微生物中滅菌試管如何包裝

『壹』 微生物中的培養基的配製與滅菌的具體操作是怎樣的

培養基的配製與滅菌

1目的
1.1了解並掌握培養基的配製、分裝方法
1.2掌握各種實驗室滅菌方法及技術。
2原理
培養基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養料。由於微生物具有不同的營養類型，對營養物質的要求也各不相同，加之實驗和研究的目的不同，所以培養基的種類很多，使用的原料也各有差異，但從營養角度分析，培養基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無機鹽、生長素以及水分等。另外，培養基還應具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。
瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質，是應用最廣的凝固劑。加瓊脂製成的培養基在98～100℃下融化，於45℃以下凝固。但多次反復融化，其凝固性降低。
任何一種培養基一經製成就應及時徹底滅菌，以備純培養用。一般培養基的滅菌採用高壓蒸汽滅菌。
3材料
3.1器皿及材料
天平、稱量紙、牛角匙、精密pH試紙、量筒、刻度搪瓷杯、試管、三角瓶、漏斗、分裝架、移液管及移液管筒、培養皿及培養皿盒、玻璃棒、燒杯、試管架、鐵絲筐、剪刀、酒精燈、棉花、線繩、牛皮紙或報紙、紗布、乳膠管、電爐、滅菌鍋、乾燥箱。
3.2葯品試劑
蛋白腖、牛肉膏、NaCl、K2HPO4、瓊脂、NaNO3、KCl、MgSO4、FeSO4、蔗糖、麥芽糖、木糖、葡萄糖、半乳糖、乳糖、土豆汁、豆芽計、磷酸銨、5%NaOH溶液、5%HCl溶液。
4流程
稱葯品→溶解→調pH值→融化瓊脂→過濾分裝→包紮標記→滅菌→擺斜面或倒平板。
5步驟
5.1培養基的制備
5.1.1稱量葯品
根據培養基配方依次准確稱取各種葯品，放入適當大小的燒杯中，瓊脂不要加入。蛋白腖極易吸潮，故稱量時要迅速。
5.1.2溶解
用量筒取一定量(約占總量的1/2)蒸餾水倒入燒杯中，在放有石棉網的電爐上小火加熱，並用玻棒攪拌，以防液體溢出。待各種葯品完全溶解後，停止加熱，補足水分。如果配方中有澱粉，則先將澱粉用少量冷水調成糊狀，並在火上加熱攪拌，然後加足水分及其它原料，待完全溶化後，補足水分。
5.1.3調節pH
根據培養基對pH的要求，用5%NaOH或5%HC1溶液調至所需pH。測定pH可用pH試紙或酸度計等。
5.1.4溶化瓊脂
固體或半固體培養基須加入一定量瓊脂。瓊脂加入後，置電爐上一面攪拌一面加熱，直至瓊脂完全融化後才能停止攪拌，並補足水分(水需預熱)。注意控制火力不要使培養基溢出或燒焦。
5.1.5過濾分裝
先將過濾裝置安裝好（圖3-1）。如果是液體培養基，玻璃漏斗中放一層濾紙，如果是固體或半固體培養基，則需在漏斗中放多層紗布，或兩層紗布夾一層薄薄的脫脂棉趁熱進行過濾。過濾後立即進行分裝。分裝時注意不要使培養基沾染在管口或瓶口，以免浸濕棉塞， 引起污染。液體分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。固體分裝裝量為管高的1/5，半固體分裝試管一般以試管高度的1/3為宜；分裝三角瓶，其裝量以不超過三角瓶容積的一半為宜。
5.1.6包紮標記
培養基分裝後加好棉塞或試管帽，再包上一層防潮紙，用棉繩系好。在包裝紙上標明培養基名稱，制備組別和姓名、日期等。
5.1.7滅菌
上述培養基應按培養基配方中規定的條件及時進行滅菌。普通培養基為121℃20min，以保證滅菌效果和不損傷培養基的有效成份。培養基經滅菌後，如需要作斜面固體培養基，則滅菌後立即擺放成斜面(圖3-2)，斜面長度一般以不超過試管長度的1/2為宜；半固體培養基滅菌後，垂直冷凝成半固體深層瓊脂。
5.1.8倒平板
將需倒平板的培養基，於水浴鍋中冷卻到45～50℃,立刻倒平板。
5.2滅菌方法
滅菌是指殺死或消滅一定環境中的所有微生物，滅菌的方法分物理和化學滅菌法兩大類。本實驗主要介紹物理方法的一種，即加熱滅菌。
加熱滅菌包括濕熱和乾熱滅菌兩種。通過加熱使菌體內蛋白質凝固變性，從而達到殺菌目的。蛋白質的凝固變性與其自身含水量有關，含水量越高，其凝固所需要的溫度越低。在同一溫度下，濕熱的殺菌效力比乾熱大，因為在濕熱情況下，菌體吸收水分，使蛋白質易於凝固；同時濕熱的穿透力強，可增加滅菌效力。
5.2.1.高壓蒸汽滅菌法
高壓蒸汽滅菌用途廣，效率高，是微生物學實驗中最常用的滅菌方法。這種滅菌方法是基於水的沸點隨著蒸汽壓力的升高而升高的原理設計的。當蒸汽壓力達到1.05kg/cm2時，水蒸氣的溫度升高到121℃，經15～30min，可全部殺死鍋內物品上的各種微生物和它們的孢子或芽孢。一般培養基、玻璃器皿以及傳染性標本和工作服等都可應用此法滅菌（圖3-4）。
5.2.1.1操作方法和注意事項如下
加水
打開滅菌鍋蓋，向鍋內加水到水位線。立式消毒鍋最好用已煮開過的水，以便減少水垢在鍋內的積存。注意水要加夠，防止滅菌過程中干鍋。
裝料、加蓋
滅菌材料放好後，關閉滅菌器蓋，採用對角式均勻擰緊鍋蓋上的螺旋，使蒸汽鍋密閉，勿使漏氣。
排氣

