A. 計算微生物的繁殖數時有哪些常用方法
測定微生物繁殖,一定要計算各個體的數目。
單細胞狀態的細菌和酵母菌--計算各個體的數目
放線菌和黴菌等絲狀生長的微生物--計算其孢子數
1.繁殖數直接計數法
(1)
計數板直接計數法
指採用計數板(細菌計數板或血球計數板),在光學顯微鏡下直接觀察微生
物細胞並進行計數的方法。(計算一定容積里樣品中微生物的數量)
缺點:
不能區分死菌與活菌;
不適於對運動細菌的計數;
需要相對高的細菌濃度;
個體小的細菌在顯微鏡下難以觀察;
(2)染色後活菌計數法
採用特定的染色技術進行活菌染色,然後用光學顯微鏡計數的方法。可分別對活菌和死菌進行計數。
例:美藍染色酵母
活細胞→無色
死細胞→藍色
Eg.
細菌經丫啶橙染色後,在紫外光顯微鏡下可觀察
活細胞→橙色熒光
死細胞→綠色熒光
(3)比例計數法死細胞→藍
將已知顆粒濃度的樣品(例如血液)與待測細胞細胞濃度的樣品混勻後在顯微鏡下根據二者之間的比例直接推算待測微生物細胞濃度。
(4)過濾計數法
當樣品中菌數很低時,可以將一定體積的樣品通過膜過濾器。然後將濾膜乾燥、染色,並經處理使膜透明,再在顯微鏡下計算膜上(或一定面積中)的細菌數。
(5)Coulter
電子計數器
菌體與液體導電性不同,
一個細胞通過小孔,電阻增加,形成一個脈沖。
(6)菌絲長度
平板
U行管
2.繁殖數間接計數法
是一種活菌計數法,這是一種依據活菌在液體培養基中會使其變混或在固體培養基上(內)形成菌落的原理而設計。
最常用的是菌落計數法(colony-counting
methods)。
(1)平板菌落計數法
可用澆注平板(pour
plate)或塗布平板(spread
plate)等方法進行。此法適用於各種好氧菌或厭氧菌。
採用培養平板計數法要求操作熟練、准確,否則難以得到正確的結果。
樣品充分混勻;每支移液管及塗布棒只能接觸一個稀釋度的菌液;
同一稀
釋度三個以上重復,取平均值;
每個平板上的菌落數目合適(30-300),便於准確計
數;
一個菌落可能是多個細胞一起形成,所以在科研中一般用菌落形成單位
(colony
forming
units,
CFU)來表示,而不是直接表示為細胞數。
根據每皿上形成的CFU數乘上稀釋度可推算出菌樣的含菌數。此方法最為常用,
但操作較繁瑣且要求操作者技術熟練--缺點。
國外出現了微型、快速、商品化的用於菌落計數的小型紙片或密封瓊脂板。原
理是利用加在培養基中的活菌指示劑TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑),它可使
菌落在很微小時就染成易於辨認的玫瑰色。
(2)膜過濾培養菌落計數法
當樣品中菌數很低時,可以將一定體積的湖水、海水或飲用水等樣品通過膜過濾器,然後將將膜轉到相應的培養基上進行培養,對形成的菌落進行統計。
(3)厭氧菌的菌落計數法
一般可用亨蓋特滾管培養法進行。此法設備較復雜,技術難度很高。
簡便快速的半固體深層瓊脂法,可測定雙歧桿菌(bifidobacteria)和乳酸菌
(lactic
acid
bacteria)等厭氧菌活菌數。
原理:
試管中的深層半固體瓊脂有良好的厭氧性能,並利用其凝固前
可作稀釋用,凝固後又可代替瓊脂平板作菌落計數用的良好性能。
兼有省工、省料、省設備和菌落易辯認等優點!
