Ⅰ 致病菌感染的微生物學檢查基本程序是怎麼樣的
病原微生物種類繁多,變異迅速,快速鑒定病原微生物的檢驗技術也在不斷發展前進著。目前,應用比較廣泛的病原微生物檢測方法主要有直接塗片鏡檢、分離培養、生化反應、血清學反應、核酸分子雜交、基因晶元、多聚酶鏈反應等,該文對這些檢測技術進展做一綜述。 對人和動物具有致病性的微生物稱為病原微生物,又稱病原體,有病毒、細菌、立克次體、支原體、衣原體、螺旋體、真菌、放線菌、朊粒等。這些病原微生物可引起感染、過敏、腫瘤、痴獃等疾病,也是危害食品安全的主要因素之一。近年來出現的SARS、高致病性禽流感、西尼羅病毒感染等疾病的傳染性極強,往往造成世界性大流行,因此對病原體的檢測必須做到快速、准確。常規病原學檢測方法操作繁瑣,檢測周期長,而且對操作人員技術水平要求比較高。隨著醫學微生物學研究技術的不斷發展,病原學診斷已不再局限於病原體水平,深入到分子水平、基因水平的檢測手段不斷出現並被應用於臨床和實驗室 J。核酸分子雜交技術、PCR技術、基因晶元技術等檢測方法,自動化程度高,快速省時、無污染、結果精確,可以准確靈敏地鑒定病原微生物。1 傳統的病原微生物的檢測方法傳統的病原微生物學實驗室檢查以染色、培養、生化鑒定等為主,將標本直接塗片染色鏡檢和接種在培養基上進行分離培養是對細菌或真菌感染性疾病進行病原學診斷的常用方法。1.1 直接塗片鏡檢病原微生物體形體積微小,大多無色半透明狀,將其染色後可藉助顯微鏡觀察其大小、形態、排列等。直接塗片染色鏡檢簡便快速,對那些具有特殊形態的病原微生物感染仍然適用,例如淋球菌感染、結核分枝桿菌、螺旋體感染等的早期初步診斷。直接塗片鏡檢不需要特殊的儀器和設備,在基層實驗室里仍然是十分重要的病原微生物檢測手段。1.2 分離培養與生化反應 分離培養主要用於臨床標本(如血液、痰、糞便等)或培養物中有多種細菌時對某一種細菌的分離。細菌的生長繁殖需要一定時間,檢測周期較長,不能同時處理批量樣本。為解決這一問題,各種自動化培養和鑒定系統不斷產生,傳統鑒定方法也在逐步改進,大大加快了檢驗速度。例如Microscan WalLCAway全自動微生物分析儀,可同時做細菌鑒定和葯敏試驗,檢驗500多個菌種。苛養菌如肺炎鏈球菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血桿菌等對營養要求比較高,常規培養陽性率低。雍剛 等將不要同比例的葡萄糖、玉米澱粉、生長因子、酵母粉、氨基酸等特殊增菌劑加入到巧克力培養基中製成了新型淋病奈瑟菌培養基,大大提高了淋病奈瑟菌的分離培養率。蘇盛通等在營養瓊脂中加人了中葯紅棗、赤小豆培養甲型鏈球菌、乙型鏈球菌、肺炎鏈球菌等細菌,生長指數明顯高於血平板。1.3 組織細胞培養 活組織細胞培養適於專營活組織細胞內生存的病原體,包括病毒、立克次體、衣原體等。不同病原體敏感的組織細胞是不一樣的,將活細胞從病原體敏感的動物組織中取出在體外進行原代培養或用病原體敏感細胞系進行傳代培養,再將病原體接種於相應的組織細胞中後,病原體可在其中繁殖增長,引起特異性的細胞病變效應。