打開排氣口(也叫放氣閥)。用電爐加熱，待水煮沸後，水蒸氣和空氣一起從排氣孔排出，當有大量蒸汽排出時，維持5min，使鍋內冷空氣完全排凈。
升壓、保壓和降壓
當鍋內冷空氣排凈時，即可關閉排氣閥，壓力開始上升。當壓力上升至所需壓力時，控制電壓以維持恆溫，並開始計算滅菌時間，待時間達到要求（一般培養基和器皿滅菌控制在121℃，20min）後，停止加熱，待壓力降至接近「0」時，打開放氣閥。注意不能過早過急地排氣，否則會由於瓶內壓力下降的速度比鍋內慢而造成瓶內液體沖出容器之外。
滅菌後的培養基空白培養
滅菌後的培養基放於37℃培養箱中培養，經24h培養無菌生長，可保存備用；斜面培養基取出後，立即擺成斜面後空白培養；半固體的培養基垂直放置凝成半固體深層瓊脂後，空白培養。
5.2.2乾熱滅菌法
通過使用乾熱空氣殺滅微生物的方法叫乾熱滅菌。一般是把待滅菌的物品包裝就緒後，放入電烘箱中烘烤，即加熱至160～170℃維持1～2h。
乾熱滅菌法常用於空玻璃器皿、金屬器具的滅菌。凡帶有膠皮的物品，液體及固體培養基等都不能用此法滅菌。
5.2.2.1滅菌前的准備
玻璃器皿等在滅菌前必須經正確包裹和加塞，以保證玻璃器皿於滅菌後不被外界雜菌所污染。常用玻璃器皿的包紮和加塞方法如下：平皿用紙包紮或裝在金屬平皿筒內；三角瓶在棉塞與瓶口外再包以厚紙，用棉繩以活結扎緊，以防滅菌後瓶口被外部雜菌所污染；吸管以拉直的曲別針一端放在棉花的中心，輕輕捅入管口，松緊必須適中，管口外露的棉花纖維統一通過火焰燒去，滅菌時將吸管裝入金屬管筒內進行滅菌，也可用紙條斜著從吸管尖端包起，逐步向上卷，頭端的紙卷捏扁並擰幾下，再將包好的吸管集中滅菌。
5.2.2.2乾燥箱滅菌
將包紮好的物品放入乾燥烘箱內，注意不要擺放太密，以免妨礙空氣流通；不得使器皿與烘箱的內層底板直接接觸。將烘箱的溫度升至160～170℃並恆溫1～2h，注意勿使溫度過高，超過170℃，器皿外包裹的紙張、棉花會被烤焦燃燒。如果是為了烤乾玻璃器皿，溫度為120℃持續30分鍾即可。溫度降至60～70℃時方可打開箱門，取出物品，否則玻璃器皿會因驟冷而爆裂。
用此法滅菌時，絕不能用油、蠟紙包紮物品。
5.2.2.3火焰滅菌
直接用火焰灼燒滅菌，迅速徹底。對於接種環，接種針或其它金屬用具，可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱進行滅菌。此外，在接種過程中，試管或三角瓶口，也採用通過火焰而達到滅菌的目的。
6結果
6.1記錄各種不同物品所用的滅菌方法及滅菌條件（溫度、壓力等）。
6.2試述高壓蒸汽滅菌的過程及注意事項。
7思考
7.1制備培養基的一般程序是什麼？
7.2做過本次實驗後，你認為在制備培養基時要注意些什麼問題？
7.3滅菌在微生物學實驗操作中有何重要意義？
4試述高壓蒸汽滅菌的操作方法和原理。
5高壓蒸汽滅菌時應注意哪些事項？

