❶ 動物細胞培養的取材要求
細胞培養--培養細胞的取材 人和動物體內絕大部分組織都可以在體外培養,但其難易程度與組織類型、分化程度、供體的年齡、原代培養方法等有直接關系,原代取材是進行組織培養的第一步。 取材的基本要求 (1)取材的組織最好盡快培養。因故不能即時培養,可將組織浸泡於培養液內,放置於冰浴或4度冰箱中。如果組織塊很大,應先將其切成1cm3以下的小塊再低溫保存,但時間不能超過24h。 (2)取材時應嚴格無菌操作,用無菌包裝的器皿或用事先消毒好的,帶少許培養液的小瓶等便於攜帶的物品取材,取材過程中要盡量避免紫外線照射和接觸化學試劑如碘、汞等。從消化道、周圍有壞死組織等污染因素存在的區域取材時,為減少污染,可用含500~1000單位/ml的青鏈黴素液漂洗5~10min,或用10%達克寧注射液沖洗浸泡10min再做培養. (3)取材和原代培養時,要用鋒利的器械如刮臉刀片切碎組織,盡可能減少對細胞的機械損傷. (4)對於血液.脂肪.神經組織.結締組織和 壞死組織,取材時要細心出去,修剪和切碎過程中,為避免組織乾燥,可將其浸泡於少量培養液中. (5)原代培養,特別是正常細胞的培養,應採用營養豐富的培養液,最好添加胎牛血清,含量為10%~20%為宜. (6)一般來講,胚胎組織較成熟個體的組織容易培養,分化底的較分化高的組織容易生長,腫瘤組織較正常組織容易培養.如無特殊要求,可採用易培養的組織進行培養,成功率較高. (7)為了便於以後鑒別原代組織的來源和觀察細胞體外培養後與原組織的差異性,原代取材時要同時留好組織學標本和電鏡標本.對組織的來源.部位.包括供體的一般情況要做詳細的記錄,以備以後查詢. 取材的基本器材和用品 (1)眼科組織剪.彎鑷.手術刀(用前消毒) (2)裝有無血清培養基或Hank's液的小瓶 (3)小燒杯(10ml,50ml) (4)培養皿(特殊用途物品詳見後面章節) 皮膚和粘膜的取材 皮膚和粘膜是上皮細胞培養的重要組織來源.一般皮膚黏膜主要取自手術過程中切除的部分組織,如特殊需要也可酌情單獨取材.方法似外科取斷層皮片手術的操作,但面積一般2~3mm2即可.這樣局部不留疤痕.注意取材時不要用碘酒消毒. 皮膚黏膜培養多是以獲取上皮細胞為目的,因而無論何種方法取材都不要切取太厚並要盡可能去除所攜帶的皮下或者黏膜下組織.如欲培養成纖維細胞則反之,皮膚.粘膜分布在機體外部或與外界相通的部位,故表面細菌.黴菌很多.取材時要嚴格消毒,必要時用較高濃度的 抗菌素溶液漂洗. 內臟和實體瘤的取材 人和動物體內所發生的腫瘤及各臟器是較常用的培養材料.內臟除消化道外基本是無菌的,但有些實體瘤有壞死並向外破潰者可能被細菌污染.內臟和實體瘤取材時,一定要明確和熟悉自己所需要組織的類型和部位,要去除不需要的部分如血管.神經和組織間的結締組織,取腫瘤組織時要盡可能取腫瘤細胞分布較多的部分,避開壞死液化部分.但有些復發性.浸潤性較強的腫瘤較難取到較為純凈的瘤體組織,其腫瘤組織與結締組織混雜在一起,培養後會有很多纖維細胞生長,給以後的培養工作增加困難.對於一些特殊細胞培養的取材,詳見以後的介紹。 血液中的白細胞是很常用的培養材料,常用於進行染色體分析.淋巴細胞體外激活進行免疫治療等.一般多採用靜脈取血,微量時也可以從指尖或耳垂取血.為防止凝血重用肝素抗凝劑,抗凝劑的量以產生抗凝效果的最小量為宜,量過大易導致溶血.肝素常用濃度為20U/ml,抽血前針管也要用濃度較高的肝素(500U/ml)濕潤.抽血時要嚴格無菌. 骨髓.羊水.胸水.腹水內細胞的取材 要根據各種有關操作規程進行.詳見以後的章節.這幾種樣品取材後一般不需要其它處理,離心後最好立即培養,不易低溫保存. 鼠胚組織的取材 由於鼠胚組織取材方便,易於培養,同時與人類相近都是哺乳類動物,已成為較常用的培養材料.因為小鼠的毛中隱藏微生物較多,而且不易消毒.所以取材時更要注意無菌消毒,其無菌消毒一般採用以下方法進行:首先用引頸法殺死動物,然後將其整個浸入盛有75%酒精的燒杯中5min,注意時間不能太長以免酒精從口和其它孔道進入體內,影響組織活力.取出後放在消毒過的小木板上,用消毒過的圖釘或大頭釘將其固定.然後用眼科剪和止血鉗剪開皮膚解剖取材.也可在酒精消毒後,在動物軀干中部環形剪開皮膚,用止血鉗分別挾住兩側皮膚拉向頭尾把動物反包,暴露軀干,然後在固定解剖 取材.區號的組織要放置在另一干凈的平皿中或玻璃板上進行原代培養操作.動物消毒後的操作宜在超凈台內或無菌環境中進行
❷ 高中生物前期發酵時如何保證毛霉的數量
先回顧毛霉的相關知識點
