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IFT在生物中是什麼過程

發布時間:2022-08-06 03:29:33

⑴ 胛狀腺是啥病發病前有啥感覺該咋治療

簡介
甲狀腺是人體最大的內分泌腺體,位於甲狀軟骨下緊貼在氣管第三,四軟骨環前面,由兩側葉和峽部組成,平均重量成大約20-25g,女性略大略重.甲狀腺後面有甲狀旁腺4枚及喉返神經.血液供應有上下左右四條動脈,所以甲狀腺血供較豐富,腺體受頸交感神經節的交感神經和迷走神經支配,甲狀腺的主要功能是合成甲狀腺激素,調節機體代謝,一般人每日食物中約有100-200μg 無機碘化合物,經胃腸道吸收入血循環,迅速為甲狀腺攝取濃縮,腺體中貯碘約為全身的1/5.碘化物進入細胞後,經過氧化酶的作用,產生活性碘迅速與膠質腔中的甲狀腺球蛋白分子上的酪氨酸基結合,形成一碘酪氨酸(MIT)和二碘酪氨酸(DIT),碘化酪氨
酸通過氧化酶的作用,使MIT和DIT偶聯結合成甲狀腺素(T4),MID和DIT偶聯結合成三碘甲狀腺原氨酸(T3),貯存於膠質腔內,合成的甲狀腺素(T4)和三碘甲狀腺原氨酸(T3)分泌至血液循環後,主要與血漿中甲狀腺素結合球蛋白(TBG)結合,以利轉運和調節血中甲狀腺素的濃度.甲狀腺素(T4)在外周組織經脫碘分別形成生物活性較強的T3和無生物活性的rT3.脫下的碘可被重新利用.所以,在甲狀腺功能亢進時,血T4、T3及rT3均增高,而在甲狀腺功能減退時,則三者均低於正常值.甲狀腺素分泌量由垂體細胞分泌和TSH通過腺苷酸環化酶-cAMP系統調節.而TSH則由下丘腦分泌的TRH控制,從而形成下丘腦—垂體—甲狀腺軸,調節甲狀腺功能.
甲狀腺的被膜和毗鄰,甲狀腺有兩層被膜:氣管前筋膜包繞甲狀腺形成甲狀腺鞘,稱為甲狀腺假被膜;甲狀腺自身的外膜伸入腺實質內,將腺體分為若干小葉,即纖維囊,又稱甲狀腺真被膜.腺鞘與纖維囊之間的間隙內有疏鬆結締組織,血管,神經和甲狀旁腺等.手術分離甲狀腺時,應在此間隙內進行,並避免損傷不該損傷的結構.在甲狀腺左右葉的上端,假被膜增厚並連於甲狀軟骨,稱為甲狀腺懸韌帶;左右葉內側和甲狀腺峽後面的假被膜與環狀軟骨和氣管軟骨環的軟骨膜愈著,形成甲狀腺外側韌帶.上述韌帶將甲狀腺固定於喉及氣管壁上,因此,吞咽時甲狀腺可隨喉上,下移動,為判斷甲狀腺是否腫大的依據.喉返神經常在甲狀腺外側韌帶和懸韌帶後面經過,甲狀腺手術處理上述韌帶時注意避免損傷喉返神經.
甲狀腺前面由淺入深依次為皮膚,淺筋膜,頸筋膜淺層,舌骨下肌群和氣管前筋膜.甲狀腺葉的後內側與喉和氣管,咽和食管以及喉返神經等相毗鄰,其後外側與頸動脈鞘及鞘內的頸總動脈,頸內靜脈和迷走神經,以及位於椎前筋膜深面的頸交感干相鄰.當甲狀腺腫大時,如向內側壓迫,可出現呼吸與吞咽困難和聲音嘶啞等,如向後外壓迫交感干時,可出現HORNER綜合征,即瞳孔縮小,上瞼下垂及眼球內陷等.
甲狀腺腫瘤
甲狀腺腫瘤可以分為良性腫瘤和惡性腫瘤.臨床上甲狀腺腫瘤往往僅
表現為甲狀腺結節,因此常把甲狀腺腫瘤與甲狀腺結節相互混用.實際上結節僅是形態的描述,它包括腫瘤、囊腫、正常組織構成的團塊以及其他疾病所引起的甲狀腺腫塊.臨床上難以確定甲狀腺結節的性質,即使病理活檢,有時甲狀腺腺瘤與結節性增生,良性腫瘤與惡性腫瘤也不易明確辨認.因此.甲狀腺腫瘤的發病率不易精確統計.
甲狀腺腫瘤是常見病,在不同地區其發病率有較大差別.一般甲狀腺腫流行地區的甲狀腺腫瘤發病率較非流行區高.甲狀腺腫瘤中,最多見的是甲狀腺良性腫瘤.甲狀腺癌並不常見,但近年來有逐年增高的趨勢.手術證明單個結節者80%為良性腫瘤,20%為惡性腫瘤.單個結節的腫瘤發生率為15.6%-28.7%,而多發結節癌腫的發生率,一般不到10%.說明單個結節癌腫的可能性數倍於多發結節.就性別而言,甲狀腺腫瘤多見於女性,其發病率女性較男性高4倍,但就甲狀腺癌和甲狀腺結節的比例看,男性高於女性,在每個年齡組中,甲狀腺良性腫塊和惡性腫塊的發病率相似,但是兒童時期的甲狀腺結節中,甲狀腺癌的發病率高,約佔50%-71%,因此,對兒童期的甲狀腺結節,應特別警惕癌的可能.
甲狀腺疾病
當你發現頸部增粗或有腫塊時,即使沒有什麼不適的症狀,也應想到是否發生了甲狀腺腫大或其他甲狀腺疾病.此時應及時去醫院就診.一般醫生通過甲狀腺觸診就可以告訴你甲狀腺是否腫大、是否有腫物.甲狀腺疾病多種多樣,有甲狀腺腫大或甲狀腺腫物者,一般需要進一步做些檢查,才能確定甲狀腺疾病的性質,如抽血化驗檢查甲狀腺功能,必要時還需做甲狀腺的放射性核素和超聲波檢查,甚至做甲狀腺穿刺細胞學檢查.當你出現怕熱、多汗、心悸、性情急躁、食慾亢進、消瘦等症狀時,應該想到是否有甲狀腺功能亢進的可能.當你發現有怕冷、浮腫、體重增加、皮膚乾燥、食慾減退等症狀時,應該注意有無甲狀腺功能減退的可能.當你感覺頸部疼痛並有發熱,尤其可在甲狀腺部位摸到腫塊並有壓痛時,應想到有無急性或亞急性甲狀腺炎的可能.遇到以上這些情況,應及時到醫院內分泌科就診,以便做進一步檢查,這樣可以得到及時的診斷和合理的治療.
疾病分類
2.甲狀腺功能亢進(甲狀腺功能亢進的並發症)
3.甲狀腺功能減退
6.亞急性甲狀腺炎
8.慢性纖維性甲狀腺炎
甲狀腺是多種原因造成的甲狀腺功能增強、減弱,合成和分泌甲狀腺激素過多、過少,所導致的一種常見內分泌疾病,主要包括:甲狀腺機能亢進(俗稱甲亢)、甲狀腺功能減退(俗稱甲減)、甲狀腺炎、甲狀腺腫、甲狀腺瘤、甲狀腺癌.
一、甲亢
指甲狀腺的呈高功能狀態,其特徵有甲狀腺腫大、突眼症、基礎代謝增加和自主神經系統的失常.本病多見於女性,男女之間比例為1:4~6,以20-40歲最多見,起病緩慢.臨床上最常見的甲亢是毒性彌漫性甲狀腺腫.
主要病理表現及危害:
(1)高代謝症群:患者可表現為怕熱多汗,皮膚、手掌、面、頸、腋下皮膚紅潤多汗.常有低熱,嚴重時可出現高熱.患者常有心動過速、心悸、胃納明顯亢進,但體重下降,疲乏無力.
(2)甲狀腺腫大
(3)眼征:眼突出
(4)神經系統:神經過敏,易於激動,煩躁多慮,失眠緊張,多言多動,有時思想不集中,有時神情淡漠、寡言抑鬱者.
(5)心血管系統:心悸、胸悶、氣促,活動後加重,可出現各種早搏及房顫等.
(6)消化系統:食慾亢進,體重明顯減輕.
(7)生殖系統:女性患者常有月經減少,周期延長,甚至閉經,但少數患者仍能 妊娠、生育.男性多陽痿,影響乳房發育.
二、甲減
甲狀腺機能低減症,系甲狀腺激素合成與分泌不足或甲狀腺激素生理效應不好,生理效應不足而致的全身性疾病.
