生物破膠劑酶有哪些應用

A. 所有生物酶的作用

按照酶促反應的性質，酶可分為六大類：

EC1，氧化還原酶類(Oxidorectases)：催化底物進行氧化還原反應的酶類。例如，乳酸脫氫酶、琥珀酸脫氫酶、細胞色素氧化酶、過氧化氫酶、過氧化物酶等。
EC2，轉移酶類(Transferases)：催化底物之間進行某些基團的轉移或交換的酶類。例如，甲基轉移酶、氨基轉移酶、己糖激酶、磷酸化酶等。
EC3，水解酶類(Hydrolases)：催化底物發生水解反應的酶類。例如，澱粉酶、蛋白酶、脂肪酶、磷酸酶等。
EC4，裂解酶類(Lyases)：催化從底物中移去一個基團並留下雙鍵的反應或其逆反應的酶類。例如，碳酸酐酶、醛縮酶、檸檬酸合酶等。
EC5，異構酶類(Isomerase)：催化各種同分異構體之間的相互轉化的酶類。例如，磷酸丙糖異構酶、消旋酶等。
EC6，連接酶類(Ligases)：催化兩分子底物合成為一分子化合物，同時偶聯有ATP的磷酸鍵斷裂釋放能量的酶類。例如，谷氨醯胺合成酶、氨基酸:tRNA連接酶等。

以下為列表：

EC1：氧化還原酶

催化底物進行氧化還原反應的酶類。例如，乳酸脫氫酶、琥珀酸脫氫酶、細胞色素氧化酶、過氧化氫酶、過氧化物酶等。

EC1.1：作用在給體的CH-OH上
EC1.1.1：以NAD+或NADP+為受體
EC1.1.1.1：醇脫氫酶
EC1.2：作用在給體的醛基或氧橋上
EC1.2.1：以NAD+或NADP+為受體
EC1.2.1.1：已刪除，以EC1.1.1.284和EC4.4.1.22 代替
EC1.3：作用在給體的CH-CH上
EC1.3.1：以NAD+或NADP+為受體
EC1.3.1.1：二氫尿嘧啶脫氫酶(NAD+)
EC1.4：作用在給體的CH-NH2上
EC1.4.1：以NAD+或NADP+為受體
EC1.4.1.1：丙氨酸脫氫酶
EC1.5：作用在給體的CH-NH上
EC1.5.1：以NAD+或NADP+為受體
EC1.5.1.1：吡咯啉-2-羧酸還原酶
EC1.6：作用在NADH或NADPH上
EC1.6.1：以NAD+或NADP+為受體
EC1.6.1.1：NAD(P)+轉氫酶(B)
EC1.6.1.2：NAD(P)+轉氫酶(AB)
EC1.7：以其他含氮化合物為給體
EC1.7.1：以NAD+或NADP+為受體
EC1.7.1.1：硝酸還原酶(NADH+)
EC1.8：作用在給體的硫族上
EC1.8.1：以NAD+或NADP+為受體
EC1.8.1.1：半胱胺脫氫酶
已刪除
EC1.9：作用在給體的血紅素上
EC1.9.3：以氧為受體
EC1.9.3.1：細胞色素C氧化酶
EC1.10：以聯苯酚及其相關化合物為給體
EC1.10.1：以NAD+或NADP+為受體
EC1.10.1.1：順-苊-1,2-二醇脫氫酶
EC1.11：以過氧化物為給體
EC1.11.1：過氧化物酶類
EC1.11.1.1：NADH過氧化物酶§NADH peroxidase
EC1.12：以氫為給體
EC1.12.1：以NAD+或NADP+為受體
EC1.12.1.1：氫化酶
已轉移至EC1.18.99.1
EC1.13：加氧酶
EC1.13.11：加雙氧酶
EC1.13.11.1：兒茶酚-1,2-加雙氧酶
EC1.14：
EC1.14.11：
EC1.14.11.1：γ-丁基甜菜鹼加雙氧酶
EC1.15：以超氧化物為給體
EC1.15.1：
EC1.15.1.1：超氧化物歧化酶
EC1.15.1.2：超氧化物還原酶
EC1.16：氧化金屬離子
EC1.16.1：以NAD+或NADP+為受體
EC1.16.1.1：汞(II)還原酶
EC1.17：作用在給體的CH-CH2上
EC1.17.1：以NAD+或NADP+為受體
EC1.17.1.1：CDP-4-氫-6-脫氧葡萄糖還原酶
EC1.18：以鐵-硫蛋白為給體
EC1.18.1：以NAD+或NADP+為受體
EC1.18.1.1：紅氧還蛋白—NAD+還原酶
EC1.19：以黃素氧還蛋白為給體
EC1.19.6：以氮分子為受體
EC1.19.6.1：固氮酶(黃素氧還蛋白)
EC1.20：作用於給體的磷或砷上
EC1.20.1：以NAD+或NADP+為受體
EC1.20.1.1：膦酸脫氫酶
EC1.21：作用在X-H和Y-H上形成X-Y
EC1.21.3：以氧為受體
EC1.21.3.1：異青黴素-N合酶
EC1.97：其他氧化還原酶
EC1.97.1：
EC1.97.1.1：氯酸還原酶

EC2：轉移酶
催化底物之間進行某些基團的轉移或交換的酶類。例如，甲基轉移酶、氨基轉移酶、己糖激酶、磷酸化酶等。

EC2.1：轉移一個碳
EC2.1.1：甲基轉移酶
EC2.1.1.1：煙醯胺-N-甲基轉移酶
EC2.1.1.2：胍乙酸-N-甲基轉移酶
EC2.1.1.3：噻亭—高半胱氨酸-S-甲基轉移酶
EC2.1.1.4：乙醯血清素-O-甲基轉移酶
EC2.1.1.5：甜菜鹼—高半胱氨酸-S-甲基轉移酶
EC2.1.1.6：鄰苯二酚-O-甲基轉移酶
EC2.1.1.7：煙酸-N-甲基轉移酶
EC2.1.1.8：組胺-N-甲基轉移酶
EC2.1.1.9：硫醇-S-甲基轉移酶
EC2.1.1.10：高半胱氨酸-S-甲基轉移酶
EC2.1.1.11：鎂原卟啉IX甲基轉移酶
EC2.1.1.12：甲硫氨酸-S-甲基轉移酶
EC2.1.1.13：甲硫氨酸合酶
EC2.1.1.14：5-甲基四氫蝶醯三谷氨酸—高半胱氨酸-S-甲基轉移酶
EC2.1.1.15：脂肪酸-O-甲基轉移酶
EC2.1.1.16：亞甲基-脂肪醯基磷脂合酶
EC2.1.1.17：磷脂醯乙醇胺-N-甲基轉移酶
EC2.1.1.18：多糖-O-甲基轉移酶
EC2.1.1.19：三甲基鋶—四氫葉酸-N-甲基轉移酶
EC2.1.1.20：甘氨酸-N-甲基轉移酶
EC2.2：轉移醛基或酮基
EC2.3：醯基轉移酶
EC2.4：糖基轉移酶
EC2.5：轉移除了甲基的烷基和芳基
EC2.6：轉移含氮基團
EC2.7：轉移含磷基團
EC2.8：轉移含硫基團
EC2.9：轉移含硒基團

