/L氫氧化鈉溶液4.000g氫氧化鈉加水配製到1000ml容量瓶
『叄』 結晶紫染色法測生物膜需要什麼濃度的pbs緩沖液
結晶紫染色法測定生物膜的詳細步驟
1.在96孔細胞培養板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164細胞的培養液(含10%小牛血清的RPMI-1640培養液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培養箱中培養2~3小時,讓細胞帖壁。
2.用RPMI-1640培養液10倍遞次稀釋TNF標准品,根據需要3~5倍遞次稀釋待檢樣品,每孔加0.1ml稀釋的標准品或待檢樣品,每個稀釋度3個重復孔。對照孔6個,3個陽性對照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培養液,3個陰性對照孔各加100μl RPMI-1640培養液。繼續培養18~24小時。
3.甩去培養液,用PBS小心洗滌一次,每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定細胞30秒鍾。
4.吸去甲醇溶液,每孔加0.1ml結晶紫染液,室溫中放置20分鍾。
5.輕輕甩去染色液,用蒸餾水洗滌各孔,將培養板倒置於吸水紙上吸干水分。自然乾燥或37℃烘乾。此板可以在室溫中長期保存。
6.測定前,每孔加0.1ml 33%醋酸脫色,充分振盪後在570nm處測定光吸收度。用光吸收度(OD)值對樣品稀釋度作圖,比較標准品曲線和待檢樣品曲線即可得到待測樣品中的細胞因子活性
『肆』 誰能告訴我結晶紫染色法測定生物膜的詳細步驟
1.在96孔細胞培養板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164細胞的培養液(含10%小牛血清的RPMI-1640培養液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培養箱中培養2~3小時,讓細胞帖壁。
2.用RPMI-1640培養液10倍遞次稀釋TNF標准品,根據需要3~5倍遞次稀釋待檢樣品,每孔加0.1ml稀釋的標准品或待檢樣品,每個稀釋度3個重復孔。對照孔6個,3個陽性對照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培養液,3個陰性對照孔各加100μl RPMI-1640培養液。繼續培養18~24小時。
3.甩去培養液,用PBS小心洗滌一次,每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定細胞30秒鍾。
4.吸去甲醇溶液,每孔加0.1ml結晶紫染液,室溫中放置20分鍾。
5.輕輕甩去染色液,用蒸餾水洗滌各孔,將培養板倒置於吸水紙上吸干水分。自然乾燥或37℃烘乾。此板可以在室溫中長期保存。
6.測定前,每孔加0.1ml 33%醋酸脫色,充分振盪後在570nm處測定光吸收度。用光吸收度(OD)值對樣品稀釋度作圖,比較標准品曲線和待檢樣品曲線即可得到待測樣品中的細胞因子活性
『伍』 革蘭氏染色中需要的各種染色液(結晶紫染色液、碘液、番紅復染液)是怎樣配製的
革蘭氏(Gram)染色液
1.草酸銨結晶紫染液
A液:結晶紫(crystal violet) 1g
95%酒精 20ml
B液:草酸銨(ammonium oxalate) 0.8g
蒸餾水 80ml
混合A、B二液,靜置48小時後使用。
2.盧戈氏(Lugol)碘液
碘片 1.0g
碘化鉀 2.0g
蒸餾水 300ml
先將碘化鉀溶解在少量水中,再將碘片溶解在碘化鉀溶液中,待碘全溶後,加足水分即成。
3.95%的酒精溶液。
4.沙黃復染液
沙黃 0.25g
95%的酒精 10ml
蒸餾水 90ml
將沙黃溶於乙醇中,再用蒸餾水稀釋。
『陸』 transwell做細胞遷移用的結晶紫怎麼配置的哇怎麼染色
① 用棉簽擦去基質膠和上室內的細胞 ② 染色:採用0.1%結晶紫染色。 這種方法有如下優勢:(1). 不需要固定細胞,直接染色即可。(2). 配製簡單方便。(3). 染色後可以用33%醋酸脫色,將結晶紫完全洗脫下來,洗脫液可在酶標儀上570nm 測其OD值,間接...
『柒』 請問 結晶紫溶液如何配製
結晶紫 中文別名:甲基紫
根據國標GC/T 604-2002中表8常 (用 指 示 劑 待 檢 溶 液 的 制 備 方 法)中說明: 甲基紫指示劑,稱取0.25 g甲基紫,溶於100 mL水中配製而成。在其它資料上也有配製成0.1%水溶液的,用0.1g溶於10ml水中。因為它的顏色太明顯,所以使用時,用量也非常少,一般一滴到兩滴就足夠了。
根據化學數據速查手冊介紹,甲基紫共有三次變色:
變色次數 PH范圍 酸色 鹼色
甲基紫(第一次變色) 0.13~0.5 黃 綠
甲基紫(第二次變色) 1.0~1.5 綠 藍
甲基紫(第三次變色) 2.0~3.0 藍 紫
『捌』 0.1%結晶紫如何配製
稱取0.1g結晶紫加100ml冰乙酸溶解完全,搖勻即得。
『玖』 染細菌生物膜的0.5%結晶紫溶液怎麼配置
1.在96孔細胞培養板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164細胞的培養液(含10%小牛血清的RPMI-1640培養液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培養箱中培養2~3小時,讓細胞帖壁。
2.用RPMI-1640培養液10倍遞次稀釋TNF標准品,根據需要3~5倍遞次稀釋待檢樣品,每孔加0.1ml稀釋的標准品或待檢樣品,每個稀釋度3個重復孔。對照孔6個,3個陽性對照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培養液,3個陰性對照孔各加100μl RPMI-1640培養液。繼續培養18~24小時。
3.甩去培養液,用PBS小心洗滌一次,每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定細胞30秒鍾。
4.吸去甲醇溶液,每孔加0.1ml結晶紫染液,室溫中放置20分鍾。
5.輕輕甩去染色液,用蒸餾水洗滌各孔,將培養板倒置於吸水紙上吸干水分。自然乾燥或37℃烘乾。此板可以在室溫中長期保存。
6.測定前,每孔加0.1ml 33%醋酸脫色,充分振盪後在570nm處測定光吸收度。用光吸收度(OD)值對樣品稀釋度作圖,比較標准品曲線和待檢樣品曲線即可得到待測樣品中的細胞因子活性
『拾』 細胞侵襲實驗,用結晶紫染色方法如何做
① 用棉簽擦去基質膠和上室內的細胞② 染色:採用0.1%結晶紫染色。這種方法有如下優勢:(1). 不需要固定細胞,直接染色即可。(2). 配製簡單方便。(3). 染色後可以用33%醋酸脫色,將結晶紫完全洗脫下來,洗脫液可在酶標儀上570nm 測其OD值,間接反映細胞數。結晶紫一染就出來了,我做的時候沒做固定,用的結晶紫濃度較高0.5%,搖了5分多鍾的板子,鏡下就直接可以看到染上色的細胞了。感謝您的採納啦