微生物塗抹怎麼取

A. 微生物塗抹怎麼做

工作人員手部微生物檢測，塗抹法
不能將棉球放到培養基裡面培養，這樣根本沒辦法計數。將棉簽放入10ml滅菌生理鹽水中，混勻，取1 ml到平板中，再到平板(45℃的培養基約15ml)。37℃培養48h，計數。
假如手很臟，細菌很多，則將棉簽放入含10ml滅菌生理鹽水的采樣管後，取1ml到9ml無菌生理鹽水中(相當於10倍稀釋)，再取1ml該稀釋液到滅過菌的平板中，再倒入培養基。

B. 自然界分離微生物的一般操作步驟

自然界的微生物，幾乎都是混雜在一起的。人們要想觀察、研究和利用某一種微生物，就必須將它從各種微生物混生的環境中分離開來。所以微生物的分離是一項十分重要的技術。

一、分離的基本方法

微生物分離的方法很多，主要有連續稀釋分離法，平板劃線分離法和單細胞分離法等方法。其中，單細胞分離法需要貴重精密儀器，中學無法開展，而連續稀釋分離法和平板劃線分離法卻簡便易行，中學完全具備開展條件。現將這兩種方法說明如下。

1.連續稀釋分離法

①取1克土樣，在火焰旁放入裝有99毫克無菌水的錐形瓶內，充分搖勻，將菌分散。

②用移液管吸取上述菌懸液1毫升，放入盛有9毫升無菌水的試管中，並進一步稀釋成1000倍，即10-3的菌懸液。按10倍稀釋法連續稀釋到10-8（每1次稀釋，都須更換移液管）。

③取3支1毫升移液管分別從10-8、10-7、10-6菌懸液中吸取1毫升菌懸液，分別注入編號10-8、10-7和10-6的培養皿內，同一稀釋液重復做3個培養皿。

④將溫度為45～50℃的營養瓊脂培養基（其成分和配製方法見本章第三節）倒入上述各培養皿內，輕輕旋轉使菌懸液充分混合均勻，凝固後，將培養皿倒扣放置在溫暖處（28℃左右），每天觀察培養基表面有無微生物菌落。

⑤經過一定時間培養後，培養基上長出菌落，根據菌落特徵，初步判斷屬於何種類型的微生物，並在顯微鏡下檢查，若菌體形態一致，則可認為是初步分離到純菌種。

⑥將分離培養所得的純菌種，從平板培養基轉移到試管斜面培養基上培養。

2.平板劃線分離法

①取1克土樣，在火焰旁加進裝有99毫升無菌水的錐形瓶中，堵塞棉塞，製成菌懸液待用。

②取一培養皿置於實驗台上，左手將培養皿打開稍許，向培養皿內注入熔化的營養固體培養基10～12毫升，輕輕轉動培養皿，使其中的培養基分布均勻，平放桌上，使其凝成平板。然後在皿底用蠟筆劃分A、B、C、D幾個區。應連續製作幾份平板培養基。

③將培養皿底部用姆指和無名指固定成傾斜狀態，在火焰旁將培養皿稍微打開。在此同時，用環狀接種針在火焰旁取少許菌懸液，迅速送入培養皿內，在平板培養基的一邊，作第1次平行劃線 6～7條，轉動培養皿約70°角，用燒過冷卻的接種針，通過第1次劃線部分作第2次平行劃線，然後再用同樣方法，作第3次平行劃線。劃線時，應使平板培養基表面向下，以免空氣中雜菌落入。接種針應與平板表面成30°角左右。不要使接種針碰到培養皿邊緣，也不要將培養基劃破。

④將劃線後的培養皿倒放在28℃左右的溫暖處進行培養，待長出菌落後，鑒定微生物類群，並根據鏡檢結果，判斷是否已分離到了純菌種。如果菌種很純，則可轉移到斜面培養基上進一步培養。

連續稀釋分離法和平板劃線法，均須在無菌室或接種箱內進行。

二、各類微生物的分離

1.從土壤中分離好氣性及兼性厭氣細菌

其分離方法見本節「分離的基本方法」

2.從土壤中分離放線菌

①製作高氏一號培養基，趁熱注入培養皿中，凝成平板，待用。

②稱取土壤10克，放入裝有100毫升無菌水的錐形瓶中，並加入10%酚10滴，以抑制細菌生長。振盪10分鍾，製成10-1菌懸液。按照連續稀釋分離法，進一步製成10-3菌懸液。

③用移液管吸取0.1毫升10-3菌懸液，注入平板培養基上，用無菌玻璃刮刀將菌懸液均勻塗抹在整個培養基上。然後將培養皿倒置於25～30℃溫箱中，培養7～10天，培養基上會出現微生物菌落。如果菌落的硬度較大，乾燥緻密，且與基質緊密結合，不易被針挑起，這就是放線菌菌落。

④挑取放線菌菌落，接種於斜面培養基上。

3.從土壤中分離黴菌

①製作豆芽汗葡萄糖培養基，並添加80%乳酸數滴，以抑制細菌生長。將培養皿中，凝成平板，待用。

②稱取10克土壤，按上述分離放線菌的方法製成10-4或10-5的菌懸液。

③取0.1毫升菌懸液注入培養皿內培養基上，用玻璃刮刀塗抹均勻。然後將培養皿倒置於25～30℃溫箱內培養3～4天。培養基上會出現微生物菌落。黴菌菌落常長成絨狀、棉絮狀或蜘蛛網狀，可根據這一特徵尋找黴菌菌落。

