講微生物導入受體細胞用什麼方法

Ⅰ 重組DNA分子導入受體細胞的主要方法有哪些

（1）農桿菌轉化法：

農桿菌是土壤中的一種微生物，在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物，對大多數單子葉植物沒有感染能力。農桿菌進入植物細胞後，其Ti質粒上的T-DNA會轉移到受體細胞染色體的DNA上，目的基因進入植物細胞。

（2）花粉管通道法：

在授粉後向子房注射含目的基因的DNA溶液，利用植物在開花、受精過程中形成的花粉管通道，將外源DNA導入受精卵細胞，並進一步地被整合到受體細胞的基因組中，隨著受精卵的發育而成為帶轉基因的新個體。

（3）基因槍法：

基因槍根據動力系統可分為火葯引爆、高壓放電和壓縮氣體驅動三類。其基本原理是通過動力系統將帶有基因的金屬顆粒（金粒或鎢粒），將DNA吸附在表面，以一定的速度射進植物細胞，由於小顆粒穿透力強，故不需除去細胞壁和細胞膜而進入基因組，從而實現穩定轉化的目的。

原理：

選擇一種特製的空質粒載體（如PBI121質粒載體），其上要求含有T-DNA邊界序列（此處可參見詞條雙元表達載體系統），在序列之間含有復制原點、抗性基因、GUS報告基因、Hind Ⅲ和BamH I 等酶切位點（以上這些構成了一個T-DNA區）。

先通過雙酶切反應酶切空質粒載體和目的基因，再通過酶連反應連接空質粒載體和目的基因，從而構建成完整的重組質粒。此時重組質粒的T-DNA區包括T-DNA邊界序列、復制原點、突變啟動子片段、GUS報告基因、抗性基因。

以上內容參考：網路-農桿菌轉化法

Ⅱ 將目的基因導入受體細胞的方法有那些

DNA分子雜交技術：

用同位素標記的目的基因片段作探針，與受體染色體DNA進行雜交。

近年來研究者常採用PCR-Southern雜交技術，即先對被檢測的材料進行PCR擴增，然後再用目的基因的同源探針與擴增產物進行雜交。

再採用RT-PCR檢測轉錄產物，即以受體總RNA或mRNA為模板進行逆轉錄合,然後再進行PCR擴增，如果得到特異的cDNA擴增條帶，則表明目的基因實現了轉錄。

最後還需在翻譯水平上驗證表達，常進行Wester blotting,將經SDS-PAGE分離的蛋白質樣品通過電轉移到硝酸纖維素膜上，用待定蛋白質的初級抗體與膜上吸附的蛋白質進行免疫反應，再與酶標記的第二抗體反應，通過二抗上標記酶催化的顯色反應，就可以鑒定目的基因表達的特異蛋白質產物。

Ⅲ 常見目的基因導入受體細胞的方法及過程

1，植物細胞；常用農桿菌轉化法（其中能將目的基因整合到Ti質粒上的T-DNA上）常用於雙子葉和裸子植物。
基因槍法；單子葉植物。
花粉管通道法；剪掉柱頭
2，動物細胞；顯微注射技術（注射到受精卵中）
3，微生物；感受態細胞法或鈣離子處理法（用含有鈣離子溶液處理使其成為感受態細胞）

Ⅳ 將目的基因導入受體細胞的方法

顯微注射技術是轉基因動物中採用最對，也是最有效的一種將目的基因導入動物細胞的方法。

Ⅳ 將目的基因導入受體細胞的方法

高中生物選修三書中內容。導入動物細胞的方法：顯微注射技術。導入植物細胞的方法：農桿菌轉換法。導入微生物細胞的方法：Ca離子處理法。

Ⅵ 將目的基因導入受體細胞的方法有哪些

• 常用方法：基因工程中常用的受體細胞有大腸桿菌，枯草桿菌，土壤農桿菌，酵母菌和動植物細胞等。其中，對於細菌或植物細胞，常用質粒作為載體將目的基因導入細胞內；動物細胞則用顯微注射的方法將目的基因導入動物受精卵的雄性原核中。

• 過程：用人工方法使體外重組的DNA分子轉移到受體細胞，主要是借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑。例如，如果運載體是質粒，受體細胞是細菌，一般是將細菌用氯化鈣處理，以增大細菌細胞壁的通透性，使含有目的基因的重組質粒進入受體細胞。目的基因導入受體細胞後，就可以隨著受體細胞的繁殖而復制，由於細菌的繁殖速度非常快，在很短的時間內就能夠獲得大量的目的基因。

Ⅶ 將基因導入受體細胞常用什麼方法

導入植物細胞常用農桿菌轉化法，花粉管通道法，基因槍法，導入動物細胞常用顯微注射法，導入微生物細胞常用鈣離子處理法

Ⅷ 將目的基因導入受體細胞的方法有那些

導入植物細胞：農桿菌轉化法（轉基因抗蟲棉用的是花粉管通道法）；導入動物細胞：顯微注射技術（注射入受精卵中）；導入原核生物：一般是將細菌用氯化鈣處理，以增大細菌細胞壁的通透性，使含有目的基因的重組質粒進入受體細胞。