生物實驗有哪些干擾因素

❶ 影響檢驗結果的生物學因素有哪些

1.生理因素的影響。年齡、一些體液成分在不同的年齡段有所不同。性別、青春期之前，男性與女性的血液生化數據幾乎無差異。青春期之後，男性血清鹼性磷酸酶、氨基轉移酶、肌酸激酶、酸性磷酸酶活性高於女性。體型、肥胖者血清膽固醇、甘油三酯、極低密度脂蛋白、尿酸、葡萄糖濃度及乳酸脫氫酶活性升高，男性血清天門冬氨酸氨基轉移酶、肌酐、總蛋白及血液血紅蛋白濃度隨體重增加而升高，女性血清鈣隨體重增加而升高，男性和女性血清磷均隨體重增加而降低。妊娠、隨著孕期的延長，孕婦各系統將發生一系列的生理性變化，血清中的生化成分也將發生變化，如甲狀腺激素分泌增加，腎小球濾過率增高，甲胎蛋白升高，總蛋白和白蛋白減少。晝夜節律的變化、許多體液成分有晝夜節律的變化，促使其變化的因素有體位、活動、膳食、緊張、日照，以及睡眠狀態。有些體液成分的晝夜節律變化很大。運動。運動使呼吸加快，出汗增多，體液分布發生改變，導致血液生化成分發生改變。
2.飲食和葯物因素的影響。
飲食的影響、飲食對體液生化成分的影響取決於飲食的成分和進食時間。
葯物和毒物的影響、葯物對生化結果的影響主要包括兩個方面：（1）影響分析方法,即葯物本身或其代謝產物干擾化學反應,如維生素C是一種還原劑,可干擾葡萄糖氧化酶法測定血糖。（2）葯物可以通過它的生理作用、葯理作用及毒理作用改變生化參數,如口服含黃體酮成分的避孕葯引起血清膽固醇的升高；利尿葯增加血鈉和血鉀濃度；砷劑易損害肝臟,引起肝功能的異常。

❷ 影響食品微生物檢驗結果的因素有哪些

食品微生物檢驗是食品安全監測的重要組成部分，在實際工作中存在許多復雜因素影響食品微生物學的檢驗，可能給檢驗結果帶來偏差甚至錯誤。影響食品微生物檢驗結果的因素主要有以下幾個方面：

1．樣品的接收和預處理。樣品送達實驗室時，應檢查樣品標記是否與樣品相符，樣品包裝狀況是否正常。送檢的樣品，一般需保持在0～4℃的環境中，食品微生物學實驗室在收到樣品後，必須及時進行檢驗，以防止病原菌死亡或細菌數量增加。
2．儀器設備。微生物實驗室的主要儀器及設備包括：無菌室、顯微鏡、菌落計數器、高壓滅菌器、乾熱滅菌器、離心機、蒸餾設備、培養箱、厭氧箱、水浴箱、冰箱、超凈工作台、酶標儀、洗板機、PCR儀、電泳儀、凝膠成像系統等。要求所有的儀器和設備均應按照生產廠家提供的方法和有關規定正確使用，操作人員應了解儀器工作原理並遵守操作規則。
3．檢驗培養基和試劑。⑴培養基必須由專業廠家生產，產品質量必須符合有關的質量標准，保存也應符合要求，防止潮解、結塊等，使用時盡量縮短開蓋時間，放在低溫乾燥的環境中保存。對於易受潮的品種啟用後宜放入乾燥器中保存。培養基的配製應嚴格按照國標規定的方法進行操作並做好原始記錄。⑵檢驗試劑及葯品須在分析純級以上。在利用葯品、試劑配製標准溶液、染色液、緩沖液及其他試劑時應注意：按要求選取溶劑，用帶塞的試劑瓶盛裝，易分解的試劑宜用棕色瓶，揮發性的試劑瓶口應予密封。實驗室內保存的試劑應定期進行清點，陳舊或損壞的試劑及時棄去，注意保存試劑的使用有效期以及最佳保存方式。
4．檢驗人員檢驗。人員應執行上崗前培訓，並主動學習新技術，掌握國家食品衛生微生物學檢驗方法、標准及相關法律法規。
總之，食品微生物檢驗一定要把握好從取出樣品、稱取樣品到處理樣品、檢驗樣品的全過程無菌操作，檢驗人員必須按照標准嚴格、認真的檢驗。

