導航:首頁 > 生物信息 > 如何測土壤的微生物數量

如何測土壤的微生物數量

發布時間:2022-09-25 12:39:06

『壹』 如何測定土壤中特定細菌的數量

顯微鏡直接計數法和稀釋平板計數法是測定微生物數量的常用方法。直接計數法中常用的是顯微鏡直接計數法,這種方法是先將待測樣品製成懸液,然後取一定量的懸液放在顯微鏡下進行計數(圖1-3-1)。根據在顯微鏡下觀察到的微生物數目來計算出單位體積內的微生物總數。直接計數法所需設備簡單,可迅速得到結果,而且在計數的同時能觀察到所研究微生物的形態特徵,其缺點是難以計數微小的細菌。這種方法一般適用於純培養懸浮液中各種單細胞菌體的計數。間接計數法最常用的是稀釋平板計數法,它是根據微生物的培養特徵而設計的計數方法。這種方法在樣品中含菌數較少的情形下,也可以完成計數。應用稀釋平板計數法計數時,需要將待測樣品配製成均勻的系列稀釋液,盡量使樣品中的微生物細胞分散開。再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中,使其均勻分布於平板中的培養基內;或是將一定量的稀釋液,與溶化後冷卻至45℃左右的瓊脂培養基混合,傾入無菌培養皿中,搖勻、靜置待凝。經過培養後,就由單個微生物生長繁殖形成菌落,這樣的一個菌落就代表著一個微生物個體。統計培養基中出現的菌落數,即可推算出檢測樣品中的活菌數。FOR EXAMPLE:] 土壤中好氣性細菌的計數土壤中生活的微生物種類和數量是極其豐富的,這些數量眾多的微生物對提高土壤肥力有重要作用。因此,測定土壤中的含菌量可以作為判定土壤肥力的一個重要指標。材料器具土壤樣品;牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基(附錄二)、無菌水;培養皿、移液管、天平、錐形瓶、試管、酒精燈、恆溫培養箱、搖床等。活動程序1.制備土壤稀釋液取土壤表層5~10 cm 處的土樣。准確稱取1 g 土樣,放入盛有99 mL 無菌水的錐形瓶(250 mL,放有小玻璃珠)中,用手或搖床振盪20 min,即製成102 倍的稀釋液。用1 mL無菌移液管,吸取10 2倍稀釋液0.5 mL,移入裝有4.5 mL無菌水的試管中,配製成103 倍稀釋液。用同樣的方法可製成稀釋倍數為104、105、106 的系列稀釋菌液(圖1-3-2)。圖移液時,要將移液管插入液面,吹吸3 次,每次吸上的液面要高於前一次,讓菌液混合均勻並減少稀釋中的誤差。每配一個稀釋度要換用一支移液管。2.取樣及倒平板將無菌培養皿編號,依次為104、105、106,每一號碼設置三個重復。用無菌移液管三支,分別吸取稀釋倍數為104、105、106的土壤稀釋液各0.2 mL,注入到相應編號的培養皿中(每個稀釋倍數各三個培養皿)。將已滅菌牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基溶化,待冷卻至45~50 ℃左右,傾入到無菌培養皿中,每皿約15 mL,輕輕轉動培養皿,使土壤稀釋液與培養基混合均勻。3.培養將上述接種好的平板培養基冷卻後,倒置放入28~30 ℃的恆溫培養箱中培養24~36 h,直至長出菌落為止。4. 觀察記錄將實驗中得到的菌落數填入表1-3-1。結果分析1.選取具有合適菌落數的稀釋倍數並計數。在計算結果時,從接種的3 個稀釋度中選擇一個合適稀釋倍數,統計出菌落數(圖1-3-3)。選擇的原則是:過(1) 細菌、放線菌、酵母菌以每個培養皿內有30~300 個菌落為宜。黴菌以每個培養皿內有10~100 個菌落為宜。(2) 同一稀釋倍數各個重復的菌落數相差不太懸殊。2.將統計出的菌落數按下列公式計算,得出每克樣品菌數。每克土壤樣品菌數= 某稀釋倍數的菌落平均數×稀釋倍數