毛霉是一種絲狀真菌。代謝類型是異養需氧型。生殖方式是孢子生殖。營腐生生活。
〖作用〗
多種微生物參與了豆腐的發酵,如青黴、酵母、麴黴、毛霉等,其中起主要作用的是毛霉。
〖原理〗
毛霉等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸;脂
肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。
(1)前期發酵的主要作用:創造條件讓毛霉生長;使毛霉形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。
(2)後期發酵主要是酶與微生物協同參與生化反應的過程。通過各種輔料與酶的緩解作用,生成腐乳的香氣
重點:〖毛霉的生長〗
條件:將豆腐塊平放在籠屜內,將籠屜中的溫度控制在15~18℃,並保持一定的濕度。
來源:(1)來自空氣中的毛霉孢子;(2)直接接種優良毛黴菌種;
時間:5天後,豆腐表面叢生直立菌絲。
綜上所述,我們要提高毛霉的數量,質量,就要從以下幾個方面入手
1.豆腐選材,要嚴格選用含水量70%的豆腐
2.腌制環境要滿足,通風(提供足量氧氣) 溫度在15到18攝氏度
還有更有效的一種方法,我們可以人工接種高品質的毛霉,可以做到產出足夠優質數量的毛霉
❸ 怎麼寫作文
一、審題
1.確立准確的內容
看到作文題目後,我們該寫些什麼?這是所有命題作文首先要解決的問題。
思維的發散:具體到考場作文,我們可以從以下幾個方面發散自己的思維:
①把握話題作文,仔細審題,充分利用作文題中的提示性語言,來獲得寫作內容。
②圍繞話題展開多層次聯想,多角度拓展寫作內容。
A.類似聯想:由話題出發,聯想到與話題同類或相似的事物,從而確定寫作的內容。
B.內斂式聯想:給一些寬泛型的話題添加一些限製成分,縮小話題的外延,明確寫作的范圍。
C.逆反式聯想:從話題的反面著手,確定寫作的范圍和內容。
D.虛實轉換聯想:有些作文話題往往是從繽紛繁雜的現象中抽象出來的一些概念,既有虛的一面,也有實的一面。
思維的歸納:即表現內容的確立過程,在這一過程中,我們要注意下面兩點:
①要寫自己熟悉的內容;
②要寫自己駕馭得了的內容:由同學們的認知水平、思想深度乃至於語言表達能力所決定。
通過思維的發散和思維的歸納,一篇文章的表現內容得以最終確立。
2.突出明確的中心
為了明確點明中心,我們可以在文章內容構思好以後,圍繞中心編寫幾段話,將它們安插在文章的開頭、結尾或是文章的過渡、轉折的地方,既提醒自己不要偏離中心,也提醒閱卷老師你有明確的中心意識。
①表現中心的確立存在一個是否符合題意的問題
有些同學在審題時能夠注意准確把握話題的范圍和內涵,但是在寫作過程中沒有圍繞中心鋪展渲染的意識,結果是要麼中心渙散,要麼表現中心偏離題意。
②我們還要注意培養自己明確點明中心的意識。
為了明確點明中心,我們可以在文章內容構思好以後,圍繞中心編寫幾段話,將它們安插在文章的開頭、結尾或是文章的過渡、轉折的地方,既提醒自己不要偏離中心,也提醒閱卷老師你有明確的中心意識。
表現中心的確立有品位高低之分
①要有深刻的思想:對科學的世界觀有必要有所了解,掌握發展的觀點、全面的觀點、聯系的觀點,提高自己對事物的認知能力,使自己作文的立意做到深刻。
②要有小中見大的眼光:對平凡的生活現象進行
深刻的思考,有獨到深刻的見解,才能夠使文章中心的確立不同凡響。
④要有化實為虛的能力:在立意時展開聯想和想像,跳出材料的束縛,運用隱喻、象徵等手法,藉助於虛擬的「形象」來表達思想,就可以迅速打開思路。
⑤要有時代意識:恰當地聯系時代內容,就能有效地提高文章中心的品位。需要提醒的是,話題的時代特色是融在文章之中的。
⑥要有新穎的角度:通過跳出思維定勢,採用逆向思維,來求得與眾不同的立意。
二、構思
⒈確立合適的文體
如果所寫作內容比作人的軀干,寫作中心比作人的靈魂,那麼文章的體裁就應該是一件衣服。一件既合身又得體的衣服,能恰到好處地烘托出身體的美和穿著者審美眼光的高妙。
文體的選擇
①根據話題的特點來確定文體。
②根據自身的特點來確定文體:大多數同學在文體上都有自己的偏好和特長,充分利用這個特點,在考場上揚長避短,盡量選用自己熟悉、擅長的文體,取得最佳效果。由於生活經歷和閱讀面的不同,同學們所掌握的寫作題材也不盡相同,針對不同類型的寫作題材,我們也應該選擇不同的文體。
文體的要求
記敘文
A.要處理好敘事詳略的問題。
B.要處理好敘述與描寫的關系。
