❶ 微生物的平板劃線實驗中中劃線部分的菌落數量很少,僅僅在第三次劃線的尾部可以觀察到菌落,原因是
應該是操作的原因。
平板劃線法是在平板上實現混合菌種或單菌種分離,並選取單細菌菌落純培養的常用方法。
在平板劃線實驗中,要嚴格按照操作規程和方法進行,否則很難得到理想的結果。
其過程是:
1、選用平整、圓滑的接種環,按無菌操作法挑取少量菌種。或用移液管吸取少量菌液。
2、拿接種環先在培養基一側劃3—4條連續的平行線(線條多少應依挑菌量的多少面定)。劃完後應立即燒掉環上的殘菌,以免因菌過多而影響後面各區的分離效果。或用移液管向培養基近邊緣處的表面滴入一滴(不高於0.1 ml)菌液,再用接種環按上面的方法以菌液為起始點劃線。
3、平板轉動一個方向,用接種環從上次劃線的末端開始,向另一方向劃3-4條平等線。
4、依此類推,再在培養基其他未劃過線的地方劃線。
如此操作,應當能在培養基上獲得單細胞菌落,且越是後來劃的線,菌落越是稀疏。
❷ 生物中接種方法→平板劃線法要注意什麼
(1)要注意全程無菌操作;
(2)滑動時用力要均勻,切勿將接種環嵌入培養基內;
(3)平板應較硬、較厚、表面乾燥;
(4)需要分區的時候,劃完一個區後必須燒去接種環上的殘菌,待冷卻後再劃另一個區;
(5)劃線的線條宜平行、密集、整齊。
接種是食用菌生產中的關鍵環節之一,如果接種技術不過關,即會造成雜菌污染,成活率低而前功盡棄。無論是菌種分離、傳代還是擴繁,都要在無菌條件下嚴格按照無菌操作規程進行。
(2)如何劃板微生物擴展閱讀
常用的接種方法
1、三點接種
在研究黴菌形態時常用此法。此法是把少量的微生物接種在平板表面上,成等邊三角形的三點,讓它各自獨立形成菌落後,來觀察、研究它們的形態。除三點外,也有一點或多點進行接種的。
2、穿刺接種
在保藏厭氧菌種或研究微生物的動力時常採用此法。做穿刺接種時,用的接種工具是接種針,用的培養基一般是半固體培養基。用接種針蘸取少量的菌種,沿半固體培養基中心向管底作直線穿刺,如某細菌具有鞭毛而能運動,則在穿刺線周圍能夠生長。
3、澆混接種
將待接的微生物和45℃左右的固體培養基進行混合,這樣菌液就達到稀釋的目的,待平板凝固之後,置合適溫度下培養,就可長出單個的微生物菌落。
4、塗布接種
將菌液倒入凝固的平板上面,用塗布棒在表面作來回左右的塗布,讓菌液均勻分布,就可長出單個的微生物的菌落
5、注射接種
用注射的方法將待接的微生物轉接至活的生物體內,如人或其它動物中,常見的疫苗預防接種,就是用注射接種,接入人體,來預防某些疾病。
6、活體接種
活體接種是專門用於培養病毒或其它病原微生物的一種方法,因為病毒必須接種於活的生物體內才能生長繁殖。所用的活體可以是整個動物;也可以是某個離體活組織,例如猴腎等;也可以是發育的雞胚。接種的方式是注射,也可以是拌料喂養。
❸ 微生物的選擇培養可以用平板劃線法嗎
1. 接種環 (1)滅菌,將接種環置於本生燈火焰中灼燒直至變紅。 (2)冷卻,將接種環觸碰無菌瓊脂平板的表面直至其不發出噝噝聲。二、實驗步驟1. 採用無菌操作技術,用接種環將接種物從平板的一側開始劃線。 2. 重新消毒接種環,從第一劃線處將樣品劃線至平板的其佘部分,重復劃線直至覆蓋整個平板。3. 於37℃培養直至長出單菌落。 4. 如果要從很多的菌液中分離單克隆,可以將平 板分為4、6或8小份,在每個小份中劃出單克隆。 ...
❹ 微生物的分離平板塗布法和平板劃線法分離微生物的區別
微生物的分離平板塗布法和平板劃線法分離微生物的區別
由接種環以菌操作沾取少許待分離的材料,在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線,微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少,並逐步分散開來,如果劃線適宜的話,微生物能一一分散,經培養後,可在平板表面得到單菌落。
先將待分離的材料用無菌水作一系列的稀釋(如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …),然後分別取不同稀釋液少許,與已溶化並冷卻至 45 ℃左右的瓊脂培養基混合,搖勻後,傾入滅過菌的培養皿中,待瓊脂凝固後,製成可能含菌的瓊脂平板,保溫培養一定時間即可出出菌落。如果稀釋得當,在平板表面或瓊脂培養基中就可出現分散的單個菌落,這個菌落可能就是由一個細菌細胞繁殖形成的。隨後挑取該單個菌落,或重復以上操作數次,便可得到純培養。 稀釋塗布法:
優點:可以計數,可以觀察菌落特徵。
缺點:吸收量較少,較麻煩,平板不幹燥效果不好,容易蔓延。
一般用於平板培養基的回收率計數!!