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生物素和親和素如何作用

發布時間:2022-09-19 00:10:44

❶ 生物素是什麼東西

是70年代末發展起來的一種新型生物反應放大系統。隨著各種生物素衍生物的問世,BAS很快被廣泛應用於醫學各領域。

近年大量研究證實,生物素—親和素系統幾乎可與目前研究成功的各種標記物結合。生物素與親和素之間高親合力的牢固結合以及多級放大效應,使BAS免疫標記和有關示蹤分析更加靈敏。

原理

生物素(biotin,B)廣泛分布於動、植物組織中,常從含量較高的卵黃和肝組織中提取,分子量244.31Da.生物素分子有兩個環狀結構(如圖1),其中Ⅰ環為咪唑酮環,是與親和素結合的主要部位;II環為噻吩環,C2上有一戊酸側鏈。

其末端羧基是結合抗體和其他生物大分子的唯一結構,經化學修飾後,生物素可成為帶有多種活性基團的衍生物——活化生物素。活化生物素可以在蛋白質交聯劑的介導下,與已知的幾乎所有生物大分子偶聯,包括蛋白質,核酸,多糖,脂類等。

❷ 親和素的含義

親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,由於每個分子由4個亞基組成,因此可以和4個生物素分子親密結合。在免疫機制有起重要作用!
生物素在人體內是不能單獨起作用的,它需要與其他酶、氨基酸脂肪衍生物等結合來綜合調控。生物素結合常數即表示了它與其他有機分子結合能力的大小。

❸ 有誰用生物素和親和素的

生物素(biotin,B)廣泛分布於動、植物組織中,常從含量較高的卵黃和肝組織中提取,分子量244.31Da.生物素分子有兩個環狀結構(如圖),其中Ⅰ環為咪唑酮環,是與親和素結合的主要部位;II環為噻吩環,C2上有一戊酸側鏈,其末端羧基是結合抗體和其他生物大分子的惟一結構,經化學修飾後,生物素可成為帶有多種活性基團的衍生物——活化生物素。活化生物素可以在蛋白質交聯劑的介導下,與已知的幾乎所有生物大分子偶聯,包括蛋白質,核酸,多糖,脂類等。
親和素(avidin,AV)亦稱抗生物素蛋白、卵白素,是從卵白蛋白中提取的一種由4個相同亞基組成的鹼性糖蛋白,分子量為68kD,等電點pI=10.5;耐熱並耐受多種蛋白水解酶的作用.尤其是與生物素結合後,穩定性更好。生物素與親和素間的作用是目前已知強度最高的非共價作用,親和常數(K)為1015mol/L,比抗原與抗體間的親和力(K=10.5~11L/mol)至少高1萬倍。並且,二者的結合穩定性好專一性強,不受試劑濃度,PH環境,抑或蛋白變性劑等有機溶劑影響。由於每個親和素能結合4個分子的生物素,這一特點可以用於構建一個多層次信號放大系統。因此,BAS即可用於微量抗原、抗體及受體的定量、定性檢測及定位觀察研究,亦可製成親和介質用於上述各類反應體系中反應物的分離、純化。

❹ 如何破壞生物素和鏈霉親和素的結合

如何破壞生物素和鏈霉親和素的結合
生物素(biotin,B)廣泛分布於動、植物組織中,常從含量較高的卵黃和肝組織中提取,分子量244.31Da.生物素分子有兩個環狀結構(如圖),其中Ⅰ環為咪唑酮環,是與親和素結合的主要部位;II環為噻吩環,C2上有一戊酸側鏈,其末端羧基是結合抗體和其他生物大分子的惟一結構,經化學修飾後,生物素可成為帶有多種活性基團的衍生物——活化生物素。活化生物素可以在蛋白質交聯劑的介導下,與已知的幾乎所有生物大分子偶聯,包括蛋白質,核酸,多糖,脂類等。
親和素(avidin,AV)亦稱抗生物素蛋白、卵白素,是從卵白蛋白中提取的一種由4個相同亞基組成的鹼性糖蛋白,分子量為68kD,等電點pI=10.5;耐熱並耐受多種蛋白水解酶的作用.尤其是與生物素結合後,穩定性更好。生物素與親和素間的作用是目前已知強度最高的非共價作用,親和常數(K)為1015mol/L,比抗原與抗體間的親和力(K=10.5~11L/mol)至少高1萬倍。並且,二者的結合穩定性好專一性強,不受試劑濃度,PH環境,抑或蛋白變性劑等有機溶劑影響。由於每個親和素能結合4個分子的生物素,這一特點可以用於構建一個多層次信號放大系統。因此,BAS即可用於微量抗原、抗體及受體的定量、定性檢測及定位觀察研究,亦可製成親和介質用於上述各類反應體系中反應物的分離、純化。

