如何測定未知微生物的mic

❶ 微量肉湯二倍稀釋法應注意哪些環節才能准確測定mic

注意用移液槍吸取葯液時候，不能有氣泡，槍頭要伸進液體裡面，而且要慢。

MIC可以肉眼判斷也可以測OD，很多文獻都是在波長600nm處檢測，測定的時候要混勻，因為本來檢測原理就是利用細菌的光學性質，樣本不混勻放置時間長了細菌會沉降的，結果會受影響的。另外，對於那些有顏色的葯，測OD會受干擾。

出現負值是常有的事，微孔板檢測的時候孔間差異，加入樣品對體系的影響，系統誤差，長時間放置後細菌先後沉降（很多酶標儀帶振盪功能，可以先振盪幾秒鍾再測）等都可能造成這樣的結果。

(1)如何測定未知微生物的mic擴展閱讀：

MIC：最低抑菌濃度，在微生物鑒定的稀釋法中以在試管內或小孔內完全抑制細菌生長的最低葯物濃度為最低抑菌濃度。與之相關的還有最低（小）殺菌濃度MBC。

一個最低抑菌濃度通常被視為對生物抗菌劑的活性最基本的實驗室測量。由於較低的最低抑菌濃度值表明，少的葯物是必需的，以抑制生長的生物體，具有較低的最低有效濃度分數的葯物是更有效的抗菌劑。有幾個基於網路的、可自由訪問的最小抑制濃度資料庫。最低抑菌濃度分數是重要的診斷實驗室，以確認抗微生物的抗菌劑，也監測新的抗菌劑的活性。

❷ 測定微生物的生長有哪些方法各有何優缺點 已解決

常用測定微生物生長的方法有：1)稱乾重法。可用離心法或過濾法測定。優點：可適用於一切微生物，缺點：無法區別死菌和活菌。2)比濁法。原理：由於微生物在液體培養時，原生質的增加導致混濁度的增加，可用分光光度計測定。優點：比較准確。3)測含氮量，大多數微生物的含氮量占乾重的比例較一致，根據含氮量再乘以6.25即可測得其粗蛋白的含量。4)血球計數板法。優點：簡便、快速、直觀。缺點：結果包括死菌和活菌。5)液體稀釋法。對未知菌樣作連續的10倍系列稀釋，經培養後，記錄每個稀釋度出現生長的試管數，然後查MPN表，再根據樣品的稀釋倍數就可計算其中的活菌含量。優點：可計算活菌數，較准確。缺點：比較繁瑣。6)平板菌落計數法。取一定體積的稀釋菌液塗布在合適的固體培養基，經培養後計算原菌液的含菌數。優點，可以獲得活菌的信息。缺點：操作繁瑣，需要培養一定時間才能獲得，測定結果受多種因素的影響。

❸ 怎麼樣利用分子生物學手段對未知微生物進行鑒定

有必要用分支生物學么？直接找一本菌種鑒定手冊就可以了，比如伯傑氏系統細菌學手冊之類的，根據培養情況基本可以鑒定出來。分子生物學一般鑒定16srna，好像是哦，不太熟悉。