主要分為:呆小病、幼年甲低、成人甲低三種,多見於中年女性.成人的甲狀腺機能減退,不少由於手術切除、長期抗甲狀腺葯物治療或使用放射性131碘治療甲亢導致.
主要病理表現及危害:
(1)一般表現:怕冷、皮膚乾燥少汗、粗糙、泛黃、發涼、毛發稀疏、乾枯、指甲脆、有裂紋、疲勞、瞌睡、記憶力差、智力減退、反應遲鈍、輕度貧血、體重增加.
(2)特殊表現:顏面蒼白而蠟黃、面部浮腫、目光呆滯、眼瞼浮腫、表情淡漠、少言寡語、言則聲嘶、吐詞含混.
(3)心血管系統:心慮緩慢、心音低弱、心臟呈普遍性擴大、常伴有心包積液、也有疾病後心肌纖維腫脹、粘液性糖蛋白(PAS染色陽性)沉積以及間質纖維化稱甲減性心肌病變.
(4)生殖系統:男性可出現性功能底下,性成熟推遲、副性徵落後,性慾減退、陽痿和睾丸萎縮.女性可有月經不調、經血過多或閉經,一般不孕.無論對男女病人的生育都會產生影響.
(5)肌肉與關節系統:肌肉收縮與鬆弛均緩慢延遲、常感肌肉疼痛、僵硬、骨質代謝緩慢、骨形成與吸收均減少、關節不靈、有強直感、受冷後加重、有如慢性關節炎、偶見關節腔積液.
(6)消化系統:患者食慾減退、便秘、腹脹、甚至出現麻痹性腸梗阻、半數左右的患者有完全性胃酸缺乏.
(7)內分泌系統:男性陽痿、女性月經過多、久病不治者亦餓閉經、腎上腺皮質功能偏低、血和尿皮質醇降低.
(8)精神神經系統:記憶力減退、智力低下、反應遲鈍、多瞌睡、精神抑鬱、有時多慮有精神質表現、嚴重者發展為猜疑性精神分裂症、後期多痴呆、環幻覺木僵或昏睡.
三、甲狀腺炎
按發病多少依次分為:橋本氏甲狀腺炎、亞急性甲狀腺炎、無痛性甲狀腺炎感染性甲狀腺炎及其他原因引起的甲狀腺,最常見的是慢性淋巴細胞性及亞急性甲狀腺炎.
1、橋本氏甲狀腺炎
橋本氏甲狀腺炎於1912年由日本人橋本策首先報告並描述,因而得名,又稱橋本氏病、慢性淋巴細胞性甲狀腺炎、自身免疫性甲狀腺炎.為甲狀腺炎中最常見的一種類型,約佔全部甲狀腺病的7.3%-20.5%.橋本氏病多見於30-50歲的婦女,也是兒童散發性甲狀腺腫的常見原因,男女比例約為1:6-10.
主要病理表現及危害:
起病緩慢,發病時多有甲狀腺腫大,質地硬韌,邊界清楚,部分患者可有壓迫症狀.
初期時常無特殊感覺,甲狀腺機能可正常,少數病人早期可伴有短暫的甲亢表現,多數病例發現時以出現甲狀腺功能底下.
病患常表現怕冷、浮腫、乏力、皮膚乾燥、腹脹、便秘、月經不調、性慾減退等.
多在30~50歲發病,女性比男性發病率多3-6倍.大多數病人甲狀腺功能渝後可恢復正常,一些病人病情緩解後數月之內還可再次或多次復發.永久性甲狀腺功能低減的發病率不及10%,極少數病例可發展為橋本氏病或毒性彌漫性甲狀腺腫.
主要病理表現及危害:
典型的表現為甲狀腺劇痛,通常疼痛開始於一側甲狀腺的一邊,很快向腺體其他部位和耳根及頜部放散,常常伴有全身不適、乏力、肌肉疼痛,也可有發熱,病後3-4天內達到高峰,1周內消退,也有不少病人起病緩慢,超過1-2周,病情起伏波動持續3-6周,好轉後,在數月內可有多次服發,甲狀腺可較正常時體積增大2-3倍或者更大,接觸時壓痛明顯病後1周內,約一半病人;伴有甲狀腺功能亢進的表現:包括興奮、怕熱、心慌、顫抖及多汗等;這些症狀是由於急性炎症時從甲狀腺釋放出過量的甲狀腺激素引起的,在疾病消退過程中,少數病人可以出現腫脹、便秘、怕冷、瞌睡等甲狀腺功能減低表現,但這些表現持續時間不長最終甲狀腺功能恢復正常.
四、甲狀腺結節
一種常見的甲狀腺病,甲狀腺上的結節可能是甲狀腺癌,也可能是甲狀腺瘤,結節性甲狀腺腫等其他病因,在未明確其性質以前統稱為甲狀腺結節.
主要病理表現及危害:
臨床表現為甲狀腺腫大,並可見到觸及大小不等的多個結節,結節的質地多為中等硬度.臨床症狀不多,僅為頸前區不適.甲狀腺功能多數正常.但部分患者會出現繼發性功能亢進或癌變.
甲狀腺結節多數是良性,其中只有甲狀腺癌是惡性疾病.但兒童期出現的結節50%為惡性,發病於青年男性的當個結節,也應警惕惡性的可能,如果新生結節或原有的結節在短期內迅速增大,應懷疑惡性病變.高速懷疑惡性疾病者宜盡早治療.
五、甲狀腺瘤
1、甲狀腺腺瘤:臨床常見的良性甲狀腺腫瘤,指發生於頸部正中或附近的半球腫塊,表現光滑,邊緣清楚,能隨吞咽動作而上下移動、質地堅實,按之不痛,生長緩慢.
2、甲狀腺囊腫:若甲狀腺腺瘤血液循環不足,在結節內發生退行性病變,引起囊腫形成時稱甲狀腺囊腺瘤,或稱甲狀腺腺瘤.
3、功能亢進性腺瘤:合並有功能亢進症狀者,稱功能亢進性腺瘤,亦稱毒性腺瘤,此種腺瘤發生惡變的可能性較小.
4、乳狀腺瘤:腺瘤內出現乳頭狀改變者,稱乳狀腺瘤,其惡變可能性較大.
六、甲狀腺癌
甲狀腺癌是由數種不同生物學行為以及不同病理類型的癌腫組成,主要包括乳頭狀腺癌、濾泡狀癌、未分化癌、髓樣癌四種類型.它們的發病年齡、生長速度、轉移途徑、預後都明顯不同,如乳頭狀腺癌術後10年生存率將近90%,而未分化癌變程很短,一般僅生存幾月.
七、慢性淋巴細胞性甲狀腺炎
亦稱橋本甲狀腺炎(Hashimoto thyroiditis),是一種自體免疫性疾病.本病多見於中年女性,表現為甲狀腺腫,起病緩慢,常在無意中發現,體積約為正常甲狀腺的2~3倍,表面光滑,質地堅韌有彈性如橡皮,明顯結節則少見,無壓痛,與四周無粘連,可隨吞咽運動活動.晚期少數可出現輕度局部壓迫症狀.
本病發展緩慢,有時甲狀腺腫在幾年內似無明顯變化.初期時甲狀腺功能正常.病程中有時也可出現甲亢,繼而功能正常,甲減,再正常,其過程類似於亞急性甲狀腺炎,但不伴疼痛,發熱等,故稱此狀態為無痛性甲狀腺炎,產後發病則稱為產後甲狀腺炎.但當甲狀腺破壞到一定程度,許多患者逐漸出現甲狀腺功能減退,少數呈粘液性水腫.本病有時可合並惡性貧血,此因患者體內存在胃壁細胞的自身抗體.
八、慢性纖維性甲狀腺炎
是甲狀腺慢性炎症性疾病中最少見的一種,其特徵為正常甲狀腺組織被侵入性纖維化所取代並穿破其被膜進入鄰近器官或組織的炎性疾病.臨床上命名眾多,如侵襲性纖維性甲狀腺炎(invasive fibrous thyroiditis,IFT)、慢性木樣甲狀腺炎(chronic woody thyroiditis)等,1896年由Bernhard Riedel首先報道,故國外多稱Riedel病(Riedel′s disease)、Riedel甲狀腺炎(Riedel′s thyroiditis)、Riedel甲狀腺腫(Riedel′s struma)等.男女比例為1:3,臨床上早期症狀不明顯,功能正常,晚期甲狀腺功能低下,增生的瘢痕組織壓迫可以產生聲音嘶啞,吞咽困難等.肉眼觀甲狀