❸ 有哪些因素可以干擾folin

1．干擾物質
此法是在Folin-酚法的基礎上引入雙縮脲試劑，因此凡干擾雙縮脲反應的基團，如-CO-NH2,-CH2-NH2,-CS-NH2以及在性質上是氨基酸或肽的緩沖劑，如Tris緩沖劑以及蔗糖，硫酸銨，巰基化合物均可干擾Folin-酚反應。此外，所測的蛋白質樣品中，若含有酚類及檸檬酸，均對此反應有干擾作用。而濃度較低的尿素（約0.5%左右），胍（0.5%左右），硫酸鈉（1%），硝酸鈉（1%），三氯乙酸（0.5%），乙醇（5%），乙醚（5%），丙酮（0.5%）對顯色無影響，這些物質在所測樣品中含量較高時，則需做校正曲線。若所測的樣品中含硫酸銨，則需增加碳酸鈉—氫氧化鈉濃度即可顯色測定。若樣品酸度較高，也需提高碳酸鈉—氫氧化鈉濃度1—2倍，這樣即可糾正顯色後色淺的弊病。
2．控制時間
因Lowry反應的顯色隨時間不斷加深，因此各項操作必須精確控制時間。即第1支試管加入2.0ml鹼性硫酸銅試劑後，開始計時，1分鍾後，第2支試管加入2.0ml鹼性硫酸銅試劑，2分鍾後加第3支試管，以此類推。全部試管加完鹼性硫酸銅試劑後若已到10分鍾，則第1支試管可立即加入0.20ml Folin-酚試劑，1分鍾後第2支試管加入0.20ml Folin-酚試劑，2分鍾後加第3支試管，以此類推。40℃水浴10min，冷卻後，每一分鍾測定一管吸光值。

❹ 生物安全實驗室的負壓不穩定是什麼原因

生物安全實驗室負壓梯度擾動因素，SICOLAB整理了一下，大概這幾方面
1、正常運行工況下的擾動
在實驗室正常運行期間，經常會出現干擾室內壓差穩定的情況，最常見的有4種：
1）工作人員進出開關門，導致靜壓差波動甚至逆轉；
2）配備生命支持系統和化學淋浴的高等級生物安全實驗室，室內有工作人員的動態工況下，正壓防護服排風到室內，引起靜壓差波動甚至逆轉，另外化學淋浴間在壓縮空氣吹乾的過程向化學淋浴間排風，也可歸納於此；
3）室內設置有對外的局部排風設備（如B2型生物安全櫃、負壓排風櫃、動物隔離器、獨立通風籠具等）時，設備啟動與停止引起的靜壓差波動甚至逆轉；
4）室內溫濕度顯著變化引起的壓力波動甚至逆轉。
2、異常故障引起的擾動
在實驗室正常運行期間，偶爾會出現異常故障干擾室內壓差穩定，甚至出現壓力逆轉的情況，常見的有2種：
1）當排風系統出現故障時，導致靜壓差波動甚至逆轉；
2）當送風系統出現故障時，導致靜壓差波動甚至逆轉。
3、通風系統開關機的擾動
為避免實驗室通風系統開關機過程中出現正壓，要求送、排風系統連鎖，即開機時要求先開排風機再開送風機，關機時先關送風機再關排風機。國內高等級生物安全實驗室幾乎全部是按照此連鎖順序運行的，但在開關機過程中仍有部分實驗室出現短時相對壓力逆轉以及部分實驗室絕對負壓過大的情況（－300Pa以上）。
3、負壓梯度標准要求
高等級生物安全實驗室房間壓力控制是實驗室通風控制的重要部分，是安全運行和污染控制的保證。
3.1負壓梯度技術指標要求
GB50346—2011《生物安全實驗室建築技術規范》和GB19489—2008《實驗室生物安全通用要求》對氣密性高等級生物安全實驗室各功能房間之間的靜壓差均有明確規定。
以上為SICOLAB整理，實驗室整體設計建設工程、生物樣本建設工程、GMP環境建設工程、環保工程

❺ 影響動物實驗效果的動物實驗技術因素有哪些

一、動物選擇
選擇好適合研究需要的實驗動物是獲得正確實驗結果和實驗成功的重要環節。應按照不同實驗的要求選擇合適的動物。如作腫瘤的研究工作，就必須了解哪種動物是高癌種，哪種是低癌種，各種動物自發性腫瘤的發生率是多少。如A系、C3H系、AKR系、津白Ⅱ等小鼠是高癌品系小鼠，C3H/He系經產雌鼠有80～100%的自發性乳腺癌。AKR系8～9月齡小鼠有80～90%自發性血病。C57BL系、津白Ⅰ等小鼠是低癌品系小鼠。不同動物對同一因素的反應雖然往往是相似的，但也常常會遇到動物出現特殊反應的情況。如5歲以上的雌狗常自發性乳腺腫瘤，如果給雌狗孕激素，就更容易誘發乳腺腫瘤。雌激素還容易引起狗發生貧血，這在其它實驗動物是很少見的。怎樣選擇好實驗動物可參看實驗動物的選擇和應用一講。

