為什麼要進行微生物培養

A. 微生物培養需要什麼條件為什麼

微生物的生長和繁殖需要條件有：

1、適宜的營養條件(充足的碳源、氮源)。

2、適宜的氧含量(好氧的要震盪培養，厭氧的要厭氧培養，兼性的可以靜止培養)。

3、合適的pH值(一般指培養基的pH值)。

4、合適的環境溫度(細菌37度，真菌28度)。

5、合適的接種量(一般接種量是1%)。

6、只用專業的中海生物微生物培養基

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微生物的主要特徵

1、體小面大

一個體積恆定的物體，被切割的越小，其相對表面積越大。微生物體積很小，如一個典型的球菌，其體積約1mm，可是其表面積卻很大。這個特徵也是賦予微生物其他如代謝快等特性的基礎。

2、吸多轉快

微生物通常具有極其高效的生物化學轉化能力。據研究，乳糖菌在1個小時之內能夠分解其自身重量1000-10000倍的乳糖，產朊假絲酵母菌的蛋白合成能力是大豆蛋白合成能力的100倍。

3、生長繁殖快

相比於大型動物，微生物具有極高的生長繁殖速度。大腸桿菌能夠在12.5-20分鍾內繁殖1次。不妨計算一下，1個大腸桿菌假設20分鍾分裂1次，1小時3次，1晝夜24小時分裂24×3=72次，大概可產生4722366500萬億個（2的72次方），這是非常巨大的數字。

但事實上，由於各種條件的限制，如營養缺失、競爭加劇、生存環境惡化等原因，微生物無法完全達到這種指數級增長。 已知大多數微生物生長的最佳pH范圍為7.0 (6.6~7.5)附近，部分則低於4.0。

微生物的這一特性使其在工業上有廣泛的應用，如發酵、單細胞蛋白等。微生物是人類不可或缺的好朋友。

B. 3 微生物發酵生產的工廠，為什麼都要進行菌種的擴大培養，一般如何進行菌種的擴大培養

在微生物發酵生產時，為保證足夠的接種量，常採用菌種的擴大培養。
用以生產的菌株第一步要在實驗室環境下培養達700ml以上菌種時，接入一級種子罐種培養1-2天後，輸入二級種子罐培養1-2天，再輸入發酵罐中培養7天左右。
發酵時出現產量不穩定由多種因素引起，種子質量，接種量，原材料的質量，在發酵過程中糖、氮的補充，發酵控制條件不成熟等。
原材料的影響不大，除非是賣到發霉變質的，或者是質量嚴重不合格的原材料。
本人認為重要可能是發酵過程中糖氮的補充，掌握不成熟。易引起發酵產量不穩定。

C. 為什麼需要進行微生物培養基的優化

培養基優化，是指面對特定的微生物，通過實驗手段配比和篩選找到一種最適合其生長及發酵的培養基，在原來的基礎上提高發酵產物的產量，以期達到生產最大發酵產物的目的。發酵培養基的優化在微生物產業化生產中舉足輕重，是從實驗室到工業生產的必要環節。能否設計出一個好的發酵培養基，是一個發酵產品工業化成功中非常重要的一步。

D. 為什麼要進行細菌的分離培養進行分離培養應注意哪些事項何謂純培養

1.因為你可能需要改種細菌進行研究或者為了獲得它的某種分泌物而進行培養。2.要嚴格消毒，避免雜菌污染，另外也要控制好溫度。3.純培養就是培養出來由一個菌體繁殖形成的菌落，因為是同一種菌繁殖而來所以種類單一成為純培養。