⑵ 什麼是仙台病毒

在網路找到了答案---亦稱HVJ(Hemagglutinating virus of Jap-an的縮寫),乙型副流感病毒。屬副粘病毒屬。仙台病毒是此屬中最早分離到的(M.Kuroya),(1953)。質粒為多形態,直徑150—600毫微。具包膜,其中含有分子量為6—7×10^6的RNA,但不是蛋白質合成的模板。不耐熱,幾乎可凝集所有種類的紅血球,而且有溶血性。在雞胚、各種動物腎臟培養細胞的細胞質中增殖。被感染的細胞株很易引起繼發感染。因為具有融合各種細胞的能力,所以被廣泛地用來進行細胞的異核體形成和培育雜種細胞。與新城疫病毒一起也多用於干擾素的誘導。此病毒常存在於小鼠和豬中,另外也從人體中分離到與仙台病毒具有交換抗原的病毒(HA2等)。
曾主要應用於細胞工程中的細胞融合技術,基本原理在於HVJ含有細胞表面受體的結合位點,可以促使不同細胞凝聚,最終使細胞膜相互融合。直接產生這種作用的部位是HVJ病毒的外殼,而不是內部的RNA。但是應用HVJ技術有很多缺陷,如細胞感染率低,融合速度慢,反應條件高,融合體的去病毒困難......目前的細胞融合技術主要採取聚乙二醇(PEG),電刺激融合等技術。
最早在日本仙台一實驗室分離出來

⑶ GRF細胞生物學什麼意思

gift shop [英][ɡift ??p][美][ɡ?ft ?ɑp] [經] 禮品店; 雙語例句 1 The situation worries small business owners like Linda Heckman, who runs a gift shop in a Houston suburb. 這種形勢使休斯敦郊外一個禮品店的小店主赫克曼憂心。 2 Everybody knows that 's CIA headquarters& there' s a marked sign out front ( and a gift shop inside, at least for employees). 大家都知道這是中央情報局(CIA)總部,在它前面有一塊顯眼的牌子(那裡面還有一家禮品店,至少對中情局的人來說是這樣)

⑷ 糖尿病種類中IFG、IGT是指什麼,什麼意思

IFG」為空腹血糖受損,指空腹靜脈血糖6.1~7.0 mm0l/L。

「IGT」為糖耐量受損(以往稱為糖耐量減退或減低),是指負荷後2小時血糖值高於正常即≥7.8 mm0l/L,但又沒有達到糖尿病診斷標准即<11.1 mm0l/L,兩者均為糖尿病的前期狀態,也就是糖尿病患者的「後備軍」。

此期患者發展為糖尿病的可能性非常大,研究表明,糖尿病患者都要經過糖尿病前期階段,值得重視的是,此期是唯一有可能恢復至正常的階段;因此,盡早發現空腹血糖受損和糖耐量受損,及時採取相應的措施對降低糖尿病的發病率具有重要意義。

⑸ 低聚果糖和聚葡萄糖有什麼區別

低聚果糖又稱蔗果低聚糖或果寡糖。其組成主要是蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖的混合糖漿。是以蔗糖為原料,通過現代生物工程技術———果糖基轉移酶轉化、精製而成。低聚果糖以其獨特的保健功能和優越的食品配料的雙重品格,商品化程度在國內外處於領先地位。經過美國ift(美國食品工藝協會)和日本醫學院等研究機構應用現代科學研究反復測試得出結論,以果糖基轉酶轉化而成的低聚果糖分子結構和保健功能,與天然存在於果蔬植物中的完全相同。

人體試驗證明,攝入低聚果糖可以促進雙歧桿菌的迅速增值,從而抑制有害細菌的生長;並且雙歧桿菌能發酵低聚果糖產生的短鏈脂肪酸,即乙酸、醋酸、丙酸、葉酸和乳酸,能激活腸道蠕動,增加糞便濕度並保持一定的滲透壓,從而能有效地防止便秘。如果一次攝入15—30g低聚果糖,4小時內即可產生效果。每天攝入3—10g低聚果糖,一周之內便可起到防止便秘的效果。

乳糖是兒童生長發育的主要營養物質之一,對青少年智力發育十分重要,特別是新生嬰兒絕對不可缺少的,乳糖在自然界中只有哺乳類動物的奶中含有乳糖,在各類植物性食物中是找不到乳糖的。乳糖的主要功能是為人體供給熱能,兒童和成人的生長發育、新陳代謝、組織的合成,維持正常體溫以及體育鍛煉、勞動工作都需要大量的熱能,特別是小兒對糖的分解消化吸收利用都比成年人旺盛,乳糖是小兒體內器官、神經、四肢、肌肉等發育及活動的動力。小兒的腦細胞發育和整個神經系統的健全都需要大量的乳糖,一周歲以內的小兒每千克體重每天需要糖13克左右,乳糖的另外一個重要作用是促進小兒腸道內的乳酸菌繁殖增長,在腸道中乳糖在乳酸桿菌乳酸鏈球菌、多種酶及某些微生物的作用下生成乳酸,乳酸對小兒腸胃有調整保護作用,它能抑制腸內異常發酵產生的毒素造成的中毒現象,還可抑制腸內有害細菌的繁殖。乳糖的另一個作用是在鈣的代謝過程中可以促進小兒對鈣的吸收。乳中的甜味就來源於乳糖,但乳糖和其他糖類相比甜度較低所以不會造成小兒的偏食。同時乳糖還能保持兒童體內水分的平衡,提供與腦和重要器官的構成有關的半乳糖,而且對澱粉的貯存也是必要的。半乳糖對兒童的大腦發育特別重要,它能促進腦苷脂類和粘多糖類的生成。若缺乏乳糖就會引起兒童消瘦、乏力、體重減輕、生長發育緩慢,甚至兒童要消耗體內的脂肪、蛋白質這可能發生蛋白質缺乏症。