C.要加強點題意識:文章只要能在關鍵處加上一些畫龍點睛的語句,對話題和中心加以強化和突出,它們完全可以成為一類卷。
議論文
A.議論文中的敘述要簡潔。
B.議論文中的議論要有針對性。
⒉探究下筆的角度
世界是豐富多彩的,每一個側面都能折射出特有的精彩。同樣的材料,我們只要運用得當,也能表達出屬於自己的獨特見解來。
視角轉換
同樣一件事,觀察者的身份、角度、立場、觀念、態度不同,得到的印象和結論也不會相同。
大膽立意
「意猶帥也」,對於作文的立意必須引起高度重視,因為它是文章的統帥和靈魂,立意不對就會前功盡棄,立意不好就會大為遜色。而作文要獲得高分,立意時就應該大膽。大膽,就要想人之所未想,發人之所未發,緊密聯系當前社會的熱點,把握時代的脈搏,如以德治國、以法治國、執政為民、西部開發、祖國統一、反腐倡廉、反恐怖以及世界多極化、經濟全球化等,這些都是讀者所關心的。關注熱點,道出大家的心聲,才容易引起讀者的共鳴,把握時代脈搏,抒發真情實感,才容打動讀者。當然,這種關注和把握應該通過側面來反映,藝術地加以表現,而不是空喊幾句口號。
慎重選材
立意決定之後,就要很好地圍繞主題選擇材料。選材時,應該持謹慎的態度,對材料百般挑剔,選取那些自己最熟悉的、最受感動的、最能反映主題的材料。這些材料可以是自己在家庭生活、學校生活、社會生活中親身經歷的,或者是耳聞目睹的,也可以是從書本上、報刊上、影視中、網路里得到的。應該記住,只有最熟悉才能信手拈 來,只有最受感動才能抒發真情,打動讀者,只有最能反映主題,才能使文章具有表現力。
巧擬文題
「題好一半文」,好的文題應該簡明生動、新穎獨特,為此,應該精心設計,認真推敲,仔細琢磨。能夠體現新意的文題通常有下列幾種:
1)以題顯旨:例如,《選擇博愛》(2002年高考優秀作文)
2)推陳出新:例如,《諫屈原書》(2002年高考優秀作文)
3)點石成金:例如,《毒剌》(2002年高考優秀作文)
4)數學式:例如,《7-1=0》(2001年高考優秀作文)
5)巧用修辭:
(1)引用式:例如,《誠信,直叫人生死相許》(2001年高考優秀作文)
(2)比喻式:例如,《誠信,人生的通行證》(2001年高考優秀作文)
(3)比擬式:例如,《誠信,生命因你而美麗》(2001年高考優秀作文)
(4)呼告式:例如,《朋友,請帶好你的護照》(2001年高考優秀作文)
(5)反問式:例如,《若有誠信,夫若何求》(2001年高考優秀作文)
(6)仿句式:例如,《誠以養德,信以修身》(2001年高考優秀作文)
(7)雙關式:例如,《生命「誠」可貴》(2001年高考優秀作文)
巧妙開頭
開頭切忌講些無關緊要、偏離題意的話,要盡快入題,吸引讀者。為此,可以巧設懸念,以發人深思,可以引用詩詞,使詩情洋溢,可以講述故事,引人入勝,可以引用名言,使文采斐然,還可以蘊含哲理,耐人尋味……總之,開頭要有統攝全篇、點明題旨、先聲奪人的功效,這樣才能吸引讀者。
學會轉折
作文時,我們經常發現,不少同學總覺得無話可寫,以至所寫的文章容量小,字數達不到要求,很大程度上影響到作文的質量。這是不懂得轉折入題,思路不開闊的緣故。其實,轉折入題很簡單,只要緊扣主題展開聯想和 引申,張開想像的翅膀,由古到今,由此及彼,由表及裡,由正面到反面,由自然現象到社會現象,讓自己的思路馳騁於古今中外,盪漾於天地四方,不就事論事,就會視通萬里,覺得有很多東西可寫。轉折入題,不僅能使自己思路開闊,還能增強文章的可讀性,使文章瑰麗多姿,讓人看了愛不釋手。
段首概括
考場作文,時間有限,老師評卷的時間也很有限,在每個段落的開頭用一句話概括本段的內容,既能使文章思路清晰,又能讓讀者(包括評卷老師)一目瞭然,既然如此,我們何樂而不為呢?
錘煉字句
我們懂得,文章有文采才有可讀性,才有感染力,為此,寫作時應該錘煉字句,努力做到字斟句酌。考場作文由於時間有限,真正做到字斟句酌是比較難的。但是,恰當地使用比喻、擬人、誇張等修辭方法,恰當地使用特殊的句式(設問句、反問句、排比句、對偶句、倒裝句、假設句等),恰當地引用名人名言,同時,在句子的運用上做到長短結合、整散結合,文白結合,就會使文章熠熠生輝。
篇末點題
在寫作上,我國自古就有「鳳頭、豬肚、豹尾」之說,所以,好的文章,除了開頭要好,中間容量要大之外,結尾還應該像「豹尾」那樣簡短有力。使文章結尾簡短有力的方法很多,可以呼應開頭(或題目),使首尾一貫,可以含蓄雋永,耐人尋味,可以畫龍點睛,使主題升華,可以卒章顯志,點明主題……總之,結尾要做到精采有力,簡潔扣題。這樣,才能增強文章的表現力。
做到這些,你的作文一定會出彩
也要注意平時的積累!!
