㈠ 下面這組免疫組化結果表示什麼意思啊
免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及相對定量的研究，稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)。
還可以表達為：p16基腫瘤抑制基p16基發突變缺失導致細胞異增殖終形腫瘤該病p16基陽性提示系惡性腫瘤 p53基抑癌基物體內種抑制細胞轉變癌細胞基功能降癌症能發 Ki-67作細胞增殖標記物病理報告指數高低與許腫瘤化程度、浸潤、轉移及預密切相關數值越高惡性程度越高 CerbB-2基種原癌基該病陰性需用赫賽汀 TOP2A基陽性提示細胞增殖S期晚期G2/M期表達增加提示蒽環類葯物化療效（表阿黴素）制定化療案參考用 ER/PR別雌激素受體孕激素受體提示否需要內泌治療該病應該做內泌治療 CK5∕6種基底細胞角蛋白鱗狀皮發層細胞、肌皮細胞、間皮細胞陽性腺皮細胞陰性 p40腺癌陽性率
㈡ 什麼是直接免疫熒光法和間接免疫熒光法
免疫熒光技術是將熒光素如異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)與相應抗體（或抗原）以化學的方法結合，將熒游標記抗體（或抗原）與標本中相應的抗原結合形成熒游標記的抗體- 抗原復合物，用熒光顯微鏡觀察。在鏡下見到有熒光存在即推斷有抗原抗體復合物的存在，根據已 知的抗體（或抗原）即可推知另一個未知抗原（或抗體）的存在。
1. 直接免疫熒光法直接免疫熒光法是利用熒光色素標記的特異性抗體直接與相應的抗原結合，以鑒定未知抗原。本法具有操作簡單、時程短、特異性高的優點，但也 存在缺點如不能檢查抗體，敏感性較差。
（1）在標本上滴加熒光素標記抗體，放入濕盒中。37℃溫育30min。
（2）PBS 沖洗後，再用PBS分三缸浸泡，每缸3min。
（3）PBS浸泡1～2min，風干。
（4）緩沖甘油封片。在熒光顯微鏡下觀察。
進行直接免疫熒光法時應注意：①溫育時一定要將玻片放在濕盒中，以防液體蒸發。②用PBS浸泡時應不斷振盪。
2. 間接免疫熒光法間接免疫熒光法以熒光素標記抗球蛋白抗體，抗體與相應抗原結合後，熒游標記的抗球蛋白抗體與已結合的抗體發生作用，從而推知抗原或抗體的 存在。間接熒光技術可以用已知的抗原檢測未知的抗體，也可用已知的抗體測出未知抗原。現以檢測流行性出血熱病毒抗體（IgM）為例介紹如下：
（1）將待測病人血清加至抗原片（流行性出血熱病毒感染的Vero-E6細胞片）上，每個稀釋 度加2孔，最後2孔加PBS做對照。將玻片放置濕盒中，37℃溫育 60min。取出玻片，棄去反應液，用PBS洗滌5min，風干。
（2）加入1∶40稀釋的FITC標記的羊抗人IgM，37℃溫育60min。取出玻片，按步驟2洗滌，風干。
（3）PBS甘油封片，熒光顯微鏡下觀察。陽性結果：在細胞膜及細胞質中可見顆粒狀熒光顆粒，細胞核 呈紅色。
注意事項：溫育時將玻片放在濕盒中，以防液體蒸發。選擇低溫、乾燥、潔凈的環境風干。
㈢ 免疫熒光是什麼
．原理免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由於抗原抗體反應具有高度的特異性，所以當抗原抗體發生反應時，只要知道其中的一個因素，就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體（或抗原）上，與其相應的抗原（或抗體）結合後，在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。
直接法：將標記的特異性熒光抗體，直接加在抗原標本上，經一定的溫度和時間的染色，用水洗去未參加反應的多餘熒光抗體，室溫下乾燥後封片、鏡檢。