EC3：水解酶
催化底物發生水解反應的酶類。例如，澱粉酶、蛋白酶、脂肪酶、磷酸酶等。

EC3.1：作用在酯鍵上
EC3.1.1：羧酸酯水解酶
EC3.1.1.1：羧酸酯酶
EC3.1.1.2：芳基酯酶
EC3.1.1.3：三醯甘油脂肪酶
EC3.1.1.4：磷脂酶A2
EC3.1.1.5：溶血磷脂酶
EC3.1.1.6：乙醯酯酶
EC3.1.1.7：乙醯膽鹼酯酶
EC3.1.1.8：膽鹼酯酶
EC3.1.1.9：苯甲醯膽鹼酯酶
已刪除。為EC3.1.1.8的副反應
EC3.1.1.10：托品鹼酯酶
EC3.1.1.11：果膠酯酶
EC3.1.1.12：維A酯酶
已刪除。與EC3.1.1.1相同
EC3.1.1.13：固醇脂酶
EC3.1.1.14：葉綠素酶
EC3.1.1.15：L-阿拉伯糖酸內酯酶
EC3.1.1.16：4-羧甲基-4-羥基異丁烯酸內酯酶
已刪除。EC5.3.3.4與EC3.1.1.24的混合物
EC3.1.1.17：葡糖酸內酯酶
EC3.1.1.18：醛糖酸內酯酶
已刪除。屬於EC3.1.1.17
EC3.1.1.19：糖醛酸內酯酶
EC3.1.1.20：鞣酸酶
EC3.1.1.21：棕櫚酸視黃酯酶
EC3.1.1.22：二聚羥基丁酸水解酶
EC3.1.1.23：醯基甘油脂肪酶
EC3.1.1.24：3-氧己二酸烯醇內酯酶
EC3.1.1.25：1,4-內酯酶
EC3.1.1.26：半乳糖酯酶
EC3.1.1.27：吡哆醇內酯酶
EC3.1.1.28：醯基肉毒鹼水解酶
EC3.1.1.29：氨醯基-tRNA水解酶
EC3.1.1.30：D-阿拉伯糖酸內酯酶
EC3.2：糖基化酶
EC3.3：作用在醚鍵上
EC3.4：肽酶
EC3.5：作用在除了肽鍵的C-N鍵上
EC3.6：作用於酸酐上
EC3.7：作用在C-C鍵上
EC3.8：作用在鹵鍵上
EC3.9：作用在P-N鍵上
EC3.10：作用在S-N鍵上
EC3.11：作用在C-P鍵上
EC3.12：作用在S-S鍵上
EC3.13：作用在C-S鍵上

EC4：裂合酶
催化從底物中移去一個基團並留下雙鍵的反應或其逆反應的酶類。例如，碳酸酐酶、醛縮酶、檸檬酸合酶等。

EC4.1：碳-碳裂合酶
EC4.1.1：羧基裂合酶
EC4.1.1.1：丙酮酸脫羧酶
EC4.1.1.2：草酸脫羧酶
EC4.1.1.3：草醯乙酸脫羧酶
EC4.1.1.4：乙醯乙酸脫羧酶
EC4.1.1.5：乙醯乳酸脫羧酶
EC4.1.1.6：烏頭酸脫羧酶
EC4.1.1.7：苯甲醯甲酸脫羧酶
EC4.1.1.8：草醯CoA脫羧酶
EC4.1.1.9：丙二醯CoA脫羧酶
EC4.1.1.10：氨基丙二酸脫羧酶
已刪除。屬於EC4.1.1.12
EC4.1.1.11：天冬氨酸-1-脫羧酶
EC4.1.1.12：天冬氨酸-4-脫羧酶
EC4.1.1.13：氨甲醯基天冬氨酸脫羧酶
已刪除。
EC4.1.1.14：纈氨酸脫羧酶
EC4.1.1.15：谷氨酸脫羧酶
EC4.1.1.16：羥谷氨酸脫羧酶
EC4.1.1.17：鳥氨酸脫羧酶
EC4.1.1.18：賴氨酸脫羧酶
EC4.1.1.19：精氨酸脫羧酶
EC4.1.1.20：二氨基庚二酸脫羧酶
EC4.1.1.21：磷酸核糖基氨基咪唑脫羧酶
EC4.1.1.22：組氨酸脫羧酶
EC4.1.1.23：乳清苷-5'-脫羧酶
EC4.1.1.24：氨基苯酸脫羧酶
EC4.1.1.25：酪氨酸脫羧酶
EC4.1.1.26：多巴脫羧酶
已刪除。屬於EC4.1.1.28
EC4.1.1.27：色氨酸脫羧酶
已刪除。屬於EC4.1.1.28
EC4.1.1.28：L-芳香氨基酸脫羧酶
EC4.1.1.29：硫代丙氨酸脫羧酶
EC4.1.1.30：泛醯半胱氨酸脫羧酶
EC4.1.1.31：磷酸烯醇丙酮酸羧化酶
EC4.1.1.32：磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(GTP)
EC4.1.1.33：二磷酸甲羥戊酸脫羧酶
EC4.1.1.34：氫-L-古洛糖酸脫羧酶
EC4.1.1.35：UDP-葡糖醛酸脫羧酶
EC4.1.1.36：磷酸泛醯半胱氨酸脫羧酶
EC4.1.1.37：尿卟啉原脫羧酶
EC4.1.1.38：磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(二磷酸)
EC4.1.1.39：核酮糖-二磷酸脫羧酶
EC4.1.1.40：羥基丙酮酸脫羧酶
EC4.2：碳-氧裂合酶
EC4.3：碳-氮裂合酶
EC4.4：碳-硫裂合酶
EC4.5：碳-鹵裂合酶
EC4.6：磷-氧裂合酶
EC4.99：其他裂合酶