❹ 高中生物實驗選材要注意哪些 比如還原糖 要白色的材料,不要取顏色深得那些
這個是專業性問題了,要准確的答案建議你加高中教師群。高中生物群,這樣進去肯定有人解答的,希望你滿意,謝謝
❺ 怎樣分離真菌病原物並對病原菌進行純化
(一)、真菌病原物分離的程序
1.分離前的准備工作
分離和培養應該在無菌至少很清潔的條件下進行。
為了保證無菌操作,應注意下面幾點:
1.1 清潔環境:分離工作嚴格說應在無菌條件下進行,無菌室或無菌箱是分離不可缺少的設施。
1.2 若限於條件實驗只能在普通房間進行時,必須對房間進行徹底掃除,清潔環境、搞好衛生。地上多灑些水,以消除室內塵埃,工作台上鋪好濕毛巾,點燃酒精燈。
1.3 分離工作開始前最好將所需的一切用品都准備好,放在超凈工作台內或伸手可及的台外,以避免操作過程中頻繁走動,破壞環境帶來雜菌;
1.4 保證工作人員自身的潔凈,工作前用肥皂洗手;
1.5 無菌操作前還要用70%酒精擦手;
1.6 工作中,特別在進行無菌操作時,呼吸要輕,不要說話等。
2.分離材料的選擇
分離材料的選擇對分離培養的成敗有著決定的影響。
病害材料應盡可能新鮮,如可選擇新近發病的植株、器官或組織作為分離的材料,可以減少腐生菌的污染。
最好在病、健交接處選材取樣。病、健交接處,除材料新鮮,污染的可能性小外,病原菌的生活力強、比較活躍,容易分離成功。
從受害的邊緣部分分離這一原則,對於絕大部分病害都是適用的。
採得的材料如已經敗壞而沾染大量的腐生菌,有時可以採用接種後再分離的方法,即將沾染有腐生菌的病組織作為接種材料,直接接種在健全的植物組織工植株上,等發病後再從病株或病組織分離。先接種再分離的方法,用得較多的是植物病原細菌的分離。
3.組織的表面消毒劑
(1)酒精
用酒精(70%)消毒,只浸很短的時間(幾秒鍾到1分鍾),然後用滅菌水沖洗;
較大的材料往往是在酒精中浸過後,或用棉花塞蘸酒精塗在組織表面,然後都在火焰上將酒精燒去。
(2)升汞溶液(0.1%)
配方為:升汞 1g, 濃鹽酸 2.5mL, 加水 至 1000mL。
將升汞溶於濃鹽酸中,待其充分溶解後,用水稀釋。
升汞劇毒、無色,為便於認識,可在溶液中加幾滴紅染料。
消毒時間因材料質地、發病部位深淺及污染情況而異,一般3~5分鍾。消毒後用無菌水沖洗3~4次。
(3)次氯酸鈉NaClO3
由於漂白粉的成分不固定而影響其消毒效果,目前多改用次氯酸鈉.
消毒所用的濃度一般是3%-5%的水溶液,消毒時間5-15分鍾。
幼嫩的病組織,表面用葯劑消毒時可能會同時殺死其中的病原真菌,消毒時間應盡量縮短。
比較安全的方法是不用葯劑消毒,而以滅菌水洗8、9次。
4.常規分離方法
植物病原真菌的分離方法主要有兩種:
組織分離法和稀釋分離法。
組織分離法是最常用的方法.