『貳』 包紮移液管、試管和三角瓶時,要注意哪些問題

1.移液管的包裝
准備好乾燥的移液管，在距其粗頭頂端約0．5cm處，塞一小段約1．5cm長的棉花，以免使用時將雜菌吹入其中，或不慎將微生物吸出管外。棉花要塞得松緊恰當，過緊，吹吸液體太費力；過松，吹氣時棉花會下滑。然後分別將每支移液管尖端斜放在舊報紙條的近左端，與報紙約呈45度角，並將左端多餘的一段紙覆折在移液管上，再將整根移液管捲入報紙，右端多餘的報紙打一小結。如此包好的很多移液管可再用一張大報紙包好，進行乾熱滅菌。如果有裝移液管的銅筒，亦可將分別包好的移液管一起裝入銅筒，進行乾熱滅菌；若預計一筒滅菌的移液管可一次用完，亦可不用報紙包而直接裝入銅筒滅菌，但要求將移液管的尖端插入筒底，粗端在筒口，使用時，銅筒卧放在桌上，用手持粗端拔出。
2.試管和三角燒瓶等的包裝
試管管口和三角燒瓶瓶口塞以棉花塞，然後在棉花塞與管口和瓶口的外面用兩層報紙（不可用油紙）與細線包紮好，進行乾熱滅菌。試管塞好棉花塞後也可一起裝在鐵絲簍中，用大張報紙將一簍試管口做一次包紮，包紙的目的在於保存期避免灰塵侵入。
空的玻璃器皿一般用乾熱滅菌，若需濕熱滅菌，則要多用幾層報紙包紮，外面最好再加一層牛皮紙。
如果試管是蓋的鋁帽，則不必包紙，可直接乾熱滅菌。用塑料帽，則宜濕熱滅菌。

『叄』 做微生物測試的儀器在高壓滅菌時為什麼要用報紙包著再滅菌呢

往滅菌鍋加水（差不多到鐵絲網即可，不要加太多）－－放入要消毒的器皿，只是如果要滅菌的是試管類的東西時，包紮的時候一定要記得在紗布的外面再包

『肆』 微生物實驗中，移液槍，移液管和培養皿怎麼包紮 如果有視頻和圖示更好。

1、移液槍：用八層紗布包裹，然後牛皮紙包裹，然後棉繩緊密包紮。問題是大多數的槍都是不能滅菌的，你得先確認你的槍可以滅菌。
2、移液管：一般情況下傳統的方法是用報紙撕成4公分寬50公分長的條，斜著包紮，然後將很多根包好的再用一張大報紙包在一起。不過我們的方法是：用八層紗布車成一個袋子，一頭長一些做蓋子，然後袋子中間車成一條一條的，約1公分寬，然後將移液管分別單獨放入，再將長一些的那頭蓋過來，捲成一卷，外面用報紙抱住，再用棉繩緊密包紮。
3、培養皿：一般8到12套為一組，疊在一起後橫過來，放在報紙的一頭，然後慢慢捲起來，以便卷一邊將兩頭的紙折起來。最後將紙頭塞在折縫里就行。
視頻幾乎沒有，除非我幫你拍一段，可是怎麼給你呢。圖片我先找下，你可以加我Hi好友。

