1. 菌落總數培養皿怎麼數,片上面又有好多小點要數嗎
很小的也要數,可藉助放大鏡。按照新GB,計算300以內的平板。
2. 如何數細菌個數
是這樣的,如果你是固體接種那很難保證,如果是液體接種的話,從原液體培養管裡面混合均勻後接種相同量的液體,細菌數就是一樣的。我看你是要計數,所以還要梯度稀釋,梯度稀釋到一定濃度後,取0.1ml打到培養基表面,用塗布器塗布均勻,倒置於培養箱培養,24小時後取出數數,簡單的辦法是,拿著油性記號筆,數過的細菌個數都點上顏色,這樣就不會重復計數了,有效計數范圍是30~300個
3. 微生物平板菌落計數法具體實驗步驟
一、目的要求
學習平板菌落計數的基本原理和方法。
二、基本原理
平板菌落計數法是根據微生物在固體培養基上所形成的一個菌落是由一個單細胞繁殖而成的現象進行的,也就是說一個菌落即代表一個單細胞。計數時,先將待測樣品作一系列稀釋,再取一定量的稀釋菌液接種到培養皿中,使其均勻分布於平皿中的培養基內,經培養後,由單個細胞生長繁殖形成菌落,統計菌落數目,即可換算出樣品中的含菌數。
這種計數法的優點是能測出樣品中的活菌數。此法常用於某些成品檢定(如殺蟲菌劑),生物製品檢定以及食品、水源的污染程度的檢定等。但平板菌落計數法的手續較繁,而且測定值常受各種因素的影響。
三、器材
大腸桿菌懸液,牛肉膏蛋白腖培養基, 1ml無菌吸管,無菌平皿,盛有4. 5 ml無菌水的試管,試管架和記號筆等。
四、操作步驟
1.編號:
取無菌平皿 9套,分別用記號筆標明10-4、10-5、10-6各3套。另取6支盛有4.5ml無菌水的試管,排列於試管架上,依次標明10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。
2.稀釋
用1ml無菌吸管精確地吸取0.5ml大腸桿菌懸液放入10-1的試管中,注意吸管尖端不要碰到液面,以免吹出時,管內液體外溢。然後仍用此吸管將管內懸液來回吸吹三次,吸時伸入管底,吹時離開水面,使其混合均勻。另取一支吸管自10-1試管吸0.5ml放入10-2試管中,吸吹三次,……其餘依次類推。整個稀釋過程如圖Ⅷ-3。
3.取樣
用3支1ml無菌吸管分別精確地吸取10-4、10-5、10-6的稀釋菌液0.2ml,對號放入編好號的無菌培養皿中。
4.倒平板
於上述盛有不同稀釋度菌液的培養皿中,倒入溶化後冷卻至45℃左右的肉膏蛋白腖瓊脂培養基約10—15ml,置水平位置,迅速旋動混勻,待凝固後,倒置於37℃溫室中培養。
5.計數
培養24小時後,取出培養皿,算出同一稀釋度三個平皿上的菌落平均數,並按下列公式進行計算:
每毫升中總活菌數=同一稀釋度三次重復的菌落平均數×稀釋倍數×5
一般選擇每個平板上長有30—300個菌落的稀釋度計算每毫升的菌數最為合適。同一稀釋度的三個重復的菌數不能相差很懸殊。由10-4、10-5、10-6三個稀釋度計算出的每毫升菌液中總活菌數也不能相差懸殊,如相差較大,表示試驗不精確。
平板菌落計數法,所選擇倒平板的稀釋度是很重要的,一般以三個稀釋度中的第二稀釋度倒平板所出現的平均菌落數在50個左右為最好。
平板菌蓓計數法的操作除上述的以外,還可用塗布平板的方法進行。二者操作基本相同,所不同的是塗布平板法是先將牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基溶化後倒平板,待凝固後編號,並於 37℃溫室中烘烤30分鍾左右,使其乾燥,然後用無菌吸管吸取 0.2ml菌液對號接種於不同稀釋度編號的培養皿中的培養基上,再用無菌玻璃刮棒將菌液在平板上塗布均勻,平放於實驗台上20—30分鍾,使菌液滲透入培養基內,然後再倒置於37℃的溫室中培養。
五、實驗報告
1.結果
將計數結果填入下表。
2.思考題
(1)為什麼溶化後的培養基要冷卻至45℃左右才能倒平板?
(2)要使平板菌落計數准確,需要掌握哪幾個關鍵?為什麼?
(3)同一種菌液用血球計數板和平板菌落計數法同時計數,所得結果是否一樣?為什麼?