稀釋分離法主要用於病組織上產生大量孢子的病原真菌的分離。
植物病原真菌的組織分離的技術與步驟:
1)選取典型的病組織,在病健交界處將其剪成5mm×5mm的小方塊若干,裝於火焰滅菌的小碟中。
注: 選擇新患病的組織作為分離的材料,可以減少腐生菌混入的機會。腐生菌一般在發病很久而已經枯死或腐敗的部分滋生,因此,一般斑點病害應在臨近健全組織的部分分離。
2)向裝有病組織的小碟中加入70%酒精(約半碟)進行表面消毒,十幾秒後倒掉酒精。
注:先用70%的酒精浸2、3s是為了消除寄主表面的氣泡,減少表面張力,70%的酒精亦用於表面消毒,處理的時間較短(一般數秒至lmin)。
3)向小碟中加入0.1%升汞或10%次氯酸鈉溶液(約半碟)進行表面消毒,處理時間可自30秒至3分鍾不等,然後倒掉廢液。
註:升汞溶液消毒的時間因材料而異,可自30s至30min不等,如植物組織柔嫩,則表面消毒時間宜短;反之則可長些一般情況下,需時間3、5min。
4)向小碟中加滅菌水,沖洗3-4次(除去殘留的消毒劑),將病組織轉移到滅菌濾紙上吸去多餘的水(以大大減少病組織附近出現細菌污染)。
5)將吸干水分的病組織移到預先倒好的PDA平板上,注意要用鑷子輕壓組織使其著靠在培養基上。
6)每皿5塊,均勻擺放,倒置於25℃培養箱中培養。4-5天後檢查結果。寫明日期、姓名等。
(二)、真菌病原菌的純化
對一種真菌在進行深入研究以前,菌種的純化是必要的。此外,研究真菌的遺傳和變異、性徵和同宗或異宗配合等現象,都要求菌種從單個孢子(或小段頂端菌絲)繁殖而來。
1.菌絲塊法
一般從形成的菌落的邊緣挑取菌絲體移植培養,這也有一定的純化作用。
2.單菌落法
將菌種上產生的孢子用滅菌水洗下,適當稀釋後,取一定量的孢子懸浮液與熔化後冷卻到45℃左右的瓊脂培養基充分混合,倒平板培養,從形成的單個分散的菌落上移植菌絲體培養。
3.稀釋法
將孢子懸浮液加適量的滅菌水,不斷稀釋到每一小滴懸浮液中大致只有1個孢子。
移植到適當的培養基上培養。
此方法操作比較麻煩,但是比前一種分離法可靠。
4.瓊脂平板表面單孢子挑取法
孢子懸浮液中孢子調節到適當的數量,再塗勻在瓊脂平板表面上。用玻璃針、金屬針或其他器具在顯微鏡下觀察和挑取。
❻ 發酵工業培養基和實驗室培養基選材有什麼不同
實驗室培養基選材要做到效果最好。而發酵工業培養基盡量選擇廉價的,大規模適用的。
培養基在大規模生產中用量很大,在選用時應盡量地利用較豐富的廉價原料,設法降低成本。例如,賴氨酸(Lys)生產中先選用山芋澱粉,後改為用山芋粉為碳源,這樣不僅價廉,而且山芋粉中還含有生物素、鎂鹽等,省去了原來所加的玉米漿、硫酸鎂,並使整個成本降低15%。
工業發酵培養基
從微生物的營養要求來看,所有的微生物都需要碳源、氮源、無機元素、水、能源和生長物質,如果是好氧微生物則還需要氧氣。碳源是供給菌體生命活動所需的能量和構成菌體細胞以及代謝產物的基礎。氮源主要是構成菌體細胞物質和代謝產物,即蛋白質、氨基酸等之類的含氮代謝物。微生物生長發育過程和生物合成過程也需要大量元素和微量元素,如鎂、硫、磷、鉀、錳等。一些特殊的微量生長因子如生物素、硫胺素、肌醇等,對缺陷型微生物是必不可少的。生物體內各種生化作用必須在水溶液中進行,營養物質必須溶解於水中,才能透過細胞膜被微生物利用。另外有些產品的生產還需要使用誘導劑、前體和促進劑。在實驗室規模上配製含有純化合物的培養基是相當簡單的,雖然它能滿足微生物的生長要求,但在大規模生產上往往是不適合的。在發酵工業中,必須使用廉價的原料來配製培養基,使之盡可能地滿足下列條件:① 消耗每克底物將產生最大的菌體得率或產物得率;② 能產生最高的產品或菌體的濃度;③ 能得到產物生成的最大速率;④ 副產品的得率最小;⑤ 價廉並具有穩定的質量;⑥ 來源豐富且供應充足;⑦ 通氣和攪拌、提取、純化、廢物處理等生產工藝過程都比較容易。
用甘蔗糖蜜、甜菜糖蜜、穀物澱粉等作為碳源,用銨鹽、尿素、硝酸鹽、玉米漿及發酵的殘余物作為氮源,便能較好地滿足上述配製培養基的條件。
❼ 高中生物選修一植物組織培養知識點總結
生物是高考考試中重要的科目之一,尤其是植物組織培養這個知識點,是高考考試中必考知識點。下面是我為大家整理的高中生物知識點,希望對大家有所幫助!
高中生物選修一 知識點
課題一 菊花的組織培養
植物組織培養的基本過程
細胞分化:在生物個體發育過程中,細胞在形態、結構和生理功能上出現穩定性差異的過程。
離體的植物組織或細胞,在培養了一段時間以後,會通過細胞分裂,形成愈傷組織,愈傷組織的細胞排列疏鬆而無規則,是一種高度液泡化的呈無定形狀態的薄壁細胞。由高度分化的植物組織或細胞產生愈傷組織的過程,稱為植物細胞的脫分化,或者叫做去分化。脫分化產生的愈傷組織繼續進行培養,又可以重新分化成根或芽等器官,這個過程叫做再分化。再分化形成的試管苗,移栽到地里,可以發育成完整的植物體。
植物細胞工程
具有某種生物全套遺傳信息的任何一個活細胞,都具有發育成完整個體的能力,即每個生物細胞都具有全能性。但在生物體的生長發育過程中並不表現出來,這是因為在特定的時間和空間條件下,通過基因的選擇性表達,構成不同組織和器官。
植物組織培養技術的應用有:實現優良品種的快速繁殖;培育脫毒作物;製作人工種子;培育作物新品種以及細胞產物的工廠化生產等。
·細胞分化是一種持久性的變化,它有什麼生理意義?