也可以將病原體直接接種於敏感動物體內,引起相應組織器官出現特異的病理學改變。往往可以根據這些特異的病變對病原體進行鑒定。2 血清學與免疫學檢測血清學檢測是通過已知的抗體或抗原來檢測病原體的抗原或抗體從而對病原體進行快速鑒定的技術,簡化了鑒定步驟,常用的方法包括血清凝集技術、乳膠凝集實驗、熒光抗體檢測技術、協同凝集試驗、酶聯免疫測試技術等。酶聯免疫技術的應用大大提高了血清學檢測的敏感性和特異性,不僅可檢測樣本中病原體抗原,也可檢測機體的抗體成分。幽門螺奸菌在我國人群感染率高達50% ~80% ,應用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測唾液中抗HP抗體來診斷HP感染,其結果滿意。乙型肝炎病毒(HBV)在我國人群中感染率極高,ELISA應用於乙型肝炎病人早期血清學診斷的效果最為明顯。臨床上致病菌往往和非致病菌混合在一起,如何從這些細菌中分離出目標菌是關鍵。免疫磁珠分離技術(IMBS)是近年來發展起來的在微生物檢測領域中一種新技術。其基本原理是將特定病原體的單抗或多抗或二抗偶聯到磁珠微球上,通過抗原抗體反應形成磁珠一目標病原體復合物或磁珠一一抗一目標病原體復合物,在外部磁場磁力的作用下,將目標病原體分離出來。目前已經開發出了針對各種病原體的免疫磁珠,如大腸埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、軍團菌等,廣泛應用到各級科研和實驗室 。經IMBS分離出的白色念珠菌可直接在顯微鏡下檢測,檢測時間縮短至4 h。IM—Bs還可以和其它檢測技術聯合來檢測病原菌,免疫磁珠分離得到的目標菌可繼續用於分離培養使大腸埃希菌0157最低檢測限由200 cfu·g 提高到2 cfu·g~;IMBS結合聚合酶鏈反應(IMBS—PCR)可對培養條件比較特殊的細菌如苛養菌、厭氧菌進行快速檢測,肉類中的產毒素型產氣莢膜梭菌經IMBS.PC
Ⅱ 臨床微生物送檢率包括哪些項目。。。。
送檢率%=送標本的病例數/治療使用抗菌葯物的病例數*100%
按照感染性疾病病原診斷與管理要求,以下各項檢查可以作為計算微生物檢查送檢率的項目。
1.無菌體液細菌塗片染色細菌檢查 。
2.合格標本細菌培養 。
3.肺炎鏈球菌尿抗原 。
4.軍團菌抗原/抗體檢查 。
5.真菌塗片及培養
6.血清真菌G實驗或GM實驗 。
7.降鈣素原檢測(PCT)。
Ⅲ 臨床醫學微生物學有哪些重要實驗
1、細菌正常形態與各種特殊結構的觀察;
2、細菌動力學檢查法;
3、細菌染色檢查法;
4、細菌的培養法;
5、細菌的生化實驗——代謝產物的檢查;
6、抗鏈球菌溶血素「o」測定(ASO試驗);
7、肥達氏反應;
8、腸道感染的細菌學檢查;
9、生物因素對細菌的影響;
10、細菌的耐葯性變異機制——R因子傳遞試驗;
11、真菌學;
12、病毒的形態學;
13、病毒的培養法;
14、病毒的血清學實驗。
這是我們學校的,你們的我就不清楚了,參考下吧!
