痰標本微生物如何培養

1. 痰培養標本怎麼留才正確

留痰培養標本：

1、取痰前一天要多喝水，有條件的可以做霧化使痰液稀釋，易於排出。

2、在早晨空腹祛痰比較好。先用清水漱一下口，保持口腔衛生，有假牙的需要取下來，然後用力咳嗽，最好是深咳，將呼吸系統深部的痰液吐出來，吐到容器內，容器一定是無菌的乾燥的，然後收取痰液後擰緊，立即送到檢驗科。

3、用氣管穿刺法來進行對厭氧菌的培養。

4、痰液留取應立即送去檢查，避免污染。在室溫下不應該超過兩小時，另外如果沒有條件立即送檢，應在4度的冰箱內保存24小時內處理。

5、當檢查結核分枝桿菌時，為了提高陽性率應收集24小時內各時間段的痰液。

(1)痰標本微生物如何培養擴展閱讀：

痰培養的臨床意義：

該項檢查適用於各種不明原因的呼吸道感染疾病。

痰液培養出致病菌後，進行菌種鑒定，可得出相應的病原菌。常見的致病菌有：

1、革蘭陽性菌：肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、結核分枝桿菌、放線菌、奴卡菌、厭氧球菌、白喉棒狀桿菌等。

2、革蘭陰性菌：卡他布蘭漢菌、腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌、肺炎克雷伯菌、大腸桿菌、假單胞菌、軍團菌等。