EC5：異構酶
催化各種同分異構體之間的相互轉化的酶類。例如，磷酸丙糖異構酶、消旋酶等。

EC5.1：消旋酶和差向異構酶
EC5.1.1：作用於氨基酸及其衍生物上
EC5.1.1.1：丙氨酸消旋酶
EC5.1.1.2：甲硫氨酸消旋酶
EC5.1.1.3：谷氨酸消旋酶
EC5.1.1.4：脯氨酸消旋酶
EC5.1.1.5：賴氨酸消旋酶
EC5.1.1.6：蘇氨酸消旋酶
EC5.1.1.7：二氨基庚二酸差向異構酶
EC5.1.1.8：4-羥脯氨酸差向異構酶
EC5.1.1.9：精氨酸消旋酶
EC5.1.1.10：氨基酸消旋酶
EC5.1.1.11：苯丙氨酸消旋酶(ATP水解)
EC5.1.1.12：鳥氨酸消旋酶
EC5.1.1.13：天冬氨酸消旋酶
EC5.1.1.14：諾卡菌素-A 差向異構酶
EC5.1.1.15：2-氨6-己內醯胺消旋酶
EC5.1.1.16：蛋白質-絲氨酸差向異構酶
EC5.1.1.17：異青黴素-N 差向異構酶
EC5.2：順反異構酶
EC5.3：分子內異構酶
EC5.4：變位酶
EC5.5：分子內裂合酶
EC5.6：其他異構酶

EC6：連接酶

催化兩分子底物合成為一分子化合物，同時偶聯有ATP的磷酸鍵斷裂釋放能量的酶類。例如，谷氨醯胺合成酶、氨基酸:tRNA連接酶等。

EC6.1：形成C-O鍵
EC6.1.1：
EC6.1.1：酪氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.2：色氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.3：蘇氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.4：亮氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.5：異亮氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.6：賴氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.7：丙氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.8：D-丙氨酸-sRNA合成酶
EC6.1.9：—tRNA連接酶
已刪除
EC6.1.10：纈氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.11：甲硫氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.12：絲氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.13：D-丙氨酸—聚(磷酸核糖醇)連接酶
EC6.1.14：甘氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.15：脯氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.16：半胱氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.17：谷氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.18：谷氨醯胺—tRNA連接酶
EC6.1.19：精氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.20：苯丙氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.21：組氨酸—tRNA連接酶
EC6.1.22：天冬醯胺—tRNA連接酶
EC6.1.23：天冬氨酸—tRNAAsn連接酶
EC6.1.24：谷氨酸—tRNAGln連接酶
EC6.1.25：賴氨酸—tRNAPyl連接酶
EC6.2：形成C-S鍵
EC6.3：形成C-N鍵
EC6.4：形成C-C鍵
EC6.5：形成磷酸酯鍵
EC6.6：形成N-M鍵

B. 生物破膠酶的發酵生產及其破膠性能研究

鄭承綱 李宗田 張汝生

（中國石化石油勘探開發研究院，北京 100081）

摘 要 針對中低溫油藏壓裂破膠施工的需求，篩選出生物破膠酶生產菌株——地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）BG1，通過兩水平試驗設計確定了該菌株產酶培養基中的顯著因素（碳源、有機氮源和無機氮源），在此基礎上，又通過中心法則試驗設計對該菌株的產酶培養基組成做進一步優化，最終確定了發酵培養基組成為4.08g/L碳源，11.74g/L有機氮源，5.22g/L無機氮源，2g/L磷源，1.0g/L硫源，0.05g/L微量元素。採用該優化培養基，BG1菌株的生物破膠酶產量達239 U/L。該菌株所產生物破膠酶擁有良好的穩定性，在低於50℃中溫浴6h，酶活力保持率可達85％以上，同時該酶對非極端pH條件、常規地層離子和化學助劑亦表現出良好的穩定性。通過對該酶破膠性能進行研究，發現該酶在中、低溫環境下破膠效果好，30 ～60℃溫度下破膠後的壓裂液黏度分別為11.1cp、2.23cP、1.97cP和4.65cP，破膠返排後地層傷害小，模擬實驗傷害率僅為11.37％，體現了該生物破膠酶在中、低溫油藏壓裂施工中的良好應用前景。

關鍵詞 地衣芽孢桿菌 生物破膠酶 中低溫油藏 穩定性 破膠效能

Proction of Enzymatic Gel Breaker and Its

Gel Breaking Potential Evaluation

ZHENG Chenggang，LI Zongtian，ZHANG Rusheng

（Exploration and Proction Research Institute，SINOPEC，Beijing 100081，China）

Abstract In order to fill the fracturing gel breaking demand in those moderate－/low－temperature reservoirs， Bacillus licheniformis BG1 was selected for the proction of enzymatic gel breaker（EGB）.The significant variables in the EGB fermentation medium were identified as carbon source，organic nitrogen and inorganic nitrogen source by two－level factorial design and were further optimized through full－factorial central composite design.The optimal composition of EGB fermentation medium was 4.08 g/L carbon source，11.74 g/L organic nitrogen，5.22 g/L inorganic nitrogen，2 g/L phosphorus source，1.0 g/L sulfur source，0.05 g/L trace elements and the maximum EGB proction yield was 239U/L.The EGB proced by B.licheniformis BG1 exhibited good thermostability that after incubation at a temperature below 50 ℃for 6 h，the resial activity was still above 85％ retention rate.The enzymatic breaker also showed a good stability withthe non－extreme pH conditions，conventional ion formation and chemical additives.The viscosities of broken fracturing fluids were 11.1 cP，2.23 cP，1.97 cP and 4.65 cP at a temperature ranging from 30℃ to 60℃，respectively.EGB operation caused little damage to the formation that the damage rate was merely 11.37％ in the physical simulation experiment.Based on the results from this work，the enzymatic gel breaker presents a good prospect in the hydraulic fracturing.