『伍』 微生物實驗室常用的滅菌方法有哪些

常用的滅菌方法主要包括以下三種：乾熱滅菌；濕熱滅菌；紫外滅菌
1.乾熱滅菌法
1.1灼燒與火焰滅菌：灼燒主要用於接種工具滅菌,在火焰上灼燒即可達滅菌目的,火焰滅菌通常用於無菌操作中試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等實驗物品的滅菌,防止管口污染。
1.2干烤滅菌：利用熱輻射及乾熱空氣進行滅菌.將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷製品包裝後,在烤箱內加熱至160℃,保溫2h可完全滅菌.但不宜超過170℃.此外降溫過速,驟冷易引起玻璃器皿炸裂.乾熱滅菌時裝入干烤箱內的物品切勿緊密,應有空隙,利於熱空氣流動,過密,致使溫度不均,部分物品滅菌不徹底.
2.濕熱滅菌法
通過加壓提高蒸汽溫度,用高壓蒸汽滅菌,溫度高,滅菌效果最好.
注意事項：1.完全排除高壓滅菌器內的冷空氣.有冷空氣存在時,在同一表壓下所達到的溫度值要低,而冷空氣排出越少,溫度就低得越多.在高壓蒸汽滅菌時,為保證達到規定的溫度,必須將冷空氣完全排除.否則,雖然壓力達到,而溫度達不到規定的要求,滅菌就不徹底.
3.紫外線
殺菌譜廣,但穿透力弱,影響因素多,殺菌效能受到一定限制.
紫外線消毒效果與紫外線強度、照射時間、溫度與濕度等因素有關.紫外燈殺菌的溫度以20~40℃,相對濕度40%~60%為宜.

『陸』 微生物實驗室滅菌

我這學期親自參與過微生物實驗室滅菌全過程。
我們使用的是高壓蒸汽滅菌鍋。首先將分裝好的試管或者需要滅菌的三角瓶用報紙通過棉線捆紮牢固，一可以避免試管混亂，二是可以防止三角瓶等容器棉塞不夠緊，而後期進入空氣污染溶液。
這一步完了就可以放入高壓蒸汽滅菌鍋，當然這之前要往滅菌鍋中加入水，然後放入容器，蓋上鍋蓋，打開電源，調制溫度和時間，在溫度上升的過程需要有人守在鍋旁，盯著壓力表防止裡面壓力過大使得液體沖開瓶塞，是之前所做成為無用功。調控壓力可以通過放氣和防水完成。
最後進入滅菌階段，當達到指定溫度並穩定後，就不用人在守著，只要等著30分鍾或其他倒計時時間一到，壓力恢復正常，就可以打開鍋蓋，拿出滅菌的容器即可。
如果滿意，請採納我吧~~~(*^__^*)
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『柒』 請問：平皿和試管怎樣滅菌

使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌。用牛皮紙包起來，115度滅菌30分鍾，或120度滅菌20分鍾

操作步驟：

1．首先將內層滅菌桶取出，再向外層鍋內加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。

2．放回滅菌桶，並裝入待滅菌物品。注意不要裝得太擠，以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。

3．加蓋，並將蓋上的排氣軟管插入內層滅菌桶的排氣槽內。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。

4．用電爐加熱，並同時打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內的冷空氣。待冷空氣完全排盡後，關上排氣閥，讓鍋內的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當鍋內壓力升到所需壓力時，控制熱源，維持壓力至所需時間。

5．滅菌所需時間到後，切斷電源，讓滅菌鍋內溫度自然下降，當壓力表的壓力降至0時，打開排氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品。如果壓力未降到0時，打開排氣閥，就會因鍋內壓力突然下降，使容器內的培養基由於內外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養基而發生污染。

『捌』 微生物滅菌時包報紙幾層比較好呢

微生物滅菌時包報紙可避免在滅菌後從滅菌鍋中取出時燙傷手，並有防止試管內培養基噴出燙傷人的作用（因為滅菌鍋是高壓鍋）．報紙一般包2層就達到上述作用了．

『玖』 微生物檢驗器皿包紮滅菌時，試管可以每10支一紮，管口用牛皮紙包好

你好！
如果先分別把每根試管塞好，再紮成一捆一起滅菌是沒問題的
如果對你有幫助，望採納。

『拾』 微生物技能操作中常用的平板和移液管如何洗滌和包裝

正常用水洗加試管刷刷就可以呀，但如果是新的，就還需要用鹽酸洗滌一下。
包裝的時候，因為平板都是成對的，把他們扣好，立起來，用報紙邊滾動平板邊包，包好後再用繩十字交叉纏上就可以了~