生物監測采樣方法有哪些

1. 生物監測的特點是什麼主要有哪些檢測技術和方法

太籠統了，生物監測在很多地方都有不同的意義，不能一概而論，比如我們可以對水源進行生物監測，可以對公共場所衛生情況進行生物監測，可以對制葯廠的制葯環境進行生物監測，可以對消毒滅菌的效果進行生物監測，等等等等，不勝枚舉。
不過大體上應該都可以進行字面理解，采樣後進行微生物分析以便進行污染的評價。

2. 微生物的采樣方法（詳細點！）

常用的空氣微生物采樣方法有四種：沉降法、固體撞擊法、液體撞擊法、濾過法。

最常用的是平板沉降法，其採集步驟是：在采樣前先用紫外線對所要采樣的房間照30分鍾，使室內處於相對清潔、靜止狀態，然後將及時領取的新鮮營養瓊脂平板，置室內四角及中央各一個，將平板蓋打開扣於無菌巾上，暴露20分鍾，加蓋及時送檢，以防污染。

1.2 采樣方法
在0.33hm2左右的采樣區域內，按15m×15m的面積劃分為12個樣方。1998年6月在每個樣方中分別確定生長水平中等的Ⅰ度(1年生)、Ⅱ度（3年生）、Ⅲ度（5年生）竹各3株，分別在毛竹基部挖開，順竹蔸取連在根上粒徑小於1cm土壤作為根區土壤，並分別將Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度各3株竹的根區土樣混合成一個樣品，作為該樣方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度竹的根區土樣。同時在每個樣方的竹林中多點採集和根區土深度一致的林間土樣1個，採集時盡量避開竹鞭，各點均離竹鞭5厘米以上。
1.3 分析方法
土樣帶回室內後分成兩份，1份鮮樣分析土壤微生物三大類；另1份風干、去雜、過篩後測定土壤各類酶活性。土壤微生物計數採用平板法[12]，細菌採用牛肉蛋白腖培養基；真菌採用馬丁氏瓊脂培養基；放線菌採用高澤1號瓊脂培養基。土壤過氧化氫酶採用容量法；蔗糖酶採用二硝基水楊酸比色法；脲酶採用苯酚——次氯酸比色法；蛋白酶採用茚三酮比色法；磷酸酶採用磷酸苯二鈉比色法。〔13〕

3. 空氣微生物采樣研究的方法～

空氣浮游微生物采樣器是根據顆粒撞擊原理和等速采樣理論設計。被采樣的帶有微生物的空氣在抽氣泵作用下，高速噴射並撞擊到裝有培養基的培養皿上，經培養後形成菌落予以計數。

對固體撞擊式采樣法與平板沉降法進行初步實驗。結果表明，使用固體撞擊式采樣法測定空氣微生物的含量總數與平板沉降法采獲的總數結果差異有顯著性,平板沉降法只能收集到較大顆粒的微生物，不能作精確的定量計數，它可作為一般衛生學的檢驗手段。固體撞擊式采樣法對懸浮於空氣中小顆粒微生物捕獲率高於沉降法，並能較准確地表達出空氣中細菌的實際含量，是一種較理想的的采樣方法。

4. 採集要求及方法

（一）大氣樣

大氣樣品的採集方法可歸納為直接采樣法和富集采樣法兩類。

1.直接采樣法

適用於大氣中被測組分濃度較高或監測方法靈敏度高的情況，這時不必濃縮，只需用儀器直接採集少量樣品進行分析測定即可。此法測得的結果為瞬時濃度或短時間內的平均濃度。

常用容器有注射器、塑料袋、采氣管、真空瓶等。

1）注射器采樣；常用100mL注射器採集有機蒸汽樣品。采樣時，先用現場氣體抽洗2～3次，然後抽取100mL，密封進氣口，帶回實驗室分析。樣品存放時間不宜長，一般當天分析完。氣相色譜分析法常採用此法取樣。取樣後，應將注射器進氣口朝下，垂直放置，以使注射器內壓略大於外壓。

