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什麼從原核生物中提取

發布時間:2023-01-15 10:18:50

❶ 限制性內切酶可以從原生質體中提取么

限制性內切酶大多存在於細胞質基質中,並且是原核生物才具有限制性內切酶。所以在特定的原核生物中就是從細胞質基質中提取限制性內切酶的。 不要認為是從擬核中獲取的,限制性內切酶是不存在於擬核中的。

❷ 原核基因採取什麼方法獲得

原核生物的基因則可直接用限制酶從DNA切取。因為原核生物的基因是連續不間隔的,直接切取就可得到目的基因,再PCR擴增後就能得到大量目的基因。
原核生物基因分為編碼區與非編碼區。非編碼區上的基因決定某些性狀是否表達,表達多少次以及何時開始表達。所謂的編碼區就是能轉錄為相應的信使RNA,進而指導蛋白質的合成,也就是說能夠編碼蛋白質。非編碼區則相反,但是非編碼區對遺傳信息的表達是必不可少的,因為在非編碼區上有調控遺傳信息表達的核苷酸序列。非編碼區位於編碼區的上游及下游。在調控遺傳信息表達的核苷酸序列中最重要的是位於編碼區上游的RNA聚合酶結合位點。RNA聚合酶是催化DNA轉錄為RNA。,能識別調控序列中的結合位點,並與其結合。
限制酶 restriction enzyme 是參與寄主支配性限制的酶,可識別 DNA的特定鹼基排列而切斷鏈的核酸內切酶,因此,又稱為核酸內切限制酶,目前已從各種細菌類中得到純化的特異性不同的酶。這種酶廣泛存在於生物界,並因生物種屬的不同而其特異性有所不同。因此在酶的名稱上加有生物種屬的簡稱。例如,從流感嗜血桿菌d(H-aemophilus influenzae d)菌株中分離出的酶稱為Hind限制酶或R.Hind(R為限制的縮寫)。又在同一生物種屬中含有復數的酶時,則再加上I,I等數字,從大腸桿菌的B株、K株等分離出來的酶,在反應時,必須有ATP、 S-腺苷蛋氨酸和Mg2 。與此相對應的,從持有耐葯因子的大腸桿菌中分離出的酶(R.Eco RⅠ,Ⅱ)和從嗜血桿菌屬(Haemoph-lius)分離出的酶(R.Hap, R.Hind, R.Hpa等),只需要Mg2 。這些酶決定著切斷部位的鹼基排列。雖排列因酶而有所不同,但都是具有雙重旋轉對稱性。例如,R·HindⅡ如下圖所示,是在第6個鹼基排列的部位按箭頭的位置切斷(A:腺苷,C:胞苷,G:鳥苷,T:胸苷,P:磷酸):另一方面,該菌含有的修飾酶在上面排列的腺苷上(帶*號的)使其甲基化,一旦甲基化後限制酶就不起作用了。通常認為限制酶和修飾酶在結構上是有關連的,例如,大腸桿菌B株的限制酶是由三個亞基組成,而修飾酶是由其中的二個亞基組成。

❸ 怎麼判斷DNA是從原核生物中還是從真核生物中提取的

看它是否含內含子
若含,則為從真核。不含則從原核

❹ 真核生物和原核生物DNA提取的方法是一樣的么可以同時提取么較好的是什麼方法

真核生物的基因一般用人工合成方法獲得,原核生物的基因則可直接用限制酶從DNA切取。因為原核生物的基因是連續不間隔的,直接切取就可得到目的基因。而真核細胞的基因是間隔的、不連續的,含有不表達的內含子。所以最好不要同時提取。