Ⅳ 微生物檢驗是查什麼的
病情分析:
微生物檢驗主要查人體寄生的致病微生物,如呼吸道,生殖道等處的微生物檢驗。
指導意見:
非正常微生物菌群的存在,是會致病的,引起相應部位的病症表現。
Ⅳ 微生物實驗室主要檢測的項目有哪些
主要應用於微生物學、生物醫學、生物化學、動物實驗、基因重組以及生物製品等研究使用。
一級生物安全防護實驗室:實驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用於對健康成年人已知無致病作用的微生物,如用於教學的普通微生物實驗室等。
二級生物安全防護實驗室:實驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用於對人或環境具有中等潛在危害的微生物。
三級生物安全防護實驗室:實驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用於主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通常已有預防傳染的疫苗。艾滋病病毒的研究(血清學實驗除外)應在三級生物安全防護實驗室中進行。
(5)醫院微生物實驗檢查些什麼擴展閱讀
實驗室的設立單位應當指定專門的機構或者人員承擔實驗室感染控制工作,定期檢查實驗室的生物安全防護、病原微生物菌(毒)種和樣本保存與使用、安全操作、實驗室排放的廢水和廢氣以及其他廢物處置等規章制度的實施情況。
負責實驗室感染控制工作的機構或者人員應當具有與該實驗室中的病原微生物有關的傳染病防治知識,並定期調查、了解實驗室工作人員的健康狀況。
Ⅵ 實驗室通常檢查哪些內容
實驗室檢查主要包括生物學檢查和理化檢查。生物學檢查又包括微生物學和寄生蟲學,它們分別確定傳染病的病原和寄生蟲病的病原;理化檢查是確定由中毒或者代謝原因導致的疾病理化因素。以下簡單介紹有關的主要實驗室檢查內容。
(1)微生物學檢查。
病料塗片鏡檢:對於一些具有特徵性形態的病原體,比如麴黴菌、巴氏桿菌、葡萄球菌等,通過取有顯著病變的特定組織器官作的塗片和染色鏡檢作出初步診斷。
用病料直接製作觸片或塗片鏡檢的方法較簡單,但因為細菌太少,常難以觀察到。有條件時應將病料接種到培養基上進行培養,然後用培養物塗片鏡檢。這樣不僅能觀察到大量細菌,還可根據培養後細菌菌落大小、形態、顏色來鑒別細菌。
分離培養和鑒定:用人工培養的方法,如用雞胚、組織培養及人工培養基培養等,將病原體從病料中分離出來,並進一步對所分離的病原體進行形態學、培養特性、生化特性檢查和動物接種以及血清學檢查等作出准確的鑒定。
動物接種實驗:將分離或可疑的病料接種於易感的實驗動物,如雛雞,小白鼠,豚鼠等,根據接種動物所出現的臨床症狀和病理變化等特徵來進行診斷。
血清學診斷:血清學診斷是利用抗原和抗體之間的特異性反應來進行疾病確診。該法具有高度的特異性和敏感性。可用已知抗原或抗體測未知的抗體或抗原,是傳染病的重要診斷方法。常用的血清學方法有凝集反應、瓊脂擴散反應、中和試驗和免疫熒光抗體技術等。
(2)寄生蟲學檢查。雞體內的寄生蟲,如球蟲、滴蟲、蛔蟲和絛蟲等大都寄生於消化道內,它們的蟲卵、卵囊、蟲體和幼蟲一般都是通過糞便排出體外,所以采其糞便進行直接塗片,或離心沉澱浮卵、飽和鹽水浮卵和水洗沉澱等方法在顯微鏡下觀察。
(3)病理組織學檢查。一些疾病的組織器官有特徵性典型病變,比如馬立克氏病、白血病、包涵體肝炎等均可選取這些病變組織器官,通過常規病理組織學檢查進行確診。
(4)理化檢查。主要是毒理學檢查,雞的中毒性疾病可根據臨床症狀、剖檢變化並結合病因的調查作出初步診斷,但確診需要根據家禽中毒的類型,如農葯、飼料和葯物等,選用不同的檢查方法進行實驗室檢驗。
Ⅶ 微生物室常用的病原真菌檢查方法有哪些
您好!