3、培養分離出一些真菌，有助於真菌性感染的診斷。

4、做病毒分離：可分離到某些病毒，如分離到禽流感病毒H5N1，則可診斷為禽流感。

2. 如何提高臨床微生物檢驗標本的采樣正確率

一、 血液標本的採集
1、 皮膚消毒程序： a.75%酒精清潔局部皮膚30s以上。b.待皮膚干後，再用1%-2.%碘酊作用30s或10%碘伏作用90s以上，從穿刺點中心部位向外畫圈消毒，范圍不應小於3cm（直徑），且不能用手指觸摸消毒後的皮膚。c.皮膚碘酒干後（約1min），穿刺採集血液，采血量成人10-20ml，嬰幼兒1-2ml。兒童3-5ml。d.培養瓶消毒程序：70%酒精擦拭血培養橡皮塞，作用60s；用無菌棉簽清除橡皮塞表面殘余酒精。用注射器無菌采血後立即在床旁接種培養瓶，並迅速輕搖，充分混勻防止凝固，但又不可劇震以防溶血。立即送檢，切勿冷藏。一般情況下可把血培養瓶放20-22℃。不放冰箱。
2、注意事項：a.懷疑菌血症應盡早采血，體溫上升（38.5℃）采血可提高陽性率，但也要防止因等待而延誤時機。b.對已經使用抗菌葯物，而又不能停葯者，也應在下次用葯前采血。切忌不要在靜滴抗菌葯物的靜脈處採取血標本，也不能從靜脈導管及動脈插管中取血。c.培養基與血液之比以10:1為宜，以稀釋血液中的抗生素，抗體等殺菌物質；有人主張對接受抗菌葯物治療的病人，培養基與采血量之比可為20:1或大於這個比例。d.近年研究表明，將血液注入血培養基前，更換針頭反而易導致污染。e.每例至少採血兩次，間隔0.5-1h，以利於提高陽性率和區分感染菌與污染菌。f.疑為細菌性心內膜炎及布魯氏病的病人，以肘動脈或股動脈采血為宜，除在發熱期采血外，並要多次采血（24h3-4次）和增加采血量（可增加10ml）。g采血後立即送檢，如不能立即送檢可置室溫，而不能放置冰箱。h如臨床表現很似敗血症，而血培養多次陰性者，提示考慮厭氧菌和真菌感染的可能。
二、骨髓的採集
1、採集方法：在病灶部位或髂前（後）上脊處嚴格消毒後抽取骨髓1ml，注入血培養瓶內。
2、注意事項：a.骨髓內含有大量的單核巨噬細胞系統的細胞，因而骨髓培養對傷寒病人的診斷較血培養優越。b.用於懷疑細菌性骨髓炎病人。
三、靜脈導管標本的採集
1、採集方法：a.常規導管部位皮膚消毒。b.無菌方法從病人體內拔出靜脈導管，剪下導管尖端5cm，放入無菌瓶中。立即（15min內）送檢，避免標本乾燥。4℃保存不超過2小時。
2、注意事項：a.剪下的導管立即接種血平皿，在血瓊脂平板上交叉滾動4次。然後棄之。可提高陽性率。b.肉湯反復沖洗導管腔內，沖洗液做定量培養。
四、呼吸道痰標本
1、採集方法：a.清晨起床後用涼開水漱口多次，以除去口腔內大量雜菌，用力咳出肺深部的膿痰，置於清潔乾燥容器中送檢。b.痰量極少者可用45℃3%-5%的氯化鈉溶液約5ml霧化吸入min,進行導痰。對於咯痰量少的幼兒，可輕輕壓迫胸骨上部的氣管，當其咯痰後用無菌棉棒採集標本。c.咳嗽無力或昏迷病人，可用吸痰管經鼻腔或口腔經氣管腔內吸引痰液送檢。d.氣管切開者可以深入透氣孔中取痰。e.可用支氣管鏡直接在病灶部位採集高濃度的病原菌。f.用無菌導管經鼻腔插入氣管鏡內，緩慢注入無菌蒸餾水5ml，取出導管。留取患者在3h內咳出的痰液，放入無菌容器中送檢。
2、注意事項：a.痰標本的採集以晨痰為准，此時患者痰量較多且含菌量也多。b.標本採集後立即送檢，若不能及時送檢者，可暫存4℃冰箱。若晚1-2h接種，會失去苛氧菌，並使得革蘭陰性菌過分生長。c.可接受的標本：痰；支氣管灌洗液，支氣管刷，支氣管活檢；肺吸出物和肺活檢。不能接受的標本：唾液；24h留的痰（結核桿菌培養除外）；拭子。d.痰標本的質量評價：（用顯微鏡篩選）在低倍鏡下，檢查鱗狀上皮細胞，至少10個視野，集中在有白細胞處，合格標本為白細胞與鱗狀上皮細胞比例大於2:1。
五、鼻咽喉拭子標本
A.用濕的拭子（生理鹽水）；需插兩個鼻孔；深入3.3cm左右，轉動4-5次；以上用於診斷金黃色葡萄球菌暴發時的鼻帶菌者。
B.咽拭子、口腔拭子（1）採集方法（到細菌室取專用拭子）a.患者清水漱口後，由檢查者將其舌外拉，用棉拭子將咽後壁或懸雍垂的後側反復擦拭數次；b.化膿性扁桃體炎、口腔念珠菌病時，直接用棉拭子在病灶部位擦拭；c插入運送培養基中立即送檢，防止乾燥。
(2)注意事項a.棉拭子應避免觸及舌、口腔黏膜和唾液;b.採集標本前數小時不可用消毒葯物漱口或接觸病灶局部。
六、胃腸道
1、糞便a.採集方法選取膿血、黏液糞便2-3g，液體糞便取絮狀物1-2ml。盛於滅菌瓶中或蠟紙盒中及時送檢。b.注意事項①標本要採集新鮮的，陳舊標本影響陽性檢出率；②切忌糞尿混合；③若要分離阿米巴，標本要立即送檢並注意保溫；④運送培養基可提高陽性率；⑤分離難辨梭菌時需選不成形或水樣便；⑥霍亂弧菌、大腸桿菌Ο157感染的腹瀉便則為水樣便或血性便；⑦標本在病理早期或治療前採集；⑧一般認為用抗菌葯三天後，標本培養病原菌陰性。
2、肛拭子在無法獲得糞便的情況下，可用經無菌甘油水或無菌生理鹽水濕潤的肛拭子插入肛門4-5cm（幼兒2-3cm）處，輕輕旋轉擦取直腸表面黏液後取出，置運送培養基中送檢。

