① 動物細胞是如何獲得能量的
細胞內存在一種稱為ATP(三磷酸腺苷)的能量載體,即一個ATP的能量較小,適合細胞直接利用.植物細胞和動物細胞都是通過利用它來獲得活動的能量.
② 為了進行細胞培養,首先要從生物體取得細胞,目前獲取細胞的方法有兩種,分離法
實驗:細胞培養
1.實驗目的
初步掌握哺乳動物細胞的原代培養與傳代培養的基本操作過程,為生物工程在醫學上的應用打下基礎。
實驗原理 2.
從生物體中取出某種組織或細胞,模擬體內生理條件,在人工培養條件下使其生存、生長、繁殖或傳代,這一過程稱為細胞培養。細胞培養技術的最大優點是使我們得以直接觀察活細胞,並在有控制的環境條件下進行實驗,避免了體內實驗時的許多復雜因素,還可以與體內實驗互為補充,可同時提供大量生物性狀相同的細胞作為研究對象,耗費少,比較經濟,因此成為生物學研究的重要手段。近年來,在體細胞遺傳、分化、胚胎發生、腫瘤發生、免疫學、細胞工程、放射生物學以及老年學等一系列的研究領域中得到廣泛的應用,並取得了豐碩的成果。
細胞培養可分為原代培養和傳代(繼代)培養。直接從體內獲取的組織細胞進行首次培養為原代培養;當原代培養的細胞增殖達到一定密度後,則需要做再培養,即將培養的細胞分散後,從一個容器以1:2或其他比率轉移到另一個或幾個容器中擴大培養,為傳代培養,傳代培養的累積次數就是細胞的代數。
細胞培養是一種程序復雜、要求條件多而嚴格的實驗性工作。所有離體細胞的生長都受溫度、滲透壓、pH值、無機鹽影響,消毒、配液等均有嚴格的規范和要求,特別是無菌操作是細胞培養成敗的關鍵。
③ 動物細胞培養原理
動物細胞培養的原理是細胞增殖,動物細胞培養就是從動物機體中取出相關的組織,將它分散成單個細胞,然後,放在適宜的培養基中,讓這些細胞生長和增殖。
一、細胞增殖的意義:
1、細胞增殖是生物繁殖的基礎:單細胞生物以細胞分裂的方式產生後代;多細胞生物的繁殖和發育的基礎、
2、細胞增殖是高等生物完成正常生命活動的基礎:細胞增殖是生物體生長、發育、繁殖和遺傳的基礎。
二、細胞通過分裂進行增殖:
細胞增殖是細胞重要的生命活動,是生物體生長、發育、繁殖、遺傳的基礎。
1、單細胞生物:細胞增殖而繁衍。
2、多細胞生物:從受精卵開始,要進行細胞的增殖和分化逐漸發育成個體。
3、真核細胞的分裂方式:有絲分裂、無絲分裂、減數分裂。
④ 如何獲得動物工程細胞
1.動物細胞培養.
動物細胞取自動物胚胎或剛出生不久的幼齡動物的器官或組織.用胰蛋白酶處理使之分散為單個細胞,再配置一定濃度的細胞懸浮液培養.並定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離下來.
2.動物細胞融合.
用滅活的病毒或聚乙二醇誘導融合.
3.單克隆抗體.
4,胚胎移植.
5.核移植.