2）塑料袋采樣：應選不吸附、不滲漏，也不與樣氣中污染組分發生化學反應的塑料袋，如聚四氟乙烯袋、聚乙烯袋、聚氯乙烯袋和聚酯袋等，還有用金屬薄膜作襯里（如襯銀，襯鋁）的塑料袋。采樣時，先用二聯球打進現場氣體沖洗2～3次，再充滿樣氣，夾封進氣口，帶回實驗室盡快分析。

3）采氣管采樣：采氣管容積一般為100～1000mL。采樣時，打開兩端旋塞，用二聯球或抽氣泵接在管的一端，迅速抽進為采氣管容積6～10倍的欲采氣體，使采氣管中原有氣體被完全置換出，關上旋塞，采氣管體積即為采氣體積。

4）真空瓶采樣：真空瓶是一種具有活塞的耐壓玻璃瓶，容積一般為500～1000m L。采樣前，先用抽真空裝置把采氣瓶內氣體抽走，使瓶內真空度達到1.33KPa，之後，便可打開旋塞采樣，采完即關閉旋塞，則采樣體積即為真空瓶體積。

2.富集采樣法

富集采樣法：原理是使大量的樣氣通過吸收液或固體吸收劑得到吸收或阻留，使原來濃度較小的污染物質得到濃縮，以利於分析測定。

適用於大氣中污染物質濃度較低的情況。采樣時間一般較長，測得結果可代表采樣時段的平均濃度，更能反映大氣污染的真實情況。

具體采樣方法包括溶液吸收法、固體阻留法、液體冷凝法、自然積集法等。

（1）溶液吸收法

該法是採集大氣中氣態、蒸汽態及某些氣溶膠態污染物質的常用方法。

采樣時，用抽氣裝置將欲測空氣以一定流量抽入裝有吸收液的吸收管，使被測物質的分子阻留在吸收液中，以達到濃縮的目的。采樣結束後，倒出吸收液進行測定，根據測得的結果及采樣體積計算大氣中污染物的濃度。

吸收效率主要決定於吸收速度和樣氣與吸收液的接觸面積。

吸收液的選擇原則：

1）與被採集的物質發生不可逆化學反應快或對其溶解度大；

2）污染物質被吸收液吸收後，要有足夠的穩定時間，以滿足分析測定所需時間的要求；

3）污染物質被吸收後，應有利於下一步分析測定，最好能直接用於測定；

4）吸收液毒性小，價格低，易於購買，並盡可能回收利用。

常用吸收管有氣泡式吸收管、沖擊式吸收管和多孔篩板吸收管（瓶）等。

（2）填充柱阻留法

填充柱是用一根6～10cm長，內徑3～5mm的玻璃管或塑料管，內裝顆粒狀填充劑製成。采樣時，讓氣樣以一定流速通過填充柱，則欲測組分因吸附、溶解或化學反應而被阻留在填充劑上，達到濃縮采樣的目的。采樣後，通過加熱解吸，吹氣或溶劑洗脫，使被測組分從填充劑上釋放出來測定。

根據填充劑阻留作用的原理，可分為吸附型、分配型和反應型三種類型。

1）吸附型填充柱：所用填充劑為顆粒狀固體吸附劑，如活性炭、硅膠、分子篩、氧化鋁、素燒陶瓷、高分子多孔微球等多孔性物質，對氣體和蒸氣吸附力強。

2）分配型填充劑：所用填充劑為表面塗有高沸點有機溶劑的惰性多孔顆粒物，適於對蒸氣和氣溶膠態物質的採集。氣樣通過采樣管時，分配系數大的或溶解度大的組分阻留在填充柱表面的固定液上。

3）反應型填充柱：其填充柱是由惰性多孔顆粒物或纖維狀物表面塗漬能與被測組分發生化學反應的試劑製成。也可用能與被測組分發生化學反應的純金屬（如金、銀、銅等）絲毛或細粒作填充劑。采樣後，將反應產物用適宜溶劑洗脫或加熱吹氣解吸下來進行分析。

