生物如何檢測蛋白質

❶ 高中生物實驗之還原糖、脂肪和蛋白質的檢測

高中生物的學習必然離不開實驗，高中生物實驗不僅研究一切的生命現象和生命活動規律,它還與生命軌跡周圍的環境有著千絲萬縷的關系。那麼高中生物實驗之還原糖、脂肪和蛋白質應該如何檢測呢?下面我就分享一些高中生物實驗之還原糖、脂肪和蛋白質的檢測方法，希望對同學們有幫助。

高中生物實驗之還原糖、脂肪和蛋白的檢測原理

1.還原糖用斐林試劑或者班氏試劑，這兩種試劑都是 淺藍色的，加入還原糖出現磚紅色沉澱

2.脂肪用蘇丹紅，可以發現被染成橘紅色

3.蛋白質有肽鍵，也就是有雙縮脲結構，用雙縮脲試劑，變成紫紅色

高中生物實驗之還原糖的檢測

1.還原糖定義：還原糖是指具有還原性的糖類。在糖類中，分子中含有游離醛基或羰基的單糖和含有游離醛基的二糖都具有還原性。還原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖等。

2.高中生物實驗之還原糖的檢測方法

①向試管內注入2mL待測組織葯液

②向試管內注入1mL斐林試劑(甲液和乙液等量混合均勻後再注入)

③將試管放入盛有50～65℃溫水的大燒杯中加熱約2min

④觀察試管中出現的顏色變化

高中生物實驗之脂肪的檢測

1.脂肪定義：存在於人體和動物的皮下組織及植物體中，是生物體的組成部分和儲能物質。

2.高中生物實驗之脂肪的檢測方法

①製作切片(切片越薄越好)將最薄的花生切片放在載玻片中央

②染色(滴蘇丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min後吸去染液→滴體積分數50%的酒精洗去浮色→吸去多餘的酒精)

③製作裝片(滴1～2滴清水於材料切片上→蓋上蓋玻片)

④鏡檢鑒定(顯微鏡對光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒)

高中生物實驗之蛋白質的檢測

1.蛋白質定義：蛋白質是組成人體一切細胞、組織的重要成分。蛋白質是生命的物質基礎，是有機大分子，是構成細胞的基本有機物，是生命活動的主要承擔者，氨基酸是蛋白質的基本組成單位。

2.高中生物實驗之蛋白質的檢測方法

①試管中加樣液2mL

②加雙縮脲試劑0.1g/mL的NaOH溶液1mL，搖勻

③加雙縮尿試劑0.01g/mL的CuSO4溶液4滴，搖勻

④觀察顏色變化(紫色)

❷ 2.生物實驗中,用什麼試劑檢測蛋白質,會出現什麼現象

雙縮脲試劑是一種用於鑒定蛋白質的分析化學試劑。它是一種鹼性的含銅試液，呈藍色，由0.1g/mL氫氧化鈉或氫氧化鉀、0.01g/mL硫酸銅和酒石酸鉀鈉配製而成。會遇到蛋白質顯紫色。

雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲，由於蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，因此也能與銅離子在鹼性溶液中發生雙縮脲反應。當底物中含有肽鍵時（多肽），試液中的銅與多肽配位，絡合物呈紫色。可通過比色法分析濃度，在紫外可見光譜中的波長為540nm。鑒定反應的靈敏度為5-160mg/ml。

❸ 怎樣檢測生物組織中的糖類，脂肪和蛋白質

糖類中還原糖(例葡萄糖、果糖、麥芽糖等)可用斐林試劑檢測。先准備組織樣液，再准備0·1g/ml的氫氧化鈉溶液、0.05g/ml硫酸銅溶液。方法步驟:1.(1)取2ml組織樣液加入1支潔凈的試管。
(2)再另取2支試管，分別加入2mlNaOH與硫酸銅溶液，再把硫酸銅溶液倒入氫氧化鈉溶液的試管，振盪混合均勻，即為斐林試劑。
(3)把新配製的斐林試劑與組織樣液,等體積混合，振盪搖勻，然後放入50~60度水浴中保溫，觀察顏色變化。如出現磚紅色沉澱，即說明有還原糖。
非還原糖(澱粉用碘液檢測即可)碘遇澱粉變藍。
脂肪用蘇丹三或蘇丹四檢測，材料可用浸泡過"的花生種子，先製成臨時裝片，再用顯微鏡觀察。或者把試劑滴加到組織樣液中，觀察顏色變化。
臨時裝片製作:用刀片先在花子葉切開，然後做徒手切片，放在清水中，然後用毛筆蘸取最薄的一片放在載玻片中央，滴加蘇丹三溶液染色3到5分鍾，用吸水紙吸取多餘染液，再用體積分數為50%酒精洗去浮色，蓋上蓋玻片。放在顯微鏡下觀察。脂肪粒被蘇丹三染成橘黃色、蘇丹四染成紅色。(上述徒手切片做不好，可在花生子葉上
刮取少量粉末，直接塗在載玻片上來替代。