『貳』 如何測定土壤中特定細菌的數量

直接計數法和稀釋平板計數法是測定微生物數量的常用方法.
測量土壤中微生物,一般採用平板計數法,因為直接計數法只能依靠肉眼在顯微鏡下觀察,誤差較大。
1、採集特定地區的土壤作為待測樣品。
2、要將待測樣品配製成均勻的系列稀釋液,盡量使樣品中的微生物細胞分散開。
3、再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中,使其均勻分布於平板中的培養基內; 或是將一定量的稀釋液,與溶化後冷卻至45℃左右的瓊脂培養基混合,傾入無菌培養皿中,搖勻、靜置待凝。(選用細菌培養基:牛肉膏、蛋白腖、瓊脂、氯化鈉)
4、經過培養後,就由單個微生物生長繁殖形成菌落,這樣的一個形態的菌落就代表著一個微生物個體。統計培養基中出現的菌落數,即可推算出檢測樣品中的活菌數。

『叄』 怎麼測定土壤中微生物啊大家來幫幫忙!

,加入蒸餾水,小心震盪。
2作為土壤微生物,應為它們種類繁多,如果真菌的顏色不明,要有一個提取的過程。
1,可以用高倍的光學顯微鏡.製作土壤浸出液。
4:取干凈土壤.培養:使用完全培養皿,滴入浸出液,培養
3.長出菌落後,根據菌落的形狀大小,有些是真菌菌落,有些是細菌菌落,真菌菌落可先用肉眼觀察,再都製成生物塗片,分層後取出上層清液。觀察真菌可以用較低倍數的光學顯微鏡,可染色處理,對於細菌的觀查,共生在一起,要想觀察好

『肆』 土壤微生物數量的測定方法

很惡心的方法 您確定要試么
有一個叫做微生物細胞數量的平板培養記數法
原理就是通過將樣品製作成一系列不同稀釋濃度的稀釋液 使樣品中的微生物細胞充分分散 形成耽擱細胞存在. 然後 取一定量的稀釋液接種 均勻分布在特定的培養基上. 經過培養後 有單個微生物生長繁殖形成菌落. 根據平板上的菌落數 計算樣品中的微生物活菌數量
步驟包括 均樣品稀釋液的制備;平板接踵培養及記數等幾個步驟
一般要做3種培養基 常見的是 細菌-牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基; 真菌-馬鈴薯瓊脂培養基; 放線菌-澱粉銨瓊脂培養基
公式 每克干樣品含菌數=[菌落平均數*稀釋倍數]/[接種量毫升數*(1-含水量)]
總之是惡心又麻煩 勞民傷財的實驗.....
土壤的話 可以測濕土和烘乾後的 公式8一樣

『伍』 土壤微生物數量的測定方法

取一定重量的土壤,稱取1g,置於100ml無菌水中,充分振盪,然後離心,取上清液,就得到土壤浸出液(可以看做土壤中的微生物全部轉移至水中)。然後做梯度稀釋,取一定稀釋度的溶液,塗平板,培養後數菌落數,然後乘上稀釋倍數,就可得到1g土壤中該微生物的數量。

例如,你在稀釋10的7次方的平板上數出了15個菌落,則1g土壤中微生物數量為1.5×10的8次方個。

『陸』 測定微生物的生物量有哪些主要方法

測定微生物的生物量有哪些主要方法
測定的方法主要有四種:

1.直接計數測定:根據微生物種類,有血球計數板和細菌計數板;

2.比濁法:根據菌懸液的濃度在一定范圍內與光密度成正比,可以用分光光度計測OD值,用OD值表示樣品菌液濃度;

3.核酸計數法:熒光定量PCR技術;