E. 人工培養微生物的意義

稀釋培養法和高通量培養法 d.pp3D 9/
在地球環境中，海洋環境中迄今可培養微生物的比例最低，僅為0.001% ～ 0.1%，這是由於海洋環境中主要是寡營養微生物，它們在人工培養時往往受到少數優勢生長的微生物的競爭作用而不能生長。為了克服該缺陷，1993 年Button從概率論的角度提出一個嶄新的方法，即稀釋培養法（Dilution culture）。該方法認為，當把海水中微生物群體稀釋至痕量時，在海水中主要存在的寡營養微生物可以不受少數幾種優勢微生物的競爭作用的干擾，因而主體寡營養微生物被培養的可能性會大大提高。隨後，Schut等的實際操作驗證了該理論的正確性。 ';/84j-3F
2002 年Connon在稀釋培養法的基礎上提出高通量培養法（High-throughput culturing，HTC）。將樣品稀釋至痕量後，採用小體積48 孔細胞培養板分離培養微生物。該方法不僅有效提高微生物的可培養性，還可在短期內監測大量的培養物，大大提高工作效率。Cho等利用該方法從太平洋近海和遠洋海水中也分離出多種新菌。Rappé 和Connon結合熒光原位雜交技術（FISH），對高通量培養法進行了改進，根據從培養板各孔中針對性地檢測SAR11 進化分支的海洋細菌的存在，在較短時間內對目標微生物進行了大量的培養。但是，稀釋培養法和高通量培養法成功的原因恰恰又是制約其進一步發展的障礙。在樣品稀釋、微生物間的不利作用被削弱的同時，有利作用也被削弱。例如，當微生物被極度稀釋、初始接種量很小時，一些微生物分泌的代謝產物也被稀釋，其他關聯微生物細胞由於缺乏這些必須的代謝產物，生長就會受到抑制；另外，缺少種間的共生關系和群體效應，很多微生物仍然不可培養。 O3!d(dY=_
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3.2 擴散盒培養法 GOW"o"S
Kaeberlein〔2〕等在分離培養潮間帶底泥中的微生物時使用一種新穎的自製培養儀器，為其起名為擴散盒（Diffusiongrowth chamber）。擴散盒由一個環狀的不銹鋼墊圈和兩側膠連的0.1μm 濾膜組成，濾膜只能允許培養環境中的化學物質通過而不能讓細胞通過。將底泥樣品置於擴散盒內的半固體培養基中，擴散盒置於魚缸底部的天然海洋底泥上，往魚缸內加入天然海水並保證擴散盒內存有一定空氣供微生物生長。培養時，使天然海水循環流動，並不斷注入新鮮的海水。培養1 周後培養基上產生大量的微型菌落，數目高達接種微生物的40%。這種培養方法能較大程度地模擬微生物所處的自然環境，由於化學物質可以自由穿過薄膜，可保證微生物群落間作用的存在，提高微生物可培養性。擴散盒法的主要不足是操作比較繁瑣。 b%nkIPA
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3.3 細胞包囊法 hNO )~rt
Zengler 等將海水和土壤樣品中的微生物先進行類似稀釋培養法的稀釋過程，然後乳化，部分微生物形成了僅含單個細胞的膠狀微滴。然後將膠狀微滴裝入層析柱內，使培養液連續通過層析柱進行流態培養。層析柱進口端用0.1μm 濾膜封住，防止細菌的進入而污染層析柱；出口端用8μm 濾膜封住，允許培養產生的細胞隨培養液流出。該方法的特點是讓微生物在開放式培養液中生長，使培養環境接近於微生物的自然生長環境，能夠很好地提高微生物可培養性，但成本較高，不利於普及使用。 & zgPN8u
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3.4 序列引導分離技術 _:5=| 2-E
序列引導分離技術（Sequence-guiding isolation）是根據微生物基因組中特定基因的特異性序列，設計引物或雜交探針，以培養物中目標序列存在和變化情況為標准，來指導對微生物最優培養條件的選擇，培養出新的微生物。Stevenson在細菌培養過程中採用了多種培養條件的組合，導致培養方案繁多復雜。為了減少分離細菌的工作量、節省時間，用PCR 作為監測手段來確定目標細菌是否得到培養。當細菌在固體培養基上長出菌落後，用緩沖液沖洗培養基表面，提取沖洗液中細菌的DNA，根據目標細菌的16S rDNA擴增情況判斷目標細菌的存在與否。繼續用PCR方法監測目標細菌直至分離得到純菌株。Béjà 等通過對尚未培養的海洋變形細菌的BAC 基因文庫進行研究，發現該類菌具有編碼視紫紅質的基因片段。視紫紅質是光營養過程中不可或缺的化學物質。據此設想增加光照可提高該菌的可培養性，而進一步的實驗結果驗證了該假設的正確性。此外，Breznak指出，分子原位雜交技術可以對推斷目標微生物的代謝方式和營養需求提供幫助，極大地節省工作時間，操作也很簡便，僅需要一種特異性的探針，顯示了在微生物培養時引入分子生物學技術作為引導的優勢和力量。

F. 生物實驗為什麼要做培養細菌，其目的是什麼

需要用細菌做實驗，了解細菌的結構和生活繁殖的一系列和對人體的
致病性
，可以發明改造相應的治病葯物來針對它的這些活動。

G. 為什麼選擇培養能夠濃縮所需的微生物

所謂的選擇培養是利用培養基或培養條件針對性地促進或抑制某類微生物的生長，從而使目標微生物數目增加的一種培養方法。

1、選擇性的促進某種微生物的生長，從而抑制其他微生物。為了從土壤中分離可分解角蛋白的細菌，我們將培養基的以家禽羽毛粉作為唯一的碳源和氮源，培養48小時後，可分解角蛋白的細菌增殖，成為主要菌群，而沒有這一能力的細菌就消失了。

2、選擇性地抑制。為了分離真菌，我們可向培養基加入鏈黴素，以抑制細菌的生長，從而使真菌的數目大大增加，細菌數目減少。

H. 為什麼要做細菌培養，葯敏實驗

引起每個人感染的細菌可能有所不同，而不同的細菌對不同的抗菌葯物敏感性，即便是不同人體感染的是同一種細菌，其對抗菌葯物的敏感性也會不同，因此，臨床上為提高使用抗菌葯物的針對性，盡快控制細菌感染，一般均應採集病人標本進行細菌培養和葯敏試驗。

I. 為什麼要培養微生物，直接看不到嗎

顯微鏡不能看到太多差別。培養成菌落，可以看到菌落形態的差別，顏色的差別，如果是真菌，還可以看到的孢子穗（囊）的形態和顏色變化。用不同的培養基，可以分辨是否產氣，對氧氣的需求反應，對某些物質的分解能力，比如產澱粉酶的會分解澱粉，產蛋白酶的會分解明膠，培養一段時間後，培養基是變酸還是變鹼等等。這些信息單靠顯微鏡是不能夠獲得的。