乳糖是糖類中的一種,糖類的化學構成可分為單糖、雙糖和多糖。乳糖是雙糖,乳糖在人體內被雙糖酶分解成一分子的葡萄糖和一分子的半乳糖而被人體吸收利用,葡萄糖是血液中唯一合適的糖,血液把葡萄糖送到人體全身的每一個細胞,細胞把葡萄糖轉化為二氧化碳及水,並釋放出熱能。人乳、牛奶、山羊奶中的乳糖含量是不同的,人乳含乳糖7%,牛奶中含乳糖4.2%,山羊奶含乳糖4.6%,牛、羊奶中的乳糖含量都比人乳低。乳糖沒有甘蔗糖甜,它的甜度是甘蔗糖的六分之一。乳糖是兒童食用最好的糖類,而且兒童消化道內有充足的分解乳糖的乳糖酶,能很好的分解消化吸收利用乳糖。人乳中的乳糖不但含量比牛、羊奶高而穩定,且不會因母親的食物變化而變化,也不會因血糖變化而產生波動。

乳糖是牛奶中最豐富的糖類,牛奶中所含的糖類99.8%是乳糖,另外還有少量的葡萄糖、果糖、半乳糖。乳糖易溶於水,牛奶中的乳糖幾乎全部是溶液狀態,易於消化吸收。

牛奶中的乳糖在兒童小腸內分解為容易消化的葡萄糖及半乳糖,半乳糖的消化吸收較慢,但半乳糖在兒童腸道內是促進細菌合成維生素k和復合維生素b的促進劑。乳糖並能增進礦物質鈣、磷、鎂等的吸收,增加血鈣濃度,使骨鈣沉積更迅速,為奶中高鈣的吸收和利用創造了最佳的條件,減少了維生素d的需要量,所以牛奶是人乳很好的代用品。

牛奶是一種最接近完善的營養食品,牛奶中的主要碳水化合物是乳糖,正常情況下,這些乳糖應該在人體內的乳糖酶的作用下,水解成葡萄糖和半乳糖後吸收並進入血液。但是有很多人,由於體內缺乏這種酶,飲用牛奶後常會引起對乳糖的消化不良現象,出現腹漲、腸鳴、急性腹痛甚至腹瀉等症狀,我們稱之為乳糖不耐症。

⑹ 食品不同殺菌方法的比較

在食品中常用殺菌方法

(1)超高壓殺菌技術:食品超高壓殺菌(高靜水壓殺菌)就是食品物料以某種方式包裝完好後,放人液體介質(通常是食用油、甘油、油與水的乳液)中,100~1000 MPa壓力下作用一定時間後,使之達到滅菌的要求。其滅菌的基本原理就是壓力對微生物的致死作用,主要是通過破壞細胞膜抑制酶的活性和影響DNA等遺傳物質的復制來實現的。在400~600 MPa的壓力下,可以殺滅細菌、酵母菌、黴菌,避免了一般高溫殺菌帶來的不良變化,因此,能更好地保持食品固有的色、香、味,達到延長保存期的效果。

(2)低溫殺菌:低溫殺菌是對食品中存在的微生物進行部分殺菌的加熱方法。通常使用100℃以下的溫度。由於低溫殺菌後,食品中的菌殘存較多,為了延長產品的貨架期,再使用冷藏、發酵、加入添加劑、脫氧等加工技術。該法主要適用於pH 4.5以下的酸性食品及採用較強加熱處理會明顯導致品質降低的食品。在近幾年,對牛奶及保存期較短的商品也採用該法。

(3)巴氏殺菌法:巴氏殺菌是指溫度比較低的熱處理方式,一般在低於水沸點溫度下進行。它是一門古老的技術,由19世紀法國醫生巴斯德首創,至今仍有一定的應用價值。
巴氏殺菌是最早的殺菌方法,利用熱水作為傳熱介質。殺菌條件為61~63 ℃,30 min,或72~75 ℃,10~15 min。加熱時應注意物料表面溫度較內部溫度低4~5 ℃;此外,當表面產生氣泡時,泡沫部分難以達到殺菌要求。這種殺菌方法,由於所需時間長,生產過程不連續,長時間受熱容易使某些熱敏成分變化,殺菌也不夠理想。目前在大中型食品廠中已很少採用。

(4)超高溫瞬間殺菌:超高溫殺菌簡稱UHT殺菌。一般加熱溫度為125~150 ℃,加熱時間2~8 s,加熱後產品達到商業無菌要求的殺菌過程稱為UHT殺菌。這種殺菌方法,能在瞬間達到殺菌目的,殺菌效果特別好,幾乎可以達到或接近滅菌要求,而引起的化學變化很小。它具有提高處理能力、節約能源、縮小設備體積、穩定產品質量,並可實行設備原地無拆卸循環清洗。

(5)微波殺菌:微波殺菌就是將食品經微波處理後,使食品中的微生物喪失活力或死亡,從而達到延長保存期的目的。一方面,當微波進人食品內部時,食品中的極性分子,如水分子等不斷改變極性方向,導致食品的溫度急劇升高而達到殺菌的效果。另一方面,微波能的非熱效應在殺菌中起到了常規物理殺菌所沒有的特殊作用,細菌細胞在一定強度微波場作用下,改變了它們的生物性排列組合狀態及運動規律,同時吸收微波能升溫,使體內蛋白質同時受到無極性熱運動和極性轉動兩方面的作用,使其空間結構發生變化或破壞,導致蛋白質變性,最終失去生物活性。因此,微波殺菌主要是在微波熱效應和非熱效應的作用下,使微生物體內的蛋白質和生理活性物質發生變異和破壞,從而導致細胞的死亡。

(6)紫外線殺菌:紫外線的殺菌作用在於促使細胞質的變性。當微生物細胞吸入紫外線後,由於產生光化學作用引起細胞內成分特別是核酸、原漿蛋白等發生化學變化,使細胞質變性。尤其是抑制DNA的復制和細胞分裂,使微生物細胞受傷甚至死滅。波長為250~260 nm的紫外線殺菌效果最強。

(7)臭氧殺菌:臭氧是一種在室溫和冷凍溫度下存在的淡紫色的、有特殊魚腥味的氣體,它在水中部分溶解,且隨著溫度的降低而溶解度增加;在常溫下能自行降解產生大量的自由基,最顯著的是氫氧根自由基,因而具有強氧化性的特點。http://www.chc.org.cn/data/2007-10-21/1192966289.html