二、實驗季節
生物體的許多功能隨著季節產生規律性的變動。目前已有大量資料表明，動物對化學物作用的反應也受到季節的影響。例如在春、夏、秋、冬分別給10隻大鼠注入一定量的巴比妥納，發現入睡時間以春季最短。秋季最長，而睡眠時間則相反，春季最長，秋季最短（見表11-19）。

表11-19大鼠對巴比妥納反應的季節變動

季節 入睡時間（分） 睡眠時間（分）
春 56.1±11.0 470±34.0
夏 93.5±11.3 242±14.3
秋 120.0±19.0 190±18.7
冬 66.5±8.2 360±33.0
不同實驗季節，動物的機體反應性有一定改變。如不同季節對輻射效應有影響。家兔的放射敏感性在春夏兩季升高，秋冬兩季降低。在狗的實驗中，在春、夏兩季照射後的死亡率比秋、冬為高。小鼠的放射敏感性，在冬季和補夏顯著升高，而初夏和夏季則降低。大鼠的放射敏感性則沒有明顯的季節性波動。因此，這種季節的波動在進行跨季度的慢性實驗時必須注意的。

三、晝夜過程
機體的有些功能還有晝夜規律性變動。例如有人給小鼠皮下重復注入40%的四氯化碳溶液0.2ml後，在同一天不同的時間將動物處死，觀察肝細胞的有絲分裂動態，以了解肝細胞變性的修復情況。結果列於表11-20。資料表明，小鼠肝細胞有絲裂的晝夜變動十分明顯。

表11-20小鼠肝細胞有絲分裂系數（‰）的晝夜變動

分組 晝夜的鍾點
0 2 4 6 7 8 9 10
實驗組 2.4±1.2 2.6±1.2 1.02±0.17 4.11±0.27 0.26±0.06 1.36±0.25 0.66±0.25 0.57±0.08
對照組 2.8±1.86 2.6±0.16 0.2±0 6.3±1.48 0.46±0.07 0.26±0.07 0.97±0.05 0.66±0.04
動物對照射的敏感性在晝夜間有不同的變化，這種變化見於不同性別、種系和年齡的小鼠和大鼠。白天放射敏感性降低（死亡較少，LD50/30較高，體重下降較少，肝臟損傷較輕）夜間升高。同時，在小鼠和大鼠實驗中，除了夜間（21～24點）的高峰外，還發現白天（小鼠9～12點，大鼠15點）損傷加重情況。下午和後半夜射敏感性最低。大鼠與小鼠不同，其放射敏感性雖有晝夜間的明顯波動，但不很劇烈。經實驗證明實驗動物的體溫、血糖、基礎代謝率、內分泌激素的分泌均發生晝夜節律性變化。因此這類實驗的觀察必須設有相應的對照，並注意實驗中某種處理的時間順序結果的影響。為了得到可比性的實驗結果，所有實驗組動物應在同一時間內進行照射或其它實驗處理。

四、麻醉濃度
動物實驗中往往需要將動物麻醉後才能進行各種手術和實驗。要求麻醉濃度要適度，而且在整個實驗過程中要保持始終恆定。因此不能不分別實驗要求和動物品種（或品系）而用同一種麻醉劑，也不能亂用麻醉劑。因為不同的麻醉劑有不同的葯理作用和副作用，應根據實驗要求與動物種類而加以選擇，使用合適。麻醉濃度的控制是順利完成實驗獲得正確實驗結果的保證。如果麻醉過深，動物處於濃度抑制，甚至瀕死狀態，動物各種正常反應受到抑制，那是不會做出可靠的實驗結果的。麻醉過淺，在動物身上進行手術或實驗，將會引起強烈的疼痛刺激，使動物全身，特別是呼吸，循環功能發生改變，消化功能也會發生改變，如疼痛刺激會反射性的長時間中止胰腺的分泌。所以麻醉濃度必須合適。由此也不難理解在整個實驗中保持麻醉濃度的始終一致是如何必要了，因為麻醉濃度的變動，會使實驗結果產生前後不一致的變化，給實驗結果帶來了難以分析的誤差。