3. 痰標本中的病原微生物

簡單概括為，晨痰，漱口/刷牙，用力咳出。
最關鍵的是，每個低倍鏡視野，鱗狀上皮細胞＜10個，白細胞＞25個（或者鱗/白的比例＜1:2.5），可視為合格標本

4. 痰標本如何接種

痰是診斷某些呼吸道疾病的依據之一。通過觀察痰的性狀可以大致上辨別疾病的類型,對痰液進行培養還能發現致病微生物以及葯物敏感性，對治療疾病有幫助。查痰如此重要，因此病人應掌握正確的留痰方法，否則將會直接影響痰檢結果
正確留取痰標本的方法是：
1.病人留痰標本前用清水漱口，以清除口腔內的食物殘渣及部分雜菌
；
2.做深呼吸數次後，收腹用力咳出來自支氣管深部的膿樣或粘液樣痰液，痰量不少於3毫升，避免留取唾液或鼻咽部分泌物；
3.留痰標本要使用專用的痰盒，並及時送實驗室檢查，以免乾燥妨礙檢查；
4.在治療期留痰培養標本時，應在停葯48小時後留取
。
5.無痰或少痰者應使用濃鹽水刺激排痰；或拍背咳嗽使痰液排出。
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5. 痰培養微生物總在變化是院內感染嗎

痰培養的痰標本是否合格？每個低倍鏡視野下有多少上皮細胞和白細胞？

6. 痰標本污染率高，敏感細菌容易死亡，為了提高痰標本送檢質量，以下哪些是正確的

就目前的微生物學細菌培養現狀來說，痰標本微生物學培養的臨床意義很低，因為痰標本受到的影響因素非常多，也很容易污染。但是痰標本的送檢率很高，因為痰標本相對容易獲得。

