『壹』 微生物分離方法
微生物分離法是獲得微生物純培養物的一種分離方法。通過這個方法可實現一種微生物的培養,或獲得一個細胞的後代。其具體方法有:
1、稀釋倒平皿法。將待分離的材料作一系列稀釋,取不同稀釋度適量塗布於固體培養基平板上或與已熔化的固體培養基一起傾注入平板內,經過培養即有一個微生物細胞繁殖來的單個菌落。
2、劃線法。先將已熔化的固體培養基製成平板,待凝後,取分離材料在上面劃線,可作平行劃線、扇形劃線或其他形狀的連續劃線,使菌樣逐漸減少,最後得到單個孤立的菌落。
(1)從什麼中分離微生物擴展閱讀:
微生物分離技術的應用措施:
1、減少毒性氧物質的毒害作用:由於常規培養方法使用的高濃度營養基質不利於微生物生長,適當降低營養基質的濃度可以減弱這種不利影響。發現低濃度基質的培養基培養出的細菌在數量和種類上均多於高濃度基質的培養基,但營養濃度過低時會使培養出的微生物數量反而下降。
2、維持微生物間的相互作用:在培養基中加入微生物相互作用的信號分子就可簡單模擬微生物間的相互作用,滿足微生物生長繁殖的要求。
3、供應新型的電子供體和受體:不同微生物的代謝過程不同,因此對反應的底物要求也不盡相同。供應微生物需要的特有底物有助於新陳代謝反應的進行及微生物的正常生長。大量的研究表明,將新穎的電子供體和受體應用到微生物培養中,能夠發現未知的生理型微生物。
4、分散微生物細胞:自然界中很多微生物聚集生長,形成「絮體」和「顆粒」等,致使其內部的微生物不易被培養。對「絮體」和「顆粒」進行適度的超聲處理,將細胞分散再進行培養,可以使更多的微生物接觸培養基而得到培養。
5、延長培養時間:對「寡營養菌」的培養,可適當延長培養時間,使其能長至肉眼可見的尺度。當然培養時間不能無限增長,因為培養時間越長,對培養環境的無菌要求就越高[4]。
6、利用瓊脂替代物:瓊脂對某些微生物具有毒性作用,採用無害且凝結作用較好的替代物質作為培養基固化劑,可以增加微生物的可培養性。
『貳』 《微生物問題》如何從土壤中分離微生物(黴菌,細菌,放線菌等)
1.取以少許土壤(一地表以下10cm處為宜)與適量無菌水混勻備用
2.做浸出液的梯度稀釋
3 .塗平板
4.劃線分離
5.接平板,接斜面
6.檢測
『叄』 分離純化微生物的方法有哪些各方法適用分離什麼菌種
主要有:劃線法、倒平板法、塗布法,根據分離的菌種選擇不同的培養基。
稀釋混合倒平板法、稀釋塗布平板法、平板劃線分離法、稀釋搖管法、液體培養基分離法、單細胞分離法、選擇培養分離法等。其中前三種方法最為常用,不需要特殊的儀器設備,分離純化效果好。
從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。在分子生物學的研究及應用中,不僅需要通過分離。
分離技術
主要是稀釋和選擇培養,稀釋是在液體中或在固體表面上高度稀釋微生物群體,使單位體積或單位面積僅存留一個單細胞,並使此單細胞增殖為一個新的群體。最常用的為平板劃線法。
如果所要分離的微生物在混雜的微生物群體中數量極少或者增殖過慢而難以稀釋分離時,需要結合使用選擇培養法,即選用僅適合於所要分離的微生物生長繁殖的特殊培養條件來培養混雜菌體,改變群體中各類微生物的比例,以達到分離的目的。為保證分離到的微生物是純培養,分離時必須用。
以上內容參考:網路-微生物分離純化
『肆』 如何從土壤中分離產纖維素酶的微生物
在培養基上只添加纖維素和其他一些必需物質如無機鹽,水,生長因子可以生活,或者說可以形成菌落的就只有可以產生纖維素酶的微生物了,因為只有它才可以把纖維素水解為葡萄糖並加以利用。
能夠分解纖維素的微生物很多。既有好氧性微生物,也有厭氧性微生物;既有細菌,也有放線菌和真菌。 好氧性纖維素分解細菌:食纖維菌屬和生孢食纖維菌屬是土壤中常見的好氧性纖維素分解細菌。多囊菌屬、鐮狀纖維菌屬與纖維弧菌屬。 許多放線菌能夠分解纖維素。
(4)從什麼中分離微生物擴展閱讀:
水可使纖維素發生有限溶脹,某些酸、鹼和鹽的水溶液可滲入纖維結晶區,產生無限溶脹,使纖維素溶解。纖維素加熱到約150℃時不發生顯著變化 ,超過這溫度會由於脫水而逐漸焦化。纖維素與較濃的無機酸起水解作用生成葡萄糖等,與較濃的苛性鹼溶液作用生成鹼纖維素,與強氧化劑作用生成氧化纖維素。
將選好的工業木漿板疏解,送入已加1%~10%的鹽酸(用量為5%~10%)的反應釜進行升溫水解,溫度為90~100℃,水解時間0.5~2h,反應結束後經冷卻送人中和槽,用液鹼調至中性,過濾後濾餅在80~100℃下乾燥,最後經粉碎得產品。
『伍』 如何從復雜的土壤樣本中分離我們所需要的目標微生物
如何從復雜的土壤樣本中分離我們所需要的目標微生物?