蛋白質用雙縮脲試劑來檢測。雙縮脲是由A液(0.1g/ml的氫氧化鈉)、B液(O.01g/mL的硫酸銅溶液組成。)
使用時取組織樣液(用蛋清稀釋液或豆漿)一2mL加入潔凈試管，然後先滴加1mLA液，振盪試管搖勻，再滴加3~4滴硫酸銅溶液，搖勻。蛋白質遇雙縮脲生成紫色。

❹ 敘述生物樣品中蛋白質含量測定方法有哪些

概述：目前常用的有四種古老的經典方法，即定氮法，雙縮尿法（Biuret法）、Folin－酚試劑法（Lowry法）和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法，即考馬斯亮藍法（Bradford法）。其中Bradford法和Lowry法靈敏度最高，比紫外吸收法靈敏10～20倍，比Biuret法靈敏100倍以上。定氮法雖然比較復雜，但較准確，往往以定氮法測定的蛋白質作為其他方法的標准蛋白質。
注意點：值得注意的是，這後四種方法並不能在任何條件下適用於任何形式的蛋白質，因為一種蛋白質溶液用這四種方法測定，有可能得出四種不同的結果。每種測定法都不是完美無缺的，都有其優缺點。在選擇方法時應考慮：①實驗對測定所要求的靈敏度和精確度；②蛋白質的性質；③溶液中存在的干擾物質；④測定所要花費的時間。
考馬斯亮藍法（Bradford法），由於其突出的優點，正得到越來越廣泛的應用。

❺ 怎樣檢測生物組織中的蛋白質

蛋白質的鑒定原理:鑒定生物組織中是否含有蛋白質時,常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑.雙縮脲試劑的成分是質量濃度為0.1 g／mL的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.01 g／mL的硫酸銅溶液.在鹼性溶液(NaOH)中,雙縮脲(H2NOC—N...

❻ 如何檢測生物組織中的糖類，脂肪，和蛋白質

一．實驗目的：嘗試用化學試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質
二．實驗原理：某些化學試劑能使生物組織中的有關有機化合物,產生特定的顏色反應.
1．可溶性還原糖（如葡萄糖、果糖、麥芽糖）與斐林試劑發生作用,可生成磚紅色的Cu 2O沉澱.即Cu ( OH ) 2被還原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.
2．脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色（或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色）.
3．蛋白質與雙縮脲試劑發生作用,產生紫色反應.（蛋白質分子中含有很多肽鍵,在鹼性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用,產生紫色反應.）
4.澱粉遇碘變藍色.
三．實驗材料
1．做可溶性還原性糖鑒定實驗,應選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨.（因為組織的顏色較淺,易於觀察.）
2．做脂肪的鑒定實驗.應選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實驗前一般要浸泡3-4小時（也可用蓖麻種子）.
3．做蛋白質的鑒定實驗,可用富含蛋白質的黃豆或雞蛋清.
四、實驗試劑
斐林試劑（包括甲液：質量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：質量濃度為0.05g/ mL CuSO4溶液）、蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、雙縮脲試劑（包括A液：質量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和B液：質量濃度為0.01g/ mL CuSO4溶液）、體積分數為50%的酒精溶液,碘液、蒸餾水.
五、方法步驟：
（一） 可溶性糖的鑒定
1.制備組織樣液.
蘋果或梨組織液必須臨時制備，因蘋果多酚氧化酶含量高,組織液很易被氧化成褐色,將產生的顏色掩蓋.
2.注入2mL組織樣液.
3.注入1mL新制的斐林試劑,振盪.
（現配現用、先混後加）
應將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配製、儲存,使用前才將甲、
乙液等量混勻成斐林試劑；切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測.
斐林試劑很不穩定,甲、乙液混合保存時,生成的Cu ( OH ) 2在70-900C下分解成黑色CuO和水；甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發生反應,無
Cu ( OH ) 2生成.
4.水浴加熱：試管放在盛有50-650C溫水的大燒杯中,加熱約2分鍾,觀察到溶液顏色：淺藍色 → 棕色 → 磚紅色（沉澱）
最好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不朝向實驗者.
也可用酒精燈對試管直接加熱.
防止試管內的溶液沖出試管,造成燙傷；
縮短實驗時間.
（二）脂肪的鑒定
取材、切片、製片：花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水.