使多細胞生物體中細胞結構和功能趨向專門化,有利於提高各種生理功能的效率。
比較根尖分生組織和愈傷組織的異同
影響植物組織培養的條件
材料:不同的植物組織,培養的難易程度差別很大。植物材料的選擇直接關繫到試驗的成敗。植物的種類、材料的年齡和保存時間的長短等都會影響實驗結果。菊花組織培養一般選擇未開花植物的莖上部新萌生的側枝作材料。一般來說,容易進行無性繁殖的植物容易進行組織培養。選取生長旺盛嫩枝進行組培的是嫩枝生理狀態好,容易誘導脫分化和再分化。
營養:離體的植物組織和細胞,對營養、環境等條件的要求相對特殊,需要配製適宜的培養基。常用的培養基是MS培養基,其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg,微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co,有機物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。
激素:植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。在生長素存在的情況下,細胞分裂素的作用呈現加強趨勢。在培養基中需要添加生長素和細胞分裂素等植物激素,其濃度、使用的先後順序、用量的比例等都影響結果。
4、操作流程環境條件:PH、溫度、光等環境條件。
不同的植物對各種條件的要求往往不同。進行菊花的組織培養,一般將pH控制在5.8左右,溫度控制在18~22℃,並且每日用日光燈照射12h.
配製MS固體培養基:配製各種母液:將各種成分按配方比例配製成的濃縮液(培養基母液)。
·使用時根據母液的濃縮倍數,計算用量,並加蒸餾水稀釋。
·配製培養基:應加入的物質有瓊脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有機物和植物激素的母液,並用蒸餾水定容到1000毫升。
·在菊花組織培養中,可以不添加植物激素
原因是菊花莖段組織培養比較容易。·滅菌:採取的滅菌 方法 是高壓蒸汽滅菌。
·MS培養基中各種營養物質的作用是什麼?與肉湯培養基相比,MS培養基有哪些特點?
大量元素和微量元素提供植物細胞所必需的無機鹽;蔗糖提供碳源,維持細胞滲透壓;甘氨酸、維生素等物質主要是為了滿足離體植物細胞在正常代謝途徑受到一定影響後所產生的特殊營養需求。
微生物培養基以有機營養為主,MS培養基則需提供大量無機營養。
外植體的消毒 外植體:用於離體培養的植物器官或組織片段。選取菊花莖段時,要取生長旺盛的嫩枝。菊花莖段用流水沖洗後可加少許洗衣粉,用軟刷輕輕刷洗,刷洗後在流水下沖洗20min左右。用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分,放入體積分數為70%的酒精中搖動2~3次,持續6~7s,立即將外植體取出,在無菌水中清洗。取出後仍用無菌吸水紙吸干外植體表面水分,放入質量分數為0.1%的氯化汞溶液中1~2min。取出後,在無菌水中至少清洗3次,漂洗消毒液。
注意:對外植體進行表面消毒時,就要考慮葯劑的消毒效果,又要考慮植物的耐受能力。
接種:接種過程中插入外植體時形態學上端朝上,每個錐形瓶接種7~8個外植體。外植體接種與細菌接種相似,操作步驟相同,而且都要求無菌操作。
培養:應該放在無菌箱中進行,並定期進行消毒,保持適宜的溫度(18~22℃)和光照(12h)
移栽:栽前應先打開培養瓶的封口膜,讓其在培養間生長幾日,然後用流水清洗根部培養基。然後將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠岩等環境中生活一段時間,進行壯苗。最後進行露天栽培。
栽培
外植體在培養過程中可能會被污染,原因有外植體消毒不徹底;培養基滅菌不徹底;接種中被雜菌污染;錐形瓶密封性差等。
高一生物 月季的花葯培養被子植物的花粉發育被子植物的雄蕊通常包含花絲、花葯兩部分。花葯為囊狀結構,內部含有許多花粉。花粉是由花粉母細胞經過減數分裂而形成的,因此,花粉是單倍體的生殖細胞。被子植物花粉的發育要經歷小孢子四分體時期、單核期和雙核期等階段。在小孢子四分體時期,4個單倍體細胞連在一起,進入單核期時,四分體的4個單倍體細胞彼此分離,形成4個具有單細胞核的花粉粒。這時的細胞含濃厚的原生質,核位於細胞的中央(單核居中期)。隨著細胞不斷長大,細胞核由中央移向細胞一側(單核靠邊期),並分裂成1個生殖細胞核和1個花粉管細胞核,進而形成兩個細胞,一個是生殖細胞,一個是營養細胞。生殖細胞將在分裂一次,形成兩個精子。
注意:①成熟的花粉粒有兩類,一類是二核花粉粒,其花粉粒中只含花粉管細胞核和生殖細胞核,二核花粉粒的精子是在花粉管中形成的;另一類是三核花粉粒,花粉在成熟前,生殖細胞就進行一次有絲分裂,形成兩個精子,此花粉粒中含有兩個精子核和一個花粉管核(營養核)②花粉發育過程中的四分體和動物細胞減數分裂的四分體不同。花粉發育過程中的四分體是花粉母細胞經減數分裂形成的4個連在一起的單倍體細胞;而動物細胞減數分裂過程中的四分體是聯會 配對 後的一對同源染色體,由於含有四條染色單體而稱為四分體。③同一生殖細胞形成的兩個精子,其基因組成完全相同。