間接法：如檢查未知抗原，先用已知未標記的特異抗體（第一抗體）與抗原標本進行反應，用水洗去未反應的抗體，再用標記的抗抗體（第二抗體）與抗原標本反應，使之形成抗原—抗體—抗體復合物，再用水洗去未反應的標記抗體，乾燥、封片後鏡檢。如果檢查未知抗體，則表明抗原標本是已知的，待檢血清為第一抗體，其它步驟的抗原檢查相同。
標記的抗抗體是抗球蛋白抗體，同於血清球蛋白有種的特異性，如免疫抗雞血清球蛋白只對雞的球蛋白發生反應，因此，制備標記抗體適用於雞任何抗原的診斷。
）熒光效率高，標記後下降不明顯。
3）熒光色澤與背景色澤對比鮮明。
4）標記後能保持生物學活性和免疫活性
5）標記方法簡單、快速。6）安全無毒
㈣ 熒光免疫分析儀用來做什麼的
是一種用於測量含量很低的生物活性化合物的儀器。
㈤ 請教這個免疫熒光的結果怎麼看
很可能做雙染的，感覺常用的只有綠色和紅色，再加上染核的藍色。
，但是要注意後續染色的時候二抗的熒光不要跟質粒攜帶的熒光的顏色一樣。
㈥ 熒光偏振免疫分析的作用是什麼
熒光偏振免疫分析，是一種定量免疫分析技術，其基本原理是熒光物質經單一平面的藍偏振光(485nm)照射後，吸收光能躍入激發態，隨後回復至基態，並發出單一平面的偏振熒光(525nm)。適宜檢測小至中等分子物質，常用於葯物、激素的測定。熒光偏振免疫分析法(fluorescence polarization immunoassay，FPIA)是一種定量免疫分析技術，其基本原理是熒光物質經單一平面的藍偏振光(485nm)照射後，吸收光能躍入激發態，隨後回復至基態，並發出單一平面的偏振熒光(525nm)。偏振熒光的強弱程度與熒光分子的大小呈正相關，與其受激發時轉動的速度呈反相關。FPIA最適宜檢測小至中等分子物質，常用於葯物、激素的測定。熒光偏振免疫分析常用於測定半抗原的葯物濃度。反應系統內除待測抗原外，同時加入一定量用熒光素標記的小分子抗原，使二者與有限量的特異性大分子抗體競爭結合。當待測抗原濃度高時，經過競爭反應，大部分抗體被其結合，而熒光素標記的抗原多呈游離的小分子狀態。由於其分子小，在液相中轉動速度較快，測量到的熒光偏振程度也較低。反之，如果待測抗原濃度低時，大部分熒光素標記抗原與抗體結合，形成大分子的抗原抗體復合物，此時檢測到的熒光偏振程度也較高。熒光偏振程度與待測抗原濃度呈反比關系。我們測定待測抗原標准品後制標准曲線。通過檢測反應系中偏振光的大小，從標准曲線上可以精確地得知樣品中待測抗原的相應含量。
㈦ 如何分析細胞免疫熒光的結果，能否區分是在膜上，還是在胞漿。
你染熒光的時候肯定會染表徵細胞核的DAPI吧，你拿電腦進行merge，如果你染出來的結果是只在DAPI（藍色）外面有一圈，那就是細胞膜定位。如果染出來在DAPI周圍到處都是，那就是包漿定位；如果染出來和DAPI是完全merge的，那就是細胞核定位。
至於定量和半定量可以通過軟體分析熒光強度，這個不麻煩。半定量應該也可以跑蛋白膠，但是沒試過
㈧ 那個免疫熒光是怎麼回事，有懂的嗎
你好！免疫熒光是利用抗原抗體反應原理，將抗原與抗體進行結合。通常是將抗原負載在載玻片上，之後用抗體（一抗，可能是人的血清中存在的抗體）去進行孵育，這樣抗原抗體進行結合後，用熒游標記的抗樣本中抗體的二抗與其進行結合，這樣在熒光顯微鏡下，如果待檢測樣本含有抗體（一抗），那麼就能發出熒光被我們用肉眼看到。
㈨ 核定位的蛋白做免疫熒光需要dapi染色么
核定位的蛋白做免疫熒光需要dapi染色。
1．實驗原理
免疫染色的實驗原理類似於Western Blotting，兩者都是運用抗體的特異性識別作用來顯示目的蛋白，但是由於免疫染色需要在原位進行，而且蛋白沒有經過富集，因此其實驗難度較高。