干種子要浸泡3-4小時,新花生的浸泡時間可縮短.
浸泡時間短,不易切片,浸泡時間過長,組織較軟,切下的薄片不易成形.切片要盡可能薄些,便於觀察.
染色：在子葉薄片上滴2-3滴蘇丹Ⅲ（染色3分鍾）或蘇丹Ⅳ染液（染色1分鍾）.
染色時間不宜過長.
漂洗：用吸水紙吸去薄片周圍染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精.
酒精用於洗去浮色,不洗去浮色,會影響對橘黃色脂肪滴的觀察.同時,酒精是脂溶性溶劑,可將花生細胞中的脂肪顆粒溶解成油滴.
用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片.
滴上清水可防止蓋蓋玻片時產生氣泡.
鏡檢：先低後高（高倍鏡用法：移物換器時針反）,低倍鏡下找到花生子葉薄片的最薄處,可看到細胞中有染成橘黃色或紅色圓形小顆粒.
裝片不宜久放.
時間一長,油滴會溶解在乙醇中.
三、蛋白質的鑒定
制備組織樣液.（浸泡、去皮研磨、過濾.）黃豆浸泡1至2天,容易研磨成漿,也可購新鮮豆漿以節約實驗時間.加樣液約2ml於試管中,加入雙縮脲試劑A,搖勻；再加入雙縮脲試劑B液3-4滴,搖勻,溶液變紫色.
A液和B液也要分開配製,儲存.鑒定時先加A液後加B液.
CuSO4溶液不能多加.
先加NaOH溶液,為Cu2+與蛋白質反應提
供一個鹼性的環境.A、B液混裝或同時加入,會導致Cu2+變成Cu ( OH ) 2沉澱,而失效.
否則CuSO4藍色會遮蓋反應的真實顏色.可用蛋清代替豆漿.蛋清要先稀釋.
如果稀釋不夠,在實驗中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應後會粘固在試管內壁上,使反應不容易徹底,並且試管也不易洗干凈.
附：澱粉的檢測和觀察用試管取2ml待測組織樣液,向試管內滴加2滴碘液,觀察顏色變化.碘液不要滴太多，以免影響顏色觀察

❼ 高中生物必修一檢測蛋白質的實驗

folin—酚試劑法。

此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的，只是加入了第二種試劑，即folin-酚試劑，以增加顯色量，從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深蘭色的原因是在鹼性條件下，蛋白質中的肽鍵與銅結合生成復合物。

folin-酚試劑中的磷鉬酸鹽-磷鎢酸鹽被蛋白質中的酪氨酸和苯丙氨酸殘基還原，產生深蘭色（鉬蘭和鎢蘭的混合物）。在一定的條件下，蘭色深度與蛋白的量成正比。

(7)生物如何檢測蛋白質擴展閱讀：

注意事項：

樣品應是均勻的，若是固體樣品應事先研細過篩，液體樣要混合均勻。

樣品放入凱氏燒瓶時，不要黏附瓶頸上，萬一黏附可用少量水緩慢沖下，以免被檢樣消化不完全，使結果偏低。

如果稱1g以上的樣品，就需要K氏燒瓶最小500ml，800~1000ml的更好，這樣的K氏燒瓶對於縮短氨化時間，加熱的均勻性和完全氨化效果最好。

向蒸餾瓶中加入濃鹼時，往往出現褐色沉澱。這時由於分解促進劑與加入的硫酸銅反應，生成氫氧化銅，經加熱後又分解生成氧化銅的沉澱，有時Cu離子與氨作用生成深蘭色的絡合物。

❽ 怎樣檢測生物組織中的蛋白質

蛋白質的鑒定原理:鑒定生物組織中是否含有蛋白質時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質量濃度為0.1 g／mL的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.01 g／mL的硫酸銅溶液。在鹼性溶液(NaOH)中，雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用，形成紫色或紫紅色的絡合物，這個反應叫做雙縮脲反應。由於蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，因此，蛋白質可與雙縮脲試劑發生顏色反應。

用於鑒定還原糖的實驗材料准備植物組織是常用的實驗材料，但必須加以選擇。在雙子葉植物中，光合作用的主要產物葡萄糖形成後，合成為澱粉，暫時儲藏在葉子內，因此最好不用雙子葉植物的葉子作實驗材料。有些單子葉植物，如韭菜、鳶尾，並不將光合作用的初始產物轉變為澱粉，因此葉內含有大量的可溶性單糖，但是，由於葉片中葉綠素的顏色較深，對於鑒定時的顏色反應起著掩蓋作用，導致實驗現象不明顯，因此，也不宜用單子葉植物的葉子作實驗材料。

本實驗最理想的實驗材料是還原糖含量較高的植物組織(或器官)，而且組織的顏色較淺或近於白色的，如蘋果和梨的果實。經試驗比較，顏色反應的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜。
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❾ 蛋白質檢驗實驗步驟

選擇高蛋白的食物漿液，比如豆漿和蛋清。然後准備檢測蛋白質的雙縮脲試劑，由A液和B液組成，A液：氫氧化鈉的質量分數為0.1 g/mL的水溶液。B液：硫酸銅的質量分數為0.01 g/mL的水溶液。

在實驗時，需要現在待測液體中先在加入A液，先製造出鹼性環境，滿足B液與蛋白質反應的條件，這樣才可以方便進行蛋白質的檢測。一段時間後，如果試管中的液體變為紫色，說明待測液體中含有蛋白質，而且顏色深淺與蛋白質濃度成正比。

(9)生物如何檢測蛋白質擴展閱讀：

蛋白質檢驗注意事項：

用戶需要注意樣品應是均勻的，若是固體樣品應事先研細過篩，液體樣要混合均勻。

樣品放入凱氏燒瓶時，不要黏附瓶頸上，萬一黏附可用少量水緩慢沖下，以免被檢樣消化不完全，使結果偏低。

如果稱1g以上的樣品，就需要K氏燒瓶最小500ml，800~1000ml的更好，這樣的K氏燒瓶對於縮短氨化時間，加熱的均勻性和完全氨化效果最好。