4.活菌計數法:MPN和平板計數法由於測定方法的限制。新鮮土樣經氯仿熏蒸後(24h),土壤微生物死亡細胞發生裂解,釋放出微生物生物量碳,用一定體積的LK2SO4溶液提取土壤,借用有機碳自動分析儀測定微生物生物量碳含量。根據熏蒸土壤與未熏蒸土壤測定有機碳的差值及轉換系數(KEC),從而計算土壤微生物生物量碳。

『柒』 如何調查土壤中微生物種類

按照我理解的「土壤中微生物的種類」是指古菌、細菌、真菌等生命體而不包括藻類、原生動物等低等動植物。
土壤中微生物的種類數量的調查屬於微生態區系分析的范疇。
一般說來,我們所開展的研究工作主要採用以下兩類方法進行研究分析:
1、經典的選擇培養法:
即採用選擇培養的方法,對土壤樣品中的細菌、放線菌、酵母菌、絲狀真菌等幾大類微生物進行分類培養,還可以採用詳細的選擇培養方式比如無氮培養基培養固氮微生物、利用MPN法測定氮循環微生物等等,從功能角度再細分一下微生物的種類組成;還可以通過寡營養、富營養、長周期培養等方法做進一步詳細的分析。
此類方法工作量大,分析精度和全面性都有一定的局限性。但同時是任何層面的研究都不可以忽略的方式方法,是獲得微生物菌種資源純培養以進行深入研究的唯一方法。

2、分子微生態學方法
是基於DNA分析和測序基礎上的分子微生態學研究方法,常用的有DGGE(變性梯度凝膠電泳)、克隆文庫構建、T-RFLP以及宏基因組技術,對樣品中的DNA進行電泳乃至測序分析,從分子水平確定樣品中微生物的種類和數量。
從全面性和深度以及工作效率方面都教常規方法有大幅度提升,但目前仍然有不成熟的地方。另外其成本遠高於常規方法。

『捌』 如何測定土壤中特定細菌的數量

顯微鏡直接計數法和稀釋平板計數法是測定微生物數量的常用方
法。
直接計數法中常用的是顯微鏡直接計數法,這種方法是先將待
測樣品製成懸液,然後取一定量的懸液放在顯微鏡下進行計數(圖1-
3-1)。根據在顯微鏡下觀察到的微生物數目來計算出單位體積內的微
生物總數。直接計數法所需設備簡單,可迅速得到結果,而且在計數
的同時能觀察到所研究微生物的形態特徵,其缺點是難以計數微小的
細菌。這種方法一般適用於純培養懸浮液中各種單細胞菌體的計數。
間接計數法最常用的是稀釋平板計
數法,它是根據微生物的培養特徵而設計
的計數方法。這種方法在樣品中含菌數較
少的情形下,也可以完成計數。
應用稀釋平板計數法計數時,需要
將待測樣品配製成均勻的系列稀釋液,盡
量使樣品中的微生物細胞分散開。再取一
定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板
中,使其均勻分布於平板中的培養基內;
或是將一定量的稀釋液,與溶化後冷卻至
45℃左右的瓊脂培養基混合,傾入無菌培
養皿中,搖勻、靜置待凝。經過培養後,
就由單個微生物生長繁殖形成菌落,這樣
的一個菌落就代表著一個微生物個體。統
計培養基中出現的菌落數,即可推算出檢
測樣品中的活菌數。

FOR EXAMPLE:]
土壤中好氣性細菌的計數
土壤中生活的微生物種類和數量是極其豐富的,這些數量眾多的
微生物對提高土壤肥力有重要作用。因此,測定土壤中的含菌量可以
作為判定土壤肥力的一個重要指標。
材料器具
土壤樣品;牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基(附錄二)、無菌水;培養皿、
移液管、天平、錐形瓶、試管、酒精燈、恆溫培養箱、搖床等。
活動程序
1.制備土壤稀釋液
取土壤表層5~10 cm 處的土樣。准確稱取1 g 土樣,放入盛有
99 mL 無菌水的錐形瓶(250 mL,放有小玻璃珠)中,用手或搖床振盪
20 min,即製成102 倍的稀釋液。
用1 mL無菌移液管,吸取10 2倍稀釋液0.5 mL,移入裝有4.5 mL
無菌水的試管中,配製成103 倍稀釋液。
用同樣的方法可製成稀釋倍數為104、105、106 的系列稀釋菌液
(圖1-3-2)。