產生花粉植株的兩種途徑通過花葯培養產生花粉植株(即單倍體植株)一般有兩種途徑,一種是花粉通過胚狀體階段發育為植物,另一種是花粉在誘導培養基上先形成愈傷組織,再將其誘導分化成植株。這兩種途徑之間並沒有絕對的界限,主要取決於培養基中激素的種類及其濃度配比。
注意:①無論哪種產生方式,都要先誘導生芽,再誘導生根②胚狀體:植物體細胞組織培養過程中,誘導產生的形態與受精卵發育成的胚非常類似的結構,其發育也與受精卵發育成的胚類似,有胚芽、胚根、胚軸等完整結構,就像一粒種子,又稱為細胞胚。
影響花葯培養的因素誘導花粉能否成功及誘導成功率的高低,受多種因素影響,其中材料的選擇與培養基的組成是主要的影響因素
·親本的生理狀況:花粉早期是的花葯比後期的更容易產生花粉植株,選擇月季的初花期。
·合適的花粉發育時期:一般來說,在單核期,細胞核由中央移向細胞一側的時期,花葯培養成功率最高
·花蕾:選擇完全未開放的花蕾
·親本植株的生長條件、材料的低溫預處理以及接種密度等對誘導成功率都有一定影響
·材料的選取:選擇花葯時,一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否處於適宜的發育期。確定花粉發育時期的最常用的方法是醋酸洋紅法。但是,某些植物的花粉細胞核不易著色,需採用焙花青-鉻礬法,這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色
·材料的消毒
·接種和培養:滅菌後的花蕾,要在無菌條件下除去萼片和花瓣,並立即將花葯接種到培養基上。在剝離花葯時,要盡量不損傷花葯(否則接種後容易從受傷部位長生愈傷組織),同時還要徹底去除花絲,因為與花絲相連的花葯不利於愈傷組織或胚狀體的形成,通常每瓶接種花葯7~10個,培養溫度控制在25℃左右,不需要光照.幼小植株形成後才需要光照.一般經過20~30天培養後,會發現花葯開裂,長出愈傷組織或形成胚狀體。將愈傷組織及時轉移到分化培養基上,以便進一步分化出再生植株。如果花葯開裂釋放出胚狀體,則一個花葯內就會產生大量幼小植株,必須在花葯開裂後盡快將幼小植株分開,分別移植到新的培養基上,否則這些植株將很難分開。還需要對培養出來的植株做進一步的鑒定和篩選。
植物組織培養技術與花葯培養技術的相同之處是:培養基配製方法、無菌技術及接種操作等基本相同。兩者的不同之處在於:花葯培養的選材非常重要,需事先摸索時期適宜的花蕾;花葯裂開後釋放出的愈傷組織或胚狀體也要及時更換培養基;花葯培養對培養基配方的要求更為嚴格。這些都使花葯培養的難度大為增加。
樣品水分含量(%)計算公式如下:
(烘乾前容器和樣品質量-烘乾後容器和樣品質量)/烘乾前樣品質量
·毛霉的生長:條件:將豆腐塊平放在籠屜內,將籠屜中的控制在15~18℃,並保持一定的溫度。
來源:1.來自空氣中的毛霉孢子,2.直接接種優良毛黴菌種
時間:5天
·加鹽腌制:將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中,同時逐層加鹽,隨著層數的加高而增加鹽量,接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽腌制的時間約為8天左右。
·用鹽腌制時,注意控制鹽的用量:鹽的濃度過低,不足以抑制微生物的生長,可能導致豆腐腐敗變質;鹽的濃度過高會影響腐乳的口味
·食鹽的作用:1.抑制微生物的生長,避免腐敗變質2.析出水分,是豆腐變硬,在後期製作過程中不易酥爛3.調味作用,給腐乳以必要的鹹味4.浸提毛酶菌絲上的蛋白酶。
·配製鹵湯:鹵湯直接關繫到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配製而成的。鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右。
·酒的作用:1.防止雜菌污染以防腐2.與有機酸結合形成酯,賦予腐乳風味3.酒精含量的高低與腐乳後期發酵時間的長短有很大關系,酒精含量越高,對蛋白酶的抑製作用也越大,使腐乳成熟期延長;酒精含量過低,蛋白酶的活性高,加快蛋白質的水解,雜菌繁殖快,豆腐易腐敗,難以成塊。
·香辛料的作用:1.調味作用2.殺菌防腐作用3.參與並促進發酵過程
·防止雜菌污染:①用來腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干凈後要用沸水消毒。②裝瓶時,操作要迅速小心。整齊地擺放好豆腐、加入鹵湯後,要用膠條將瓶口密封。封瓶時,最好將瓶口通過酒精燈的火焰,防止瓶口被污染。
疑難解答
(1)利用所學的生物學知識,解釋豆腐長白毛是怎麼一回事?