⑤ 從成體活體動物中獲得幹細胞的方法有哪些
從骨髓裡面可以獲得間充質幹細胞,直接沖洗即可,但培養起來有難度,很耗錢。。
⑥ 動物細胞培養的基本過程
一、准備工作
准備工作對開展細胞培養異常重要,工作量也較大,應給予足夠的重視,准備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。准備工作的內容包括器皿的清洗、乾燥與消毒,培養基與其他試劑的配製、分裝及滅菌,無菌室或超凈台的清潔與消毒,培養箱及其他儀器的檢查與調試。
二、取材
在無菌環境下從機體取出某種組織細胞(視實驗目的而定),經過一定的處理(如消化分散細胞、分離等)後接入培養器皿中,這一過程稱為取材。如是細胞株的擴大培養則無取材這一過程。機體取出的組織細胞的首次培養稱為原代培養。
理論上講各種動物和人體內的所有組織都可以用於培養,實際上幼體組織(尤其是胚胎組織)比成年個體的組織容易培養,分化程度低的組織比分化高的容易培養,腫瘤組織比正常組織容易培養。
取材後應立即處理,盡快培養,因故不能馬上培養時,可將組織塊切成黃豆般大的小塊,置4℃的培養液中保存。取組織時應嚴格保持無菌,同時也要避免接觸其他的有害物質。取病理組織和皮膚及消化道上皮細胞時容易帶菌,為減少污染可用抗菌素處理。
三、培養
將取得的組織細胞接入培養瓶或培養板中的過程稱為培養。如系組織塊培養,則直接將組織塊接入培養器皿底部,幾個小時後組織塊可貼牢在底部,再加入培養基。如系細胞培養,一般應在接入培養器皿之前進行細胞計數,按要求以一定的量(以每毫升細胞數表示)接入培養器皿並直接加入培養基。細胞進入培養器皿後,立即放入培養箱中,使細胞盡早進入生長狀態。
正在培養中的細胞應每隔一定時間觀察一次,觀察的內容包括細胞是否生長良好,形態是否正常,有無污染,培養基的PH是否太酸或太鹼(由酚紅指示劑指示),此外對培養溫度和CO2濃度也要定時檢查。一般原代培養進入培養後有一段潛伏期(數小時到數十天不等),在潛伏期細胞一般不分裂,但可貼壁和遊走。過了潛伏期後細胞進入旺盛的分裂生長期。
細胞長滿瓶底後要進行傳代培養,將一瓶中的細胞消化懸浮後分至兩到三瓶繼續培養。每傳代一次稱為「一代」。二倍體細胞一般只能傳幾十代,而轉化細胞系或細胞株則可無限地傳代下去。轉化細胞可能具有惡性性質,也可能僅有不死性(Immortality)而無惡性。培養正在生長中的細胞是進行各種生物醫學實驗的良好材料。
四、凍存及復甦
為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度—-196℃,將細胞收集至凍存管中加入含保護劑(一般為二甲亞碸或甘油)的培養基,以一定的冷卻速度凍存,最終保存於液氮中。
在極低的溫度下,細胞保存的時間幾乎是無限的。復甦一般採用快融方法,即從液氮中取出凍存管後,立即放入37℃水中,使之在一分鍾內迅速融解。然後將細胞轉入培養器皿中進行培養。凍存過程中保護劑的選用、細胞密度、降溫速度及復甦時溫度、融化速度等都對細胞活力有影響。
(6)生物實驗動物細胞如何獲得擴展閱讀:
進入細胞間開始細胞培養時,注意事項:
①確定所有的細胞操作用的溶液和耗材都已經消毒並檢測沒有問題,不確定的溶液和耗材請勿使用,除非特殊情況,不要借用別人的溶液。
②確定衣服的袖口已經捲起或者白大褂的袖口已經扎緊。
③確定酒精燈內的酒精量,需要的話及時進行補充。
④確定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。為了方便單手開啟瓶蓋,實驗開始前可以把所有瓶蓋旋松。
⑤盡量不要直接傾倒溶液,除非瓶口沒有被燒壞。如果傾倒失敗,溶液粘在瓶口,請用噴過75%酒精的紙巾仔細清潔瓶口周圍(不要接觸到瓶口)後在火焰上簡單燒灼。
⑥操作時如果不能肯定所用的耗材是潔凈的,必須及時更換。
⑦實驗完畢及時收拾,保持工作區域清潔整齊,最後用75%酒精清潔檯面。
⑦ 動物細胞培養需要哪些條件
一、細胞培養的條件和要求
1.所有與細胞接觸的設備、器材和溶液等,都必須保持絕對無菌,避免細胞外微生物的污染。
目前最可靠和最常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。