《食品殺菌新技術》http://www.8.com/books/sep3m6c.html

食品殺菌技術按殺(除)菌方式一般可分為加熱殺菌技術、化學葯劑殺菌技術、輻射殺菌技術(γ-射線、微波、紅外線等)、過濾除菌法以及加熱與其他手段相結合的殺菌技術等。
其中食品熱力殺菌可分為低溫殺菌法(巴氏殺菌)、高溫短時殺菌法和超高溫瞬時殺菌法。
前兩種方法,現今還廣泛用在各類罐藏食品、飲料、酒類、葯品、乳品的生產中。後一種方法,由於其獨特的優點,已發展為一種高新食品殺菌技術。 電阻加熱殺菌也叫歐姆殺菌,是一種新型熱殺菌方法,它借通入的電流使食品內部產生熱量而達到殺菌的目的,是酸性和低酸性食品和帶顆粒(粒徑小於25mm)食品進行連續殺菌的一種新技術。電阻加熱已成功地用於各種包含大顆粒的食品和片狀食品的殺菌,如馬鈴薯、胡蘿卜、蘑菇、牛肉、雞肉、片狀蘋果、菠蘿、桃等 。
臭氧殺菌技術具有高效、快速、安全、便宜等優點,自1785年發現以來,廣泛應用於食品加工、運輸與貯存及自來水、純凈水生產等領域。
輻照殺菌技術利用原子輻射技術進行食品殺菌保鮮。輻照就是利用X射線、γ射線或加速電子射線(最為常見的是Co60和Cs137的γ射線)對食品的穿透力以達到殺死食品中微生物和蟲害的一種冷滅菌消毒方法。
微波殺菌具有穿透力強、節約能源、加熱效率高、適用范圍廣等特點,而且微波殺菌便於控制,加熱均勻,食品的營養成分及色、香、味在殺菌後仍接近食物的天然品質。微波殺菌目前主要用於肉、魚、豆製品、牛乳、水果及啤酒等的殺菌。
遠紅外線殺菌技術遠紅外加熱殺菌不需要傳媒,熱直接由物體表面滲透到內部,因此不僅可用於一般的粉狀和塊狀食品的殺菌,而且還可用於堅果類食品如咖啡豆、花生和穀物的殺菌與滅霉以及袋裝食品的直接殺菌。
紫外線殺菌技術 廣泛用於空氣、水及食品表面、食品包裝材料、食品加工車間、設備、器具、工作台的滅菌處理。磁力殺菌是把需消毒殺菌的食品放於磁場中,在一定磁場強度作用下,使食品在常溫下起到殺菌作用。由於這種殺菌方式不需加熱,具有廣譜殺菌作用,經處理後的食品,其風味和品質不受影響,主要適用於各種飲料、流質食品、調味品及其他各種包裝的固體食品。
高壓電場脈沖殺菌是將食品置於兩個電極間產生的瞬間高壓電場中,由於高壓電脈沖(HEEP)能破壞細菌的細胞膜,改變其通透性,從而殺死細胞。可達到商業無菌的要求,特別適用於熱敏性食品,具有廣闊的應用前景。超聲波殺菌技術 以醬油為滅菌對象,取得了良好的效果。 脈沖強光殺菌技術是採用強烈白光閃照的方法進行滅菌,該技術由於只處理食品的表面,從而對食品的風味和營養成分影響很小,可用於延長以透明材料包裝的食品及新鮮食品的貨架期。
超高壓殺菌技術最大優越性在於它對食品中的風味物質、維生素C、色素等沒有影響,營養成分損失很少,特別適用於果汁、果醬類食品的殺菌。 膜過濾除菌技術已在食品、生物制葯等工業生產中得到廣泛應用,例如生化物質的提取、純水的制備、果汁的濃縮等。
食品工程中的殺菌技術還很多,如:二氧化氯殺菌技術、氯氣殺菌技術、電子滅菌技術、加熱與加壓並用殺菌技術、加熱與化學葯劑並用殺菌技術、加熱與輻射並用殺菌技術、靜電殺菌技術等。這些技術正在得以研究和應用。

⑺ 膳食纖維更確切的名稱是

專家們對膳食纖維准確的定義為:「膳食纖維是指能抗人體小腸消化吸收的、而在人體大腸能部分或全部發酵的可食用的植物性成份、碳水化合物及其相類似物質的總和,包括多糖、寡糖、木質素以及相關的植物物質」。 通俗點說,膳食纖維就是植物性食物中人難以消化吸收的那部分物質,包括纖維素、木質素、戊糖、水果、果膠等。穀皮、麩皮、蔬菜與水果的根、莖、葉就是膳食纖維的主要來源。 既然不能被消化吸收,怎麼又會被譽為第七營養素呢? 什麼是「營養」?營養通常是指能滿足人體生長發育和維持各組織器官活動所需要的養料。在普通人的眼裡,「營養」就是諸如雞、鴨,魚、肉這類物質。但在營養學家的眼裡,營養素有7種,除了蛋白質、脂肪、糖類、無機鹽、微量元素、維生素外,還必須加上膳食纖維,因為膳食纖維正是「維持各組織器官活動所必需的養料。」 長期以來,人們對攝入膳食纖維的重要性認識不足,一直認為膳食纖維沒有營養價值。但是,隨著人們生活水平日益提高,人類飲食日趨精細,膳食纖維攝入量日趨下降,高蛋白質、高脂肪、高熱量的「三高」飲食結構,使糖尿病、心血管病、肥胖、腸道癌、便秘等富貴病越來越普遍。這種情況在發達國家和都市人群中尤其突出。通過對纖維素的深入研究,認識到膳食纖維的攝入和人體的健康密不可分,尤其對「富貴病」的防治,有著極其重要的作用。於是,膳食纖維才被列為「第七營養素」,成為強身保健、防病治病所必須的營養品。 根據膳食纖維溶解度的不同,膳食纖維可分為不溶性纖維和可溶性纖維。 1、可溶性纖維。 可溶性纖維是能溶於水,在水中形成凝膠體,又可吸水膨脹,並能被大腸中微生物酵解的一類纖維。常存在於植物細胞液和細胞間質中,主要有果膠、植物膠、黏膠和部分半纖維素等。主要存在於燕麥、豆類、水果、海藻類和某些蔬菜中。 2、不可溶性纖維 不可溶性纖維是既不能溶解於水又不能被大腸中微生物酵解的一類纖維。主要有纖維素、半纖維素、木質素等。常存在於植物的根、莖、干、葉、皮、果