Key words Bacillus licheniformis；enzymatic gel breaker；moderate－/low－temperature reservoirs； stability；gel breaking efficiency

水力壓裂是油氣井增產、注水井增注的一項重要技術措施，全國壓裂措施工藝每年達上萬井次，年增油近千萬噸。其過程是用壓裂泵組將壓裂液以高壓力壓開地層，形成裂縫；並用支撐劑支撐裂縫，增加導流能力、減小流動阻力，是一種增產、增注措施。壓裂液的性能是影響壓裂施工成敗的關鍵因素，壓裂液的破膠效果直接影響壓裂液的反排和增產效果，破膠失敗或者不理想會造成嚴重的地層傷害。根據低滲透儲層的特點，利用核磁共振技術及岩心流動試驗進行了壓裂液傷害機理研究，結果表明：壓裂液黏滯力和大分子基團滯留是造成傷害的主要因素。因而提高破膠效果，降低壓裂液的黏滯阻力，是解決壓裂液傷害的一個重要辦法^［1，2］。

大多數水基壓裂液所使用的稠化劑為（變性）胍豆膠，壓裂作業中常用化學（氧化型）破膠劑為過硫酸鉀、過硫酸銨等，其優點是價格低、使用方便、破膠迅速、破膠液黏度在10mPa·s以下。但在實際應用中，氧化破膠劑存在著一些缺陷，包括：(1)反應時間及其活性主要依賴於溫度，溫度低於50℃時，反應很慢，必須添加低溫催化劑，而高於93℃時降解反應發生很快，反應不易控制，反應迅速，使壓裂液提前降解而失去輸送支撐劑的能力，甚至導致壓裂施工失敗；(2)它屬於非特殊性反應物，能和遇到的任何反應物如管材、地層基質和烴類等發生反應，易生成與地層不配伍的污染物，造成地層傷害；(3)作用時間短，氧化型破膠劑往往在到達目的裂縫前消耗殆盡，達不到有效破膠的目的；(4)反應不徹底，造成胍豆膠不能完全降解，約20％的分子量大於2.0×10⁶的聚合物基本上未降解，並產生大量殘渣。而生物破膠酶是具有高催化能力和很好活性的生物蛋白，它在催化反應時自身的形態和結構不發生改變，其反應特異性決定了其專一性分解多糖聚合物結構中特定的糖苷鍵，並將其降解為單糖和二糖，這些特異性的生物破膠酶主要有Beta－1，4甘露聚糖酶、Beta－甘露糖苷酶和Alpha－半乳糖苷酶等。研究表明，化學破膠劑破膠後的聚合物分子量為（1.0～3.0）×10⁵Da，而生物酶破膠方法後的膠液分子量僅為2000～4000Da，其破膠性能大大高於氧化型破膠劑，壓裂後無殘渣，返排效果好^［3］。同時，生物破膠酶主要應用於30～60℃的油藏，有效彌補化學破膠劑在中、低溫油藏應用中的瓶頸問題（如反應緩慢、需要添加催化劑、破膠難以控制）^［4～6］。本文對新型壓裂液生物破膠酶進行了研究，優化了其發酵生產條件，並對其破膠性能進行了相關分析。

1 生物破膠酶的發酵生產和純化

1.1 菌種、培養基和發酵條件

本研究中所用生物破膠酶生產菌株為本實驗所保存菌種BG1，分離自某油田原油污染土樣，經16SrDNA序列分析和生理生化反應鑒定為地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis），菌株保存於－80℃冰箱甘油管（20％，v/v）中，使用前經固體培養基進行活化後作為接種物。

種子液培養採用LB培養基，其組成為：10g/L蛋白腖，5g/L酵母膏，10g/L氯化鈉，pH＝7.0～7.2；經響應面法優化後的發酵培養基組成為：4.08g/L碳源，11.74g/L有機氮源，5.22g/L無機氮源，2g/L磷源，1.0g/L硫源，0.05g/L微量元素。接種濃度為2.0％，接種後的培養物置於37℃搖床中在轉速180rpm條件下培養48h。

1.2 酶活力的測定

本研究中破膠酶的酶活力檢測採用3，5－二硝基水楊酸法（DNS法），分別以0mg/mL、2mg/mL、4mg/mL、6mg/mL、8mg/mL和10mg/mL濃度的還原糖溶液作為反應物製作標准曲線。將發酵結束後的菌液於4℃下轉速為8000rpm離心10min，去除菌體，取上清液作為粗酶液，以0.6％濃度胍豆膠溶液作為底物進行水解反應，反應條件為50℃溫浴中反應10min，檢測反應物中還原糖的濃度。1個酶活力單位（U）定義為：在50℃溫浴條件下，每分鍾釋放1μmol還原糖所需要的酶量^［7］。

1.3 破膠酶發酵生產的優化

為了獲得高產量的生物破膠酶，在菌株最佳培養的基礎上，對發酵培養基組成進行優化。首先將破膠酶發酵生產中的碳源、有機氮源、無機氮源、磷源、硫源和微量元素，作為培養基優化實驗中的6個試驗因素（X₁—X₆），通過兩水平試驗設計（Two－level factorial design）篩選其中的顯著因素，進而對顯著因素的濃度進行進一步優化。本實驗中，因素的兩水平包括正效應（＋）和負效應（－），正效應的因素均取高值，負效應的因素均取低值，通過使因素同時朝響應值增大的方向變化，找出峰值，從而確定逼近最大響應區域的水平值，並把對響應值影響較大的因素（F＜0.05，置信度95％）作為顯著因素^［8］。

兩水平試驗設計及其響應值如表1所示，通過對實驗結果進行分析發現，對破膠酶的生產有顯著影響的因素為碳源（99.90％）、有機氮源（99.51％）和無機氮源（95.11％），而磷源（10.52％）、硫源（32.27％）和微量元素（33.11％）對發酵液酶產量影響較小。6個試驗因素中，碳源、有機氮源、無機氮源和磷源對破膠酶的發酵生產均呈現負效應，而硫源和微量元素對破膠酶的合成呈現正效應。將碳源、有機氮源和無機氮源3個顯著因素分別作為自變數（A、B和C），採用中心法則試驗設計（central composite design）對影響破膠酶發酵生產的底物濃度水平進行優化。中心法則試驗設計共包括20組實驗，其中交互試驗23組、中心點6組和邊際點6組，每一自變數的5個試驗水平分別以－1.68、－1 、0、＋1和＋1.68進行編碼^［9］，如表2所示。

表1 兩水平試驗設計及其響應值（n＝6）

續表

表2 中心法則試驗設計及其響應值

通過擬合得到一個描述響應值與自變數關系的多元回歸模型，如公式（1）所示。模型的P－value值為0.0041，該值遠遠小於0.05，表明回歸方程的F檢驗顯著，所獲得的模型能夠准確地反映破膠酶的發酵生產情況。