❹ 微生物的測定怎麼取樣和培養基的制定和最後的觀察

問題不夠清楚哦，你要測定什麼，微生物限度，還是已知菌的檢測？
我只能舉例說明哦，是關於葯品的。不明白的你可以Hi我，或追問。
我根據你的問題按步驟來回答。
一、取樣
1、供試品應隨機抽樣。一般抽樣量（2個以上最小包裝單位）為檢驗量的3倍量。
2、對異常的供試品應針對性的抽樣。抽樣時，凡發現有異常或可疑的樣品，應選取有疑問的樣品，但機械損傷、明顯破裂的包裝不得作為樣品。凡能從葯品、瓶口（外蓋內側及瓶口周圍）、外觀看出長蟎、發霉、蟲蛀及變質的葯品，可直接判為不合格，無需在抽樣檢驗。不能以外觀有上述情況而檢查內容物合格，來判斷該葯品合格。
3、供試品收檢後應及時檢驗，若有困難，應存放在該品種規定的儲存條件下（一般為陰涼乾燥處），勿冷藏或冷凍，以防供試品內污染菌因保存條件不妥引起致死、損傷或繁殖。
4、供試品在檢驗之前，應保持原包裝狀態，嚴禁開啟，包裝已開啟的樣品不得作為供試品。
5、供試品的取樣必須在凈化條件下無菌操作，嚴防再污染。（原料葯、裝量大的葯）
6、有劑型檢驗量均需取自2個以上包裝單位（中葯蜜丸、膜劑，除需取自2個以上包裝外，還應取4丸、片以上樣品）。
7、固體及半固體（粘稠性供試品）制劑檢驗量為10克。
8、液體制劑檢驗量為10毫升。
9、膜劑除另有規定外，中葯膜劑檢驗量為30～50cm2 ，化學膜劑及生化葯膜劑檢驗量為 100cm2 。
10、貴重的或微量包裝的供試品檢驗量可以酌減，除另有規定外，口服固體制劑不低於3克，液體制劑採用原液者不得少於6毫升，採用供試液者不得少於3毫升，外用葯品不得少於5克。
二、培養基的制定
1、一般如果是微生物限度的話，有兩種培養基：檢測細菌用營養瓊脂培養基，檢測黴菌及酵母菌用玫瑰紅鈉瓊脂培養基。
2、另外，如果還有致病菌要求的話，通常革蘭氏陰性腸道菌用伊紅美藍瓊脂培養基（EMB瓊脂），沙門氏菌用沙門氏志賀氏菌屬瓊脂（SS 瓊脂），霍亂弧菌用硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖瓊脂培養基（TCBS瓊脂），等等……
3、最後的觀察：通常是計數，如樓上所說的數個數。然後就是菌落形態的觀察，主要有大小、顏色、厚度、邊緣狀態等等。
不過看到你對樓上的追問，我在想，你是不是想問對未知微生物的鑒定，譬如泥土裡的微生物種類、空氣中的微生物種類等？
那是微生物的分離和鑒定，不叫檢測吧。
那樣的話一般是用營養瓊脂培養基和馬丁氏瓊脂培養基。

❺ 測定微生物的生長有哪些方法各有何優缺點

常用測定微生物生長的方法有：
1)、稱乾重法.可用離心法或過濾法測定.優點：可適用於一切微生物,缺點：無法區別死菌和活菌.
2)、比濁法.原理：由於微生物在液體培養時,原生質的增加導致混濁度的增加,可用分光光度計測定.優點：比較准確.
3)、測含氮量,大多數微生物的含氮量占乾重的比例較一致,根據含氮量再乘以6.25即可測得其粗蛋白的含量.
4)、血球計數板法.優點：簡便、快速、直觀.缺點：結果包括死菌和活菌.
5)、液體稀釋法.對未知菌樣作連續的10倍系列稀釋,經培養後,記錄每個稀釋度出現生長的試管數,然後查MPN表,再根據樣品的稀釋倍數就可計算其中的活菌含量.優點：可計算活菌數,較准確.缺點：比較繁瑣.
6)、平板菌落計數法.取一定體積的稀釋菌液塗布在合適的固體培養基,經培養後計算原菌液的含菌數.優點,可以獲得活菌的信息.缺點：操作繁瑣,需要培養一定時間才能獲得,測定結果受多種因素的影響.

❻ 當平板上沒有細菌生長時,如何判斷是MIC還是MBC

可以根據的是紙的反應的顏色來決定就可以。

MIC：最低抑菌濃度，在微生物鑒定的稀釋法中以在試管或小孔完全抑制細菌生內長的最低葯物濃度容為最低抑菌濃度。

MBC：最低殺菌濃度（MBC），能夠殺滅培養基內細菌（即殺死99.9%供試微生物）的最低濃度。

MIC： 測量抗菌葯物抗菌活性大小。

MBC：測量該微生物對受試葯物耐葯性。

(6)如何測定未知微生物的mic擴展閱讀：

最小殺菌濃度：殺死99.9%（降低3個數量級）的供試微生物所需的最低葯物濃度。有些葯物的MBC與其MIC非常接近，如氨基糖苷類。有些葯物的MBC比MIC大，如β內醯胺類。如果受試葯物對供試微生物的MBC≧32倍的MIC，可判定該微生物對受試葯物產生了耐葯性。