有機肥之中有機質的分解轉化是一個復雜的過程,微生物活動在分解轉化過程之中起著重要作用。土壤環境非常適合微生物活動,所以土壤之中天然微生物數量最多。因為土壤之中微生物種類繁多,數量大;一克土壤之中,微生物有幾十種到幾百種,幾億到幾十億個,土壤微生物繁殖迅速,在有機質的轉化和分解之中起著重要作用。土壤微生物包括細菌、放線菌、真菌和藻類。
(1)細菌
細菌是一種單細胞微生物,是土壤之中分布最廣、數量最多的微生物。細菌有三種基本形態:球形、桿狀和螺旋形;有球菌、桿菌和螺旋體(40種);包括弧菌&41;三種類型。土壤細菌按其營養類型可分為自養菌、兼性自養菌和異養菌。
(2) 真菌
土壤真菌分布廣泛,適應廣泛的酸性條件,在PH4.0條件之下生長良好,對森林土壤有機質的轉化起著重要作用。土壤真菌是異養的。它們必須從土壤有機質之中獲取能量和碳源,並在發育過程之中需要良好的供氧。根據真菌與樹木的關系及其營養類型,真菌可分為腐生真菌、寄生真菌和共生真菌。
(3) 放線菌
放線菌是細長的菌絲體,呈分枝狀或放射狀。它們在土壤之中僅次於細菌。大多數是腐生植物。許多放線菌能分解纖維素、澱粉、脂肪、木質素和蛋白質。
『陸』 自然界分離微生物的一般操作步驟
自然界的微生物,幾乎都是混雜在一起的。人們要想觀察、研究和利用某一種微生物,就必須將它從各種微生物混生的環境中分離開來。所以微生物的分離是一項十分重要的技術。
一、分離的基本方法
微生物分離的方法很多,主要有連續稀釋分離法,平板劃線分離法和單細胞分離法等方法。其中,單細胞分離法需要貴重精密儀器,中學無法開展,而連續稀釋分離法和平板劃線分離法卻簡便易行,中學完全具備開展條件。現將這兩種方法說明如下。
1.連續稀釋分離法
①取1克土樣,在火焰旁放入裝有99毫克無菌水的錐形瓶內,充分搖勻,將菌分散。
②用移液管吸取上述菌懸液1毫升,放入盛有9毫升無菌水的試管中,並進一步稀釋成1000倍,即10-3的菌懸液。按10倍稀釋法連續稀釋到10-8(每1次稀釋,都須更換移液管)。
③取3支1毫升移液管分別從10-8、10-7、10-6菌懸液中吸取1毫升菌懸液,分別注入編號10-8、10-7和10-6的培養皿內,同一稀釋液重復做3個培養皿。
④將溫度為45~50℃的營養瓊脂培養基(其成分和配製方法見本章第三節)倒入上述各培養皿內,輕輕旋轉使菌懸液充分混合均勻,凝固後,將培養皿倒扣放置在溫暖處(28℃左右),每天觀察培養基表面有無微生物菌落。
⑤經過一定時間培養後,培養基上長出菌落,根據菌落特徵,初步判斷屬於何種類型的微生物,並在顯微鏡下檢查,若菌體形態一致,則可認為是初步分離到純菌種。
⑥將分離培養所得的純菌種,從平板培養基轉移到試管斜面培養基上培養。
2.平板劃線分離法
①取1克土樣,在火焰旁加進裝有99毫升無菌水的錐形瓶中,堵塞棉塞,製成菌懸液待用。
②取一培養皿置於實驗台上,左手將培養皿打開稍許,向培養皿內注入熔化的營養固體培養基10~12毫升,輕輕轉動培養皿,使其中的培養基分布均勻,平放桌上,使其凝成平板。然後在皿底用蠟筆劃分A、B、C、D幾個區。應連續製作幾份平板培養基。
③將培養皿底部用姆指和無名指固定成傾斜狀態,在火焰旁將培養皿稍微打開。在此同時,用環狀接種針在火焰旁取少許菌懸液,迅速送入培養皿內,在平板培養基的一邊,作第1次平行劃線 6~7條,轉動培養皿約70°角,用燒過冷卻的接種針,通過第1次劃線部分作第2次平行劃線,然後再用同樣方法,作第3次平行劃線。劃線時,應使平板培養基表面向下,以免空氣中雜菌落入。接種針應與平板表面成30°角左右。不要使接種針碰到培養皿邊緣,也不要將培養基劃破。
