Ⅰ 如何對微生物菌種進行活化
有同學已經說的很專業了,我就給你說些簡單實用的。不知道你出於何種目的要進行活化。如果你是用凍存管保存的菌株進行活化,取出2顆小珠放在適宜的固體培養基上,合上蓋讓小珠在平皿上滾動,適宜條件培養就可以了。長出一個菌落,你再繁殖就可以了。如果你是凍乾粉的菌種,准備適宜的液體培養基,少少一點點粉末接種就可以了,根據此菌種一般液體培養所需時間,大概在36-48h,你還可以在觀察到液體渾濁、試管底部有沉澱時(沉澱者也可能為原本死亡的細菌),取100微升液體塗抹在固體培養基上。
一般的話,復甦的菌種需要重復幾次復壯。
Ⅱ 如何進行生物大分子的分離提純
用凝膠過濾層析法
是最好的方法之一。
可以分離不同大小的物質例如蛋白質混合物、膠體混合物等等。
大分子物質先出來,小分子物質後出來。
Ⅲ 如何進行微生物活化
樓上太絕對了。
除了平板你還可以用液體培養基活化,按照1%的接種量接種到新鮮液體培養基。
如果是甘油管的活化,建議還是液體活化。
保溫溫度和時間根據不同的菌種自己調整。
Ⅳ 如何純化微生物
你可以採取以下兩種方法:
1.若是你不知道你所要純化的微生物的特徵,最簡單的不知道它的菌落特徵和形態大小,那現根據你要分離菌的特性,找適合的初篩培養基,找到你要純化的菌。如纖維素菌,你在培養基中加纖維素粉或CMC-Na作碳源,這樣就可以帥選出分解纖維素的菌。然後再用下面的方法繼續純化。
2.若你知道目標菌的形態,可以直接挑混合菌劃平板,直到長出當個菌落,並且在鏡下沒有雜菌即可;或者挑菌稀釋塗布得到當個菌落也行。
若有不明白可以問我!
Ⅳ EM生物菌劑如何自行培育
EM有效微生物菌劑是一種新型的復合微生物制劑,呈棕色半透明狀液體,PH值在3.5~4.5之間,由光合菌,乳酸菌,酵母菌,放線菌群,醋酸桿菌等5個科10個屬80多種厭氧性或嫌氧性正常微生物復合培養而成,不含任何化學有害物質,無毒副作用,不污染環境。土著菌就是em菌, 土著菌就生活在我們周圍的自然環境中,走進闊葉樹林或竹林,在落葉且腐殖質多地方,扒開樹葉或雜草就可以看到細絲壯白色菌落,這就是有益的土著微生物。
土著微生物是多種有益微生物的混合群,土著微生物按好嫌氣性分有好氣菌、嫌氣菌;按菌種分有酵母菌、麴黴菌、放線菌、乳酸菌、芽孢菌等。
可以在不同的季節、不同的地點採集不同的菌種。採集到的原始菌種應放在室內陰涼、乾燥處保存。
土著菌採集方法 :
1、採集地方:可以在當地山上落葉聚集較多的山谷、樹林中採集。
2、具體辦法:把做的稍微有一點硬的大米飯(1kg~1.5kg),裝入用干凈杉木板做的小木箱(25cm×20cm×10cm)約三分之一,大米飯上面蓋上宣紙,封好口,將其埋在當地山上落葉聚集較多的山谷樹林中。為防止野生動物糟蹋,木箱最好罩上鐵絲網。夏季經三~五天,春秋經六~七天,周邊的土著微生物潛入到米飯中,在米飯上形成白色菌落(放置時間稍長時會形成各種顏色菌落,雖然也能利用,但最好還是用白色菌落)。
3、擴陪方法:把變的稀軟狀態的米飯取回後裝入壇子里,土著菌採集成功後摻入原材料量1/3左右的紅糖,將其混合均勻(數量按壇子容量的三分之一),把變的稀軟狀態的米飯裝入壇子里,蓋上宣紙,用線繩系好口,放置在溫度18℃左右地方。大約放置7天左右,就會變成濃稠液體狀態,飯粒多少會有些殘留,但不礙事。簡單過濾後就是土著微生物菌種原液。 用的時候直接稀釋後和EM菌種原液一起使用!
