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如何計算土壤樣本中微生物數量

發布時間:2022-09-08 17:28:10

A. 稀釋平板法測定土壤微生物數量

A、測定土壤樣品中的微生物的數量,常用稀釋塗布平板法,來統計活菌數目,一般情況下,實驗結果與真實結果相比偏小,A錯誤;
B、樣方大小對種群數量有一定的影響,喬木100m 2 、灌木16m 2 、草本1m 2 ,所以樣方法測種群密度時取的樣方面積不合適,實驗結果與真實結果相比不一定偏大,B錯誤;
C、根據標志重捕法的計算公式:種群中個體數(N)÷標記總數=重捕總數÷重捕中被標志的個體數可知,若部分灰喜鵲身上的標志物脫落,則會導致重捕中被標志的個體數偏小,最終導致實驗所得到數值比實際數值大,C正確;
D、由於酵母菌是兼性厭氧型生物,所以計數培養液中酵母菌數量時,待培養液沉澱後再取沉澱物計數,往往實驗結果與真實結果相比偏大,D正確.
故選:CD.

B. 土壤微生物分離計數的方法

用培養基的方法來分比較麻煩,而且土壤中90%以上的菌是不可培養的……

如果只是想做到群落水平的話,可以試試Biolog分析、磷脂脂肪酸分析和總DNA分析等方法,這些方法能研究和表徵那些現在還不能夠被培養的土壤微生物。

C. 微生物計數方法有哪些

測定微生物計數的方法有很多,主要有以下幾種:
1.血細胞計數法
將稀釋的菌液樣品滴在血細胞計數板上,在顯微鏡下計算4~5個中格的細菌數,並求出每個小格所含細菌的平均數,再以此為依據,估算總菌數.
①此法的缺點是不能區分死菌和活菌.
②對壓在小方格界線上的細菌,應當取平均值計數.
③此法可用於測定培養液中酵母菌種群數量的變化
2.稀釋塗布平板法
原理:每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落.培養基表面生長的一個菌落,來源於樣品稀釋液中的一個活菌.
①這一方法常用來統計樣品中活菌的數目
②統計的菌落數往往比活菌的實際數目低,原因是當兩個活多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落.因此統計結果一般用菌落數而不是用活菌數來表示.
③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含細菌、酵母、芽孢與孢子等的數量均可用此法測定.但不適於測定樣品中絲狀體微生物,例如放線菌或絲狀真菌或絲狀藍細菌等的營養體等.
④此法若不培養成菌落,可通過將一定量的菌液均勻地塗布在玻片上的一定面積上,經固定染色後在顯微鏡下計數,這樣又稱塗片計數法.染色可用台盼藍,台盼藍能使死細胞染成藍色,可分別計數死細胞和活細胞.
3.濾膜法
濾膜法是當樣品中菌數很低時,可將一定體積的湖水、海水或飲用水燈樣品通過膜過濾器.然後將濾膜乾燥、染色,並經處理使膜透明,再在顯微鏡下計算膜上(或一定面積上)的細菌數.
此法也可以通過培養觀察形成的菌落數來推算樣品中的菌數.例如測定飲用水中大腸桿菌的數目:將已知體積的水過濾後,將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養.在該培養基上大腸桿菌的菌落呈現黑色,可根據培養基上黑色菌落的數目,計算出水樣中大腸桿菌的數目.
此法也是統計樣品中活菌的數目.
4.比濁法
原理是在一定范圍內,菌是懸液中細胞濃度與混濁度成正比,即與光密度成正比,菌越多,光密度越大.因此可藉助與分光光度計,在一定波長下,測定菌懸液的光密度,以光密度表示菌量.實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內,否則不準確.
5.顯微鏡直接計數法
在課本生物選修1生物技術實踐P22中「除了上述活菌計數法外,顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法.」這里說的顯微鏡直接計數,我認為應該是在稀釋塗布的基礎上不培養成菌落而通過染色的方法在顯微鏡下直接計數.再如濾膜法也一樣,可以有兩種情況.
另外,微生物計數法發展迅速,多種多樣的快速、簡易、自動化的儀器和裝置等方法可以用來統計微生物的數目.

