微生物質控菌株怎麼復甦

㈠ 我第一次微生物，剛買回來了菌種，但不知道如何復甦和保存，幫幫忙，謝謝

復甦就是挑一點在培養基上培養。保存一般4度冰箱里

㈡ 菌種如何復壯呢

栽培種如果保存時間太長，是沒有辦法復壯的。如果菌絲體已經出現老化現象，最好不要再使用。

㈢ 如何對退化的菌種進行復壯

如果一個菌種因遺傳變異而呈現退化，我們是無法通過改變環境條件使其恢復原狀的。因此，所謂「復壯」，是指從衰退的群體中找出尚未衰退的少數個體，以達到恢復菌種的優良性狀的目的；或通過改變某些內（如菌種的生理狀況）、外（如營養成分）因素，使因長期在人工條件（尤其是不適的條件）下培養，生活力和生理機能下降的菌種恢復生活力和正常生理機能的一種措施。

菌種復壯最好在菌種的生產性能尚未衰退之前及時進行，並定期對菌種進行復壯處理，以防衰退。主要通過淘汰已衰退的個體和定期重新分離菌種措施來完成。常有以下幾種方法：

（1）純菌種分離

自然界里，食用菌大都與細菌、黴菌、酵母菌等微生物混雜生活在一起，因此，為了獲得純菌種，就必須進行純菌種的分離培養。所謂純菌種分離是指採用無菌操作技術，將食用菌的菌種從混雜的微生物群中單獨地分離出來。常用的分離方法有孢子分離法、組織分離法、基內菌絲分離法和土中菌絲分離法。

在自然條件下，菌種的復壯，只有靠產生新一代才能實現，經有性繁殖所產生的孢子，是食用菌生活史的起點，具有豐富的遺傳特性。要有計劃的把無性繁殖和有性繁殖的方法交替使用，最好每年進行一次組織分離，3年進行一次有性繁殖。新分離的菌種，必須經過試驗，性能符合要求後，方能用於生產。

（2）更換培養基

在菌種的培養、保藏、繼代過程中，每隔一個時期，注意改變培養基成分（改變、調整、增加某種碳源、氮源或礦質元素等），或在原有的培養基中添加酵母膏、麥芽汁、氨基酸類物質和維生素等，或採用麥粒、穀粒、玉米粒等顆粒菌種，以刺激菌絲生長，提高菌種活力。

（3）適當添加維生素

在高溫的夏季，培養雙孢菇、鳳尾菇等食用菌母種時，在瓊脂培養基中加入適量維生素E或維生素B₁，可延緩細胞衰老，而且產量還有增加的趨勢。

（4）菌絲液培養

從已退化的菌群中分離出仍保持原菌種典型性狀的單個菌體細胞，經生長測定後進行擴大培養，以恢復原菌種的優良性狀。具體操作是：在無菌條件下，將試管中菌絲體刮下，放入裝有100毫升無菌水的三角瓶中，充分振動搖勻，使菌絲分散，然後用注射器吸取10毫升菌絲液，注入裝有90毫升無菌水的三角瓶內，充分搖勻後，接入平板培養基上，每個平板接入2～3滴菌絲液，使菌絲液分散在平板上，在適宜溫度下培養使菌絲萌發，從中挑選健壯的菌絲接入斜面試管。等到菌絲長滿斜面，經試驗證明符合原菌種的性狀後，即可用於生產。

（5）尖端菌絲切取復壯

菌絲體的生長點位於菌絲的尖端，取菌絲的尖端旺盛生長點，進行分離培養，以得到優良的菌種。

（6）原基復壯分離法

此法適宜木腐菌的菇類，原基分離能保持母本性狀。由於原基形成的物質條件更優越化，因而更易篩選到優良菌株。如用滅菌的尖頭鑷子在無菌條件下鑷取金針菇原基，接入斜面培養基中，恆溫培養7～10天。選取菌絲濃密、氣生菌絲旺盛的斜面種再轉管，生長性狀穩定的即為復壯後的分離種。

（7）芽孢復壯

呂作舟、蔡衍山（1992）提出，銀耳菌種出耳率下降，可加入芽孢進行復壯。具體做法是：將約500毫升含5克葡萄糖和數滴乳酸滅菌營養液（pH5.5左右），分注入30～40支銀耳芽孢試管中，將芽孢菌落洗脫，即得芽孢懸液。芽孢懸液應隨配隨用，每瓶木屑種加 20毫升芽孢懸液，段木栽培的出耳率可明顯提高。

（8）種木分離

袋料栽培的木生菌類，要定期接入木材中，待長出子實體後，挑選菇木或耳木進行種木分離，從而達到復壯作用。

㈣ 菌種冷凍後如何復甦

菌株的復甦
1、 從冰箱取出保存管。不要將保存管解凍。如果同時取出幾支管，可以用冰袋來防止保存管的解凍。
2、 打開蓋子，用無菌的針插入玻璃珠的孔挑出或用鑷子取出玻璃珠
3、 取出的玻璃珠，可以投入一專用的液體培養基，或者立即在一專用的固體培養基上滾動。培養基置合適的條件培養
4、 遵循廢物處理手冊安全地處理該玻璃珠
5、 保存管重新封好，盡快將它置冰箱保存