④挑取培養皿內的黴菌菌落接種於斜面培養基上。

4.從飲水中分離大腸桿菌

①製作伊紅美藍培養基，趁熱注入培養皿中，凝成平板，待用。

②用滅過菌的錐形瓶盛取河水或溝水，按1：10稀釋。

③取0.1毫升稀釋液接種於伊紅美藍培養基上。用平板劃線分離法進行分離。

④將劃線後的培養皿倒置37℃溫箱中培養18～24小時。培養基中會出現大腸桿菌菌落，菌落中心呈暗藍黑色，發金屬光澤。

⑤將菌落接種於斜面培養基上（由營養瓊脂培養基製成）。

C. 醫療器械如何做微生物限度實驗，菌液的提取方法有哪些

不同類別有不同的檢驗方法。
消毒器械一般采樣用塗抹法，塗抹100平方厘米，不夠采全部表面，放入10ml中和劑中，然後送檢。
滅菌器械做無菌試驗。
有些器械有專門的監測方法（包括采樣、檢測），如胃鏡等。
網上有標准方法的，自己搜下

D. 塗抹法是微生物檢驗的一個采樣方法,想引用但不知道是哪個標准里的

一般都是企業自定的，參照標准：
中華人民共和國國家標准《一次性使用衛生用品衛生標准》GB15979－1995、《HACCP原理與實施》、中華人民共和國國家標准《公共場所空氣微生物檢驗方法細菌總數測定》GB/T 18204.1－2000、中華人民共和國進出口商品檢驗行業標准SN 0169-92/SN 0172-92/ SN 0170-92、 出入境檢驗檢疫局二000四年《出入食品微生物檢驗培訓教材》中《出入食品生產廠衛生細菌檢驗方法》、日本東京冷凍食品檢驗方法。

E. 微生物塗抹怎麼計數啊

單位是cfu/ml ，其中cfu是活菌數目，你所採用的方法是活菌計數法，計數結果為每個平板的菌落數比上塗抹的量（即多少毫升或微升）。一般情況下活菌技術需要2個以上的重復以提高准確度，具體的操作可以參考微生物實驗手冊中的微生物計數方法。另外一種計數方法是直接計數，即將塗抹液滴入血球計數板上，直接計數，但這種方法計數的結果誤差較大，且不能代表活菌的數目。

F. 微生物鏡檢塗片步驟

單染色法，以觀察菌體形態為主。
1、把泡在酒精中的片子用鑷子夾出，放在酒精燈上點燃，去掉片子上的酒精及油脂。
2、片子冷卻後，蘸一接種環發酵液，均勻地塗在片子上。
3、塗後的片子，於酒精燈火焰上過幾遍，使所塗的細菌固定在片子上，注意，片子溫度不易過高，以不燙手背為主，溫度過高，會使菌變形，影響觀察結果。
4、片子塗菌的位置，滴幾滴結晶紫染液，使染液完全覆蓋住所塗的菌，染1分鍾左右。
5、用水沖洗片子至無紫色水流下後，進行火焰烤乾。
6、鏡下觀察。在塗點處滴1滴香柏油，於油鏡下觀察菌體形態。

G. 工作人員手部微生物檢測，塗抹法

10-2、10-3、10-4、10-5都可以的，同時做幾個嘛。這樣就可以比較哪個濃度更適合檢測。

H. 微生物棉簽塗抹法步驟視頻

摘要 1.手內側塗抹

I. 微生物平板塗布注意事項

微生物平板塗布注意事項：

1、樣品要准確稱取待測樣品l0g，放入裝有90ml無菌水並放有小玻璃珠的250ml三角瓶中，用手或置搖床上振盪20min，使微生物細胞分散，靜置20-30s，即成10-1稀釋液。

2、用稀釋平板計數時，待測菌稀釋度的選擇應根據樣品確定。樣品中所含待測菌的數量多時，稀釋度應高，反之則低。

3、塗抹平板計數法與混合法基本相同，所不同的是先將培養基熔化後趁熱倒入無菌平板中，待凝固後編號，然後用無菌吸管吸取0.1ml菌液對號接種在不同稀釋度編號的瓊脂平板上。

(9)微生物塗抹怎麼取擴展閱讀：

塗布平板法的特徵：

稀釋平板計數是根據微生物在固體培養基上所形成的單個菌落，即是由一個單細胞繁殖而成這一培養特徵設計的計數方法，即一個菌落代表一個單細胞。計數時，首先將待測樣品製成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在。

再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布於平板中的培養基內。經培養後，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統計菌落數目，即可計算出樣品中的含菌數。

此法所計算的菌數是培養基上長出來的菌落數，故又稱活菌計數。一般用於某些成品檢定（如殺蟲菌劑等）、生物製品檢驗、土壤含菌量測定及食品、水源的污染程度的檢驗。

參考資料來源：網路—塗布平板法

J. 微生物塗抹法

一樣的，但用棉簽塗抹後放入的是生理鹽水中作為第一稀釋度。