D. 如何計算土壤微生物的菌數(稀釋塗布法)

土壤中微生物種類很多,根據你想要的菌配製所需要的培養基就行了,很簡單啊。

E. 通過菌落數計算樣品中的微生物數量的方法

菌落總數的計算方法

若只有一個稀釋度平板上的菌落數在適宜計數范圍內,計算兩個平板菌落數的平均值,再將平均值乘以相應稀釋倍數,作為每g(mL)中菌落總數結果。

若有兩個連續稀釋度的平板菌落數在適宜計數范圍內時,按如下公式計算:

N=∑C/(n1+0.1n2)d

式中:

N —樣品中菌落數

ΣC —平板(含適宜范圍菌落數的平板)菌落數之和

n1 —第一稀釋度(低稀釋倍數)平板個數

n2 —第二稀釋度(高稀釋倍數)平板個數

d —稀釋因子(第一稀釋度)

示例:

稀釋度 1:100(第一稀釋度) 1:1000(第二稀釋度)

菌落數(CFU) 232,244 33,35

上述數據按8.2.2數字修約後,表示為25000或2.5×104。

若所有稀釋度的平板上菌落數均大於300 CFU,則對稀釋度最高的平板進行計數,其他平板可記錄為多不可計,結果按平均菌落數乘以最高稀釋倍數計算。

若所有稀釋度的平板菌落數均小於30 CFU,則應按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。

若所有稀釋度(包括液體樣品原液)平板均無菌落生長,則以小於1 乘以最低稀釋倍數計算。

若所有稀釋度的平板菌落數均不在30 CFU~300 CFU 之間,其中一部分小於30 CFU 或大於300 CFU 時,則以最接近30 CFU 或300 CFU 的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。

ps 8.2.2大於或等於100 CFU 時,第3 位數字採用「四捨五入」原則修約後,取前2位數字,後面用0 代替位數;也可用10 的指數形式來表示,按「四捨五入」原則修約後,採用兩位有效數字。

相關熱詞:菌落 菌落總數 稀釋倍數 平均值 有效數字 稀釋因子 連續稀釋

..........
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F. 測定微生物的生物量有哪些主要方法

測定微生物的生物量有哪些主要方法
測定的方法主要有四種:

1.直接計數測定:根據微生物種類,有血球計數板和細菌計數板;

2.比濁法:根據菌懸液的濃度在一定范圍內與光密度成正比,可以用分光光度計測OD值,用OD值表示樣品菌液濃度;

3.核酸計數法:熒光定量PCR技術;

4.活菌計數法:MPN和平板計數法由於測定方法的限制。新鮮土樣經氯仿熏蒸後(24h),土壤微生物死亡細胞發生裂解,釋放出微生物生物量碳,用一定體積的LK2SO4溶液提取土壤,借用有機碳自動分析儀測定微生物生物量碳含量。根據熏蒸土壤與未熏蒸土壤測定有機碳的差值及轉換系數(KEC),從而計算土壤微生物生物量碳。

G. 如何測定土壤中特定細菌的數量

顯微鏡直接計數法和稀釋平板計數法是測定微生物數量的常用方
法。
直接計數法中常用的是顯微鏡直接計數法,這種方法是先將待
測樣品製成懸液,然後取一定量的懸液放在顯微鏡下進行計數(圖1-
3-1)。根據在顯微鏡下觀察到的微生物數目來計算出單位體積內的微
生物總數。直接計數法所需設備簡單,可迅速得到結果,而且在計數
的同時能觀察到所研究微生物的形態特徵,其缺點是難以計數微小的
細菌。這種方法一般適用於純培養懸浮液中各種單細胞菌體的計數。
間接計數法最常用的是稀釋平板計
數法,它是根據微生物的培養特徵而設計
的計數方法。這種方法在樣品中含菌數較
少的情形下,也可以完成計數。
應用稀釋平板計數法計數時,需要
將待測樣品配製成均勻的系列稀釋液,盡
量使樣品中的微生物細胞分散開。再取一
定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板
中,使其均勻分布於平板中的培養基內;
或是將一定量的稀釋液,與溶化後冷卻至
45℃左右的瓊脂培養基混合,傾入無菌培
養皿中,搖勻、靜置待凝。經過培養後,
就由單個微生物生長繁殖形成菌落,這樣
的一個菌落就代表著一個微生物個體。統
計培養基中出現的菌落數,即可推算出檢
測樣品中的活菌數。