⑻ 牛初乳是不是只能對小牛起作用,對人有效嗎

什麼是牛初乳 初乳是一種非常特殊的乳,它是所有雌性哺乳動物在產後2-3天內所分泌乳汁的統稱。 初乳的特殊性首先表現在化學組分上:較之普通乳汁,初乳蛋白質含量更高,脂肪和糖含量較低,鐵含量為普通乳汁的10—17倍,維生素 D和維生素 A分別為普通乳汁的3倍和10倍。對人類來說,初乳因富含免疫因子、生長因子及生長發育所必需的營養物質,是母親產後提供給新生兒最珍貴的禮物。免疫球蛋白能形成抗體,與病原微生物及毒素等抗原結合,在新生兒自身免疫系統發育成熟之前保護其免受病原侵襲。新生兒在最初6個月不易生病,這就是母乳中的「原生免疫因子」在起作用。 但母乳畢竟有限,人類自然要尋找其它的初乳資源。牛初乳是母乳最佳的延續。牛初乳的嚴格定義是指乳牛分娩後72小時內採集的乳汁。現代乳品工業認為,乳牛分娩後最初6次乳汁較之常乳組成明顯不同,不能直接出售,也不宜直接混入常乳用於常規乳品加工,這便是通常意義上的「牛初乳」。它富含免疫球蛋白、生長因子和多種活性酶,經大量的科學研究和臨床實踐,科學家們達到共識:不同年齡的人都能極大地得益於牛初乳的免疫保護,輔助治療疾病和促進疾病的恢復。 牛初乳所含的免疫抗體比人初乳更多,因此牛初乳是一種卓越的營養食品。 這些乳汁是母牛為了供給牛犢在新生環境下,可以抗外來病毒及細菌而合成的,它富含在體內自然合成的天然抗體。它除了含有豐富的優質蛋白質、維生素和礦物質等營養成分外,還富含免疫蛋白球(主要為IgG抗體)、生長因子等活性功能組分,能攻擊侵入人體的致病原,抑制病菌繁殖,是一種能增強人體免疫力、促進組織生長的健康功能性食品。牛初乳神奇之處在於能增強自身免疫功能,減少對抗生素的依賴性,也不會產生任何副作用,在任何時候均可有效保護身體的健康,早被外國 科學家描述為「大自然賜給人類的真正白金食品」。於2000年更被美國食品科技協會(IFT)列為2l世紀最佳發展前景的非草葯類天然健康食品 優質的牛初乳 根據研究,乳牛產犢後24小時內所分泌的乳汁。所含的優質蛋白質和免疫 球蛋白特別豐富,當中的IgG含量可占總蛋白量的40%以上,比人初乳的最多高 出100倍;而在24小時後採集的IgG含量會急速下降至4%;在48小時後至72小時內的IgG更會逐漸降至接近普通乳汁水平 牛初乳功效 牛初乳是牛犢誕生後的第一份食物,牛初乳是乳牛產犢後3天內所分泌的乳汁,是牛犢在新生環境下,抵抗外來病毒及細菌侵襲的重要保證,它包含了牛犢成長最重要的免疫因子和生長因子,可以幫助抵抗外來病原和促進生長發育。

⑼ 牛初含乳是什麼意思

含乳飲料

根據國家標准GB 11673-2003《含乳飲料衛生標准》的規定,含乳飲料種類可分為配製型含乳飲料和發酵型含乳飲料兩種。配製型含乳飲料中蛋白質含量不低於1.0%的稱為乳飲料,蛋白質含量不低於0.7%的稱為乳酸飲料。發酵型含乳飲料中蛋白質含量不低於1.0%的稱為乳酸菌乳飲料,蛋白質含量不低於0.7%的稱為乳酸菌飲料。
什麼是牛初乳?
2005年12月12日,中國官方通過牛初乳行業規范。規范認為,母牛產犢後3天內的乳汁與普通牛乳明顯不同,稱之為牛初乳。牛初乳蛋白質含量較高,而脂肪和糖含量較低。20世紀50年代以來,由於生理學、生物化學、醫學以及分子生物學的發展,發現牛初乳中不僅含有豐富的營養物質,而且含有大量的免疫因子和生長因子,如免疫球蛋白、乳鐵蛋白、溶菌酶、類胰島素生長因子、表皮生長因子等,經科學實驗證明具有免疫調節、改善胃腸道、促進生長發育、改善衰老症狀、抑制多種病菌等一系列生理活性功能,被譽為「21世紀的保健食品」。牛初乳還被外國科學家描述為「大自然賜給人類的真正白金食品」,2000年美國食品科技協會(IFT)則將牛初乳列為21世紀最佳發展前景的非草葯類天然健康食品。
從餅干泡水到麥乳精,然後是豆奶芝麻糊,繼而流行吃麥片,再到純奶、酸奶,打著營養旗幟的這些液體食物曾給我們美味的感受,也記住了歲月變遷的痕跡。出現於上世紀末本世紀初的牛初乳,便是營養食品中一個新的詞彙,同時,也是當下最熱門的一種綠色功能食品。

⑽ 血清中禽流感抗體含量的檢測方法

禽流感是由A型流感病毒引起的一種高度接觸性傳染性疾病。給世界養禽業造成了巨大的經濟損失。禽流感病毒可分為不同的亞型,世界各地的禽流感主要由高致病性的H5和H7兩種亞型引起,而人對其中的H1和H3亞型易感。快速診斷禽流感病毒具有重大意義。目前禽流感的實驗室檢測是比較快速、准確的方法。隨著血清學實驗技術和生物工程技術的飛速發展,禽流感診斷技術的研究也不斷取得新進展。瓊脂擴散試驗、血凝和血凝抑制試驗等常規方法的使用雖有一定的優勢,但免疫熒光法和ELASA也日益顯示出其快捷准確的特點:分子生物學的發展為核酸序列分析法的建立創造了條件,也使PCR,RT-PCR及核酸探針等檢測技術成為可能。這篇文章就是對有關該病的診斷方法加以總結,並提出了認為比較可行的改進方法,旨在方便對禽流感做出及時而有效的診斷並採取相應措施。

1. 病毒的分離鑒定

無菌採集病料經處理後接種9-11日齡雞胚,收取尿囊液測定血凝活性。若為陰性則應繼續盲傳2-3代。對具有血凝活性的尿囊液需先用新城疫(ND)抗血清做血凝抑制(HI)試驗!以排除ND感染。然後用免疫擴散等方法來檢測特異核心抗原,核糖蛋白(NP)或基質蛋白(MP),再用血凝抑制試驗和神經氨酸酶抑制試驗鑒定A型流感病毒亞型。分離鑒定的同時進行致病力試驗,確定毒力強弱。但是流感病毒「O」相毒株不凝集雞紅細胞,故近來在流感病毒鑒定中常用豚鼠或人紅細胞來代替。然而,該兩種細胞無細胞核,沉積慢,一般在紅細胞凝集及凝集抑制測定中需60分鍾才能觀察結果,同時在「U」型孔板中,很難沉積成像眼淚樣的點即當中常有小空[1]。

病毒的分離鑒定對禽流感的診斷比較確實,但操作程序繁瑣、費用多、耗時費力。

2. 血清學診斷技術

2.1 瓊脂擴散(AGP)試驗

進行病毒抗原型特異性鑒定即用已知陽性血清和末知抗原進行AGP試驗。

受檢樣品是具有血凝素活性的雞胚尿囊液。AGP是用來檢測A型流感病毒群特異性血清抗體,即抗核糖蛋白(RNP)和基質蛋白(MP)抗體,因而適用於鑒定流感病毒 。1979年Beard首次將AGP用於禽流感抗體檢測[2]。

此法雖簡單易行,但是敏感性較差,易出現假陽性。AGP最常用的是免疫雙擴散,趙增連、陳海燕等分別開展了禽流感病毒快速定型雙擴散法的研究,不僅提高了其敏感度,且快速省時,在此方法基礎上建立的AGP診斷技術及其診斷試劑盒,在全國范圍內得到推廣應用,並取得良好的效果。

2.2 血凝(HA)和血凝抑制試驗(HI)

一般情況下,新分離毒株要先鑒定出特異性NP或.MP抗原型(用AGP)確定禽流感病毒,再做HA亞型的鑒定[3]。

現已有人採用改進HA試驗方法,稱為HA加敏法。該法測抗體效價比常規性高2-4倍,若抗原用乙醚裂解其敏感性比常規法高4-6倍,但觀察時以30min內為好,否則易出現假陽性。另外,還應注意在HI試驗時,應先除去特異性凝集反應。許多禽類血清都含有非特異性因子,能和紅細胞表面受體競爭性地作用於病毒表面的血凝素而發生非特異性凝集反應。通常用受體破壞酶(RED)即霍亂菌培養液處理法或高碘酸鈉法制備血清[4]。