（3）濾料阻留法

將過濾材料放在采樣夾上，用抽氣裝置抽氣，則空氣中的顆粒物被阻留在過濾材料上，稱量過濾材料上富集的顆粒物質量，根據采樣體積，即可計算出空氣中顆粒物的濃度。常用濾料：①纖維狀濾料：如定量濾紙、玻璃纖維濾膜、氯乙烯濾膜等；②篩孔狀濾料：如微孔濾膜、核孔濾膜、銀薄膜等。各種濾料由不同的材料製成，性能不同，適用的氣體范圍也不同。

（4）低溫冷凝法

借製冷劑的製冷作用使空氣中某些低沸點氣態物質被冷凝成液態物質，以達到濃縮的目的。適用於大氣中某些沸點較低的氣態污染物質，如烯烴類灌類等。

常用製冷劑：冰、乾冰、冰－食鹽、液氯－甲醇、乾冰－二氯乙烯、乾冰乙醇等。

（5）自然積集法

利用物質的自然重力、空氣動力和濃差擴散作用採集大氣中的被測物質，如自然降塵量、硫酸鹽化速率、氟化物等大氣樣品的採集。

（二）水中溶解氣體

1.逸出氣體樣品的採取

水中逸出氣體樣品的採取，一般用排水集氣原理，如圖7-3所示。將連接在集氣管2上的玻璃漏斗沉入水中，待水面升到彈簧夾5以上時關閉彈簧夾5；再將注滿水的下口瓶3提升，使水注入集氣管2中。待集氣管2充滿水後（不得留有氣泡），關閉彈簧夾4和6；再將下口瓶3注滿水，並置於低於集氣管2的位置：將漏斗1移至水底氣體逸出處，打開彈簧夾4和5，氣體即沿漏斗1進入集氣管2內；待集氣管2中的水被排盡後，關閉彈簧夾4和5。這樣，集氣管中便收集好待測氣體，即可送實驗室分析。

圖7-5 真空法分離溶解氣樣採集方法

1—橡皮球膽；2—玻璃瓶；3—橡皮塞；4、10、13、14—橡皮管；5、6—彈簧夾；7—橡皮管接頭；8、9—紫銅管；11—集氣管；12—下口瓶；15、16 集氣管旋塞

（三）土壤氣體

土壤氣體的測量主要指標為土壤CO₂通量的測量。

首先在試驗地中選定具有代表性的地點，把CO₂採集鑽鑽至土壤中所要測定的深處，取出土鑽，棄去填滿土鑽中的土壤，再將土鑽插入孔中，然後將鑽筒往上提兩轉，使鑽頭與鑽孔間形成孔隙，然後壓緊土鑽周圍的土壤（在測定之前，需先抽取土壤空氣，以使橡皮管及鑽桿中都充滿土壤空氣）。

然後用皮管將深層CO₂抽氣鑽與CO₂氣體吸收器相連接，用壓力抽氣瓶將土壤空氣抽入採集袋。

用墨水筆在現場填寫《氣體樣品采樣交接記錄表》，字跡應端正、清晰、各欄內容填寫齊全。

采樣結束前，應核對采樣計劃、采樣記錄與樣品，如有錯誤或者漏采，應立即重采或補采。

5. 空氣微生物的采樣方法有幾種

檢測空氣中微生物含量通常有：浮游菌檢測法與沉降菌檢測法兩種方法.
分別按：《GB/T16293-1996醫葯工業潔凈室(區)浮游菌的測試方法》、《GB/T16294-1996醫葯工業潔凈室(區)沉降菌的測試方法》操作.一般在潔凈室綜合性能驗收時,30萬級時才測沉降菌,不測浮游菌,其它的則採用浮游菌檢測法.
按照上述兩個檢測規程均可采作普通肉湯瓊脂培養基.