2)水田土著微生物採集方法
秋天,在剛收割後的稻茬上有白色液體溢出。把裝好米飯並蓋宣紙的木箱倒扣在稻茬上,這樣稻茬穿透宣紙接觸米飯,很容易採集到稻草菌。約7天後,木箱的米飯變成粉紅色稀泥狀態,同(1)方法,米飯與紅糖以2:1比例拌勻裝壇子、蓋宣紙、系繩。5-7後內容物變成原液(原原種)。
以下步驟適用於菌種生產單位實驗室!普通用戶可以不做!
4、提純復壯: 有條件的可以在實驗室進行
一般情況下,采來的樣品可以直接進行分離,但是如果樣品中我們所需要的菌類含量並不很多,而另一些微生物卻大量存在。此時,為了容易分離到所需要的菌種,讓無關的微生物至少是在數量上不要增加,即設法增加所要菌種的數量,以增加分離的幾率。可以通過選擇性的配製培養基(如營養成分、添加抑制劑等),選擇一定的培養條件(如培養溫度、培養基酸鹼度等)來控制。具體方法是根據微生物利用碳源的特點,可選定糖、澱粉、纖維素,或者石油等,以其中的一種為唯一碳源,那麼只有利用這一碳源的微生物才能大量正常生長,而其他微生物就可能死亡或淘汰。對G一菌有選擇的培養基(如結晶紫營養培養基、紅—紫膽汁瓊脂、煌綠膽汁瓊脂等)通常含有5%~10%的天然提取物。在分離細菌時,培養基中添加濃度一般為50μg/m1的抗真菌劑(如放線菌酮和制黴素),可以抑制真菌的生長。在分離放線菌時,通常於培養基中加入1~5m1天然浸出汁(植物、岩石、有機混合腐質等的浸出汁) 作為最初分離的促進因子,由此可以分離出更多不同類型的放線菌類型;放線菌還可以十分有效地利用低濃度的底物和復雜底物(如幾丁質),因此,大多數放線菌的分離培養是在貧脊或復雜底物的瓊脂平板上進行的,而不是在含豐富營養的生長培養基上分離的;在放線菌分離瓊脂中通常加入抗真菌劑制黴菌素或放線菌酮,以抑制真菌的繁殖;此外,為了對某些特殊種類的放線菌進行富集和分離,可選擇性地添加一些抗生素(如新生黴素)。在分離真菌時,利用低碳/氮比的培養基可使真菌生長菌落分散,利於計數、分離和簽定;在分離培養基中加入一定的抗生素如氯黴素、四環素、卡那黴素、青黴素、鏈黴素等即可有效地抑制細菌生長及其菌落形成;抑制細菌的另外一些方法有:在使用平皿之前,將平皿先乾燥3~4天;降低培養基的pH值或在無法降低pH時,加入1:30000玫瑰紅。這樣有利於下階段的純種分離。
通過增殖培養,樣品中的微生物還是處於混雜生長狀態。因此還必須分離,純化。在這一步,增殖培養的選擇性控制條件還應進一步應用,而且要控製得細一點,好一點。同時必須進行純種分離,常用的分離方法有稀釋分離法、劃線分離法和組織分離法。稀釋分離法的基本方法是將樣品進行適當稀釋,然後將稀釋液塗布於培養基平板上進行培養,待長出獨立的單個菌落,進行挑選分離。劃線分離法要首先倒培養基平板,然後用接種針(接種環)挑取樣品,在平板上劃線。劃線方法可用分步劃線法或一次劃線法,無論用哪種方法,基本原則是確保培養出單個菌落。組織分離法主要用於食用菌菌種或某些植物病原菌的分離。分離時,首先用10%漂白粉或0.1%升汞液對植物或器官組織進行表面消毒,用無菌水洗滌數次後,移植到培養皿中的培養基上,於適宜溫度培養數天後,可見微生物向組織塊周圍擴展生長。經菌落特徵和細胞特徵觀察確認後,即可由菌落邊緣挑取部分菌種進行移接斜面培養。
對於有些微生物如毛霉、根霉等在分離時,由於其菌絲的蔓延性,極易生長成片,很難挑取單菌落。常在培養基中添加0.1%的去氧膽酸鈉或在察氏培養基中添加0.1%的山梨糖及0.01%的蔗糖,利於單菌落的分離。
經過分離培養,在平板上出現很多單個菌落,通過菌落形態觀察,選出所需菌落,然後取菌落的一半進行菌種鑒定,對於符合目的菌特性的菌落,可將之轉移到試管斜面純培養。這種從自然界中分離得到的純種稱為野生型菌株,它只是篩選的第一步,所得菌種是否具有生產上的實用價值,能否作為生產菌株,還必須採用與生產相近的培養基和培養條件,通過三角瓶的容量進行小型發酵試驗,以求得適合於工業生產用菌種。這一步是採用與生產相近的培養基和培養條件,通過三角瓶的容量進行小型發酵試驗,以求得適合於工業生產用菌種。如果此野生型菌株產量偏低,達不到工業生產的要求,可以留之作為菌種選育的出發菌株。
活性好的土著菌可以用由人工培養、擴陪成純度高的微生物菌群!