④將劃線後的培養皿倒放在28℃左右的溫暖處進行培養,待長出菌落後,鑒定微生物類群,並根據鏡檢結果,判斷是否已分離到了純菌種。如果菌種很純,則可轉移到斜面培養基上進一步培養。
連續稀釋分離法和平板劃線法,均須在無菌室或接種箱內進行。
二、各類微生物的分離
1.從土壤中分離好氣性及兼性厭氣細菌
其分離方法見本節「分離的基本方法」
2.從土壤中分離放線菌
①製作高氏一號培養基,趁熱注入培養皿中,凝成平板,待用。
②稱取土壤10克,放入裝有100毫升無菌水的錐形瓶中,並加入10%酚10滴,以抑制細菌生長。振盪10分鍾,製成10-1菌懸液。按照連續稀釋分離法,進一步製成10-3菌懸液。
③用移液管吸取0.1毫升10-3菌懸液,注入平板培養基上,用無菌玻璃刮刀將菌懸液均勻塗抹在整個培養基上。然後將培養皿倒置於25~30℃溫箱中,培養7~10天,培養基上會出現微生物菌落。如果菌落的硬度較大,乾燥緻密,且與基質緊密結合,不易被針挑起,這就是放線菌菌落。
④挑取放線菌菌落,接種於斜面培養基上。
3.從土壤中分離黴菌
①製作豆芽汗葡萄糖培養基,並添加80%乳酸數滴,以抑制細菌生長。將培養皿中,凝成平板,待用。
②稱取10克土壤,按上述分離放線菌的方法製成10-4或10-5的菌懸液。
③取0.1毫升菌懸液注入培養皿內培養基上,用玻璃刮刀塗抹均勻。然後將培養皿倒置於25~30℃溫箱內培養3~4天。培養基上會出現微生物菌落。黴菌菌落常長成絨狀、棉絮狀或蜘蛛網狀,可根據這一特徵尋找黴菌菌落。
④挑取培養皿內的黴菌菌落接種於斜面培養基上。
4.從飲水中分離大腸桿菌
①製作伊紅美藍培養基,趁熱注入培養皿中,凝成平板,待用。
②用滅過菌的錐形瓶盛取河水或溝水,按1:10稀釋。
③取0.1毫升稀釋液接種於伊紅美藍培養基上。用平板劃線分離法進行分離。
④將劃線後的培養皿倒置37℃溫箱中培養18~24小時。培養基中會出現大腸桿菌菌落,菌落中心呈暗藍黑色,發金屬光澤。
⑤將菌落接種於斜面培養基上(由營養瓊脂培養基製成)。
『柒』 如何從環境中分離純化微生物
先取土樣,然後提純稀釋,放在選擇培養基上。例如分離純化能分解纖維素的微生物,就放在以纖維素為唯一碳源的培養基上。能存活的就是你要的了。
純手打
望採納
不懂請追問哦~
『捌』 如何從土壤中分離出細菌,放線菌,黴菌,酵母
首先用滅菌水稀釋土壤,充分搖勻,就可以用玻棒蘸取土壤溶液,在經過滅菌的特製培養基培養皿上劃線,然後進行培養.一般我們培養細菌和酵母菌用LB培養基,青黴菌用PDA培養基,其他的沒坐過不太清楚.等培養出來後挑出單一菌落進行繼代培養,用顯微鏡觀察是什麼菌.
土壤里的細菌習性差別很大,生長條件要求也很不一樣,有固氮菌,硅酸鹽細菌,菌根菌,很多很多種,有很多種是很難在一般培養基中生長的,需要有特殊的環境,但也有很多種可以在普通的培養基上培養,生長比較快,可以培養出五彩斑斕的菌落.
對好氧菌培養相對容易一些,如果要培養厭氧菌條件特殊,需要加入特殊的葯品,或者採取深層培養或其他的厭氧條件.
土壤中微生物特別豐富,含有放線菌、真菌等,在培養過程中,可以使用選擇性培養基,加入一些抑制其生長的葯品,盡可能消除其干擾.
『玖』 如何從土壤中分離得到一個微生物的純培養體
首先你需要確定你分離的是什麼微生物,然後按照以下步驟
1.
選擇合適的富集培養基,加入土壤把目標菌屬富集
2.
選擇合適的選擇性培養基把目標菌屬分離出來。
3.
通過稀釋平板塗布,培養三天後,觀察不同的菌落,在平板反面用記號筆編號不同的菌落。
4.
把標記的菌落在培養基上劃線分離,每一個編號劃線三個平板
5.
待平板長出單菌落後,顯微鏡鏡檢,觀察目標菌是否單一。
單一菌落即為微生物的純培養體。