油氣成藏理論與勘探開發技術（五）

由響應面回歸分析和回歸方程擬合繪制酶產量與碳源、有機氮源和無機氮源的響應面，如圖1所示。

圖1 碳源、有機氮源和無機氮源對破膠酶產量影響的響應面

通過該模型計算出響應值（酶產量）對因素A、B、C存在極值點，對Y進行極值分析，確定3個因子最優試驗點（A、B、C）的代碼值（0.57、0.25、0.41），即碳源濃度為4.08g/L，有機氮源和無機氮源濃度分別為11.74g/L和5.22g/L時，該模型預測的破膠酶產量存在極大值，通過實驗驗證實際酶產量為239U/mL。

1.4 破膠酶的分離、純化和保存

破膠酶發酵結束後，將發酵液在轉速5000～10000rpm情況下離心30min去除菌體，並用0.22μm濾除去殘余菌體和不溶物質，將獲得的粗酶液經瓊脂糖層析柱（20mm×250mm）洗脫：層析柱以pH＝7.3的Tris－HCl緩沖液平衡後以0.5～1.5mol的NaCl溶液進行梯度洗脫，洗脫速率為5～15mL/h，收集酶液並用飽和硫酸銨溶液沉澱，將獲得的破膠酶由緩沖液稀釋至200～400U/mL後低溫保存^［10］。用於壓裂液破膠酶保存的緩沖液組成為：0.1M的pH＝7.2的磷酸緩沖液，殺菌劑50×10^－6，甘油50％。

2 生物破膠酶穩定性研究

由於生物破膠酶使用過程中要面臨油藏復雜的物理化學條件，同時其破膠活性還會受到壓裂液體系中其他助劑的影響，因此，本研究中考察了各種物理化學因素（溫度、pH、地層離子和化學助劑等）對生物破膠酶活力的影響。

2.1 溫度和pH因素對酶活力保持率的影響

首先，研究溫度和pH因素對生物酶活力保持情況的影響，酶活力保持率如圖2所示，實驗結果表明：生物破膠酶在中低溫條件下有良好的熱穩定性，在低於50℃的環境中溫浴6h後，其酶活力保持率能達到85％以上，而超過50℃後，酶活力保持率隨溫度升高開始下降，70℃時，溫浴後的酶活力僅為初始值的35％；生物破膠酶在非極端pH環境中（pH ＝5.0～9.0）能較好地維持其活性，而超出這一pH值范圍後，酶活力保持率會迅速下降。

圖2 溫度和pH因素對酶活力保持率的影響

2.2 地層離子和化學助劑對酶活力保持率的影響

本文還對地層離子和化學助劑對生物酶活力保持情況的影響進行了研究，如表3所示。實驗結果表明：地層水中的主要無機離子對破膠酶活力無明顯影響；而壓裂體系中的常規助劑對酶活力的保持有一定影響，本實驗中，生物破膠酶在含有EDTA、殺菌劑和交聯劑的溶液中溫浴6h後，酶活力的保持率分別為81％、76％和94％。現場的壓裂液體系非常復雜，因此，在實際應用中，有必要對各種助劑組分對生物酶活性的影響進行預實驗。

表3 地層離子和化學助劑對酶活力保持率的影響

3 生物破膠酶的破膠性能研究

3.1 生物酶破膠降黏性能研究

針對中、低溫儲層的特點，本實驗中所使用的壓裂液配方為0.35％羥丙基胍膠、6％交聯劑（1.0％硼砂溶液）、1.0％黏土穩定劑、0.5％殺菌劑，pH ＝8.5，生物破膠酶的添加濃度為20U/L。本文研究了不同溫度下（20～80℃）的破膠效果，壓裂液的降黏效果如圖3所示，在40℃和50℃下反應10h後，破膠後的膠液黏度僅為2.23cP和1.97cP，而在30℃和60℃時，破膠後的膠液黏度分別為11.1cP和4.65cP。在破膠反應30min時，壓裂液尚保持較高的黏度，維持了較好的攜砂能力。可見，本研究中的生物破膠酶，完全可以滿足中、低溫油藏壓裂施工的作業要求。

3.2 物理模擬破膠岩心傷害實驗

當壓裂液返排時，由於破膠不徹底往往留下很多殘渣（固體不溶物），降低裂縫的導流能力。在室內應用物理模擬實驗，製作人工膠結岩心模型（10cm×2.5cm）模擬水力壓裂傷害過程，50℃恆溫箱中，驅替人工配製的模擬地層水並計算模型的原始滲透率；將模型飽和含有20U/L破膠酶的壓裂液液，關閉驅替系統，並在恆溫箱中進行破膠反應12h；反應結束後，以模擬地層水進行反向驅替，計算返排後的模型滲透率（驅替至壓力恆定），並以未添加破膠酶（APS破膠）的實驗組作為對照模擬地層傷害實驗，並計算傷害率^［11］。

圖3 不同溫度下破膠酶的破膠效果

表4 地層傷害實驗

從表4的結果不難看出，相比空白對照，生物破膠酶的加入可以有效實現壓裂液破膠降黏，由於生物酶的破膠作用徹底，實驗岩心並未觀察到顯著的地層傷害（傷害率僅為11.37％），遠低於對照組30.67％的傷害率，體現了生物酶破膠劑在中、低溫油藏壓裂施工作業中的良好應用前景。

4 結論

本研究採用響應面優化法獲得了影響地衣芽孢桿菌BG1菌株發酵生產生物破膠酶的培養基組成中的顯著因素，並通過建立多項數學模型，採用統計分析對模型進行顯著性檢驗來優化發酵培養基。優化得到的最佳培養基組成為：4.08g/L碳源，11.74g/L有機氮源，5.22g/L無機氮源，2g/L磷源，1.0g/L硫源，0.05g/L微量元素。在優化的條件下，地衣芽孢桿菌BG1菌株的生物破膠酶活力達239U/L，表明採用響應面法優化發酵培養基組成是提高菌株產酶活性的有效途徑之一，從而為該技術的推廣奠定了較好的基礎。該菌株產生的生物酶具有良好的穩定性，能夠較好地耐受中低溫和非極端pH環境，並較好耐受各種無機離子和化學助劑。通過對其破膠性能進行研究，發現該破膠酶能夠有效降低壓裂液黏度，破膠徹底，對地層傷害小，因此，本研究的研究成果在中、低溫油藏壓裂施工作業中有著良好的應用前景。

致謝 本研究工作是在中國石化前瞻性項目 「微生物降解壓裂殘渣和重烴研究」 資助下完成的。在研究中，李宗田教授，中國石化石油勘探開發研究院採油工程研究所蘇建政所長和蘇長明高級專家都給予了寶貴的指導和建議，對他們表示衷心的感謝。

參考文獻

［1］王維明.VES－18清潔壓裂液性能試驗與應用［J］.煤田地質與勘探，2010，38（3）：24～31.