土著菌發酵床養豬技術、養雞技術是利用自然環境中的生物資源,採集土壤中的多種有益微生物進行培養擴繁,使其形成有相當活力的微生物母種,再按一定比例將微生物母種與鋸木屑等輔料和活性劑混合發酵形成有機墊料。讓豬、雞從小到大都生活在這種有機墊料上,豬、雞的排泄物被有機墊料里的微生物迅速降解、消化,不需進行人工處理,達到零排放。
Ⅵ 如何對微生物菌種進行活化
菌種活化就是將保藏狀態的菌種放入適宜的培養基中培養,逐級擴大培養是為了得到純而壯的培養物,即獲得活力旺盛的、接種數量足夠的培養物。菌種發酵有一般需要2-3代的復壯過程,因為保存時的條件往往和培養時的條件不相同,所以要活化,讓菌種逐漸適應培養環境
要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法。目前國際國內常用的菌種保存方法包括:定期移植法、液體石蠟法、沙土管法、真空冷凍乾燥法、80℃ 冰箱凍結法、液氮超低溫凍結法。
對於不同的保存方式活化的方式也不同:
1 定期移植法的菌種復甦較簡單,直接轉接即可;
2 液體石蠟法保存的菌種在復甦時,挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上,生長繁殖後,再重新轉接一次;
3 沙土管法保存菌種在復甦時,在無菌條件下打開沙土管,取部分沙土粒於適宜的斜面培養基上,長出菌落後再轉接一次。或取沙土粒於適宜的液體培養基中,增殖培養後再轉接斜面;
4 真空冷凍乾燥法保存菌種在復甦時先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,將安瓿管頂部燒熱, 用無菌棉簽沾冷水,在頂部擦一圈,頂部出現裂紋,用挫刀或鑷子頸部輕叩一下,敲下已開裂的安瓿管的頂端,用無菌水或培養液溶解菌塊,使用無菌吸管移入新鮮培養基上,進行適溫培養;
5 -80℃ 冰箱凍結法保存菌種復甦時,從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置38℃-40℃水浴中快速復甦並適當快速搖動。直到內部結冰全部溶解為止,約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內容物移至適宜的培養基上進行培養
6 液氮超低溫凍結法保存菌種復甦與-80℃ 冰箱凍結法保存菌種復甦相似,從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置在38℃-40℃水浴中快速復甦並適當搖動。直到內部結冰全部溶解為止,一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內容物移至適宜的培養基上進行培養。
總結一下菌種活化需要以下幾個步驟:
第一配置菌種適宜生長的培養基
第二將菌種從保藏狀態恢復到室溫狀態,比如將冷凍的菌種解凍
第三將通過操作將保藏的菌種接種到培養基中培養,此步驟稱為菌種復壯
第四步挑選培養基茁壯的菌落,挑選其中部分菌落接種到新的培養基中培養,重復此步驟2-3次,從而得到生長良好的菌落
經過這四個步驟就到達將菌種從保藏狀態活化的目的
希望對你有幫助!