7. 痰培養樣本要求是什麼

痰培養的採集及要求

痰培養操作流程

樣本接收
1、標本識別與病人基本信息
2、 申請單內容與標本類型核對
3、標本外觀與容器密閉性檢查
肉眼篩選
1、合格標本(膿性)：黃色、灰色、血性、鐵銹色，渾濁、稠厚，呈現團塊狀的標本；
2、不合格標本(唾液性)：無色、白色、有黑色小點，清稀，呈現泡沫狀，或者是有明顯食物渣滓、紙屑灰塵、泥土的標本；
3、混合性標本：既有膿性成分又有唾液成分的痰標本。
鏡下篩選
混合性標本：1、先進行洗滌，分離出膿性成分，再鏡檢；2、膿細胞>25個/HP且復層鱗狀上皮<10個/LP的標本為合格標本，可進入下一步程序；而膿細胞<10個/HP或復層鱗上皮>25個/LP的標本為不合格標本，應拒收。
兒科痰標本：直接鏡檢做細胞學篩查。
顯微鏡檢驗
鏡檢原理：免疫學原理
鏡檢方法：先低倍鏡再油鏡，收尋20~30個視野中膿細胞聚集處，集中而不稠密，且周圍無鱗狀上皮細胞或無大量成團狀分布的細菌球的區域為讀片區。
鏡檢內容：認真收尋膿細胞胞漿中有無吞噬的細菌，或者結節狀膿細胞團塊中有無菌絲的包裹，記錄細菌的染色排列特徵，菌體特徵（如粗細、長短、扭曲）。
注意區分粘附與吞噬
注意辨認經抗生素治療後形態變異了的細菌（小球體、巨球體、絲狀體、斑駁染色）
鏡檢的免疫學原理
人體生理腔道粘膜中、粘膜下，以及無菌部位分布的免疫細胞膜上的Toll樣受體種類及分子多態性程度不同。
粘膜中，由於菌群建立過程，伴隨著免疫耐受過程的形成，這些部位Toll樣受體種類相對單一，分子多態性程度低，可識別的異源性分子種類少，因而對多數正常菌群產生免疫耐受，表現為無應答。
當機體被微生物感染時，就會激發機體的免疫系統，從而產生免疫應答。在細菌和真菌的感染中，侵襲性感染是最主要的感染類型。人體對侵襲性感染的主要免疫機制就是細胞滲出——包括早期的固有免疫（中性粒細胞的浸潤）和後期的適應性免疫（免疫調理和細胞毒作用）。整個過程都始終貫穿著白細胞的趨化、包裹、吞噬、消化等過程和胞內吞噬、多細胞包裹是易於辨認的具有重要意義的免疫現象。只要觀察白細胞與微生物之間的「斗爭」，我們就能正確區分「敵我雙方」關系。
因而，具有吞噬和包裹現象的微生物就是感染菌。無吞噬現象的則可能為定植菌，也可能為感染菌（例如感染早期產生莢膜的細菌具有抗吞噬作用）。
痰液的接種
培養基基本組合：血平板、巧克力培養基（含萬古黴素）、麥康凱
特殊補充
懷疑為軍團菌的加種BCYE-а培養基
懷疑為百日咳的加種Boudet-Gengou培養基
懷疑為肺炎支原體感染的加種Hayflick雙相培養基
懷疑為結核的接種L-J培養基或Middlebrook7H-10
痰培養環境
苛養菌：35℃，5%CO2環境，相對濕度＞70%
普通細菌：35℃，普通大氣環境，相對濕度＞70%
絲狀真菌: 28℃，普通大氣環境，相對濕度＞80%
讀碟：目標菌落選取
結合鏡下特徵與菌落特徵綜合分析，並挑選菌體特徵與菌落特徵一致的細菌作為目標菌，作傳代純培養和進一步的鑒定葯敏。
鑒定方法選擇
1、手工試驗：微量生化管、API系列
2、半自動：ATB（32種）、Autoscan、國產鑒定系統（上海復興、珠海迪爾、珠海美華、山東新科、合肥恆星、溫州康泰、杭州天和等15~30種）
3、全自動：梅里埃V2C（60種）BD phoenix100（45種）西門子MicroscanwalkAway-96（30種）
葯敏試驗
1、手工：紙片擴散法、MIC法、E-test法、 瓊脂稀釋法
2、半自動與全自動：簡化雙濃度折點法、ATB葯敏簡化、濃度分布MIC法、Phoenix100、Microscan、Autoscan、
3、動力學計算MIC法：VITEK2葯敏
綜合報告
1、未染色標本直接塗片結果：有無膿細胞、膿細胞數量、上皮細胞數量、二者比例、有無真菌孢子／菌絲、有無寄生蟲等；
2、Gram染色鏡檢結果：包括膿細胞數量、上皮細胞與胞外正常菌群數量與污染程度、膿細胞胞內吞噬細菌／真菌孢子的情況，炎性包裹物內細菌和真菌的存在情況、膿細胞和炎性包裹物內的細菌／真菌的染色特徵、形態特徵和排列特徵；
3、細菌鑒定結果、特殊耐葯機制、葯敏試驗測試結果；
4、檢驗結果與臨床診斷和治療相關性的評述與建議。
關於痰培養的陰性報告
1、不合格標本：退回，或直接塗片：鱗狀上皮＞25/LP，白細胞＜10/LP，提示標本為唾液；
2、塗片染色：白細胞內未見明顯細菌吞噬；
3、細菌培養：未分離出致病菌；
4、合格但未見吞噬標本；
5、直接塗片：可見較多/大量白細胞。