五、手術技巧
動物實驗中除了要注意選擇合適的實驗動物，用的試劑要純粹，儀器要靈敏，方法要准確外，還必須注意手術技巧，即操作技術的熟練。手術熟練可以減少對動物的刺激，動物受的創傷、

❻ 每種蛋白質濃度測定方法的干擾因素都有哪些

每種蛋白質濃度測定方法的干擾因素：干擾因素有硫酸銨、Tris緩沖液和某些氨基酸等。

在使用雙縮脲試劑時候，必須注意，必須是先加0.1 g/mL氫氧化鈉溶液，再加0.01 g/mL硫酸銅的水溶液。若先加入硫酸銅溶液，再加入氫氧化鈉溶液，則無法充分製造鹼性環境，此時硫酸銅會與氫氧化鈉發生復分解反應，生成藍色氫氧化銅沉澱，導致現象不清，無法較好地達到實驗目的。

注意事項

不合宜人群：有明顯出血傾向的人群。檢查前禁忌：檢查前一天不吃過於油膩、高蛋白食物，避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。體檢前一天的晚八時以後，應禁食。

檢查時要求：抽血時應放鬆心情，避免因恐懼造成血管的收縮、增加采血的困難。測定中，蛋白-染料復合物會有少部分吸附於比色杯壁上，實驗證明此復合物的吸附量是可以忽略的。測定完後可用乙醇將藍色的比色杯洗干凈。

以上內容參考：網路-蛋白質濃度測定

❼ 細菌內毒素檢查在哪些情況下進行干擾試驗

您好，
通過鱟實驗法檢供試品內毒素含量，受到多種因素的影響，如供試品的ph值、溫度、離子強度、濃度，蛋白質和可發生鱟試劑反應的非內毒素雜質等都會對內毒素的檢測產生干擾。在進行鱟試驗法檢測其內毒素時，需先進行干擾試驗。
當進行新葯的內毒素檢查試驗前，
或無內毒素檢查項的品種建立內毒素檢查
法時，須進行干擾試驗。
當鱟試劑、供試品的配方、生產工藝改變或試驗環境中發生了任何有可能影響試驗結果的變化時，須重新進行干擾試驗。
當
es
在
0.5λ～2λ（包括
0.5λ和
2λ）及
et
在
0.5es～2es（包括
0.5es和
2es）時，認為供試品在該濃度下無干擾作用。若供試品溶液在小於
mvd
的稀釋倍數下對試驗有干擾，應將供試品溶液進行不超過
mvd
的進一步稀釋，再重復干擾試驗。
如果一個新葯開展內毒素檢查時，未進行干擾試驗，可能會造成假陰性或假陽性結果。

❽ Folin－酚測定蛋白含量實驗中的干擾因素有哪些

該方法可受這些物質如：硫酸銨；Tris緩沖液；甘氨酸；各種硫醇干擾,另外該方法有耗費時間長；操作要嚴格計時；顏色深淺隨不同蛋白質變化等缺點.