(4)試比較平板菌落計數法和顯微鏡下直接計數法的優缺點。
4. 菌落總數計數時培養皿側壁上有好多菌落怎麼計數
固體培養基表面及內部的可見菌落(包括小點)均要計數,計數時可用筆在培養皿背面劃線,分若干塊計數
細菌菌落總數(CFU)的測定
一)平板菌落數的選擇
1、進行平皿菌落計數時,記下同一濃度的3個平板(或2個)的菌落總數,計算平均值,再乘以稀釋倍數即為1ml水樣中的細菌總數。
2、計數時應選擇菌落數在30~300/皿之間的稀釋倍數進行計數,若同—個稀釋度中一個平皿有較大片狀菌落生長時,則不宜採用,而應以無片狀菌落生長的平皿計數該稀釋度的平均菌落數。若片狀菌落少於平皿的一半時,而另—半中菌落分布又均勻,則可將其菌落數的2倍作為全皿的數目。在記下各平皿菌落數後,應算出同一稀釋度的平均菌數,供下—步計算時用。
(二) 稀釋度的選擇
l、首先選擇平均菌落數在30~300者進行計算,當只有一個稀釋度的平均菌落數符合此范圍時,即可用它作為平均值乘其稀釋倍數。
2、若有兩個稀釋度的平均菌落數都在30~300之間,則應按兩者的比值來決定。若其比值小於2,應報告兩者的平均數;若大於2則報告其中較小的菌落數。
3、如果所有稀釋度的平均菌落數均大於300,則應按稀釋度最高的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。
4、若所有稀釋度的平均菌落數均小於30,則應按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。
5、如果全部稀釋度的平均菌落數均不在30~300之間,則以最接近300或30的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。
6、菌落計數的報告,菌落在100以內時按實有數報告;大於100時,採用二位有效數字;在二位有效數字後面的數值,以四捨五入方法計算。為了縮短數字後面的零數,也可用10的指數來表示,在所需報告的菌落數多至無法計算時,應註明水樣的稀釋倍數。
5. 菌落總數培養皿怎麼數,片上面又有好多小點要數嗎
固體培養基表面及內部的可見菌落(包括小點)均要計數,計數時可用筆在培養皿背面劃線,分若干塊計數
細菌菌落總數(CFU)的測定
一)平板菌落數的選擇
1、進行平皿菌落計數時,記下同一濃度的3個平板(或2個)的菌落總數,計算平均值,再乘以稀釋倍數即為1ml水樣中的細菌總數。
2、計數時應選擇菌落數在30~300/皿之間的稀釋倍數進行計數,若同—個稀釋度中一個平皿有較大片狀菌落生長時,則不宜採用,而應以無片狀菌落生長的平皿計數該稀釋度的平均菌落數。若片狀菌落少於平皿的一半時,而另—半中菌落分布又均勻,則可將其菌落數的2倍作為全皿的數目。在記下各平皿菌落數後,應算出同一稀釋度的平均菌數,供下—步計算時用。
(二)
稀釋度的選擇
l、首先選擇平均菌落數在30~300者進行計算,當只有一個稀釋度的平均菌落數符合此范圍時,即可用它作為平均值乘其稀釋倍數。
2、若有兩個稀釋度的平均菌落數都在30~300之間,則應按兩者的比值來決定。若其比值小於2,應報告兩者的平均數;若大於2則報告其中較小的菌落數。
3、如果所有稀釋度的平均菌落數均大於300,則應按稀釋度最高的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。
4、若所有稀釋度的平均菌落數均小於30,則應按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。
5、如果全部稀釋度的平均菌落數均不在30~300之間,則以最接近300或30的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。
6、菌落計數的報告,菌落在100以內時按實有數報告;大於100時,採用二位有效數字;在二位有效數字後面的數值,以四捨五入方法計算。為了縮短數字後面的零數,也可用10的指數來表示,在所需報告的菌落數多至無法計算時,應註明水樣的稀釋倍數。
6. 微生物學怎麼數菌落數
網路來的~
做樣品前首先要根據食品的好壞程度來確定要做的稀釋度,不太確定時最好多做幾個稀釋度。如果細菌長彌漫成片的話就沒有任何價值。數菌落時,如菌落不太多時,可以用平均分配的方法,把平皿分四等分或六等分,數相對應的細菌數乘以2或3;菌落過多時可以分別在不同的區域選4個1平方厘米的小方塊,數四個小方塊的菌落數然後除以4再乘以64就得出菌落數了。