實驗的基本原理是：利用固定劑（通常是甲醛或多聚甲醛）將細胞固定，使得細胞膜的通透性大大增加，並且利用Triton-X-100使得一部分膜蛋白變性，從而使通透性進一步加強。利用正常羊血清封閉，可以令許多蛋白先與血清內的非特異性抗體結合，而特異性的抗體由於動力學的關系可以通過競爭性的反應與目的蛋白結合，這一過程可以保證抗體識別的特異性。
二抗可以特異性識別一抗的Fc區域，利用二抗連接不同的熒光基團，就可以在熒光顯微鏡下觀察到不同的熒光，從而顯示目的基因的表達情況。
另外，免疫熒光實驗由於其較高的敏感性可以顯示出基因表達的亞細胞情況(核內，核外，膜上以及一些較大的細胞器上)，所以通常被用來作為基因定位的方法。
DAPI的中文名稱是4，6-聯脒-2-苯基吲哚，是一種常用的熒光染料，其作用機理與溴化乙錠（EB）等染色劑的機理類似：它們與DNA雙螺旋的凹槽部分可以發生相互作用，從而與DNA的雙鏈緊密結合。結合後產生的熒光基團的吸收峰是358nm而散射峰是461nm，正好UV（紫外光）的激發波長是356nm，使得DAPI成為了一種常用的熒光檢測信號。
Jagielski M. et. Al在1976年首次運用該技術檢測細胞培養中的支原體感染。後來隨著技術的進步，該技術被運用於各種微生物的檢測、生長監測，胚胎發育過程的檢測，細胞周期的檢測和各種核定位的實驗。
㈩ 為什麼兩台熒光顯微鏡看到的熒光蛋白不一樣
為什麼兩台熒光顯微鏡看到的熒光蛋白不一樣
（1）
利用有色熒光蛋白標記技術進行蛋白定位研究
此法也可稱為活細胞定位.把兩種具有相互作用的蛋白分別克隆到帶有兩種不同顏色熒光
蛋白（綠色熒光蛋白或紅色熒光蛋白）的載體中,共轉染到功能細胞中（一般選用
COS7
細胞）表達帶有熒光的融合蛋白.這樣,相互作用的兩種蛋白就被標上不同的熒光,可以在細胞內用熒光顯微鏡直接觀測.在進行精確細胞定位或共定位時,必須用共聚焦熒光顯微鏡觀測.因為共聚焦熒光顯微鏡（相當於醫院給病人診斷的
CT）觀測的是細胞內一個切面上的顏色.如果在一個切面上在同一區域看到兩種顏色,就提示這兩種蛋白在該區域內有相互作用.普通熒光顯微鏡看到的是一個立體圖象,無法確定蛋白質共定位現象.在進行定位或共定位同時,也可以對細胞核進行染色.這樣,在細胞中就有三種顏色.細胞核的顯色幫助你確定共定位發生的位置.上面介紹的活細胞定位,其優點是表達的熒光蛋白熒光強,沒有背景,觀測方便.但缺點
是相互作用的蛋白由於標上熒光蛋白,實際上是兩個融合蛋白.融合蛋白的定位結果或共定位結果是否與天然蛋白分布一致,有待於進一步確定.而利用免疫熒游標記技術可以避免這一缺點.
（2）
利用雙色或多色染色的免疫熒光技術進行蛋白定位研究
免疫熒光的原理是,首先把細胞進行固定,然後用待檢測靶蛋白的抗體（一抗）與細胞內
靶蛋白進行免疫反應,再用熒光素（如
FITC
和
TRITC
等）標記的二抗與一抗進行反應.這樣就在細胞內形成免疫復合物（靶蛋白----一抗---二抗）,結果靶蛋白被標上顏色,然後可用共聚焦熒光顯微鏡觀測定位與共定位結果.
免疫熒光技術最大優點就是可用來檢測細胞內源性蛋白的定位及相互作用.當然也可以對
靶細胞進行轉染表達目的蛋白,然後標記目的蛋白進行觀測.免疫熒光技術的缺點是熒光相對較弱並且背景較高,結果受到干擾,所以這項技術不好掌握.為了結果的可靠性,要求嚴格設計陽性對照與陰性對照.
（3）
細胞內蛋白動態定位
有時細胞在正常狀態下,有相互作用的蛋白在胞內可能暫時分開,沒有共定位現象發生.
但是在某一個特定情況下,如細胞受到外界刺激時,細胞本身會產生應急反應,這時暫時分離的蛋白有可能發生相互作用,並產生共定位現象.所以在進行共定位研究時,可根據具體情況具體分析,必要時觀測細胞內蛋白動態定位結果.