Ⅰ 基因工程常用載體和其相應宿主細胞
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pUC 系列質粒載體:大腸桿菌
λ噬菌體:大腸桿菌
BAC(大腸桿菌人工染色體):大腸桿菌
YAC(酵母菌人工染色體):酵母菌
pRS 系列酵母質粒載體:酵母菌
pcDNA 系列質粒:哺乳動物細胞(動物/大腸桿菌穿梭質粒)
pEGFP 系列質粒:哺乳動物細胞(動物/大腸桿菌穿梭質粒)
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Ⅱ 基因工程技術中常用的宿主細胞有哪些並簡述各自的優缺點
那個不能確切地說! 也許是植物,動物,又可以是微生物! 如得抗蟲棉花時是棉本身!; 得分泌物時是大腸干菌!
Ⅲ 在遺傳工程相關研究中,常用的宿主菌和載體有哪些
通常用的從噬菌體,大腸桿菌,酵母,到高級一些的植物細胞、昆蟲離體細胞,甚至哺乳動物細胞都有,看錶達需求。一般來講,沒有特殊需要,原核的大腸桿菌或者真核酵母就夠了。載體的主要是各種質粒,根據表達需求,質粒也是不一樣的,還有用病毒直接往基因組里插入外源基因的做法。
Ⅳ 基因工程中,常用的細菌、酵母菌等微生物作為受體細胞,主...
【答案】B
【答案解析】試題分析:由於微生物多為單細胞,繁殖速度快,常被用作基因工程是受體細胞。B正確。
考點:本題考查微生物的特點,意在考查考生理解所學知識的要點,把握知識間的內在聯系,形成知識網路結構的能力。
Ⅳ 請問作為質粒等這些運載體的宿主,除了大腸桿菌可以作為宿主外,還有別的什麼可以作為宿主嗎
質粒能以什麼菌作為宿主,主要跟質粒上有個復制起始位點有關。不同的復制起始位點只能被特定的菌識別。
一般來說一個質粒只能以一種菌做宿主,當然,這個菌不一定是大腸桿菌,絕大多數菌,比如芽孢桿菌、農桿菌、酵母菌等都可以有自己的質粒。
有的質粒有兩個或以上的復制起始位點,就可以在多種菌中傳代,這種質粒往往叫做穿梭質粒。
有的質粒的復制起始位點可以被多種不同的菌識別,這種質粒叫做廣宿主質粒。
Ⅵ 比較大腸桿菌、植物和動物三種不同系統作為基因工程宿主的優缺點 我也想知道
4.1大腸桿菌表達系統優缺點
優越性:(1)結構簡單,生理生化和遺傳背景知識,尤其是其基
因表達調控機制有了清楚的了解;(2)易於大規模培養,成本
低廉;(3)經過了遺傳改造,已發展為一種安全的基因工程
實驗系統,擁有各種不同的菌株和載體系列。
不足之處(表達真核基因的障礙)(1)真核基因具有內含子,
所以只能用其cDNA;(2)許多真核生物基因僅在大腸桿菌中
合成無特異性空間結構的多肽鏈;(3)許多真核基因的蛋白
質產物,都要經受翻譯後的加工修飾,而大腸桿菌缺乏蛋白質
加工系統;(4)大腸桿菌內源性蛋白酶易降解外來的真核生物基因所表達的蛋白質分子;(5)大腸桿菌細胞膜間隙中含
有大量的內毒素,痕量的內毒素即可導致人體熱原反應。
5.8植物作為制備基因工程疫苗生物反應
器的優勢 ①微生物發酵系統不能對真核蛋白質疫苗進行正確的翻譯後加工,有時導致其免疫原性變弱。而植物與動物細胞表達系統,可對表達產物進行轉譯後加工,保持了自然狀態下的免疫原性。
②細菌在發酵過程中常產生一些不溶性聚合物,其要重新溶解並折疊成天然蛋白質則需要很高的成本,且發酵需要龐大設備投資。
③動物細胞生產基因工程疫苗,常用動物病毒作為載體導入抗原基因,在生產過程中也可能污染動物病毒。
④轉基因植物中的外源基因可通過植物雜交的方法進行基因重組而達到在植物體內積累多基因的目的。
⑤植物表達系統生產的疫苗可以直接儲存在植物種子和果實中,無需冷連系統設備進行儲藏運輸,故易於長距離運輸和普及推廣。不僅降低了成本且方便,可隨時長期給葯。
⑥疫苗抗原基因轉入可食用的植物後,可供人直接服用或飼喂動物,不需要分離提純。這樣可節約許多儀器設備,降低生產成本,使用方便。