1、真菌鏡檢
是最簡單也是很有價值的實驗室診斷方法。其優點在於簡便、快速,無菌部位的陽性結果可直接確定真菌感染。但是由於陽性率較低,陰性結果亦不能排除診斷。直 接鏡檢對於淺表和皮下真菌感染最有幫助。在皮膚刮屑、毛發或甲標本中發現皮膚癬菌、念珠菌和馬拉色菌的成分可提供對相應真菌病的可靠診斷。如在無菌體液的 直接鏡檢中發現真菌成分常可確立深部真菌病的診斷,例如在腦脊液中檢測到帶莢膜的新生隱球菌酵母細胞,或外周血塗片中檢測到莢膜組織胞漿菌細胞。但一般在 有菌部位則只有發現大量真菌菌絲方才有意義,通過直接鏡檢一般可以區分念珠菌、隱球菌、暗色真菌、毛霉(接合菌)等菌的感染,進一步明確鑒定菌種需要通過 培養鑒定來完成。
2、真菌培養
真菌培養是實驗室檢查中的重要環節,培養出致病真菌是進一步鑒定菌種的前提條件。真菌培養第一步是從臨床標本中培養真菌的初代培養,初代培養後進一步進行 分離純化培養和鑒定培養。不同致病真菌每一步所採用的培養基,培養時間和培養溫度存在一定的差異。常規的真菌培養需要在28-30°C溫度下培養3-4 周,一般初代培養選用沙氏培養基(SDA)或者馬鈴薯瓊脂培養基(PDA),採用試管培養,一般同時培養兩管,其中一管可添加抗生素(氯黴素或慶大黴素均 可)。在培養1周內,應該每天觀察有無真菌生長。一般培養4周後,如果無真菌生長可報陰性。發現培養出真菌,直接挑取少量菌體或者小培養後,用乳酸酚棉蘭 製成塗片顯微鏡下觀察,結合菌落大體形態,典型菌種可直接報告種屬。不典型菌種根據基本表現,採用適當的標准鑒定培養基,標准培養條件培養,必要時要結合 生理學和分子生物學方法進行鑒定。
3、真菌鑒定
對常見致病真菌要掌握的鑒定原則是首先區分酵母菌和黴菌。
如果初代培養基上培養出酵母樣菌落,在鑒定前應進行分離純化。在去除細菌和其他真菌污染,區分混合感染後,對純菌落進行鑒定。酵母菌鑒定主要根據形態學特 征和生理生化特點,按照一定的流程進行。首先根據菌落顏色進行分類。臨床最為常見的是白色或奶白色菌落,這類菌進一步做芽管試驗,若芽管試驗是陽性則為白 念珠菌,若陰性則通過Vitek YBC或API20C及玉米吐溫瓊脂上培養的形態特徵來鑒定。另外,還可以應用念珠菌顯色瓊脂、尿素酶試驗等試驗來輔助鑒定。
檢驗地帶網
黴菌的鑒定非常復雜,有許多標准包括形態學特徵、溫度耐受性,放線菌酮抗性、雙相性、營養需求、蛋白分解活動以及水解尿素能力等。現代分類學鑒定方法主要 依據分生孢子的個體發生過程結合其他特徵來進行鑒定。初代培養後根據形態學特徵一般可鑒定到屬的水平,再依據不同真菌的鑒定要求,採用標准培養基和培養條 件進一步完成菌種鑒定。例如:麴黴屬鑒定時需要採用標准培養基,即察氏培養基和麥芽瓊脂,25℃培養7天後與麴黴形態鑒定檢索表對應得到正確的結果。
Ⅷ 微生物檢驗知識
微生物檢驗知識大全
你知道什麼是微生物檢驗嗎?你對微生物檢驗知識了解嗎?下面是我為大家帶來的關於微生物檢驗的知識,歡迎閱讀。
一.塗片鏡檢結果與培養結果不吻合?
1、塗片結果是報告所有檢見病原菌,而培養的目的是檢出致病菌,因此會產生不一致的情況。
2、一些苛養菌需要在特殊環境或培養基上生長,因此常規培養不一定能得到結果。
我們先來談談這第一個問題:塗片鏡檢結果與培養結果不吻合?。正如謝軼老師說的那樣:首先我們的搞懂什麼是塗片?什麼是培養?塗片的原則在排除一些檢查前或檢驗中的因素後其實就是:所見即所得!而培養呢?是根據檢驗的目的,檢出可能的致病菌,因此會產生不一致的情況;也正如一些老師聊到的那樣:一些苛養菌,厭氧菌等需要在特殊環境或培養基上生長,因此常規培養不一定能得到結果。
二.取的明顯是膿液標本,為何培養報告為無菌生長?