B. 什麼是微生物的生長速度和增代時間
微生物是同步生長的,既某一群體中所有個體細胞盡可能都處於分裂步調一致的生長狀態。它的生長是有特定的生長曲線,在定量描述液體培養基微生物的生長曲線有4個階段:
1、延滯期:指細胞數目沒有增加。影響延滯期的因素:種齡、接種量、培養基成分、培養條件等。
2、對數期:細胞數目以幾何級數增長的時期.
3、動態平衡期,即死亡的菌數與增長的菌數保持一致,呈動態平衡.
4、衰亡期:微生物個體死亡速度超過新生速度。
增代時間既菌體分裂的時間,因為微生物的繁殖方式是分裂繁殖,一般增代時間越短,說明菌體活性越好
C. 微生物生長分哪些時期,每個時期有何特點
典型的微生物生長曲線包括四個時期:遲緩期、對數期、穩定期、衰亡期。
1、遲緩期
該期菌體增大,代謝活躍,為細菌的分裂繁殖合成並積累充足的酶、輔酶和中間代謝產物;遲緩期長短不一,按菌種本身的遺傳特性、菌齡和菌量,以及營養物等不同而異,一般為1~ 4小時。
2、對數期
生長速率常數R最大,細胞每分裂一次所需要的時間——代時(generation time,G,又稱增代時間)最短;細胞進行平衡生長(balanced growth),菌體各部分的成分均勻;酶系活躍,代謝旺盛;細胞群體的形態與生理特性最一致;微生物細胞抗不良環境的能力最強。
3、穩定期
生長速率常數等於0,即新增細胞數和死亡細胞數幾乎相等,二者處於動態平衡,活菌數保持相對穩定並達到最高水平,菌體產量也達到最高點;細菌分裂速度降低,代時逐漸延長,細胞代謝活力逐漸減退,開始出現形態和生理特徵的改變;
細胞內開始積累貯藏物質,如肝糖粒、異染顆粒、脂肪粒等;多數芽孢細菌在此期形成芽孢;許多重要的發酵產物主要在此期間大量積累並達到最高峰。
4、衰亡期
細胞形態發生變化(表現為多形態,如膨大或不規則的退化形態),甚至畸形;細胞代謝活力明顯降低,有的微生物因蛋白水解酶活力的增強導致菌體死亡並伴隨著菌體自溶,釋放代謝產物;有些革蘭氏陽性菌染色反應反應變為陽性;
有的微生物在此期間進一步合成或釋放對人體有益的抗生素等次級代謝產物,而芽孢桿菌在此期間釋放芽孢。
(3)如何算微生物代時擴展閱讀
1、遲緩期
在生產實踐中,通常採取的措施有增加接種量、在種子培養中加入某些營養成分、採用最適種齡(即處於對數期的菌種)的健壯菌種接種以及選用繁殖快的菌種等措施,以縮短遲緩期,加速菌種生長周期,提高利用率。
2、對數期
由於對數期的群體細胞具有生理特性比較一致、細胞各成分平衡增長和生長速率恆定等優點,故是代謝、生理研究的良好材料,也是作為菌種的最佳材料。另外,亦可用於微生物培養,發酵工程等生物工程。
3、穩定期
穩定期產生的原因:營養素特別是生長限制因子的耗盡,營養物質的比例失調,例如C/N比值不合適等;酸、醇、毒素或過氧化氫等有害代謝產物的積累;pH、氧化還原勢等環境條件越來越不適應等。
4、衰亡期
產生的原因:主要是外界環境對細菌細胞繼續生長越來越不利,從而引起細胞內的分解代謝明顯超過合成代謝,繼而引起大量菌體死亡。
D. 什麼叫生長速率常數(R)什麼叫代時(G)它們如何計算
你好!