❺ 生物素是什麼意思及作用

一、生物素的定義:生物素又稱維生素H、輔酶R,是水溶性維生素,也屬於維生素B族,B7。它是合成維生素C的必要物質,是脂肪和蛋白質正常代謝不可或缺的物質。是一種維持人體自然生長、發育和正常人體機能健康必要的營養素。

生物素是20世紀30年代在研究酵母生長因子和根瘤菌的生長與呼吸促進因子時,從肝中發現的一種可以防治由於餵食生雞蛋蛋白誘導的大鼠脫毛和皮膚損傷的因子。

二、生物素的用途:生物素,即人們所熟知的維生素H,它能使身體將食物轉化為自身能量。生物素有利於細胞的健康和再生。糖尿病患者可以通過生物素改善血糖的調節。頭發和指甲的健康也需要生物素。

(1)保健用途

糖尿病。補充生物素,生物素通過改善胰島素和血糖的使用幫助改善血糖的調節。頭發和指甲。補充生物素可以修復薄弱爆裂的腳趾甲和手指甲,改善頭發的健康。生物素也可以修復那些由於生物素水平偏低引起過早的灰白頭發。

(2)美容用途

生物素具有出色的美容作用,可保持皮膚嫩白、指甲光滑等。這個發現也為生物素產品開拓了一大新葯業用途。美容化妝品行業是國際大產業之一,美容化妝品的國際市場總銷售額遠遠高於葯品的銷售額,生物素在美膚、美甲(指甲)及美發上的新應用必將導致葯用級生物素銷量的上升。

(3)科研用途

生物素可以用作核酸探針的標記物,它能與核酸分子的UTP或dUTP 5『位上的C相結合,並可與親和素結合而被檢測。在檢測的過程中,生物素只用作固定連接,而不用作信號檢測。

(5)生物素和親和素如何作用擴展閱讀:

生物素的食物來源:

(1)在牛奶、牛肝、蛋黃、動物腎臟、草莓、柚子、葡萄等水果、瘦肉、糙米、啤酒、小麥中都含有生物素。在復合維生素B和多種維生素的制劑中,通常都含有維生素H。

(2)富含該維生素的美食:芥末雙脆、 蟹肉西蘭花、芥茉菠菜、魚香腰花、油燜鱔魚、素炒三絲、蛋黃南瓜、芒果柳橙蘋果汁、胡蘿卜燉羊肉、松花淡菜粥、清燉蘿卜牛肉、銀杞明目湯、雞肝胡蘿卜粥、牛肉蔬

(3)菜濃湯、芒果葡萄柚汁、芒果柳橙蘋果汁、木瓜生薑汁、蘆薈檸檬汁、甜橙檸檬汁、杏獼猴桃汁。

❻ 親和素的介紹

親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個分子由4個亞基組成,可以和4個生物素分子親密結合。現在使用更多的是從鏈黴菌中提取的鏈親和素(strepavidin)。生物素(biotin)又稱維生素H,分子量244.31,存在於蛋黃中。用化學方法製成的衍生物,生物素-羥基琥珀亞胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產物。親和素與生物素的結合,雖不屬免疫反應,但特異性強,親和力大,兩者一經結合就極為穩定。由於1個親和素分子有4個生物素分子的結合位置,可以連接更多的生物素化的分子,形成一種類似晶格的復合體。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯起來,就可大提高ELISA的敏感度。

