『壹』 微生物實驗無菌操作台如何滅菌
可能是操作過程中污染的。一般使用超凈工作台就能使操作空間處於一個潔凈狀態。但是操作前雙手也應用75%酒精擦拭,尤其是指甲。另外,用於消毒的酒精必須是70%到75%的。希望有所幫助。
『貳』 被病原微生物污染的玻璃器皿,應先放在什麼設備中進行消毒滅菌
被病原微生物污染的玻璃器皿,應先放在高壓滅菌鍋中進行消毒滅菌。
高壓滅菌鍋使用方法:
1 在外層鍋內加適量的水,將需要滅菌的物品放入內層鍋,蓋好鍋蓋並對稱地扭緊螺旋。
2 加熱使鍋內產生蒸氣,當壓力表指針達到 33.78kPa時,打開排氣閥,將冷空氣排出,此時壓力表指針下降,當指針下降至零時,即將排氣閥關好。
3 繼續加熱,鍋內蒸氣增加,壓力表指針又上升,當鍋內壓力增加到所需壓力時,將火力減小,按所滅菌物品的特點,使蒸氣壓力維持所需壓力一定時間,然後將滅菌器斷電或斷火,讓其自然冷後再慢慢打開排氣閥以排除余氣,然後才能開蓋取物。
高壓滅菌鍋使用注意事項
1 待滅菌的物品放置不宜過緊;
2 必須將冷空氣充分排除,否則鍋內溫度達不到規定溫度,影響滅菌效果;
3 滅菌完畢後,不可放氣減壓,否則瓶內液體會劇烈沸騰,沖掉瓶塞而外溢甚至導致容器爆裂。須待滅菌器內壓力降至與大氣壓相等後才可開蓋;
4 已有微電腦自動控制的高壓蒸氣滅菌鍋,只需放去冷氣後,儀器即可自動恆壓定時,時間一到則自動切斷電源並鳴笛,使用起來很方便。
『叄』 微生物實驗用過的吸量管、細菌培養皿應該怎麼進行滅菌、消毒才有效
首先要先將其洗涮干凈,烘乾,現在吸量管和培養皿都有專用的皿盒,如果沒有,可以用報紙包裹,在121度,0.1MPA下高壓20分鍾,待降壓後取出,放在烘乾箱中烘乾,即可以使用。
『肆』 做微生物實驗時,實驗器具都如何滅菌,消毒啊
1、培養基和待用的玻璃器皿:高溫高壓濕熱滅菌
2、用過的玻璃吸管、塗布棒等:先消毒液浸泡24小時,清洗後高溫高壓濕熱滅菌
3、抗生素、維生素、激素等溶液:針筒濾頭過濾
4、接種環等:酒精燈灼燒
5、手部等的皮膚消毒:消毒液如新潔爾滅等
『伍』 實驗室該如何無菌采樣
液體樣品
液體樣品比較容易獲得,液態食品一般盛放在大罐中,取樣時可連續或間歇攪拌。對於較小的容器,可在取樣前將液體上下顛倒,使其完全混勻。取得的樣品應放在已滅菌的容器中送往實驗室,實驗室在取樣檢測之前應當把液體再徹底混勻一次。
固體樣品
固態樣品常用的取樣工具有解剖刀、勺子、軟木鑽、鋸、鉗子等,使用前均須滅菌。如奶粉等已經混勻的食品,其成分質量均勻穩定,可以抽取少量樣品檢測;散裝樣品要從多個點取樣,且每個點都要單獨處理,在檢測前要徹底混勻;肉類、魚類或類似食品既要在表皮取樣,又要在深層取樣,深層取樣時要小心不要被表面污染。
水樣
取水樣時,最好選用帶有防塵磨口瓶塞的廣口瓶。
如果樣品時從水龍頭上取得,龍頭嘴的里外都應擦乾凈。打開水龍頭讓水流幾分鍾,關上水龍頭並用酒精燈灼燒,再次打開水龍頭讓水流1-2min後再接樣並裝滿取樣瓶。如果檢測的目的是用於追蹤微生物的污染源建議還應在水龍頭滅菌前取樣會在龍頭的里外用棉拭子塗抹取樣,以檢測水龍頭自身污染的可能性。