6. 微生物檢測有哪些

1、體積測量法：又稱測菌絲濃度法。原理：通過測定一定體積培養液中所含菌絲的量來反映微生物的生長狀況。

菌絲濃度測定法是大規模工業發酵生產上微生物生長的一個重要監測指標。這種方法比較粗放，簡便，快速，但需要設定一致的處理條件，否則偏差很大，由於離心沉澱物中夾雜有一些固體營養物，結果會有一定偏差。

2、稱乾重法。原理：利用離心或過濾法測定。一般乾重為濕重的10-20%。稱乾重發法較為煩瑣，通常獲取的微生物產品為菌體時，常採用這種方法，如活性乾酵母（activity dry yeast, ADY）,一些以微生物菌體為活性物質的飼料和肥料。

3、比濁法。原理：微生物的生長引起培養物混濁度的增高。通過紫外分光光度計測定一定波長下的吸光值，判斷微生物的生長狀況。該法主要用於發酵工業菌體生長監測。

4、菌絲長度測量法。方法：對於絲狀真菌和一些放線菌，可以在培養基上測定一定時間內菌絲生長的長度。

7. 大氣環境污染的生物監測方法有哪些各有何特點

用於生物監測的手段很多。大氣污染的生物監測手段主要有：①利用指示植物監測大氣污染，主要是根據各種植物在大氣污染的環境中葉片上出現的傷害症狀，對大氣污染作出定性和定量的判斷。②測定植物體內污染物的含量，估測大氣污染狀況。③觀察植物的生理生化反應,如酶系統的變化、發芽率的降低等，對大氣污染的長期效應作出判斷。④測定樹木的生長量和年輪等，估測大氣污染的現狀和歷史。⑤利用某些敏感植物（如地衣、苔蘚等）製成大氣污染植物監測器，進行定點觀測（見大氣污染的生物監測）

8. 檢測空氣微生物的采樣方法有幾種

檢測空氣中微生物有凝膠膜過濾方法和撞擊法兩種方式；

MD8 空氣采樣器

台式空氣采樣器MD8 Airscan 和攜帶型空氣采樣器 AirPort MD8 設計用於檢測空氣中最小的微生物。

BACTair: 不同凡響

預裝的瓊脂平板採用即用型無菌包裝，可直接用撞擊法采樣。

凝膠膜過濾器：連續主動空氣監測

凝膠膜與 MD8 空氣采樣器結合使用（凝膠膜過濾法），用於採集空氣中的微生物和病毒。

9. 固體,液體,氣體和生物樣本的採集方法

水樣的採集與制備

水樣比較均勻，在不同深度分別取樣即可，粘稠或含有固體的懸浮液或非均勻液體，應充分攪勻，以保證所取樣品具有代表性。

採集水管中或有泵水井中的水樣時，取樣前需將水龍頭或泵打開，先放10～15min的水再取。採取池、江、河中的水樣，因視其寬度和深度採用不同的方法採集，對於寬度窄、水淺的水域，可用單點布設法，采表層水分析即可。對寬度大，水深的水域，可用斷面布設法，采表層水、中層水和底層水供分析用。但對靜止的水域，應采不同深度的水樣進行分析。采樣的方法是將干凈的空瓶蓋上塞子，塞子上系一根繩，瓶底系一鐵砣或石頭，沉入離水面一定深處，然後拉繩拔塞讓水灌滿瓶後取出。

6.1.5 氣體樣品的採集

⒈采樣方法

抽氣法有以下幾種：

① 吸收液：主要吸收氣態和蒸氣態物質。常用的吸收液有：水、水溶液，有機溶劑。吸收液的選擇依據被測物質的性質及所用分析方法而定。但是，吸收液必須與被測物質發生的作用快，吸收率高，同時便於以後分析步驟的操作。

② 固體吸附劑：有顆粒狀吸附劑和纖維狀吸附劑兩種。前者有硅膠、素陶瓷等，後者有濾紙、濾膜、脫脂棉、玻璃棉等。吸附作用主要是物理性阻留，用於採集氣溶膠。硅膠常用的是粗孔及中孔硅膠，這兩種硅膠均有物理和化學吸附作用。素陶瓷需用酸或鹼除去雜質，並在110～120℃烘乾，由於素陶瓷並非多孔性物質，僅能在粗糙表面上吸附，所以采樣後洗脫比較容易。採用的濾紙及濾膜要求質密而均勻，否則采樣效率降低。

③ 真空瓶法。當氣體中被測物質濃度較高，或測定方法的靈敏度較高，或當被測物質不易被吸收液吸收，而且用固體吸附劑采樣有困難時，可用此方法采樣。將不大於 1L的具有活塞的玻璃瓶抽空，在采樣地點打開活塞，被測空氣立即充滿瓶中，然後往瓶中加入吸收液，使其有較長的接觸時間以利吸收被測物質，然後進行化學測定。