㈤ 如何對微生物菌種進行活化能否更具體一些

有同學已經說的很專業了，我就給你說些簡單實用的。不知道你出於何種目的要進行活化。如果你是用凍存管保存的菌株進行活化，取出2顆小珠放在適宜的固體培養基上，合上蓋讓小珠在平皿上滾動，適宜條件培養就可以了。長出一個菌落，你再繁殖就可以了。如果你是凍乾粉的菌種，准備適宜的液體培養基，少少一點點粉末接種就可以了，根據此菌種一般液體培養所需時間，大概在36-48h，你還可以在觀察到液體渾濁、試管底部有沉澱時（沉澱者也可能為原本死亡的細菌），取100微升液體塗抹在固體培養基上。
一般的話，復甦的菌種需要重復幾次復壯。

㈥ 標准菌株怎樣保存最適合的溫度是多少

可使用凍干保藏、利用多孔小珠(磁珠)在-70℃保藏或使用液氮保藏等方法。菌株不同保藏方法也不盡相同，應根據文獻資料選擇最佳保藏方法。

對於從標准菌種冷藏中心或經ISO9000 質量管理體系認證或其它有效的認證的商業機構獲得原包裝的質控菌株，復甦和使用應按照製造商提供的使用說明進行。

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標准菌株使用注意事項：

1、選擇合適的培養基：勿使用選擇性培養基。一般使用非選擇性的增菌培養基，因為微生物在選擇性培養基中生長某些生物特性可能丟失，保藏的菌種的生物特性可能與標准菌株特性不同。

2、菌液的濃度：菌液的濃度一般越大，菌種保存時間越長。保藏時細菌常使用菌液，黴菌常用無菌水或生理鹽水制備成的孢子懸液。

3、甘油濃度：甘油終濃度一般為10%~20%。由於甘油原液太粘稠，需要配製合適的甘油-水溶液。

4、對菌種進行保藏時注意慢凍快化，冷凍時降溫速率保持1℃/min,復甦時用37℃水浴融化，能夠保證菌種大的成活率。當冷凍菌種融化後，應避免再次冷凍，否則菌體的生存率會大幅度降低。

㈦ 用甘油凍存的細菌如何進行復甦

復甦：

1、無菌操作台滅菌30min後，75%酒精棉球消毒包括手在內的所有物品。

2、用滅菌接種環扣取試管中的冷凍菌塊放入3mlLB液體培養基中，37℃150rpm過夜培養。

3、將過夜菌液重新按照步驟2活化一次。

4、活化2次後的菌液即可用於實驗。

目的

微生物在使用和傳代過程中容易發生污染、變異甚至死亡，因而常常造成菌種的衰退，並有可能使優良菌種丟失。菌種保藏的重要意義就在於盡可能保持其原有性狀和活力的穩定，確保菌種不死亡、不變異、不被污染，保持菌株優良性狀不退化，保持優良菌株存活，以達到便於研究、交換和使用等諸方面的需要。

㈧ 怎樣復活安培管里休眠的菌種乾粉，具體操作，請知道的朋友幫忙啊！

一、安瓿瓶裝微生物菌種開封
1-1、用浸過70％酒精的脫脂棉擦凈安瓿瓶。
1-2、用火焰將安瓿瓶口加熱滅菌。 1-3、用鑷子將鋁封口撕開。
二、菌株恢復培養
2-1、用無菌吸管，吸取0.3-0.4ml適宜的液體培養基，滴入安瓿管內，輕輕振 盪，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。
2-2、取約0.2ml菌體懸浮液，移植於指定的瓊脂斜面培養基上，剩餘的菌液，注入指定的液體培養基內（3-4ml），然後在建議的溫度下培養。
三、注意事項
3-1、菌種活化前，請將安瓿瓶保存在5-10℃的環境下。
3-2、厭氧菌的培養，如無特別說明，自開封至接種完成，均需以無氧氣體充 填，以保持厭氧狀態。
3-3、某些菌種經過冷凍乾燥保存後，延遲期較長，需連續兩次繼代培養才能 正常生長。
四、製作ｅｍ菌液

4-1、菌種活化:用ｅｍ菌種10克、紅糖0.1公斤（紅糖先用熱水溶化），加入1公斤的水。註：（先把水加熱到100°c後加入紅塘或白糖，而後繼續加熱5分鍾。冷卻到40°c時加入ｅｍ菌種），密閉發酵(35°c-40°c溫度)下活化3天，打開容器口聞到有酸甜味即活化成功。可以作為液體菌種使用。
4-2、製作原液：將活化好的液體菌種加入二級發酵罐。菌種——二級發酵罐(密閉) (加水比例:按1:10的比例加入) 二級發酵液:（10%的無菌糖水！ 0.1%瓊脂粉！溫度35-40度！發酵5-7天！）成品發酵液標准（氣味：酸甜！ ph值：4.0-5.0！ 活菌含量：100億/ml ！）

㈨ 細菌復甦操作

先剃度升溫，我想培養基用普通的牛肉糕蛋白凍就可以了吧，液體培養一天左右，再劃線挑選個好的菌落，再擴大培養使用。菌種不同不知道能不能跟我以前做的一樣，以前好像是用的桿菌。