從水庫、河流、井水等取水樣時,用無菌的器械或工具拿取瓶子和打開瓶塞,在流動水中取樣品是瓶嘴應直接對著水流。
帶包裝食品
直接食用的小包裝食品盡可能取原包裝,直到檢測前不要開封防止污染;桶裝或容器包裝的液體或固體食品應用無菌取樣器由幾個不同部位採取,一起放入滅菌容器內;冷凍食品抽樣之後送達實驗室前,要始終保持樣品處於冷凍狀態。若樣品一旦融化,不可使其再冷凍,保持冷卻即可。
無菌抽樣的規范性是保證樣品檢測准確性的前提,因此我們在取樣時應規范操作,確保從源頭杜絕污染。
『陸』 微生物學實驗室常用的滅菌方法有哪些
物理方法
1、溫度
利用溫度進行滅菌、消毒或防腐,是最常用而又方便有效的方法。高溫可使微生物細胞內的蛋白質和酶類發生變性而失活,從而起滅菌作用,低溫通常起抑菌作用。
1 乾熱滅菌法:
a.灼燒滅菌法:利用火焰直接把微生物燒死。此法徹底可靠,滅菌迅速,但易焚毀物品,所以使用范圍有限,只適合於接種針、環、試管口及不能用的污染物品或實驗動物的屍體等的滅菌。
b.乾熱空氣滅菌法:這是實驗室中常用的一種方法,即把待滅菌的物品均勻地放入烘箱中,升溫至160℃,恆溫1小時即可。此法適用於玻璃皿、金屬用具等的滅菌。
2 濕熱滅菌法:
在同樣的溫度下,濕熱滅菌的效果比乾熱滅菌好,這是因為一方面細胞內蛋白質含水量高,容易變性。另一方面高溫水蒸汽對蛋白質有高度的穿透力,從而加速蛋白質變性而迅速死亡。
a.巴氏消毒法:有些食物會因高溫破壞營養成分或影響質量,如牛奶、醬油、啤酒等,所以只能用較低的溫度來殺死其中的病原微生物,這樣既保持食物的營養和風味,又進行了消毒,保證了食品衛生。該法一般在62℃,30分鍾即可達到消毒目的。此法為法國微生物學家巴斯德首創,故名為巴氏消毒法。
b.煮沸消毒法:直接將要消毒的物品放入清水中,煮沸15分鍾,即可殺死細菌的全部營養和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸鈉或2%的石炭酸,則效果更好。此法適用於注射器、毛巾及解剖用具的消毒。
c.間歇滅菌法:上述兩種方法在常壓下,只能起到消毒作用,而很難做到完全無菌。若採用間歇滅菌的方法,就能殺滅物品中所有的微生物。具體做法是:將待滅菌的物品加熱至100℃,15~30分鍾,殺死其中的營養體。然後冷卻,放入37℃恆溫箱中過夜,讓殘留的芽孢萌發成營養體。第2天再重復上述步驟,三次左右,就可達到滅菌的目的。此法不需加壓滅菌鍋,適於推廣,但操作麻煩,所需時間長。
d. 加壓蒸汽滅菌法:這是發酵工業、醫療保健、食品檢測和微生物學實驗室中最常用的一種滅菌方法。它適用於各種耐熱、體積大的培養基的滅菌,也適用於玻璃器皿、工作服等物品的滅菌。
加壓蒸汽滅菌是把待滅菌的物品放在一個可密閉的加壓蒸汽滅菌鍋中進行的,以大量蒸汽使其中壓力升高。由於蒸汽壓的上升,水的沸點也隨之提高。在蒸汽壓達到1.055公斤/厘米2時,加壓蒸汽滅菌鍋內的溫度可達到121℃。在這種情況下,微生物(包括芽孢)在15~20分鍾便會被殺死,而達到滅菌目的。如滅菌的對象是砂土、石蠟油等面積大、含菌多、傳熱差的物品,則應適當延長滅菌時間。