1、塗片結果是報告所有檢見病原菌,而培養的目的是檢出致病菌,因此會產生不一致的情況;
2、一些苛養菌需要在特殊環境或培養基上生長,因此常規培養不一定能得到結果。
我們先來談談這第一個問題:塗片鏡檢結果與培養結果不吻合?正如謝軼老師說的那樣:首先我們的搞懂什麼是塗片?什麼是培養?塗片的原則在排除一些檢查前或檢驗中的因素後其實就是:所見即所得!而培養呢?是根據檢驗的目的,檢出可能的致病菌,因此會產生不一致的情況;也正如一些老師聊到的那樣:一些苛養菌,厭氧菌等需要在特殊環境或培養基上生長,因此常規培養不一定能得到結果。
標本採集和培養方式:
1、未破裂膿腫:消毒覆於膿腫表面的皮膚,用注射器將膿腫內容物吸出,注射器針頭扎入無菌橡膠瓶蓋(青黴素小瓶橡膠塞)。---厭氧培養or需氧培養
2、開放病灶和膿腫:不建議做厭氧培養;用無菌生理鹽水或70%酒精擦拭除去表面分泌物,盡量去除表面菌群,用拭子採集病灶底部或邊緣的標本,置於需氧培養基中。---需氧培養。
三.今天的培養結果與前一天的'不一樣?
1、取材是否一致;
2、痰標本,選擇優勢菌做鑒定葯敏,就可能導致兩次結果不一致。
四.明顯是稀便,培養結果為何正常?
1. 大便培養,通常只能鑒定志賀菌、沙門菌感染。
2. 很少醫院常備致病性大腸桿菌鑒定血清。
3. 很少醫院能夠做艱難梭菌培養,但有一部分醫院能做培養和毒素檢測。
4. 很少醫院能常備霍亂弧菌血清。
與國際微生物檢驗的差距-缺項
1. 艱難梭菌:醫院感染常見病原菌,一些發達國家中排名第一
2. 肺炎鏈球菌尿抗原檢測
3. 軍團菌尿抗原檢測
4. 非典型分枝桿菌
5. 呼吸道感染病毒
五.培養陽性的病原菌都需要用抗菌葯物治療嗎?
1. 不是;
2. 培養陽性≠感染,可能為污染(血培養),可能為定植(痰培養);
3. 任何結果必須結合臨床情況進行評價(重要);
4. 感染部位的清創、引流、換葯比使用抗菌葯更重要;
改善患者全身情況:器官功能支持、糾正酸鹼平衡、電解質紊亂、低蛋白血症、高血糖等。
六.選擇葯敏報告敏感的葯物,為什麼臨床療效無效?
1. 體外葯敏試驗只能預測體內治療效果,一般規律,耐葯=治療無效;敏感≠治療有效;
2. 可能不是真正的致病菌(定植或污染);
3. 細菌本身因素(如誘導耐葯,生物被膜);
4. 感染部位的葯代動力學因素;
5. 葯敏試驗中有些葯物單獨使用無效,但可以與其他葯物聯合用葯。
“嚴重的腸球菌感染,如心內膜炎,除非證明其對慶大黴素和鏈黴素高水平耐葯外,可用氨苄西林、青黴素或萬古黴素(對於敏感株)加一種氨基糖苷類進行聯合治療,起到協同殺菌作用。”
銅綠假單胞菌:對氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林-克拉維酸、復方新諾明、1、2代頭孢天然耐葯。對三代頭孢(噻肟、曲松)即使葯敏試驗敏感,在實際里程治療中也需要超大劑量才會取得療效。頭孢中僅他啶和吡肟。
銅綠假單胞菌有對跟多葯物的誘導耐葯性,在體外試驗可能沒有表現出來,但一旦接觸某種抗生素,其沉默的耐葯基因可能被誘導激活,耐葯性則表現出來,這種特性在β-內醯胺抗生素中尤為明顯,可導致體外敏感,但實際治療卻無效。
;Ⅸ 微生物實驗室是主要做什麼臨床檢驗
主要做無菌的菌種檢測 比如水質,或者病毒累類