［2］周繼春，葉仲斌，賴南君.低溫低滲氣藏酸基新型壓裂液增稠劑的研製［J］.西南石油大學學報（自然科學版），2009，31（4）：131 ～133.

［3］胡凱，易紹金，鄧勇.生物酶破膠劑的現狀及展望［J］.科技咨詢導報，2007，21：159.

［4］龍增偉，楊振周，陳凱，等.吉林兩井地區低殘渣締合壓裂液的研究與應用［J］.鑽井液與完井液，2009，26（3）：56～58.

［5］Reiniche A，Rybacki E，Stanchits S，et al.Hydraulic fracturing stimulation techniques and formation damage mechanism－Implications from laboratory testing of tight sandstone －proppant systems［J］.Chemie der Erde，2010，70（53）：107～117.

［6］Rahman M K，Suarez Y A，Chen Z，et al.Unsuccessful hydraulic fracturing cases in Australia： Investigation into causes of failures and their remedies［J］.Journal of Petroleum Science and Engineering，2007，57（70）：70～81.

［7］Duffaud G D，McCutchen C M，Lec P，et al.Purification and characterization of extremely thermostable beta－mannanase，beta－mannosidase，and alpha－galactosidase from the hyperthermophilic eubacterium Thermotoga neapolitana 5068［J］.Applied and Environmental Microbiology，1997，63（1）：169 ～177.

［8］Gu X，Zheng Z，Yu H，et al.Optimization of medium constituents for a novel lipopeptide proction by Bacillus subtilis MO－01 by a response surface method［J］.Process Biochemistry，2005，40：3196～3201.

［9］Joshi S，Yadav S，Desai A.Application of response－surface methodology to evaluate the optimum medium components for the enhanced proction of lichenysin by Bacillus licheniformis R2［J］.Biochemical Engineering Journal，2008，41：122～127.

［10］Tamaru Y，Araki T，Amagoi H，et al.Purification and characterization of an extracellular beta－1 ，4 － Mannanase from a Marine Bacterium，Vibrio sp.Strain MA － 138［J］.Applied and Environmental Microbiology，1995，61（12）：4454～4458.

［11］徐兵威，王世彬，郭建春，等.低傷害壓裂液體系傷害性研究與應用［J］.鑽采工藝，2010，33（4）：87～89.

C. 關於酶的應用

酶在生產和生活中的應用
自19世紀末德國生物學家畢希納（Edward
Buchner）證明酵母無細胞提取液能使糖發酵產生酒精，第一次提出酶的名稱以來，人類已經發現並鑒定出3000多酶。酶作為一種催化劑，已被廣泛地應用於輕工業的各個生產領域。近幾十年來，隨著酶工程的迅猛發展，酶在生物工程、生物感測器、環保、醫葯等方面的應用也日益擴大，可以說酶已成為國民經濟中不可缺少的一部分，現實生活中，人們的衣、食、住、行及其他方面的新技術幾乎都離不開酶。
常見的酶在生產和生活中的應用
洗滌劑工業：
（加酶洗衣粉等）鹼性蛋白酶類
易於洗去衣物上的血漬、奶漬等污漬，加酶洗衣粉不能用於絲、毛等天然蛋白質纖維類織品的洗滌。
澱粉酶類
餐廳洗碗機的洗滌劑，用於去除難溶的澱粉殘跡等
烘烤食品：
真菌產生的a一澱粉酶
催化澱粉降解成可被酵母利用的糖，麵包等食品製作等
蛋白酶類（餅干松化劑）
製作餅干過程中，水解麵粉中的蛋白質；乳製品生產中，水解乳清蛋白。有利於食品中蛋白類營養的消化吸收。
釀酒工業：
麥芽中的澱粉酶、蛋白酶、葡聚糖酶。
將釀酒原料澱粉和蛋白質降解成能被酵母利用的單糖、氨基酸和肽，從而提高乙醇的產量。
β一葡聚糖酶
分解β-葡聚糖，降低麥汁粘度，加快麥汁過濾速度，避免因β-葡聚糖引起的啤酒混濁。
木瓜蛋白酶
去除啤酒儲存過程中生成的混沌物
肉類烹飪：
木瓜蛋白酶（嫩肉粉）菠蘿蛋白酶
分解肉的膠原蛋白，使肉類嫩滑。木瓜蛋白酶的最適宜溫度為600C，適宜pH7-7．5，不要在高溫和酸性環境下使用。
乳製品工業：
凝乳酶
乳酪生產的凝結劑，並可用於分解蛋白質。
乳糖酶
降解乳糖為葡萄糖和半乳糖，獲得沒有乳糖的牛乳製品，有利於乳品的消化吸收：
果汁生產：
果膠酶、纖維素酶。
處理果肉，提高出汁率、縮短出汁時間、提高果汁質量。
製糖工業：
澱粉酶等
將澱粉轉化為葡萄糖及各類糖漿
葡萄糖異構酶
用於將葡萄糖轉化為甜度高的果糖，生產高果糖漿。
紡織工業：
澱粉酶
廣泛地應用於紡織品的褪漿，其中細菌澱粉酶能忍受100～110℃的高溫操作條件。
纖維素酶
代替沙石洗工藝處理製作牛仔服的棉布，提高牛仔服質量。
製革工業：
胰蛋白酶類
除去毛皮中特定蛋白質使皮革軟化，也可用於皮革脫毛。
醫療和葯品工業：
胰蛋白酶
用於促進傷口癒合和溶解血凝塊，還可用於去除壞死組織，抑制污染微生物的繁殖；
青黴素醯化酶
將易形成抗葯性的青黴素改造成殺菌力更強的氨苄青黴素
L一天冬醯胺酶
用於治療癌症，剝奪癌細胞生長所需的營養。
溶菌酶（黏多糖溶解酶）
破壞革蘭氏陽性菌細胞壁而殺死細菌。抗菌、止血消腫、加快傷口癒合，也用於治療鼻炎、咽喉炎、口腔潰瘍等。
酪氨酸酶
生產（神經遞質），多巴用於治療帕金森綜合症。
尿激酶、鏈激酶
溶血栓劑，治療血栓病。
蛋白酶等（多酶片）
治療消化不良，許多酶在醫療中還可作為診斷試劑。

