如何建立細菌生物膜

A. 請教高手：96孔板培養細菌生物膜如何操作

應該是用96孔板液體培養吧！然後去其菌膜吧，96孔板應該起到的是多培養篩選吧。

B. 細菌生物膜的內容

細菌的生理特性受到種群密度及與其他微生物相互作用的極大影響，而附著性是其顯著特徵之一。生物膜的生理學研究今年取得重大突破。很大程度是由於應用激光共聚焦掃描顯微鏡（CLSM）和熒光原位雜交（FISH）技術的結果。單種的細菌的生物膜形成過程被認為是一種向多細胞生活方式發展的形式（有研究者將之比作組織）。有機分子(主要是多糖和蛋白質)會在幾分鍾的之內覆蓋於任何置於海水中的物體表面，形成一層臨時性膜。細菌在物體表面定植的起始步驟，通常包括細菌向物體表面的移動和微粘度的改變，而微粘度的改變會引起細菌在靠近表面時移動性下降。這時細菌在靜電引力和范德華力的作用下，會短暫、可逆地趨向表面。通過構建生物膜缺陷型突變的遺傳學研究發現，細菌為了與其他細菌接觸以形成微菌落，其通過表面的運動非常重要，而細菌的運動主要歸功於鞭毛和Ⅳ型纖毛。細菌在與物體表面的接觸過程中，經歷了細胞形態和鞭毛合成的巨大變化，這牽扯到基因表達調控的巨大變化。細菌一旦固著，其鞭毛合成可能完全被抑制。特定的基因表達與底物的性質密切相關。
附著後，最重要的生長變化是胞外多聚物（EPS）的大量表達。這些多聚物提供了一個堅固而有黏性的骨架，將細胞固定在一起。胞外多聚物的化學和物理特性是多變的，其特性和分泌量取決於細菌的種類、特定底物的濃度及環境條件。絕大多數的胞外多聚物為多聚陰離子。胞外多聚物通常以相互交叉的長鏈形成的復雜結構包圍著細胞（糖被）。賦予生物膜以剛性與柔韌性。生物膜一旦建成，細菌排列密集且其代謝轉換為產生胞外多聚物，因此細胞代謝的活躍，但是以很低的速度分裂。

C. 生物膜由什麼組成

生物膜是由生物大分子如蛋白質、多糖、DNA、RNA、肽聚糖、脂和磷脂等物質組成。
生物膜也稱為生物被膜，是指附著於有生命或無生命物體表面被細菌胞外大分子包裹的有組織的細菌群體。生物膜細菌對抗生素和宿主免疫防禦機制的抗性很強。生物膜中存在各種主要的生物大分子如蛋白質、多糖、DNA、RNA、肽聚糖、脂和磷脂等物質。生物膜多細胞結構的形成是一個動態過程，包括細菌起始粘附、生物膜發展和成熟擴散等階段。
生物被膜是微生物有組織生長的聚集體。細菌不可逆的附著於惰性或活性實體的表面，繁殖、分化，並分泌一些多糖基質，將菌體群落包裹其中而形成的細菌聚集體膜狀物。單個生物被膜可由一種或多種不同的微生物形成。通過對微生物在固體表面定植中起支配作用的特殊現象進行了大量研究，逐漸認識到這些微生膜的形成包含復雜的理化過程和生物群落的相互作用。在海洋環境中，所有類型的表面，如岩石、植物、動物和裝配式結構都可能被生物膜侵佔。
細菌生物被膜主要包括分泌的多糖蛋白、多糖基質、纖維蛋白、脂蛋白等多糖蛋白復合物。成熟生物被膜模型從外到內包括主體生物膜層、連接層、條件層、基質層。
 

D. 細菌生物膜構造和檢測是否形成。的試驗過程和檢測方法，包括染色，觀察等。詳細點，謝謝各位大大了。

生物膜？我們實驗室是做這個的……biofilm
寶你是誰啊？
嗯，觀察生物膜形成情況可用比色杯或者ELISA板兒養菌液，24~72小時，分組，養到時見後小心吸走液體，膜就留在杯里了，此時用結晶紫染色，可看到膜形成與否以及厚度

E. 細菌生物膜的介紹

生物膜由依靠胞外產物而吸附於固體表面的微生物集落構成，並能結合有機和無機成分；形成包含復雜的理化過程和生物群落的相互作用。生物膜系統是真核細胞特有的系統，由細胞器膜，細胞膜和核膜構成，這些生物膜的組成成分和結構相似，結構和功能密切相關，表現著協調統一性。

F. 如何製取純凈的細胞膜

理論上細胞膜成分都是類似的（真核細胞有膽固醇，但是功能上沒有太大變化），但是一般不會那樣做。

一般用紅細胞製取細胞膜，那是因為紅細胞在低滲溶液中會吸水膨脹破裂，導致磷脂析出。但是細菌有細胞壁阻擋滲透壓，不會因為吸水而破裂，要提取細菌的細胞膜需要大費周折，沒有誰會放著簡單易得數量巨大的紅細胞不用，而去給細菌破壁的

G. 怎麼誘導金黃色葡萄球菌在體外形成生物膜

生物膜形成主要分為兩個階起始的黏附和接下來的成熟。在慢性感染中，毒力決定因子是金黃色葡萄球菌感染的關鍵，已經段，確定許多蛋白和這一過程相關，如多糖細胞間黏附素、凝聚因子A、金黃色葡萄球菌表面蛋白、生物膜形成相關蛋白等。細菌生物膜（BF）是細菌在生長過程中為適應生存環境的變化而附著於機體組織或生物材料表面形成的一種與浮游細胞相對應的生長方式，由細菌和胞外基質組成。生物膜形成後，細菌被包裹於胞外基質中，對機體免疫清除作用及抗生素的殺菌作用的抵抗力增強，使得這兩種機制均難以有效地清除感染灶，且生物膜內的細菌還可不斷生長並釋放入血，造成慢性感染和停用抗生素後感染復發，導致疾病遷延不愈。

H. 器械如何形成生物膜，生物膜定義，危害

生物膜是緊密黏附於醫療器械表面並且難以去除的細菌團塊與細胞外基質的復合體。通俗地說，生物膜是由細菌在其分泌的粘液（粘多糖）內形成的結構。當生物膜積累到一定厚度，消毒及滅菌因子均難以殺滅包裹於其中的細菌。

去除方法：
1、防止有機污染物乾涸
對使用後的器械應盡早進行清洗，採用一切措施防止血液和組織結塊。使用後立即進行浸泡。以酶為基礎的保濕，可以快速高效分解有機污染物。
2、注重清洗劑的選擇和合理應用
應選擇有機物和生物膜清除能力更佳, 對器械腐蝕力更小,環保的清洗劑產品。
3、保證器械乾燥
保證器械管腔和關節乾燥徹底，特別對於隔夜存放的高水平消毒類器械。加強對內鏡儲存環境的溫濕度管理。
4、加強清洗質量檢測

I. 細菌生物膜的簡介

是指正常菌群與上皮細胞表面受體結合而黏附，並分泌胞外多糖聚合物，使細菌以非常精細的方式相互粘連，形成的膜狀物，能發揮屏障和佔位性保護作用，使外來病菌不能定植而通過侵入門戶侵襲機體。
通過對微生物在固體表面定植中起支配作用的特殊現象進行了大量研究，逐漸認識到這些微生膜的形成包含復雜的理化過程和生物群落的相互作用。
在海洋環境中，所有類型的表面，如岩石、植物、動物和裝配式結構都可能被生物膜侵佔。