❼ 親和素和生物素為什麼親和力最高

生物素容易與蛋白質和核酸類等生物大分子結合,形成的生物素衍生物,不僅保持了大分子物質的原有生物活性,而且比恬度高,具多價性。此外,每個親和素分子有四個生物素結合部位,可同時以多價形式結合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此,BAS具有多級放大作用,使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。

特異性
親和素與生物素間的結合具有極高的親和力,其反應呈高度專一性。因此,BAS的多層次放大作用在提高靈敏度的同時,並不增加非特異性干擾。而且,BAS結合特性不會因反應試劑的高度稀釋而受影響,使其在實際應用中可最大限度地降低反應試劑的非特異作用。

穩定性
親和素結合生物素的親和常數可為抗原-抗體反應的百萬倍,二者結合形成復合物的解離常數很小,呈不可逆反應性;而且酸、鹼、變性劑、蛋白溶解酶以及有機溶劑均不影響其結合。因此,BAS在實際應用中,產物的穩定性高,從而可降低操作誤差,提高測定的精確度。

普適性
生物素-結合素系統的多功能性還能提供一套統一的研究方法。例如對於某待測分子,已經得到了對於該分子的生物素標記抗原,那麼配合結合親和素的膠體金可以在電鏡下觀測,配合結合熒游標記的親和素可以使用流式細胞儀篩選,配合連接到酶的親和素可以進行ELISA等免疫組化實驗。

❽ 生物素——親合素原抗在實際應用中有巨大優勢主要體現在哪些方面

主要表現在以下幾個方面。

1放射免疫測定中的應用
BAS主要與免疫放射分析(IRMA)檢測體系偶聯,用於對終反應的放大(BA法):先將針對不同抗原決定簇的固相抗體和生物素化抗體與抗原(標准抗原和待測抗體)同時反應,在固相載體表面形成雙抗體夾心免疫復合物;再加入125I標記的親和素(或鏈霉親和素)與復合物中的生物素結合,最終使反應信號放大,進一步提高IRMA的靈敏度。如該系統用於測定促甲狀腺激素(TSH)時,由於方法的高靈敏性,即可將甲亢患者降低的TSH水平與正常值低限有效地予以區別。此外,BAS也可用於IRMA反應後B、F成分的分離:先將生物素化的McAb和放射性核素標記的McAb與抗原的不同抗原決定簇結合,反應平衡後,加入表面偶聯有親和素的聚苯乙烯珠與免疫復合物中的生物素連接成固相終產物。該法的優點是克服了其他IRMA法需多次離心的麻煩.待測復合物與固相結合更牢固,操作更簡便。
2在分子生物學中的應用
BAS在分子生物學領域中的應用日漸增多,目前主要集中在以生物素標記核酸探針進行的定位檢測,用BAS制備的親和吸附劑進行基因的分離純化以及將免疫測定技術與PCR結合建立免疫—PCR(immuno-PCR)用於抗原的檢測等三方面。

❾ 生物素-親合素系統的BAS系統的應用

BAS-ELISA是在常規ELISA原理的基礎上,結合生物素(B)與親和素(A)間的高度放大作用,而建立的一種檢測系統。生物素很易與蛋白質(如抗體等)以共價鍵結合。這樣,結合了酶的親和素分子與結合有特異性抗體的生物素分子產生反應,既起到了多級放大作用,又由於酶在遇到相應底物時的催化作用而呈色,達到檢測未知抗原(或抗體)分子的目的。
BAS用於檢測的基本方法可分為三大類。
第一類是標記親和素連接生物化大分子反應體系,稱BA法,或標記親和素生物素法(LAB)。