⑦粘膜免疫是病毒性腹瀉的免疫保護機制,但在啟動粘膜免疫方面尚屬難題。轉基因植物細胞是可以啟動粘膜免疫的有效途徑。
⑧提供營養。通過轉基因植物生產的口服疫苗,不僅提供了疫苗,而且提供了營養。
6.3 動物
1.轉基因動物成功率低
陽性率結果重復性差,甚至無法重復,轉基因動物的成功率較低。隨後的研究雖然使成功率有所提高,但總的成功率還是較低,限制了其應用的發展。建立更完善的轉基因方法。使用大的外源DNA片段。
2.造成宿主基因突變問題
外源基因在動物基因組中的隨機整合,可能會引起宿主細胞基因的插入突變、缺失突變及宿主基因的擴增重排和移位,也可能激活正常狀態下處於關閉狀態的基因,從而導致動物表型的改變甚至造成動物不育或死亡。基因打靶技術(gene targeting)能夠使目的基因定點整合,因此避免了對宿主基因的損傷,提高了陽性率。
3.外源基因表達水平不高
轉入的外源目的基因在轉基因動物中是否高效表達是轉基因動物研究成敗的關鍵。對外源基因的整合機理進行深入研究。選擇表達效率高的啟動子。
4.安全性問題
插入的外源基因是否會影響宿主動物自身的基因表達及表達水平;轉基因動物是否可能會把外源基因傳遞給生活在其周圍的其它種群及環境,造成基因污染;在病毒等致病基因的轉基因研究中,不可避免地會產生一些有害的轉基因動物,是否可能因為使用轉基因動物製品而將一些動物性疾病傳遞給人類。
將編碼活性蛋白的基因導入動物的受精卵或早期胚胎內以制備轉基因動物,並使外源基因在動物體內 (乳汁、血液等 )高效表達,然後再分離提取目的基因編碼產物。動物就像一個活的發酵罐。其溫度、氣體、水分和pH值均由動物自身調節。所以有人把它喻為葯物工廠、生物反應器、基因農場或分子農場(molecular farming)。
轉基因動物作為生物反應器,其特點有:表達產物能充分修飾且具有穩定的生物活性,產品成本低,並可進行大規模的生產;產品質量高,可誘導分泌,易提純,不污染環境。
Ⅶ 遺傳工程相關研究中,常用的宿主菌和載體有哪些各舉1-2例加以說明
常用的宿主菌:大腸桿菌,酵母菌。常用的載體有:質粒,噬菌體。如將胰島素基因轉入質粒再植入大腸桿菌,大量生產胰島素
Ⅷ 基因工程中常用的受體細胞除了細菌,真菌,還有哪個
受體細胞有原核受體細胞(最主要是大腸桿菌)、真核受體細胞(最主要是酵母菌)、動物細胞和昆蟲細胞(其實也是真核受體細胞)。
原核受體細胞中,最常用的宿主細胞是大腸桿菌。
所以一般指的是細菌
Ⅸ 基因工程技術中常用的宿主細胞有哪些 簡述各自的優點
基因工程技術中常用的宿主細胞有哪些
在基因工程重組DNA技術中將DNA片段(目的基因)轉移至受體細胞的一種能自我復制的DNA分子。三種常用的載體是質粒、λ噬菌體的衍生物和動植物病毒,最常用的是質粒。
用途:
在基因操作過程中使用運載體有兩個用途:一是用它作為運載工具,將目的基因轉移到宿主細胞中去;二是利用它在宿主細胞內對目的基因進行大量的復制。
基因工程中載體需要滿足的條件:
1有一個或多個限制酶的切點,便於目的基因插入
2有自我復制能力或整合到受體染色體DNA上隨染色體DNA復制的能力
3必須帶有標記基因,以便篩選
4對受體細胞無害
5大小合適,便於操作
天然質粒並不完全具備上述條件,所以都要進行人工改造。
Ⅹ 微生物在基因工程的作用
1、從基因工程的過程來說,先是在體外合成目的基因,這其中參照的模板就是微生物中某一個表型對應控制的那個基因。可以是人工體外合成,也可以是基因文庫篩選,但都離不開微生物的原始樣本。
2、第一步中用到的酶也大都是從微生物中合成提取的。
3、第二步就是導入載體中,用到的載體一般是病毒等微生物。
4、導入宿主細胞這步利用了微生物的侵染宿主細胞。進入後目的基因與宿主遺傳物質重組然後表達,還有最後一步的檢測都是利用微生物的特性。
暫時沒有想到別的。。