D. 生物酶是什麼，有什麼用

生物酶是由活細胞組成的具有催化作用的有機物，大部分為蛋白質，也有極少部分為RNA生物酶是具有催化功能的蛋白質。像其他蛋白質一樣，酶分子由氨基酸長鏈組成其中一部分鏈成螺旋狀，一部分成折疊的薄片結構，而這兩部分由不折疊的氨基酸鏈連接起來，而使整個酶分子成為特定的三維結構。生物酶是從生物體中產生的，它具有特殊的催化功能，其特性如下：高效性：用酶作催化劑，酶的催化效率是一般無機催化劑的10^7~10^13倍。專一性：一種酶只能催化一類物質的化學反應，即酶是僅能促進特定化合物、特定化學鍵、特定化學變化的催化劑。

E. 油田用的壓裂破膠劑有哪些哪種的比較好

根據井底溫度預測的結果定的，一般0.025-0.07%之間，可以做實驗或者經驗判斷，以盡量達到壓後同步破膠，壓裂液容易返排

F. 生物酶的應用

1、漆酶在紡織加工中的應用：漆酶是一種氧化還原酶，諾和信公司的Denilit II S就是通過基因改性的黑麴黴漆酶，可以進行牛仔服裝仿舊整理工藝，獲得的織物手感厚實，表面光潔、憑證、色澤明快、淡雅。
2、葡萄糖氧化酶在紡織加工的應用：葡萄糖氧化酶主要進行織物的漂白整理，這種酶處理對雙氧水的產生非常有效，處理使不需添加雙氧水穩定劑，處理後織物手感柔軟、豐滿。
3、半纖維素酶、木質素酶在紡織加工中的應用：天然的纖維素纖維中均含有半纖維素和木質素，尤其是麻類纖維含量較高，不去除半纖維素和木質素，極度影響纖維的可紡性能，通過半纖維素酶和木質素酶處理，可以大部分清除半纖維素和木質素，但半纖維素酶和木質素酶還沒有在紡織工藝中單獨使用，主要是和其他酶制劑（如果膠酶、纖維素酶等）配合進行纖維處理。
新型酶在紡織加工中的應用：化學合成纖維和漿料在紡織中的地位是明顯的，這些高分子聚合物不能進行生物分解和降解，造成環境的污染，目前研究人員正在研究新的酶種，通過篩選具有某種功能的菌種，進行基因改性成為高性能酶劑或通過克隆、轉基因或的基因工程菌，制出新酶種，或根據化學生物結構和酶學原理定向合成新型酶劑等。這些新型酶劑成為仿酶，目前較成功的酶包括PVA分解酶、滌綸分解酶、分解錦綸寡聚物的基因工程菌、合成酶等。 在石油鑽井過程中，鑽井液發揮著防止井壁滲漏和保護油氣層的雙重作用。但這兩大作用有時卻存在著尖銳的矛盾。當鑽井遇到油氣富集地層時，地層特點多不穩定，極易發生漏失、坍塌等復雜情況，此時鑽井液的護壁防漏功能顯得尤為重要。而普通鑽井液要起到很好的護壁防漏作用，就必須提高其固相含量和粘度，但這樣又會帶來污染油氣層的現象。如何才能既治理好井壁漏失坍塌的毛病、又有效保護好油氣層，早已成為我國石油鑽井領域的一大難題。
據勝利油田鑽井工程技術公司首席科學家郭寶雨介紹，剛剛通過鑒定的新型鑽井液體系能夠在井壁上形成薄而堅韌的隔膜，這種隔膜的滲透性極低，在近井壁形成了一個滲透率幾乎為零的護壁層，達到了維護井壁穩定的良好效果。
隨著時間的推移，在需要打開油氣層時，生物酶開始發揮它的生物降解作用，把原來堅韌緻密的護壁薄膜一點一點破除，而這時，活性生物酶慢慢進入儲層，在岩石表面油膜下生長繁殖，使原油從岩石表面剝離，從而被驅出；同時，它還能夠降解原油，增強原油流動能力，從而在根本上實現提高原油採收率的目的。
據悉，這一體系在曲堤油田、淮北以及吉林等油田共34口井進行的現場試驗表明，其原油採收率平均提高25%以上，地層滲透性恢復到90%以上，在解放油氣層、保護油氣層方面有著廣闊的發展前景。

G. 生物酶的作用特點 給大家介紹一下

1、其特性如下：高效性：用酶作催化劑，酶的催化效率是一般無機催化劑的10^7~10^13倍。

2、專一性：一種酶只能催化一類物質的化學反應，即酶是僅能促進特定化合物、特定化學鍵、特定化學變化的催化劑。

3、生物酶是由活細胞產生的具有催化作用的有機物，大部分為蛋白質，也有極少部分為RNA。

4、生物酶的製造和應用領域逐漸擴大，生物酶在紡織工業中的應用也日臻成熟，由過去主要用於棉織物的退漿和蠶絲的脫膠，至現在在紡織染整的各領域的廣泛應用，體現了生物酶在染整工業中的優越性。