④ 置換法。採取小量空氣樣品時，將采樣器(如采樣瓶、采樣管)連接在一抽氣泵上，使通過比采樣器體積大6～10倍的空氣，以便將采樣器中原有的空氣完全置換出來。也可將不與被測物質起反應的液體如水、食鹽水注滿采樣器，采樣時放掉液體、被測空氣即充滿采樣器中。

⑤ 靜電沉降法。此法常用於氣溶膠狀物質的采樣。空氣樣品通過12000～20000伏電壓的電場，在電場中氣體分子電離所產生的離子附著在氣溶膠粒子上，使粒子負帶電荷，此帶電荷的粒子在電場的作用下就沉降到收集電極上，將收集電極表面沉降的物質洗下，即可進行分析。此法采樣效率高、速度快，但在有易爆炸性氣體、蒸氣或粉塵存在時不能使用。

⒉采樣原則

⑴ 采樣效率。在采樣過程中，要得到高的采樣效率，必須採用合適的收集器及吸附劑，確定適當的抽氣速度，以保證空氣中的被測物質能完全地進入收集器中，被吸收或阻留下來，同時又便於下一步的分離測定。

⑵ 采樣點的選擇。根據測定的目的選擇采樣點，同時應考慮到工藝流程，生產情況，被測物質的理化性質和排放情況，以及當時的氣象條件等因素。

每一個采樣點必須同時平行採集兩個樣品，測定結果之差不得超過20%，記錄采樣時的溫度和壓力。

如果生產過程是連續性的，可分別在幾個不同地點，不同時間進行采樣。如果生產是間斷性的，可在被測物質產生前、產生後以及產生的當時，分別測定。

10. 活體生物測定方法有哪些

1．用家蠅檢測蔬菜中的殘留農葯

20世紀60年代後期，我國台灣農業試驗所採用生物測定方法進行農葯殘留檢驗，其原理是釋放高敏感性的家蠅於菜汁中，4～5h後家蠅死亡率在10%以下即為合格，該方法過程簡單，無須復雜儀器檢測，缺點是檢測時間較長，只對部分殺蟲劑有反應，無法分辨殘留農葯的種類，准確性較低。

2．用大型水蚤為試驗材料監測蔬菜中農葯的殘留

該方法的原理是將蔬菜汁按ISO標准稀釋，每個劑量10個水蚤，測定24h、48h、96h的實驗結果，以實驗水蚤的心臟停止跳動作為最終死亡指標，測定半數致死濃度。袁振華等對該類測定方法作了探索性的研究，研究表明，大型水蚤測試技術完全適用蔬菜中的農葯殘留測定，並認為該方法具有快速、靈敏、簡便、經濟等特點，但該方法同樣無法分辨殘留農葯的種類。

3．用發光細菌檢測農葯殘留

發光細菌是一類非致病性的普通細菌，在正常的生理條件下能發出波長為490nm的藍綠色的可見光。這種發光現象是細菌新陳代謝的結果，是呼吸鏈上的一個側支。當發光細菌接觸干擾和損害新陳代謝的物質，特別是有毒、有害物質時，就能使細菌發光強度下降或熄滅，而且毒物的濃度和細菌的發光強度呈負相關線性關系變化。利用這一特點就可以對農葯殘留試樣進行測定。袁東星等利用發光菌進行農葯殘留檢測，最小檢出濃度為3mg/L。該方法已能用於檢測甲胺磷、敵敵畏等常用有機磷農葯。

發光細菌能同時對多種毒物產生發光受抑反應，但農葯濃度與發光強度的線性關系不夠准確，發光菌被激活後，它的發光強度會隨時間的變化而改變。它具有快速、簡便、靈敏、價廉的特點，在定性、半定量的現場快速檢測中逐漸顯現出了其優勢。隨著食品工業的發展，採用發光細菌法檢測食品安全性作為一種快速的初篩方法，已逐漸受到人們的廣泛關注。