❼ 微生物化驗報告單上有個量度是「MIC(ug/ml)」，請問是什麼意思

最低抑菌濃度
是測量抗菌葯物的抗菌活性大小的一個指標，指在體外培養細菌18至24小時後能抑制培養基內病原菌生長的最低葯物濃度。

❽ 影響MIC（最小抑菌濃度）測定的主要因素有那些為什麼

幾種測定抗菌葯物最低抑菌濃度（MIC）方法
1.1.常量肉湯稀釋法
1.1.1.抗菌葯物貯存液制備 抗菌葯物貯存液濃度不應低於1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍於最高測定濃度。溶解度低的抗菌葯物可稍低於上述濃度。抗菌葯物直接購自廠商或相關機構。所需抗菌葯物溶液量或粉劑量可公式進行計算。例如：需配製100 ml濃度為1280μg/ml的抗生素貯存液，所用抗生素為粉劑，其葯物的有效力為750μg/mg。用分析天平精確稱取抗生素粉劑的量為182.6 mg。根據公式計算所需稀釋劑用量為：（182.6 mg×750μg/ml）/1280μg/ml=107.0ml，然後將182.6 mg抗生素粉劑溶解於107.0ml稀釋劑中。制備抗菌葯物貯存液所用的溶劑和稀釋劑見表5。配製好的抗菌葯物貯存液應貯存於-60℃以下環境，保存期不超過6個月。
1.1.2.葯敏試驗用抗菌葯物濃度范圍 根據NCCLS抗菌葯物敏感性試驗操作標准，葯物濃度范圍應包含耐葯、中介和敏感分界點值，特殊情況例外。
1.1.3. 培養基 NCCLS推薦使用Mueller-Hinton（MH）肉湯，pH7.2~7.4。需氧菌及兼性厭氧菌在此培養基中生長良好。在測試葡萄球菌對苯唑西林的敏感性時，應在肉湯中加入2%（W/V）氯化鈉，按製造廠家的要求配製需要量的MH肉湯。嗜血桿菌屬菌使用HTM肉湯，肺炎鏈球菌和其它鏈球菌使用含2%~5%溶解馬血的MH肉湯。
1.1.4.接種物的制備 有2種方法配製接種物，一是細菌生長方法，用接種環挑取形態相似待檢菌落3-5個，接種於4-5ml的水解酪蛋白（MH）肉湯中，35℃孵育2-6h。增菌後的對數生長期菌液用生理鹽水或MH肉湯校正濃度至0.5麥氏比濁標准，約含1~2×108CFU/ml。二是直接菌落懸液配製法，對某些苛養菌，如流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌和鏈球菌及甲氧西林耐葯的葡萄球菌等菌株，推薦直接取培養18~24h的菌落調配成0.5麥氏比濁標準的菌懸液。用MH肉湯將上述菌懸液進行1∶100稀釋後備用。注意應在15分鍾內接種完配製好的接種物，並取一份接種物在非選擇性瓊脂平板上傳代培養，以檢查接種物純度。
1.1.5.稀釋抗菌葯物的制備及菌液接種 取無菌試管（13×100mm）13支，排成一排，除第1管加入1.6mlMH肉湯外，其餘每管加入MH肉湯1ml，在第1管加入抗菌葯物原液（如1280μg/ml） 0.4ml混勻，然後吸取1ml至第2管，混勻後再吸取1ml至第3管，如此連續倍比稀釋至第11管，並從第11管中吸取1ml棄去，第12管為不含葯物的生長對照。此時各管葯物濃度依次為256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25μg/ml。然後在每管內加入上述制備好的接種物各1ml，使每管最終菌液濃度約為5×105CFU/ml。第1管至第11管葯物濃度分別為128、64、32、16、8、4、2、1、05、0.25、0.125μg/ml。
1.1.6.孵育 將接種好的稀釋管塞好塞子，置35℃普通空氣孵箱中孵育16~20h；嗜血桿菌和鏈球菌在普通空氣孵箱中孵育20~24h；對可能的耐甲氧西林葡萄球菌和耐萬古黴素腸球菌應持續孵育滿24h。
1.1.7.結果判斷與解釋 在讀取和報告所測試菌株的MIC前，應檢查生長對照管的細菌生長情況是否良好，同時還應檢查接種物的傳代培養情況以確定其是否污染，質控菌株的MIC值是否處於質控范圍。以肉眼觀察，葯物最低濃度管無細菌生長者，即為受試菌的MIC。甲氧苄胺嘧啶或磺胺葯物的肉湯稀釋法終點判斷，與陽性生長對照管比較抑制80%細菌生長管葯物濃度為受試菌MIC。