豆腐生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴格地說是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。
(2)為什麼要撒許多鹽,將長毛的豆腐腌起來?
鹽能防止雜菌污染,避免豆腐腐敗。
(3)我們平常吃的豆腐,哪種適合用來做腐乳?
含水量為70%左右的豆腐適於作腐乳。用含水量高的豆腐製作腐乳,不易成形。
(4)吃腐乳時,你會發現腐乳外部有一層緻密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢?它對人體有害嗎?它的作用是什麼?
“皮”是前期發酵時在豆腐表面上生長的菌絲(匍匐菌絲),對人體無害。它能形成腐乳的“體”,使腐乳成形。
高一生物染色體復習講義名詞:
1、染色體變異:光學顯微鏡下可見染色體結構的變異或者染色體數目變異。
2、染色體結構的變異:指細胞內一個或幾個染色體發生片段的缺失(染色體的某一片段消失)、增添(染色體增加了某一片段)、顛倒(染色體的某一片段顛倒了180o)或易位(染色體的某一片段移接到另一條非同源染色體上)等改變
3、染色體數目的變異:指細胞內染色體數目增添或缺失的改變。
4、染色體組:一般的,生殖細胞中形態、大小不相同的一組染色體,就叫做一個染色體組。細胞內形態相同的染色體有幾條就說明有幾個染色體組。
5、二倍體:凡是體細胞中含有兩個染色體組的個體,就叫二倍體。如人果,蠅,玉米。絕大部分的動物和高等植物都是二倍體。
6、多倍體:凡是體細胞中含有三個以上染色體組的個體,就叫~。如:馬鈴薯含四個染色體組叫四倍體,普通小麥含六個染色體組叫六倍體(普通小麥體細胞6n,42條染色體,一個染色體組3n,21條染色體。),
7、一倍體:凡是體細胞中含有一個染色體組的個體,就叫~。
8、單倍體:是指體細胞含有本物種配子染色體數目的個體。
9、花葯離體培養法:具有不同優點的品種雜交,取F1的花葯用組織培養的方法進行離體培養,形成單倍體植株,用秋水仙素使單倍體染色體加倍,選取符合要求的個體作種。
語句:
1、染色體變異包括染色體結構的變異(染色體上的基因的數目和排列順序發生改變),染色體數目變異。
2、多倍體育種:a、成因:細胞有絲分裂過程中,在染色體已經復制後,由於外界條件的劇變,使細胞分裂停止,細胞內的染色體數目成倍增加。(當細胞有絲分裂進行到後期時破壞紡錘體,細胞就可以不經過末期而返回間期,從而使細胞內的染色體數目加倍。)b、特點:營養物質的含量高;但發育延遲,結實率低。c、人工誘導多倍體在育種上的應用:常用方法---用秋水仙素處理萌發的種子或幼苗;秋水仙素的作用---秋水仙素抑制紡錘體的形成;實例:三倍體無籽西瓜(用秋水仙素處理二倍體西瓜幼苗得到四倍體西瓜;用二倍體西瓜與四倍體西瓜雜交,得到三倍體的西瓜種子。三倍體西瓜聯會紊亂,不能產生正常的配子。)、八倍體小黑麥。
3、單倍體育種:形成原因:由生殖細胞不經過受精作用直接發育而成。例如,蜜蜂中的雄蜂是單倍體動物;玉米的花粉粒直接發育的植株是單倍體植物。特點:生長發育弱,高度不孕。單倍體在育種工作上的應用常用方法:花葯離體培養法。意義:大大縮短育種年齡。單倍體的優點是:大大縮短育種年限,速度快,單倍體植株染色體人工加倍後,即為純合二倍體,後代不再分離,很快成為穩定的新品種,所培育的種子為絕對純種。
4、一般有幾個染色體組就叫幾倍體。如果某個體由本物種的配子不經受精直接發育而成,則不管它有多少染色體組都叫“單倍體”。
5、生物育種的方法 總結 如下:①誘變育種:用物理或化學的因素處理生物,誘導基因突變,提高突變頻率,從中選擇培育出優良品種。實例---青黴素高產菌株的培育。②雜交育種:利用生物雜交產生的基因重組,使兩個親本的優良性狀結合在一起,培育出所需要的優良品種。實例---用高桿抗銹病的小麥和矮桿不抗銹病的小麥雜交,培育出矮桿抗銹病的新類型。③單倍體育種:利用花葯離體培養獲得單倍體,再經人工誘導使染色體數目加倍,迅速獲得純合體。單倍體育種可大大縮短育種年限。④多倍體育種:用人工方法獲得多倍體植物,再利用其變異來選育新品種的方法。(通常使用秋水仙素來處理萌發的種子或幼苗,從而獲得多倍體植物。)實例---三倍體無籽西瓜和八倍體小黑麥的培育(6n普通小麥與2n黑麥雜交得4n後代,再經秋水仙素使染色體數目加倍至8n,這就是8倍體小黑麥)。
❽ 在檢測生物組織中的有機物時,選材時要符合哪些條件
組織要新鮮,無病變,年齡要適當,取材的量要適當