移液時,要將移液管插入液面,吹吸3 次,每次吸上的液面要高
於前一次,讓菌液混合均勻並減少稀釋中的誤差。每配一個稀釋度要
換用一支移液管。
2.取樣及倒平板
將無菌培養皿編號,依次為104、105、106,每一號碼設置三個
重復。
用無菌移液管三支,分別吸取稀釋倍數為104、105、106的土壤稀釋
液各0.2 mL,注入到相應編號的培養皿中(每個稀釋倍數各三個培養皿)。
將已滅菌牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基溶化,待冷卻至45~50 ℃左
右,傾入到無菌培養皿中,每皿約15 mL,輕輕轉動培養皿,使土壤
稀釋液與培養基混合均勻。
3.培養
將上述接種好的平板培養基冷卻後,倒置放入28~30 ℃的恆溫
培養箱中培養24~36 h,直至長出菌落為止。
4. 觀察記錄
將實驗中得到的菌落數填入表1-3-1。
結果分析
1.選取具有合適菌落數的稀釋倍數並計數。
在計算結果時,從接種的3 個稀釋度中選擇一個合適稀釋倍數,
統計出菌落數(圖1-3-3)。選擇的原則是:


(1) 細菌、放線菌、酵母菌以每個培養皿內有30~300 個菌落為
宜。黴菌以每個培養皿內有10~100 個菌落為宜。
(2) 同一稀釋倍數各個重復的菌落數相差不太懸殊。
2.將統計出的菌落數按下列公式計算,得出每克樣品菌數。
每克土壤樣品菌數= 某稀釋倍數的菌落平均數×稀釋倍數

『玖』 土壤微生物數量的測定方法

稱取10g土壤2份,一份置於烘箱中烘至恆重,稱重。另一份置於裝有90ml無菌水和若干玻璃珠的250ml三角瓶中,充分振盪20分鍾,靜置1分鍾,無菌操作取1ml,做10倍梯度稀釋,取連續3個稀釋度的溶液,塗平板或傾注平板(計數放線菌和真菌要用選擇培養基),每個稀釋度2~3個重復,培養後數菌落數,然後乘上稀釋倍數,就可得到1g濕土壤中該微生物的數量,1g干土壤中該微生物的數量再將前面結果除以干土百分比。

閱讀全文

與如何測土壤的微生物數量相關的資料

熱點內容
word中化學式的數字怎麼打出來 瀏覽:740
乙酸乙酯化學式怎麼算 瀏覽:1406
沈陽初中的數學是什麼版本的 瀏覽:1353
華為手機家人共享如何查看地理位置 瀏覽:1045
一氧化碳還原氧化鋁化學方程式怎麼配平 瀏覽:886
數學c什麼意思是什麼意思是什麼 瀏覽:1411
中考初中地理如何補 瀏覽:1300
360瀏覽器歷史在哪裡下載迅雷下載 瀏覽:703
數學奧數卡怎麼辦 瀏覽:1388
如何回答地理是什麼 瀏覽:1025
win7如何刪除電腦文件瀏覽歷史 瀏覽:1058
大學物理實驗干什麼用的到 瀏覽:1487
二年級上冊數學框框怎麼填 瀏覽:1701
西安瑞禧生物科技有限公司怎麼樣 瀏覽:979
武大的分析化學怎麼樣 瀏覽:1250
ige電化學發光偏高怎麼辦 瀏覽:1339
學而思初中英語和語文怎麼樣 瀏覽:1653
下列哪個水飛薊素化學結構 瀏覽:1425
化學理學哪些專業好 瀏覽:1488
數學中的棱的意思是什麼 瀏覽:1060