❺ 獲得原核細胞的目的基因可採用什麼方法

1cDNA文庫法(即原教材中提到的逆轉錄法)。cDNA文庫,是指匯集以某生物成熟mRNA為模板逆轉錄而成的cDNA序列的重組DNA群體。雖然可用基因組文庫法來獲取真核生物的目的基因,但是由於高等真核生物基因組DNA文庫比其cDNA文庫大得多,相關工作量同樣大得多。更為重要的是,在真核生物基因組中合有大量的間隔序列或內含子,但在大腸桿菌等原核生物中沒有類似序列的存在,所以大腸桿菌不能從真核生物基因的初級轉錄本中去除間隔序列,即不能表達真核生物DNA。而在真核生物成熟mRNA中已不存在間隔序列(已在拼接過程中被去除),所以可以以真核生物成熟mRNA為模板,逆轉錄而成的cDNA可被大腸桿菌表達。因此,在基因工程中,cDNA文庫法是從真核生物細胞中分離目的基因的常用方法。
.2。從基因文庫中獲取 這個沒什麼就是現成的基因儲存在受體菌上你用的時候提取出來就好了(基因組文庫法 就是原教材中的用限制性內切酶直接獲取。利用λ噬菌體載體構建基因組文庫的一般操作程序如下:① 選用特定限制性內切酶, DNA進行部分酶解,得到DNA限制性片段② 選用適當的限制性內切酶酶解λ噬菌體載體DNA。③ 經適當處理,將基因組DNA限制性片段與λ噬菌體載體進行體外重組。④ 利用體外包裝系統將重組體包裝成完整的顆粒。⑤ 以重組噬菌體顆粒侵染大腸桿菌,形成大量噬菌斑,從而形成含有整個DNA的重組DNA群體,即文庫。)經典解釋

3。直接分離基因最常用的方法是「鳥槍法」,又叫「散彈射擊法」。這種方法有如用獵槍發射的散彈打鳥,無論哪一顆彈粒擊中目標,都能把鳥打下來。鳥槍法的具體做法是:用限制酶(即限制性內切酶)將供體細胞中的DNA切成許多片段,將這些片段分別載入運載體,然後通過運載體分別轉入不同的受體細胞,讓供體細胞所提供的DNA(外源DNA)的所有片段分別在受體細胞中大量復制(在遺傳學中叫做擴增),從中找出含有目的基因的細胞,再用一定的方法吧帶有目的基因的DNA片段分離出來。如許多抗蟲,抗病毒的基因都可以用上述方法獲得。

❻ 真核生物和原核生物DNA提取的方法是一樣的么可以同時提取么較好的是什麼方法

你要是只提起基因組DNA的話,一般的方法都行,沒有太大要求就氯仿異戊醇的方法是通用的,只是材料的不同,預處理的方法也不同。且質粒DNA和線粒體等DNA的提取方法有些不同。細菌一般用培養液直接裂解了提取。植物組織需要液氮研磨,動物組織針對不同的不問使用冰浴或液氮。
最好的辦法是針對你的材料和目的買個試劑盒提吧,方便省時,但試劑盒達不到精確的提取。

❼ 限制性內切酶只能從原核生物中提取

不是,主要是從原核生物中分離、迄今已從近300種不同微生物中分離出了約4000種限制酶。

❽ 限制酶可以從原核生物中提取

考點: 基因工程的原理及技術 專題: 分析: 關於限制酶,考生可以從以下幾方面把握:(1)來源:主要從原核生物中分離純化出來.(2)特異性:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,並且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂.(3)結果:形成黏性末端或平末端. A、限制性核酸內切酶的活性易受溫度影響,A錯誤;B、限制性內切酶主要來自原核生物,B正確;C、限制性核酸內切酶不能識別和切割RNA,只能識別和切割DNA,C正確;D、限制酶具有特異性,一種限制性內切酶只能識別一種特定的脫氧核苷酸序列,D正確.故選:A. 點評: 本題考查限制酶的相關知識,要求考生識記限制酶的來源、特點及作用,能緊扣兩個「特定」來理解限制酶的特點,再結合所學的知識准確判斷各選項.

❾ 含有內含子的目的基因不能在原核細胞內正確表達,因此什麼方法適用於提取原核生物中的目的基因

真核生物的基因一般用人工合成方法獲得,原核生物的基因則可直接用限制酶從DNA切取。因為原核生物的基因是連續不間隔的,直接切取就可得到目的基因。而真核細胞的基因是間隔的、不連續的,含有不表達的內含子。
不能用鳥槍法,因為若用鳥槍法,得到的真核生物的目的基因中含有內含子.原核生物中沒有相應的機制,不能切除內含子轉錄的部分,所以內含子轉錄的部分要表達,結果和供體細胞合成的蛋白質不同.

❿ 請教高人,原核生物mRNA該如何抽提

一樣的啊,先要准備器皿,要用強變性劑處理。因為原核生物的MRNA沒有5`端的帽子,更容易被降解。

然後就把樣品離心濃縮,研磨提取了啊。按照一般的方法都可以。

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