第二類以親和素兩端分別連接生物素化大分子反應體系和標記生物素,稱為橋聯親和素-生物素法(BRAB)。
第三類是將親和素與酶標生物素共溫形成親和素-生物素-過氧化物酶復合物,再與生物素化的抗抗體接觸時,將抗原-抗體反應體系與ABC標記體系連成一體,稱為ABC法。這一方法可以將微量抗原的信號放大成千上萬倍,以便於檢測。 親和層析是將具有特殊結構的親和分子製成固相吸附劑放置在層析柱中,當要被分離的蛋白混合液通過層析柱時,與吸附劑具有親和能力的蛋白質就會被吸附而滯留在層析柱中。那些沒有親和力的蛋白質由於不被吸附,直接流出,從而與被分離的蛋白質分開,然後選用適當的洗脫液, 改變結合條件將被結合的蛋白質洗脫下來。
生物素-親和素系統可以與親和層析的方法結合,大大提高純化蛋白質的純度,或者為已知配體尋找受體。步驟是首先將生物素共價結合到配體蛋白上,再將生物素化後的配體蛋白加入含有受體蛋白的混合物,然後將此混合物通過預先固定了親和素的層析柱,這時配體受體復合物就通過生物素-親和素系統停留在層析柱上,最後通過選擇性洗脫獲得此受體配體蛋白復合物或者僅有受體。這一方法被廣泛運用於葯物研發行業,當人們發現某種葯物分子具有療效但是又不清楚它具體作用於哪種蛋白質時,可以將其生物素化然後把靶蛋白從成千上萬種蛋白質中「抓」出來。
生物素-親和素系統還可以用相似的方法分離DNA.方法是在DNA探針的一端掛上生物素,然後用其獲得目的DNA片段,再利用固定化的親和素回收這些DNA。
傳統的基因探針是由帶放射性的磷酸鹼基合成的,我們可以用被生物素標記的磷酸鹼基合成基因探針,避免了實驗過程中放射性物質可能造成的傷害。

❿ 生物素-親合素系統的原理

生物素(biotin,B)廣泛分布於動、植物組織中,常從含量較高的卵黃和肝組織中提取,分子量244.31Da.生物素分子有兩個環狀結構(如圖),其中Ⅰ環為咪唑酮環,是與親和素結合的主要部位;II環為噻吩環,C2上有一戊酸側鏈,其末端羧基是結合抗體和其他生物大分子的惟一結構,經化學修飾後,生物素可成為帶有多種活性基團的衍生物——活化生物素。活化生物素可以在蛋白質交聯劑的介導下,與已知的幾乎所有生物大分子偶聯,包括蛋白質,核酸,多糖,脂類等。
親和素(avidin,AV)亦稱抗生物素蛋白、卵白素,是從卵白蛋白中提取的一種由4個相同亞基組成的鹼性糖蛋白,分子量為68kD,等電點pI=10.5;耐熱並耐受多種蛋白水解酶的作用.尤其是與生物素結合後,穩定性更好。生物素與親和素間的作用是目前已知強度最高的非共價作用,親和常數(K)為1015mol/L,比抗原與抗體間的親和力(K=10.5~11L/mol)至少高1萬倍。並且,二者的結合穩定性好專一性強,不受試劑濃度,PH環境,抑或蛋白變性劑等有機溶劑影響。由於每個親和素能結合4個分子的生物素,這一特點可以用於構建一個多層次信號放大系統。因此,BAS即可用於微量抗原、抗體及受體的定量、定性檢測及定位觀察研究,亦可製成親和介質用於上述各類反應體系中反應物的分離、純化。
親和素由於帶有一個糖鏈側鏈,導致容易和細胞表面的多糖發生非特異性親和。因此,鏈霉親和素被開發出來。
鏈霉親和素(streptavidin,SA)是由鏈黴菌streptomyces avidinii分泌的一種蛋白質,分子量為65kD。鏈霉親和素分子由4條相同的肽鏈組成,其中每條肽鏈都能結合一個生物素,並且不帶任何糖基,因此與親和素一樣,一個鏈霉親和素分子也能結合4個生物素分子,二者親和常數(K)亦為1015mol/L。鏈霉親和素的適用范圍比親和素更為廣泛。

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