FOR EXAMPLE:]
土壤中好氣性細菌的計數
土壤中生活的微生物種類和數量是極其豐富的,這些數量眾多的
微生物對提高土壤肥力有重要作用。因此,測定土壤中的含菌量可以
作為判定土壤肥力的一個重要指標。
材料器具
土壤樣品;牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基(附錄二)、無菌水;培養皿、
移液管、天平、錐形瓶、試管、酒精燈、恆溫培養箱、搖床等。
活動程序
1.制備土壤稀釋液
取土壤表層5~10 cm 處的土樣。准確稱取1 g 土樣,放入盛有
99 mL 無菌水的錐形瓶(250 mL,放有小玻璃珠)中,用手或搖床振盪
20 min,即製成102 倍的稀釋液。
用1 mL無菌移液管,吸取10 2倍稀釋液0.5 mL,移入裝有4.5 mL
無菌水的試管中,配製成103 倍稀釋液。
用同樣的方法可製成稀釋倍數為104、105、106 的系列稀釋菌液
(圖1-3-2)。


移液時,要將移液管插入液面,吹吸3 次,每次吸上的液面要高
於前一次,讓菌液混合均勻並減少稀釋中的誤差。每配一個稀釋度要
換用一支移液管。
2.取樣及倒平板
將無菌培養皿編號,依次為104、105、106,每一號碼設置三個
重復。
用無菌移液管三支,分別吸取稀釋倍數為104、105、106的土壤稀釋
液各0.2 mL,注入到相應編號的培養皿中(每個稀釋倍數各三個培養皿)。
將已滅菌牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基溶化,待冷卻至45~50 ℃左
右,傾入到無菌培養皿中,每皿約15 mL,輕輕轉動培養皿,使土壤
稀釋液與培養基混合均勻。
3.培養
將上述接種好的平板培養基冷卻後,倒置放入28~30 ℃的恆溫
培養箱中培養24~36 h,直至長出菌落為止。
4. 觀察記錄
將實驗中得到的菌落數填入表1-3-1。
結果分析
1.選取具有合適菌落數的稀釋倍數並計數。
在計算結果時,從接種的3 個稀釋度中選擇一個合適稀釋倍數,
統計出菌落數(圖1-3-3)。選擇的原則是:


(1) 細菌、放線菌、酵母菌以每個培養皿內有30~300 個菌落為
宜。黴菌以每個培養皿內有10~100 個菌落為宜。
(2) 同一稀釋倍數各個重復的菌落數相差不太懸殊。
2.將統計出的菌落數按下列公式計算,得出每克樣品菌數。
每克土壤樣品菌數= 某稀釋倍數的菌落平均數×稀釋倍數

H. 1g土壤中微生物數量計算公式

1g土壤中微生物數量計算公式如下:
從最後的稀釋液中取0.1mL塗布,形成了若干菌落,則1mL稀釋液中有菌個數為:某稀釋液中的菌落數×10,再乘以稀釋倍數即為盛有90mL無菌水的錐形瓶中1mL的菌數,而錐形瓶中的100mL總共含有的菌體數為:某稀釋液中的菌落數×10×稀釋倍數×100,而這些菌來源於10土樣,故1g土壤樣品中含有的菌體數=某稀釋液中的菌落數×10×稀釋倍數×100÷10。

I. 土壤微生物數量用什麼單位表示//

用 個/克

將已知質量的土壤用蒸餾水製成懸液,按梯度稀釋,然後將稀釋倍數較高的土壤懸液塗布到平板上進行培養,菌落長好後數菌落的個數,根據稀釋倍數即可估算出微生物的數量(個/克)

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