如:玻璃製品、布類、金屬製品:6.8kg20min。
橡膠製品:3.6~4.5kg10min。
培養用液,如Hanks液,水解乳蛋白:3.6~ 4.5kg10min。
實驗中染菌物品和動物屍體等:6.8 kg20min。
試管、吸管等,則可採用乾熱滅菌;
一切不適於加熱滅菌的液體,如人工合成培養液、小牛血清、胰蛋白酶等溶液,可採用過濾法除菌。
細胞培養中常用的消毒劑濃度及其使用場合
2.必須有足夠的營養供應,而絕對不可有有害的物質,包括極微量的有害離子的摻入,為此必須注意器材的清洗和配液用水的質量。
細胞培養中對水的質量要求很高(見水處理)。
3.保證有適量的氧氣供應。
細胞代謝需要有空氣,否則細胞死亡。在用培養瓶進行靜止培養,或用轉瓶進行旋轉培養時,只要培養的液體量不超過總容量的30%,通過與液面的空氣交換,可以保證細胞有足夠的氧氣。當用罐子深層培養時,則必須通氣,一般採用含5%CO2的空氣,或根據需要將CO2、N2、O2和空氣以不同比例混合,過量氧對細胞的生長也不利。
4.需隨時清除細胞代謝中產生的有害產物。
細胞在代謝過程中會產生大量代謝廢物,如CO2、乳酸、氨、尿素、吲哚等,這些產物對細胞的生存有害,必須及時清除。在小量培養時,當培養基中酚紅指示劑顯示黃色,表示已有相當量乳酸產生,要及時更換新鮮的培養基。在大量培養時,則需隨時測定葡萄糖和乳酸等含量,並調節灌流速度,使代謝產物保持在無害水平下。
5.有良好的適於其生存的外界環境,包括溫度、pH、滲透壓和離子濃度等。
不同的細胞對pH的要求不同,一般來說適於細胞生長的pH在6.8~7.4,過高或過低均不利於細胞生長。如上所述,細胞在代謝過程中會產生大量乳酸,使培養的pH下降。為了保持培養液的pH,常在培養液內加入各種緩沖系統,如Na2HPO4/Na2HPO4、NaHCO3/H2CO3(CO2)、Tricineglycine,以及加緩沖劑Hepes液(常用濃度為10~50mol/L).
6.及時分種,保持合適的細胞密度(見細胞傳代)
⑧ 雞胚細胞怎樣制備
A、材 料
a、1 0 -1 3 齡 S P F雞胚。
b、D ME M原粉購自美國 G I B C O公司,按說明書添加雙蒸水、N a H C O , , 調 p H值至 7 . 2, 正壓濾過除菌, 4 ~ C 保存 。使用前添加 1 0 %(滅活)胎牛牛血清、 1 %廣普抗生素。
c、Ha n k s 液 用前調pH值至 7.2—7.6,4℃保存。
d、0.125-0.25%胰蛋白酶消化液。
B、雞胚成纖維細胞的制備 取 1 0 1 3齡雞胚 2個 , 用無菌方法將胚提出放入無菌平皿中,去喙、爪 、 翅和內臟 , 剪成小塊以 H a nk s 液洗 2~3次, 然後以每個雞胚 1 0 mL的量加入胰蛋白酶消化液, 室溫 30 mi n 左右。 消化完畢, 以 8 層滅菌紗布濾過, 將濾液離心去除胰蛋白酶消化液,再用 DMEM細胞培養液將細胞懸起計數分裝於細胞培養瓶 中,置 3 7 ~ C 含5%CO2的培養箱中培養 2 4 h 。
⑨ 初一動物細胞模型製作方法是什麼
1、液體部分用水筆在紙面進行繪制,因為液體部分完全不用真是模擬出來。
2、用剪刀按照你需要的形狀用泡沫大致剪出,使用砂紙進行打磨,同時用彩筆染色。之後將細胞器放入白紙扣空的細胞器內進行配對。
3、所有的細胞器都完成之後並且配對完成可以沾到紙板之上進行保存。有條件可以用玻璃進行裝裱。
動物細胞與植物細胞的區別:
植物細胞:細胞壁,細胞膜,細胞質,細胞核,液泡,葉綠體,線粒體.動物細胞:細胞膜,細胞質,細胞核,線粒體.植物細胞與動物細胞的主要區別:動物細胞沒有細胞壁、葉綠體,通常也沒液泡.
動物細胞有細胞核、細胞質和細胞膜,沒有細胞壁,液泡不明顯,含有溶酶體,動物細胞的結構有細胞膜、細胞質、細胞器、細胞核;它們的主要作用是控制細胞的進出、進行物質轉換、生命活動的主要場所、控制細胞的生命活動。
細胞內部有細胞器:細胞核,雙層膜,包含有由DNA和蛋白質構成的染色體。內質網分為粗面的與滑面的,粗面內質網表面附有核糖體,參與蛋白質的合成和加工;光面內質網,表面沒有核糖體,參與脂類合成。
⑩ 生物細胞是由什麼獲取能量的
大部分植物是由光合作用獲取能量
而動物細胞是從外界獲取食物然後由呼吸作用產生能量