在加壓蒸汽滅菌中,要引起注意的一個問題是,在恆壓之前,一定要排盡滅菌鍋中的冷空氣,否則表上的蒸汽壓與蒸汽溫度之間不具對應關系,這樣會大大降低滅菌效果。
3 影響滅菌的因素:
a.不同的微生物或同種微生物的不同菌齡對高溫的敏感性不同。多數微生物的營養體和病毒在50~65℃,10分鍾就會被殺死;但各種孢子、特別是芽孢最能抗熱,其中抗熱性最強的是嗜熱脂肪芽孢桿菌,要在121℃,12分鍾才被殺死。對同種微生物來講,幼齡菌比老齡菌對熱更敏感。
b.微生物的數量多少顯然會影響滅菌的效果,數量越多,熱死時間越長。
c.培養基的成分與組成也會影響滅菌效果。一般地講,蛋白質、糖或脂肪存在,則提高抗熱性,pH在7附近,抗熱性最強,偏向兩極,則抗熱能力下降,而不同的鹽類可能對滅菌產生不同的影響;固體培養基要比液體培養基滅菌時間長。
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滅菌對培養基成分的影響:
a.pH值普遍下降。
b.產生混濁或沉澱,這主要是由於一些離子發生化學反應而產生混濁或沉澱。例如Ca+2與PO4-3化合,就會產生磷酸鈣沉澱。
c.不少培養基顏色加深。
d.體積和濃度有所變化。
e.營養成分有時受到破壞。
2、輻射
利用輻射進行滅菌消毒,可以避免高溫滅菌或化學葯劑消毒的缺點,所以應用越來越廣,目前主要應用在以下幾個方面:
1)接種室、手術室、食品、葯物包裝室常應用紫外線殺菌。
2)應用β射線作食品表面殺菌,γ射線用於食品內部殺菌。經輻射後的食品,因大量微生物被殺滅,再用冷凍保藏,可使保存期延長。
3、過濾
採用機械方法,設計一種濾孔比細菌還小的篩子,做成各種過濾器。通過過濾,只讓液體培養基從篩子中流下,而把各種微生物菌體留在篩子上面,從而達到除菌的目的。這種滅菌方法適用於一些對熱不穩定的體積小的液體培養基的滅菌以及氣體的滅菌。它的最大優點是不破壞培養基中各種物質的化學成分。但是比細菌還小的病毒仍然能留在液體培養基內,有時會給實驗帶來一定的麻煩。
二 化學方法
一般化學葯劑無法殺死所有的微生物,而只能殺死其中的病原微生物,所以是起消毒劑的作用,而不是滅菌劑。
能迅速殺滅病原微生物的葯物,稱為消毒劑。能抑制或阻止微生物生長繁殖的葯物,稱為防腐劑。但是一種化學葯物是殺菌還是抑菌,常不易嚴格區分。消毒劑在低濃度時也能殺菌(如1:1000硫柳汞)。由於消毒防腐劑沒有選擇性,因此對一切活細胞都有毒性,不僅能殺死或抑制病原微生物,而且對人體組織細胞也有損傷作用,所以只能用於體表、器械、排泄物和周圍環境的消毒。
常用的化學消毒劑有:石碳酸、來蘇水(甲醛溶液)、氯化汞、碘酒、酒精等。答案來自
『柒』 被微生物等生物材料污染的金屬器皿可以採用什麼消毒
可以採用高溫的乾熱滅菌法,鐵鋁銅等金屬器皿不適宜採用化學滅菌法。
『捌』 被微生物等生物材料污染的金屬器皿怎樣消毒
酒精、紫外線照射只能達到殺菌的作用,不能全滅。
要滅菌,有三種方法,一是高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌),121攝氏度30分鍾,二是輻照滅菌,用伽馬射線照射,三是化學物質,環氧乙烷滅菌。你這個選方法一比較合適吧