根據NCCLS推薦的分界點值標准，判斷耐葯（resistant, R）、敏感(susceptible, S)或中介（intermediate, I）。S表示被測菌株所引起的感染可以用該抗菌葯物的常用劑量治療有效，禁忌症除外。R指該菌不能被抗菌葯物的常用劑量在組織液內或血液中所達到的濃度所抑制，或屬於具有特定耐葯機理（如β-內醯胺酶），所以臨床治療效果不佳。I是指MIC接近葯物的血液或組織液濃度，療效低於敏感菌。還表示被測菌株可以通過提高劑量（如β-內醯胺類葯物）被抑制，或在葯物生理性濃集的部位（如尿液）被抑制。另外，中介還作為「緩沖域」，以防止由微小的技術因素失控，所導致較大的錯誤解釋。
1.2.微量肉湯稀釋法
1.2.1.抗菌葯物和培養基制備 同常量肉湯稀釋法。
1.2.2.MIC板制備 無菌操作，將倍比稀釋後不同濃度的抗菌葯物溶液分別加到滅菌的96孔聚苯乙烯板中，第1至第11孔加葯液，每孔10μl，第12孔不加葯作為生長對照，冰凍乾燥後密封，-20℃以下保存備用。
1.2.3.接種物制備 將用生長法或直接菌懸液法制備的濃度相當於0.5麥氏比濁標準的菌懸液，經MH肉湯1∶1000稀釋後，向每孔中加100μl，密封後置35℃普通空氣孵箱中，孵育16~20h判斷結果。當試驗嗜血桿菌屬，鏈球菌屬時，孵育時間為20~24h，試驗葡萄球菌和腸球菌對苯唑西林和萬古黴素的葯敏試驗時孵育時間必須滿24h。此時，第1孔至第11孔葯物濃度分別為128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125μg/ml。
1.2.4.結果判斷 以在小孔內完全抑制細菌生長的最低葯物濃度為MIC。當陽性對照孔（即不含抗生素）內細菌明顯生長試驗才有意義。當在微量肉湯稀釋法出現單一的跳孔時，應記錄抑制細菌生長的最高葯物濃度。如出現多處跳孔，則不應報告結果，需重復試驗。通常對革蘭陰性桿菌而言，微量肉湯稀釋法測得的MIC與常量肉湯稀釋法測得的結果相同或低一個稀釋度（1孔或2倍）。
2.瓊脂稀釋法 瓊脂稀釋法是將不同劑量的抗菌葯物，加入融化並冷至50℃左右的定量MH瓊脂中，製成含不同遞減濃度抗菌葯物的平板，接種受試菌，孵育後觀察細菌生長情況，以抑制細菌生長的瓊脂平板所含最低葯物濃度為MIC。本法優點是可在一個平板上同時作多株菌MIC測定，結果可靠，易發現污染菌；缺點是制備含葯瓊脂平板費時費力。
2.1.培養基制備 使用MH瓊脂，按商品說明書進行配製，pH7.2~7.4。淋病奈瑟菌使用GC瓊脂基礎加1%添加劑；其它鏈球菌使用含5%（V/V）綿羊血的MH瓊脂（當試驗磺胺葯時，使用溶解的馬血）。
2.2.含葯瓊脂平板制備 根據實驗設計，將已倍比稀釋的不同濃度的抗菌葯物分別加入已加熱溶解，並在45~50℃水浴中平衡的MH瓊脂中，充分混勻傾倒滅菌平皿，瓊脂厚度3~4mm。通常按1∶9比例配製葯物瓊脂平板，根據需要來選擇葯物濃度范圍。配製好的含葯瓊脂平板應裝入密封塑料袋中，置2~8℃冰箱可貯存5天。
2.3.接種物制備與接種 制備濃度相當於0.5麥氏標准比濁管的菌懸液，再1∶10稀釋，以多點接種器吸取制備好菌液（約1~2μl）接種於瓊脂平板表面，每點菌數約為104CFU，形成直徑為5~8mm的菌斑。接種好後置35℃孵育16~20h（甲氧西林耐葯葡萄球菌、萬古黴素耐葯腸球菌孵育時間應滿24h），觀察結果。奈瑟菌屬、鏈球菌屬細菌置5%二氧化碳、幽門螺桿菌置微需氧環境中孵育。
2.4.結果判斷 將平板置於暗色、無反光物體表面上判斷試驗終點，以抑制細菌生長的最低葯物濃度為MIC。在含甲氧苄胺嘧啶或磺胺瓊脂平板上可見輕微細菌生長，與生長對照比較抑制80%以上細菌生長的最低葯物濃度作為終點濃度。
如果出現有2個以上菌落生長於含葯濃度高於終點水平的瓊脂平板上，或低濃度葯物瓊脂平板上不長而高濃度葯物瓊脂平板上生長現象，則應檢查培養物純度或重復試驗。
3.E試驗（E-test） E試驗是指濃度梯度瓊脂擴散試驗，其原理基本同擴散法，即濃度呈連續梯度的抗菌葯物從塑料試條中向瓊脂中擴散，在試條周圍抑菌濃度范圍內受試菌的生長被抑制，從而形成透明的抑菌圈。E試驗綜合了稀釋法和擴散法的原理和特點，同時還彌補了二者的一些不足，可以像稀釋法一樣直接定量測出抗菌葯物對受試菌的MIC。
3.1.培養基、菌液制備和接種 同紙片擴散法。
3.2.貼E試驗條 同紙片擴散法，E試驗條的刻度面朝上，不得貼反，一旦接觸瓊脂後不得再移動。直徑150mm的平皿內可放置6根E試驗試條，90mm者一般只能放置1根。
3.3.孵育時間和溫度 同紙片擴散法。
3.4.結果閱讀 孵育後圍繞試條可形成一個橢圓形的抑菌圈，在抑菌圈和試條的橫切相交處試條上的讀數刻度即是測定抗菌葯物對受試菌的MIC。閱讀時應注意的問題見供應商的產品說明書