8. 微生物培養方法

微生物培養法是在人為條件下繁殖微生物的方法。根據微生物的種類以及對養料、溫度、氧氣、水分、酸鹼度等環境條件的要求不同，並聯系生產和實驗上的具體要求，可有不同的培養方法。可分好氣培養法和厭氣培養法兩類。中海生物技術的培養基一是好氣微生物培養法，常用：①搖床培養法，即將微生物接種於盛有液體培養基的三角瓶後，放在恆溫培養室中的搖床上作有節奏的振盪，使空氣不斷進入培養液中，促其良好生長;②淺盤培養法，又稱表面培養法，在盤內放一淺層培養基，使微生物能夠充分接觸空氣，而有利於生長繁殖，但此法所需空間大，並且容易污染雜菌;③深層培養法，適用於好氣微生物的大規模發酵培養，在大容積的液體培養基中，通入無菌空氣，並不斷攪拌，可使微生物充分接觸空氣，迅速繁殖並積累代謝產物。二是厭氣微生物培養法，實驗室常用化學還原劑或抽氣機吸除培養基中的分子氧，也有用靜止狀態的深層培養法。在生產中常用密封式發酵罐或不通風的固體發酵法。

9. 如何正確留取痰標本

痰是診斷某些呼吸道疾病的依據之一。通過觀察痰的性狀可以大致上辨別疾病的類型,對痰液進行培養還能發現致病微生物以及葯物敏感性，對治療疾病有幫助。查痰如此重要，因此病人應掌握正確的留痰方法，否則將會直接影響痰檢結果 正確留取痰標本的方法是： 1.病人留痰標本前用清水漱口，以清除口腔內的食物殘渣及部分雜菌 ； 2.做深呼吸數次後，收腹用力咳出來自支氣管深部的膿樣或粘液樣痰液，痰量不少於３毫升，避免留取唾液或鼻咽部分泌物； 3.留痰標本要使用專用的痰盒，並及時送實驗室檢查，以免乾燥妨礙檢查； 4.在治療期留痰培養標本時，應在停葯48小時後留取 。 5.無痰或少痰者應使用濃鹽水刺激排痰；或拍背咳嗽使痰液排出。 分享到: 相關新聞最新科普知識睡眠呼吸暫停有哪些危害？睡眠呼吸暫停有什麼症狀？阻塞性睡眠呼吸暫停有哪些病因？什麼是睡眠呼吸暫停？如何防範秋季呼吸道疾病

10. 如何採集痰標本其注意事項是什麼

痰標本的採集：
1.痰標本的來源：下呼吸道痰、氣管抽吸物（TA）、支氣管肺灌洗吸出液、支氣管刷子、氣管內管、肺穿刺或活組織等。
2. 使用容器：用潔凈、廣口、無菌、加蓋、密封、防滲漏，一次性使用，可向檢驗科索取。
3. 採集方法：清晨痰量多，含菌量亦大，可先用潔口液，再用涼開水或生理鹽水漱口，以除去口腔中細菌，深吸氣後用力咳出1－2口痰於廣口無菌瓶中，痰量極少可用45℃10%氯化鈉溶液霧化吸入導痰。
已經建立人工氣道，如氣管切開或氣管插管者，應戴無菌手套或用無菌鑷子取一次性無菌專用吸痰管，一頭緩慢插入氣管致隆突（葉支氣管）水平，一頭接電動吸引器，螺旋式抽吸，吸引痰液。

注意事項：
當疑為呼吸道感染性疾病時，應讓患者取晨痰送檢。取痰前用清水反復漱口後用力自氣管咳出第一口痰於滅菌容器內，立即送檢。對於痰量少或無痰的患者可採用支氣管鏡或氣管穿刺法取得醫學教`育網搜集整理。為了避免污染菌的干擾，最好連查3次。注意事項：
①採集標本以清晨為佳，為減少口腔正常菌群污染標本，採集前應充分漱口。
②取痰標本應是深部的痰液而不是唾液，否則會影響檢查結果。
③作結核分枝桿菌檢查，痰量要多或留取24小時痰液，嬰兒肺結核要用胃管取痰。
④約有1/4～1/2肺部感染患者可能發生菌血症，應同時作血培養。
⑤ 對一些特殊患者可採用支氣管鏡採集法及氣管穿刺法取痰。