5、酶在人體皮膚護理領域也於2016年獲得了重要突破，已進入臨床應用階段。

H. 除膠劑使用時應注意哪些問題旭升

除膠劑注意事項
1.產品有揮發性，要用塑料桶盛裝，浸泡時蓋好蓋子。
2.產品有可燃性，不要靠近火源。
3.產品有腐蝕性，要戴勞保用品進行操作。如不慎沾到皮膚上，立即用水沖洗。
除膠劑使用說明
本產品可採用浸泡法和擦拭法進行除膠.浸泡十分鍾~3小時後，取出工件，再用棉布或軟毛刷將粘膠剝離擦除。
(本產品原液使用，嚴禁加水。)
適用於金屬表面，塑料表面，玻璃表面等的清洗和光亮，可以高效清除其表面的松香焊葯，吸塑膠以及牆上粘貼的膠紙，並且有很好的光亮效果。對表面的深層頑固污漬的清除有特效。
現在市面上的除膠劑，洗膠水都是化學成份，化學制劑基本上都會對人體器官生產損害。一般環保除膠劑對皮膚接觸類是沒有什麼問題的，但不能誤食以及接觸皮膚有破損地的方。
1、氧化破膠劑
常用的氧化破膠劑有過硫酸鉀、過硫酸銨等。由於氧化劑的活性和溫度有關，一般當地層溫度低於49℃時，反應的速度就很慢，需要加入活化劑。
氧化破膠劑有很多的缺陷如:①在高溫下與壓裂液反應迅速，使壓裂液提前降解而失去輸送支撐劑的能力，甚至導致壓裂施工失敗;②它屬於非特殊性反應物，能和遇到的任何反應物如管材、地層基質和烴類等發生反應，生成與地層不配伍的污染物，造成地層傷害; ③氧化破膠劑很可能在到達目的裂縫前就消耗盡了，因而達不到破膠的目的。
2、膠囊氧化破膠劑
膠囊氧化破膠劑是把過氧化物單獨裝在合成外殼內。膠囊氧化破膠劑的核心材料為破膠劑，可採用與水接觸即可溶解變為高活性的固體強氧化劑。膠囊氧化破膠劑的優點在於減少了破膠劑對壓裂液流變性能的影響;增大破膠劑用量，改善了支撐裂縫的導流能力。
3、常規酶破膠劑
酶是具有高催化能力和很好的活性的生物蛋白，它在催化反應時自身的形態和結構不發生改變，因此可再催化另一個反應。常規酶破膠劑是半纖維素酶、纖維素酶、澱粉酶和果膠酶的混合物，它無法降解特定的聚合物，達不到理想的破膠效果。
另外，常規酶破膠劑雖然在低溫下是一種較好的壓裂液破膠劑，但它要求較低的pH值。一般酶在pH=6 時活性最大，高溫、高pH值會使酶失去活性。
4、特異性酶破膠劑
針對於此，新型特異性生物酶破膠體系在其使用溫度范圍、pH范圍等深入研究，主要針對多糖聚合物糖的甙鍵篩選特異性水解酶(LSE)，它們只分解多糖聚合物結構中特定的糖甙鍵，可將聚合物降解為非還原性的單糖和二糖。這些特異性破膠酶主要有纖維素糖甙鍵特異性酶、澱粉糖甙鍵特異性酶、胍膠糖甙鍵特異性酶等等。

I. 酶在輕工化學工業方面的應用

1．可廣泛應用與製革、毛皮、毛紡、絹紡、造紙、洗滌劑、食品加工、醫葯、天然橡膠等的脫脂加工。
2．作為洗滌劑酶與鹼性蛋白酶一起添加於洗衣粉中製成雙酶洗衣粉。產品市場及經濟效益分析：以洗滌劑為例，目前歐洲各國市場加酶洗滌劑佔有量已達90%，日本為80%(主要是蛋白酶和纖維素酶)，而我國僅佔10%，且只添加單一的蛋白酶，故本品可填補國內復合洗滌劑的空白，並有希望打入國際市場。按年產 3000噸計，年產值可達1000萬元，預測年效益可達200萬元。
3.酶在生物工程、生物感測器、環保、醫葯等方面的應用也日益擴大，可以說酶已成為國民經濟中不可缺少的一部分，現實生活中，人們的衣、食、住、行及其他方面的新技術幾乎都離不開酶。
4.真菌產生的a一澱粉酶 催化澱粉降解成可被酵母利用的糖，麵包等食品製作等
蛋白酶類（餅干松化劑） 製作餅干過程中，水解麵粉中的蛋白質；乳製品生產中，水解乳清蛋白。有利於食品中蛋白類營養的消化吸收。
5.釀酒工業：
麥芽中的澱粉酶、蛋白酶、葡聚糖酶。 將釀酒原料澱粉和蛋白質降解成能被酵母利用的單糖、氨基酸和肽，從而提高乙醇的產量。
β一葡聚糖酶 分解β-葡聚糖，降低麥汁粘度，加快麥汁過濾速度，避免因β-葡聚糖引起的啤酒混濁。
木瓜蛋白酶 去除啤酒儲存過程中生成的混沌物
6.肉類烹飪： 木瓜蛋白酶（嫩肉粉）菠蘿蛋白酶 分解肉的膠原蛋白，使肉類嫩滑。木瓜蛋白酶的最適宜溫度為600C，適宜pH7-7．5，不要在高溫和酸性環境下使用。
7.乳製品工業：
凝乳酶 乳酪生產的凝結劑，並可用於分解蛋白質。
乳糖酶 降解乳糖為葡萄糖和半乳糖，獲得沒有乳糖的牛乳製品，有利於乳品的消化吸收：
果汁生產： 果膠酶、纖維素酶。 處理果肉，提高出汁率、縮短出汁時間、提高果汁質量。
製糖工業： 澱粉酶等 將澱粉轉化為葡萄糖及各類糖漿
葡萄糖異構酶 用於將葡萄糖轉化為甜度高的果糖，生產高果糖漿。
8.紡織工業：
澱粉酶
廣泛地應用於紡織品的褪漿，其中細菌澱粉酶能忍受100～110℃的高溫操作條件。
纖維素酶 代替沙石洗工藝處理製作牛仔服的棉布，提高牛仔服質量。
製革工業： 胰蛋白酶類 除去毛皮中特定蛋白質使皮革軟化，也可用於皮革脫毛。
9.醫療和葯品工業： 胰蛋白酶 用於促進傷口癒合和溶解血凝塊，還可用於去除壞死組織，抑制污染微生物的繁殖；
青黴素醯化酶 將易形成抗葯性的青黴素改造成殺菌力更強的氨苄青黴素
L一天冬醯胺酶 用於治療癌症，剝奪癌細胞生長所需的營養。
溶菌酶（黏多糖溶解酶） 破壞革蘭氏陽性菌細胞壁而殺死細菌。抗菌、止血消腫、加快傷口癒合，也用於治療鼻炎、咽喉炎、口腔潰瘍等。
酪氨酸酶 生產（神經遞質），多巴用於治療帕金森綜合症。
尿激酶、鏈激酶 溶血栓劑，治療血栓病。
蛋白酶等（多酶片） 治療消化不良，許多酶在醫療中還可作為診斷試劑。

J. 油田用的壓裂破膠劑有哪些哪種的比較好

常用的破膠劑有過硫酸銨、過硫酸鈉、生物酶和其他過氧化物。最經濟，最常用的是過硫酸銨。用在植物膠類壓裂液上。