❾ 微生物名詞解釋：MIC

回答你的後2個問題吧
根據微生物對營養源中碳源、能源需求的不同，微生物學家將它們劃分為若干營養類型。如果所需碳源是無機化合物，我們稱該類微生物是自養微生物；如果碳源是有機化合物，則稱為異養微生物；如果以光能為能源，我們稱之為光能微生物；以化學反應產生的能量為能源的則是化能微生物。所以，微生物營養類型可以分成光能自養、光能異養、化能自養和化能異養4種類型。
微生物的營養類型
營養類型
能源
氫的供體
基本碳源
微生物舉例
光能無機營養（光能自養型）
光
無機物
二氧化碳
藍細菌，綠色硫細菌，藻類
光能有機營養（光能異養型）
光
有機物
二氧化碳及簡單有機物
紫色非硫細菌
化能無機營養（化能自養型）
無機物
無機物
二氧化碳
硝化細菌，氫細菌
化能有機營養（化能異養型）
有機物
有機物
有機物
大多數已知細菌和全部真核微生物
??光能自養型
這類微生物利用光作為能源，以二氧化碳作為基本碳源，以某些還原態的無機化合物（水、硫化氫等）作為供氫體還原二氧化碳。它們的細胞內都含有一種或幾種光合色素。藍細菌含葉綠素a，利用水作為氫供體，在光照下同化二氧化碳，並放出氧氣。光合細菌如紫硫細菌和綠硫細菌不能以水作為氫供體，而是利用硫化氫等無機硫化合物還原二氧化碳，而且這些化學反應是在嚴格的厭氧條件下以光為能源進行的。這些光合細菌生長時不釋放出氧氣，產生的元素硫分泌到細胞外或沉積在細胞內。
??光能異養型
以光為能源，以有機碳化合物（甲酸、乙酸、甲醇、異丙醇等）作為碳源和氫供體進行光合作用而生長繁殖的微生物。它們需要有機化合物，所以不同於利用無機化合物二氧化碳作為唯一碳源的自養型光合細菌。
??化能自養型
以二氧化碳為碳源，利用無機化合物如銨、亞硝酸鹽、硫化氫、鐵離子等氧化過程中釋放出的能量進行生長的微生物。主要類群有：硫細菌、硝化細菌、鐵細菌等。它們的生長需要在有氧條件下進行。產甲烷菌大多能自養生活，它們以氫氣作為能源，以二氧化碳作為碳源生長，產物是甲烷，我們稱之為厭氧化能自養細菌。
??化能異養型
大多數微生物屬於這種營養類型。它們以有機碳化合物作為碳源和能源。如果微生物的食物是來自死亡或腐爛的動植物屍體，就稱其為腐生微生物。如果其生長必須從活細胞或組織中獲得營養物質的，則稱之為寄生微生物，例如病毒、衣原體、立克次氏體等。有些微生物是腐生、寄生兼而有之，例如結核桿菌就是一種以腐生為主，兼營寄生的細菌。