❾ 雙縮脲法測血清蛋白質含量實驗的干擾因素

干擾因素是尿素，雙縮脲識別蛋白質的方法是檢測肽鍵，而血清中含有尿素，尿素的結構和肽鍵很相似，尿素遇雙縮脲也會產生紫色反應。因此干擾因素是尿素。

❿ 影響ELISA結果的若干內源性干擾因素有哪些

內源性干擾因素一般包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白 、異嗜性抗體、某些自身抗體、因使用鼠抗體治療或診斷誘導的抗鼠Ig抗體、交叉反應物質等。在日常的臨床血清(漿)標本中，有相當比例不同程度的含有上述各種干擾物質，從而導致測定結果的假陽性。
1.類風濕因子(rheumatoid factors,RF)在類風濕患者、其他疾病以及正常人血清中,常含有較高或不同濃度的RF，RF一般為TgM型，亦有IgG和IgA型，RF具有與變性IgG產生非特異結合的特點，因為在ELISA測定中，其可與固相上包被的特異抗體IgG以及隨後加入的酶標的特異抗體IgG結合，從而出現假陽性結果。尤其是在捕獲法IgM型特異抗體的測定中表現最為明顯，因為此時固相包被的抗體為抗人弘鏈抗體，IgM型RF的存在可使其大量結合於固相。為避免RF對ELISA測定的干擾，通常可以採取下述措施：
(1)稀釋標本：這在判斷急性病原體感染的特異IgM抗體如抗HAVIgM，抗HBclgM， TORCH的IgM抗體檢驗等尤為有用。因為急性感染時，血循環中特異的IgM抗體滴度通常很高，而RF滴度通常相對要低得多。因此，在測定前對標本進行稀釋，特異的IgM因高滴度存在仍可檢出，而非特異的RF則會因為稀釋變成非常低的滴度，從而對測定幾乎不產生干擾。現在，有些特異IgM檢測ELISA試劑 盒不要求稀釋標本，直接檢測，這樣雖然方便了實驗室技術人員的操作，但容易出現假陽性結果，並且由於某些慢性感染，如HBV的感染，血循環中抗HBelgM可持續以一定的滴度存在，標本不做稀釋即進行檢測，即可出現陽性結果，從而失去抗HBclgM用於HBV急性感染的診斷價值。因此，在臨床實驗室，一定要使用要求對標本做1:1000稀釋的試劑盒進行檢驗，從而保證相應檢測項目結果的可靠性及臨床應用價值。
(2)改變酶標抗體：由於RF結合的是IgG的Fc片段，如果將待酶標的抗體的F，片段酶切夫除，僅留下具有特異結合功能的F(ab』)2部分標記酶，則在測定中即可避免RF的干擾。
(3)標本中RF用變性IgG預先封閉：將經熱變性(63℃，10min)的動物如兔、羊等的IgG加入到標本稀釋液中，或是將該變性IgG連接至一顆粒固相如聚苯乙烯微球或微孔，然後加入臨床血清標本，反應後，再吸出標本進行檢測。此外，在測定特異IgM時，也可使用抗人IgG去除臨床標本中RF和IgG。
(4)測定抗原 時，可在標本中加入可使RF降解的還原劑：如2—巰基乙醇。2—巰基乙醇等還原劑可使抗體內的巰基裂解，因而可以去除RF的干擾，但只適用於抗原測定。
(5)包被或酶標二抗使用特異的雞抗體IgY：RF不與雞IgY反應，如果包被和酶標二抗均為雞IgY抗體，則不受標本中RF的干擾。
2.補體在固相酶免疫測定中，來自哺乳動物的固相特異抗體和酶標二抗均有激活人補體系統的功能。一方面，固相抗體和酶標二抗可因為其在固相吸附及結合過程中，抗體分子發生變構，從而其F, 段的補體C1，結合位點被暴露出來，這樣C1，就成為一個中介物將二者交聯起來，從而出現假陽性結果。另一方面，固相抗體也會因為活化補體的結合，封閉抗體的抗原表位結合能力，而引起假陽性結果或使定量測定結果偏低。由補體引起的干擾可通過下述方法避免：
(1)對臨床血清標本加熱滅活補體：採用56~C30min加熱可使標本中的補體C1。滅活。
(2)包被或酶標二抗使用特異的雞抗體：雞抗體不激活人的補體系統，因此，使用特異的雞抗體，不會出現因補體激活而存在的假陽性和假陰性干擾。
3.異嗜性抗體(heterophilieantibodies)人類血清中含有抗嚙齒類動物(如鼠、馬、羊等)的免疫球蛋白(lg)的抗體，即天然的異嗜性抗體。有研究表明，天然的異嗜性抗體(lgG)可分為兩類，一類(85%的假陽性由其引起)可結合於山羊、小鼠、大鼠、馬和牛IgG的Fab區域，但不與兔IgG的Fab區結合。另一類(15%的假陽性由其引起)可結合於小鼠、馬、牛和兔IgG的Fc區表位，但不與山羊和大鼠IgG的Pc區表位結合。異嗜性抗體可通過交聯固相和酶標的單抗或多抗而出現假陽性反應。由異嗜性抗體引起的干擾可通過下述方法避免：
(1)使用特異的兔F(ab』)2。片段作為固相或測定酶標抗體。
(2)在標本或標本稀釋液中加入過量的動物Ig，封閉可能存在的異嗜性抗體。但加入量不足或亞類不同時無效。
(3)使用靶特異的非Ig親和蛋白(affibody)替代固相或酶標抗體之一。採用噬菌展示來自單個金黃色葡萄球A蛋白(SPA)聯合文庫的人IgA結合親和蛋白，用於IgA的測定，不受異嗜性抗體的影響。
4.因使用鼠抗體治療或診斷誘導的抗鼠Ig抗體在臨床上，有嘗試使用鼠源性單克隆抗體進行靶向治療，及使用放射性核索標記鼠源性單克隆抗體進行影像診斷等，均有可能