生長速率常數(R):
是指微生物每小時分裂次數,R=n/(t2-t1)
代是(G):
是指細胞每分裂一次所需的時間,又稱世代時間或增代時間,
G=1/R
(
n
是繁殖代數,t
是培養時間)
如果對你有幫助,望採納。
E. 所有微生物的世代時間是多少
不同的微生物是不一樣的,大腸桿菌好像是8小時一代。
F. 可用生長曲線中的任何時期計算代時嗎
不可以。
細菌倍增時間又稱代時。指的是當微生物處於生長曲線的指數期(對數期)時,細胞分裂一次所需平均時間,也等於群體中的個體數或其生物量增加一倍所需的平均時間。包括遺傳物質的復制所需時間。
G. 代時的名詞解釋是什麼
又稱世代時間。當微生物處於生長曲線的指數期(對數期)時,細胞分裂一次所需平均時間,也等於群體中的個體數或其生物量增加一倍所需的平均時間。
計算公式
G=1/R=(t2-t1)/3.322(lgx2-lgx1)
(7)如何算微生物代時擴展閱讀
生理作用
主要是引發細胞分裂,誘導芽的形成和促進芽的生長。對組織培養的煙草髓或莖切段,細胞分裂素可使已不具備分裂能力的髓細胞重新分裂。這種現象曾被用於細胞分裂素的生物測定。莖切段的分化常受細胞分裂素及生長素比例的調節。
當細胞分裂素對生長素的濃度比值高時,可誘導芽的形成;反之則有促進生根的趨勢。如對抑制的腋芽局部施用細胞分裂素或在側芽上塗抹一定濃度的生長素,可以解除頂端對側芽的抑制(即頂端優勢)。天然的簇生植物(蓮座狀植物)或由於病害發生「叢枝病」的植物里,常含有較多的細胞分裂素。
細胞分裂素還有防止離體葉片衰老、保綠的作用,這主要是由於細胞分裂素能夠延緩葉綠素和蛋白質的降解速度,穩定多聚核糖體(蛋白質高速合成的場所),抑制DNA酶、RNA酶及蛋白酶的活性,保持膜的完整性等。在葉片上局部施用細胞分裂素,能吸聚其他部分的物質向施用處運轉和積累。
細胞分裂素的作用方式還不完全清楚。已知在tRNA中與反密碼子相鄰的地方有細胞分裂素,在蛋白質合成過程中,它們參與到tRNA與核糖體mRNA復合體的連接物上。但這可能不是外源細胞分裂素的作用方式。因為在tRNA中,細胞分裂素的合成是由原來在tRNA中的嘌呤的改變產生的。
而外源細胞分裂素並不參入tRNA中,但可促進硝酸還原酶、蛋白質和核酸的合成。除了天然的促進細胞分裂的物質外,還用化學方法人工合成了一些類似激動素的物質。通常也統稱細胞分裂素。其中活性較強,也最常用的是6-苄基嘌呤。
參考資料來源:網路-細胞分裂
參考資料來源:網路-代時
H. 常溫微生物繁殖的代數時間
A、酶的活性受溫度控制,不受時間控制,A錯誤;
B、在一定溫度范圍內,隨著溫度的升高,大腸桿菌繁殖的速率逐漸加快,超過一定溫度,繁殖速度又減慢,B錯誤;
C、由表可知,10℃溫度下繁殖一代所用的時間最長,細菌繁殖最慢,C錯誤;
D、由表可知,低溫可抑制細菌繁殖,D正確.
故選:D.
I. 什麼是微生物的世代時間
植物中世代交替以蕨類植物比較明顯,孢子體和配子體都能獨立生活.二倍體的孢子體進行無性生殖時,孢子母細胞經過減數分裂產生單倍體(n)的孢子,孢子萌發長成小型的能獨立生活的配子體,叫做原葉體.原葉體在進行有性生殖時,分化出雌雄性器官,即頸卵器與精子器,並分別產生卵和精子.這兩種配子配合形成了二倍體(2n)的合子.合子又長成下一代新的孢子體.世代交替在各類植物中,因孢子體與配子體的形態、大小、顯著性、生活期限以及能否獨立生活等方面的不同,差別很大,但基本過程與蕨類植物是一致的.植物界的世代交替可以分為兩大類型(依據生活史中孢子體和配子體的形態、大小、構造的復雜性,顯著性和生活的獨立性)