Ⅶ 如何從自然界中分離純化自己想要的目的微生物
這個過程叫做「篩選」。
首先確定你所要篩選的目的微生物,並設計好「篩子」。以纖維素酶產生菌的篩選為例。
先找可能存在此類微生物的環境,如森林裡的枯枝爛葉和腐質土。採好樣品,拿回實驗室,首先進行擴大培養。就是把樣品中所有的微生物都培養增殖。一般就用全營養培養基。
培養液稀釋不同倍數後,做平板單細胞培養,這時就要用到「篩子」了。對於纖維素酶產生菌,篩子可選用可溶性纖維素。平板培養時,用可溶性纖維素作唯一碳源,不產生纖維素酶的微生物就不能生長(或生長極弱),把生長良好的微生物挑選出來,再進行擴大培養,再用纖維素唯一碳源的培養基進行篩選,並挑選生長優勢菌落,重復以上步驟(可以多挑選幾支進行對比選擇)。幾次以後,用纖維素粉(不溶性的)做唯一碳源的培養基,進行平板培養,纖維素酶產生量越大、活性越高,產生的透明圈直徑就越大。用這種辦法可能對酶產生量大、活性高的菌種做進一步篩選。
其它目的微生物的篩選步驟也差不多。
關鍵是采樣地點的選擇和「篩子」的設計。
希望對你有用。
Ⅷ EM水是什麼
EM是由乳酸菌群、酵母菌群、光合菌群等五大類微生物中的多種有益微生物組成有效微生物群。是由日本琉球大學比嘉照夫教授經過多年研究取得的科技成果。在此基礎上,徐會連博士(可以在網路上,搜徐會連,了解他的事跡和科研成果)等生物學家又進行了更深入的研究,通過對EM菌群的提純復壯,分離優勢菌株,經科學加工而製成EM益生菌多效活性液系列產品。EM益生多效活性液的面世,對發展有機農業和高效農業,加快我國由傳統農業與國際農業接軌,必將起到巨大的促進作用。
Ⅸ 如何純化微生物
1選擇適合於待分離微生物的生長條件,如營養,酸鹼度,溫度和氧等要求或加入某種抑製造成只剩於該微生物生長,而抑制其他微生物生長的環境,從而淘汰一些不需要的微生物
2微生物在固體培養基上生長形成的單個菌落可以是由一個細胞繁殖而成的集合體
Ⅹ 水稻種子怎麼提純,要注意什麼
優良水稻品種經多年種植就會混雜、退化,導致水稻產量降低,品質變劣。因此,在種植過程中需要不斷地進行提純復壯,保持水稻品種的純度和種性,才能持續高產穩產。現介紹水稻品種提純復壯關鍵技術,供稻農自選自留自用水稻品種時參考。
1.防混雜
為了保持良種的種性,在水稻生產栽培和良種繁殖的過程中,應嚴防機械混雜和生物混雜,注意去雜去劣,延緩良種使用年限。一般混雜退化的種子減產5%-10%以上,所以提醒稻農自己選留稻種防止混雜是重要的一環。
2.片選法
片選法可以在品種純度較高的水稻生產田或種子田進行。片選田塊越早確定越好,以便注意防止混雜和加強田間管理,最晚在出穗後成熟前,選擇整齊一致無病蟲的田塊,進行去雜去劣,拔除病株、劣株,成熟後單收、單打、單藏,作為下年用種。
3.穗選法
穗選法是一種簡單有效的水稻品種提純復壯方法。穗選一般於水稻成熟時收割前,在品種純度較高、栽培管理水平較好的田塊進行。根據品種特徵特性,選擇典型穗,要防止見大穗就選的傾向。將選出的稻穗紮成把、掛起風干,經脫谷後,妥善保管,留作下年種子田用。
4.擴大繁殖
片選、穗選的種子若不夠生產用種應擴大繁殖,選擇條件較好的田塊作種子田,一個品種應連片種植,附近的田塊也應種植同一品種,以減少天然雜交和機械混雜。生育期間進行去雜去劣,加強田間管理,秋後單收單打,作為下年生產用種。