HA、HI 特異性好,是亞型鑒定的常用方法,但其操作過程繁瑣費時,並且由於用已知HA亞型的抗血清不能檢出新的HA亞型的禽流感病毒,所以用該方法鑒定不如瓊脂擴散實驗簡便和快捷。

2.3 神經氨酸酶抑制試驗(NIT)

根據A 型流感病毒的表面抗原特性,特別是血凝素(HA)和神經氨酸酶(NA)特性,不僅可通過HI試驗對病毒進行堅定,而且可通過NI試驗進行鑒定。1983 R.A.Van.Densen介紹了NI試驗的一種改進法-平板微量NI試驗,此法雖不能提供常量法的定量,但卻是A型流感病毒的病毒分類和抗體檢測的快捷方法, 試驗證明微量NI試驗能對分離物做出准確鑒定而常量NI試驗檢測亞型混合物似更敏感[5]。

目前國家獸醫實驗所已將微量NI試驗列為流感病毒分離物定型及篩選畜禽血清9型NA抗體的常規方法,診斷中也已廣泛採用此法特別是美國在80年代火雞發生流感病毒期間,每次流行所得的血清樣本用微量NI試驗所作出的A型流感病毒亞型鑒定結果已為病毒分離、疫苗接種和流行病學資料所證實。這種方法已被證明是快速的且成本較低和有可重復性。這種技術的可靠性將導致NI試驗的廣泛應用。

2.4 中和試驗(NT)

病毒中和實驗技術是反映機體抵抗特定病毒感染能力的最可靠方法。流感病毒中和實驗技術有以下優點:(1)由於中和抗體作用於流感病毒表面血凝素蛋白(HA),使流感病毒失去感染能力,因此,流感病毒中和實驗主要用於檢測血清中的特異性抗血凝素蛋白抗體。(2)流感病毒中和實驗既能檢測病毒株的功能性變化,又能反映機體的抗病毒水平。(3)該方法主要使用感染性病毒,不需要進行病毒或病毒蛋白的純化,因此,可以被迅速用於檢測新病毒或人群免疫狀態[6]。

以中和試驗(NT)來鑒定或滴定流感病毒時常用雞胚或組織培養細胞,操作方法與其他病毒(如NDV)的中和試驗相同。病毒中和實驗技術是一個相當復雜的過程,參與中和反應的因素有病毒、抗血清和宿主細胞。這些因素的變化都會影響中和實驗的結果。因此,對中和實驗的整個過程進行嚴格的質量控制。每次測定必須設立陽性和陰性血清對照,陽性和陰性細胞對照,以及對病毒使用劑量進行滴定。

NT試驗是最敏感而特異的血清學方法,只有抗體與病毒顆粒上的表面抗原相對應,特別是與吸咐到宿主細胞上的病毒表面抗原相對應,才能在實驗中取得滿意的顯示效果。 因此,某一個血清型的中和試驗抗體只與同組內地其他病原表現出有限的交叉反應。病毒中和試驗操作繁瑣耗時費料,臨床上幾乎不用。但作為經典方法在病毒鑒定中起著重要作用,許多新的檢測方都要與之為標准進行比較[7]。

2.5免疫熒光技術(IFT)

免疫熒光技術就是熒光抗體技術(FAT)。 IFT早在1961年就開始用於人類流感的快速診斷。1984年濱西法尼亞州爆發禽流感時,Skeeles將IFT首次用於AIV的檢測。IFT最早用於病毒的鑒定和定位病毒感染細胞中特異性抗原。主要是核內熒光:用MP抗原的熒光抗體主要出現胞質熒光,核內也有部分熒光[8]。

用於禽流感病毒的診斷常用直接熒光抗體法即在組織觸片上直接染色,以熒光顯微鏡檢查熒光 。一種AIV的熒光抗體可用來檢測不同亞型的其他病毒。

IFT用於診斷具有快速、簡便、敏感性好的特點,而且費用較低,其敏感度同病毒的分離鑒定相當,有時高於用雞胚進行的病毒分離。但是需要注意的是如何避免和降低標本中出現的假陽性(非特異性熒光)問題。

對一株雜交瘤細胞分泌的流感病毒的單克隆抗體進行檢測時,發現間接固相免疫熒光技術的敏感性比HI 高40-150倍。間接免疫熒光技術也可以用來檢測核蛋白(NP)基質蛋的(MP)抗原與抗體的反應,其敏感性很高。但對抗原制備要求較高,需用非離子型去污劑對純化的病毒粒子進行裂解[9]。

2.6 酶聯免疫吸附法(ELISA)

ELISA的基本原理是:酶結合物與相應抗體或抗原特異性結合,再遇酶底物時,在酶的強烈催化下使原來無色的底物產生化學反應,即形成有色的產物,便可用肉眼或分光光度計定量檢測其含量。該方法具有特異性、敏感性、快速性和簡易性等優點。在流感病毒微量中和實驗中,酶結合物(HRP標記的羊抗鼠IgG抗體)與存在於MDCK細胞膜上的病毒核蛋白抗原-核蛋白單克隆抗體復合物結合,HRP酶催化OPD,使無色底物形成橙黃色化合物,再由ELISA檢測儀測定吸光度值,從而獲得中和抗體滴度[11]。

1974年Jenning等首先用ELISA對注射流感病毒所產生的抗體消長規律進行了檢測。Lanbre認為ELISA的敏感性遠高於HI補給結合反應 。Meulemans(1987)對ELISA、AGP、HI檢測AIV抗體進行了比較研究。發現AGP和ELISA一樣均能檢測型特異性抗原(抗體),但敏感性遠低於ELISA,HI適用於亞型的檢測,其敏感性不如ELISA。1993 年Shodihall用混合纖維素脂膜或硝酸纖維素膜代替微量反應板,建立了快速診斷的DAS-ELISA大大縮短了診斷時間,並可保留ELISA的特異性、敏感性,其結果又不需要特殊儀器分析、可用肉眼判定。

隨著分子生物技術的發展,中國農業科學院哈爾濱獸研所的李海燕等用表達禽流感病毒核蛋白的桿狀病毒感染S9昆蟲細胞,以其表達產物制備抗原,建立了以桿狀病毒系統表達的AIV核蛋白為抗原的禽流感間接(重組核蛋白)ELISA診斷技術(rNP-ELISA)確定了其最適工作條件,並對3138份雞血清進行了檢測。實驗證明rNP-ELISA與全病毒間接ELISA(AIV-ELISA),AGP及HI的符合率分別為99.9%、97.8%、98.8%,並能100%檢出AGP陽性及疑似HI陽性的血清樣品。 這證明了rNP-ELISA是檢測A型禽流感病毒血清特異性抗體的一種特異、敏感、微量、快捷、經濟的血清學診斷技術[11]。

ELISA方法的敏感性和特異性與抗原的純度直接相關 。1984年Abraham等報道了抗原快速提純法,所需時間比常規法縮短10倍,並且研究結果表明應用提純抗原幾乎全部排除了假陽性反應。

目前美國Kiregard Reery和Labortories有試劑盒出售。ELISA成為AI流行病學普查及早期快速診的最有效和最實用的方法。

3 分子生物學技術

近年來,隨著現代生物技術的發展,分子生物技術已被大量應用於禽流感的快速診斷。

3.1聚合酶鏈反應(PCR)及反轉錄---聚合酶鏈反應(RT—PCR)

