① 為什麼很多流動相中都會加一些磷酸
色譜過程中攜帶待測組分向前移動的物質稱為流動相。與固定相處於平衡狀態、帶動樣品向前移動的另一相。用作流動相的物質有:氣體、液體、超臨界流體等。常見的流動相主要有:乙腈-水溶液、乙腈-醋酸水溶液、甲醇-水溶液、乙腈-磷酸水溶液等。加一些磷酸的作用如下:
可以用來調節峰型。一般流動相的pH值是根據樣品的pH值來定的,要根據樣品的pKa或者pKb值來確定。磷酸就是通過調節酸鹼性來修飾峰型。可以作為離子抑制劑,有助於分離物質。
(1)生物鹼的流動相為什麼加酸擴展閱讀:
流動相應具備以下的特點:
流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉澱在柱中(或長時間保留在柱中)。流動相與樣品不產生化學反應,流動相的黏度要盡量小,以便得到好的分離效果;降低柱壓降,延長泵的使用壽命。
流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器,最好使用對紫外吸收較低的溶劑配製。流動相沸點不要太低,否則容易產生氣泡,導致實驗無法進行。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利於檢測,還可以防止流動相中的微量氧與樣品發生作用。
② 生物鹼沉澱蛋白質為什麼要先加1%的醋酸溶液
所為蛋白質沉澱,就是蛋白質變性,破壞了蛋白質的結構。這種物質主要有,酸.鹼.重金屬.有毒物質.
③ 為什麼流動相里加酸色譜峰更好看
問題很籠統!並不是所有流動相里加酸都會使峰好看。關鍵是加入酸或鹼來調節流動相的PH使流動相達到一個合適的PKa值,讓被檢物在此流動相中盡量以一種形式存在(分子或離子),從而增加柱效或者防止裂峰的出現。
下回給出這種不太有人回答的問題最好給點獎賞。那我回答會更有激情
④ 流動相中為何要加入一定量的磷酸流動相中磷酸的量對實驗結果可能產生什麼影
色譜過程中攜帶待測組分向前移動的物質稱為流動相。與固定相處於平衡狀態、帶動樣品向前移動的另一相。用作流動相的物質有:氣體、液體、超臨界流體等。常見的流動相主要有:乙腈-水溶液、乙腈-醋酸水溶液、甲醇-水溶液、乙腈-磷酸水溶液等。加一些磷酸的作用如下:
可以用來調節峰型。一般流動相的pH值是根據樣品的pH值來定的,要根據樣品的pKa或者pKb值來確定。磷酸就是通過調節酸鹼性來修飾峰型。可以作為離子抑制劑,有助於分離物質。
⑤ 液譜中流動相為什麼有時候要加酸、鹼
改變固定相吸附性質;改變流動相離子強度。
⑥ 在HPLC分析中,有時要在流動相中加入適當的鹽(碳酸銨或四烷基銨鹽)或酸,為什麼
四烷基銨鹽是離子對試劑,用來使陰離子為活性基團的葯物在C18色譜柱里有更長的保留時間
加酸就不全一樣了,醋酸磷酸主要是調流動相PH,如是長漣脂肪酸,則也起離子對試劑,用來使陽離子為活性基團的葯物在C18色譜柱里有更長的保留時間,當然還有三氟醋酸之類,不擔有微弱離子對效應,也有屏蔽C18色譜柱中硅膠上殘留羥基,防拖尾,碳酸胺好象很少用,
⑦ 生物鹼試劑沉澱蛋白質中加酸有什麼作用
生物鹼試劑本質就是酸類,它們一般均導致蛋白質變性.因為反應機理是
跟蛋白質側鏈上陽性離子(如氨基等)發生酸鹼成鹽反應,而側鏈氨基常參與蛋白質的高級結構或酶的活性中心,因此變性.(蛋白質鹽是很大的分子,沉澱是很自然的)。
大多數生物鹼在酸水或稀醇中能與某些試劑反應生成難溶於水的復鹽或分子絡合物,這些試劑稱為生物鹼沉澱試劑.
1.常用的生物鹼沉澱試劑
碘化物復鹽、重金屬鹽、大分子酸類等.常見的生物鹼沉澱試劑有碘-碘化鉀試劑、碘化鉍鉀試劑、碘化汞鉀試劑等.
2.生物鹼沉澱反應的條件
(1)反應環境
生物鹼沉澱的反應一般在稀酸水溶液中進行.
(2)凈化處理
共存的蛋白質、多肽、鞣質等成分,這些物質也能與生物鹼沉澱試劑發生沉澱的反應.為了避免其干擾,可將酸水液經鹼化後用氯仿萃取,除去水溶性干擾成分,然後用酸水從氯仿中萃取出生物鹼,以此酸水液進行沉澱反應.
3.生物鹼沉澱反應陽性結果的判斷
(1)陽性結果判斷
一般需選用三種以上的沉澱試劑進行反應,如果均有生物鹼的沉澱反應,可判斷為陽性結果.
(2)需要注意的問題
①少數生物鹼不能與一般生物鹼沉澱試劑產生沉澱反應.如麻黃鹼、咖啡鹼與多數生物鹼沉澱試劑不能發生沉澱反應.
②中葯中有些非生物鹼類物質也能與生物鹼沉澱試劑產生沉澱的應,如蛋白質、多肽、氨基酸、鞣質等.
4.生物鹼沉澱反應的應用
(1)檢識反應
(2)指導生物鹼的提取分離
(3)生物鹼的分離純化
(4)薄層或紙層色譜的顯色劑
⑧ 液質聯用中流動相加酸,或加鹼的意義是什麼
自20 世紀70 年代初,人們開始致力於液-質聯用介面技術的研究。在開始的20 年中處於緩慢的發展階段,研製出了許多種聯用介面,但均沒有應用於商業化生產[1] 。直到大氣壓離子化(atmospheric-pressure ionization, API)介面技術的問世,液-質聯用才得到迅猛發展,廣泛應用於實驗室內分析和應用領域。
液-質聯用介面技術主要是沿著三個分支發展的:
(1)流動相進入質譜直接離子化,形成了連續流動快原子轟擊(continuous-flow fast atom bombarment, CFFAB)技術等;
(2)流動相霧化後除去溶劑,分析物蒸發後再離子化,形成了「傳送帶式」介面(moving-belt interface)和離子束介面(particle-beam interface)等;
(3)流動相霧化後形成的小液滴解溶劑化,氣相離子化或者離子蒸發後再離子化,形成了熱噴霧介面(thermo spray interface)、大氣壓化學離子化(atmospheric pressure chemical ionization,APCI)和電噴霧離子化(electrospray ionization, ESI)技術等。有關液相質譜的介面技術和LC-MS 技術的發展,Niessen 曾經進行了較為詳細的綜述。
目前應用最廣泛的離子源有電噴霧電離源和大氣壓化學電離源。其顯著優勢有:可將質荷比降低到各種不同類型的質量分析器都能檢測的程度,在帶電狀態進行檢測從而計算離子的真實分子量,可以生成高度帶電且不發生碎裂的離子,同時,對於分子離子的同位素峰也可確定其分子量和帶電數。大氣壓化學離子化(APCI)技術與ESI源的發展基本上是同步的,其離子化過程主要是藉助於電暈放電啟動一系列氣相反應來完成,整個電離過程是在大氣壓條件下完成的。ESI和APCI的共同點是離子化效率高,從而顯著增強分析的靈敏度和穩定性,大多與離子阱質譜儀和三重四極桿質量分析器聯用。