PCR是近來發展成熟起來的一種體外基因擴增技術,能在數小時內使DNA呈指數增加。已成功地用於多種病毒的基因檢測和分子流行病學調查等其檢測原理為:尋找傳染性因子的特異DNA序列。對待測樣品進行PCR擴增, 如果檢測出了相應的擴增帶,則判為陽性反應;反之,無擴增帶則為陰性反應。

鑒於引起致病的禽流感病毒多是H5和H9血清亞型,在PCR技術的基礎上,崔尚金等(1998)建立了一種直接檢測禽糞樣和雞胚尿囊液中AIV—H9亞型RNA的RT-PCR反應,並將此法與AGP和電鏡技術作了比較,結果表明引物的特異性決定了產物的特異性,並且該方法靈敏度高,檢測過程僅需8h左右,並且大大縮短了感染後的檢出時間。

應用毛細管PCR(15min30個循環)代替常規PCR(2.5個小時30個循環)以進一步縮短檢測時間的研究也已展開並進入更深入的領域,以期用於不同樣品(組織、組織液、分泌液、糞便等)的檢測,區分高致病力毒株和低致病力毒株與非致病力毒株,從而深入探討該方法在AIV的臨床早期診斷,流行病學調查及發病機制中的應用價值,為我國制定AIV的綜合防制措施做出貢獻[12]。

3.2 核酸探針技術/核酸分子雜交技術

這項技術是目前生物化學和分子生物學研究應用最廣泛的技術之一,是定性和定量檢測特異DNA或RNA的有力工具。

核酸探針技術的原理,在進行雜交時,用一種預先分離純化的已知DNA或RNA序列片段去檢測末知的核酸樣品,對作檢測用的已知DNA或RNA序列片段加以標記的片段就稱為核酸探針。作為核酸探針的DNA或RNA是各種病原微生物基因的一部分。 在變性分開的待檢DNA或RNA單鏈中加入與其有互補作用的核酸探針。探針在一定條件下就能與原來變性分開的DNA或RNA單鏈上的互補區段形成氫鍵,從而結合成雜交雙鏈,通過洗滌,除去未雜交上的標記物,然後進行放射自顯影,即可確定原待檢樣品有無與探針互補的DNA或RNA序列。

Bashiruddin等(1991)報道了擴增HA基因來分析致病毒株與非致病毒株的差異,證實了致病毒株與非致病毒株氨基酸的差異,顯示了本方法的應用前景[13]。

3.3熒光PCR法

利用生物學手段,用熒光PCR方法快速檢測禽流感病毒的方法已在北京通過專家鑒定,這一研究成果不僅在國內屬於首次,而且在國際上也屬於先進水平。它與國際標准方法雞胚病毒分離相比,不僅無需做雞胚病毒分離培養,而且時間也由原來最短的21d縮短為4h。

4 電鏡技術

由於流感病毒為正粘病毒,屬於形態特徵性強的病毒,因而可用電鏡技術來診斷。為提高禽流感的檢出率,除樣品制備技術外,取病料的部位和時間也是獲得准確檢驗結果的關鍵。病料的採集部位及取材時間應根據禽流感病毒在動物體內分布特徵及其感染特性而定[15]。

5 流感實驗室檢測中應注意的若干問題(高致病性流感病毒)

(1)禁止在同一實驗室,更不應在同一接種櫃中,同時處理接種未知臨床標本、已知陽性標本

(2)禁止在同一實驗室,同一時間處理,接種采自不同動物的標本;動物標本(如禽、豬等)必須與人的標本分別保存。

(3)接種後剩餘原始標本,尤其分離出病毒的標本需暫時凍存,有條件的應置-70℃或以下保存,以便需要時可進行復查,待分離物經國家流感中心鑒定完後方可處理掉。分離陰性的標本應隨時棄之。

(4)嚴禁實驗室交叉污染:在病毒分離時嚴禁設陽性對照及操作在人群中已消失的流感病毒。

(5)向國家流感中心送毒株時,量至少需5 ml,同時需自己保存一些,以便寄送過程發生意外時可繼續補送。

(6)流感病毒在-20℃~-40℃ 時不穩定,故不宜在此溫度下長期保存。

(7)雞胚中分離出的流感病毒,應盡量別在MDCK細胞上傳代。因當今國內所用的MDCK細胞屬腫瘤細胞系,一旦病毒通過它傳代就無法用於疫苗制備。

(8)寄送毒株時一定需附上送檢表。寄送毒株需及時,尤其鑒定不出的,異常的毒株應盡快向國家流感中心寄送。寄送時用快速直送國家流感中心[16]。

總結

使用常規方法檢測禽流感及其抗體仍是目前世界上普遍接受的方法。這些方法包括病毒的分離、瓊脂擴散實驗鑒定病毒和測定特異性的血清抗體,血細胞凝集及其抑制試驗鑒定病毒或血清抗體亞型。 採用雞胚中和試驗來鑒定病毒或血清抗體亞型也是一種可以接受的方法,但相對血凝抑制試驗較為麻煩。隨著科學技術的發展,檢測該病毒和血清的方法出現了免疫光法和ELISA法,這些方都有快捷的特點,特別是日益完善並趨向成熟的ELISA檢測方法,因其簡捷、敏感、特異性強等優點而越來越得到廣泛的重視和應用。隨著分子生物學的發展,核酸序列分析法越來越可能成為一種更准確可行的方法,特別是它能從分子生物學的發展,核酸序列分析法越來越可能成為一種更准確可行的方法,特別是它能從分子水平揭示HPAIV甚至潛在HPAIV毒株。這種方法雖然在一般實驗室還不能應用,但RT-PCR技術為從基因水平檢測禽流感病毒RNA提供了靈敏、特異和快捷准確的方法。正在進行的應用毛細管PCR代替常規PCR,以進一步縮短檢測時間的研究和根據禽流感NP的高度保守性而建立的rNP-ELISA檢測法,不僅具有與AGP、HI同樣的特異性,而且具有更高的靈敏性,可在微克水平上進行檢測!都是很有前途的方法。將rNP-ELISA檢測技術及其成套的成品試劑組裝成診斷試劑盒,也取得了很好的實驗效果。

在以上各種檢測方法及科學技術發展的基礎上,將PCR技術與ELISA技術結合起來,建立一種新的實驗室檢測AIV的方法,將有較大的研究價值其實。其實驗原理(以此類方法中最簡單的雙引物雙標記法為例)如下:

PCR的一對引物中!其中一種引物用生物素標記,另一種引物用地高辛標記,酶標微孔板上用生物素的親和素包被(生物素的親和素與生物素特異的結合)。PCR擴增後純化片段加入微孔板中。此時,微孔板上包被的生物素親和素將與引物上的生物素結合而捕捉了PCR片段,再在微孔板中加入辣根過氧化物酶標記的抗地高辛抗體,該抗體將與另一引物上的地高辛結合,從而形成生物素親和素-生物素-PCR片段地-高辛-抗地高辛-酶的復合物。加入酶的相應底物進行顯色,便可判斷PCR擴增的有無。由於該方法是PCR技術和ELISA技術的結合,所以它是一種兩級放大系統,即PCR放大和ELISA放大。故而它的靈敏度更高,同時這種方法避免了PCR產物分析時的電極及染色過程,所以更為快捷、簡便、靈敏。

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