微生物實驗室滅菌的方法有哪些

A. 滅菌方法分為哪幾種類別

滅菌方法分為：

1、熱滅菌法

熱滅菌法利用高溫使微生物細胞內的一切蛋白質變性，酶活性消失，致使細胞死亡。通常有乾熱、濕熱和間歇加熱滅菌等法。

2、乾熱滅菌

把金屬器械或洗凈的玻璃器皿放入電熱烘箱內，在150～170℃下維持1～2小時後，可達到徹底滅菌（包括細菌的芽孢）的目的。灼燒是一種最徹底的乾熱滅菌法，應用范圍僅限於接種環、接種針的滅菌或帶病原菌的材料、動物屍體的燒毀等。

3、濕熱滅菌

以沸水、蒸氣和蒸氣加壓滅菌。

4、間歇滅菌

間歇滅菌連續3天，每天進行一次蒸氣滅菌的方法。此法適用於不能耐 100℃以上溫度的物質和一些糖類或蛋白質類物質。一般是在正常大氣壓下用蒸氣滅菌1小時。滅菌溫度不超過100℃，不致造成糖類等物質的破壞，而可將間歇培養期間萌發的孢子殺死，從而達到徹底滅菌的目的。

5、輻射滅菌

輻射滅菌在一定條件下利用射線進行滅菌的方法，較常用的有紫外線，其他還有電離輻射。波長在25000～80000納米之間的激光也有強烈的殺菌能力，以波長26500納米最有效。輻射滅菌法僅限於某一定材料，因所需設備復雜，難於廣泛使用。

6、滲透壓滅菌

滲透壓滅菌利用高滲透壓溶液進行滅菌的方法。在高濃度的食鹽或糖溶液中細胞因脫水而發生質壁分離，不能進行正常的新陳代謝，結果導致微生物的死亡。

7、化學試劑滅菌

大多數化學葯劑在低濃度下起抑菌作用,高濃度下起殺菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化學滅菌劑必須有揮發性，以便清除滅菌後材料上殘余的葯物。

B. 常用6種滅菌方法有哪些，附適用范圍

常用6種滅菌方法有乾熱滅菌法、濕熱滅菌法、間歇滅菌法、輻射滅菌法、過濾除菌法和化學試劑滅菌法。乾熱滅菌法是指在乾燥環境（比如火焰或者乾熱空氣）進行滅菌的技術。濕熱滅菌法是指用飽和水蒸氣、沸水或者流通蒸汽進行滅菌的方法。間歇滅菌法是指利用反復多次的流通蒸汽加熱，從而殺滅所有微生物的方法。

一、常用6種滅菌方法有哪些

1、乾熱滅菌法：是指在乾燥環境（比如火焰或者乾熱空氣）進行滅菌的技術。一般有火焰滅菌法和乾熱空氣滅菌法，適用於乾燥粉末、凡士林、油脂等。火焰滅菌法是指用火焰直接燒灼的滅菌方法；乾熱空氣滅菌法是指用高溫乾熱空氣滅菌的方法。

2、濕熱滅菌法：是指用飽和水蒸氣、沸水或者流通蒸汽進行滅菌的方法，濕熱滅菌法是以高溫高壓水蒸氣為介質，因為蒸汽的潛熱大，而且穿透力強，容易使蛋白質變性或者凝固，從而導致微生物的死亡。該方法的滅菌效率比乾熱滅菌法高，而且還是葯物制劑生產過程中比較常用的滅菌方法。

3、間歇滅菌法：是指利用反復多次的流通蒸汽加熱，從而殺滅所有微生物。間歇滅菌一般在流動蒸汽的滅菌鍋中進行，也可用普通鋁鍋代替。這種方法多用於明膠、牛乳等物質的滅菌，這類物質在100℃以上的溫度下處理比較長時間會被破壞，用間歇滅菌法可以起到殺菌作用，又可以讓被處理的物質免遭破壞。

4、輻射滅菌法：是利用電離輻射殺死大多數物質上的微生物的一種有效方法，它們都可以通過特定的方式控制微生物生長或者殺死微生物，比如微波可以通過熱產生殺死微生物的作用，該方法可以在常溫或者低溫下進行，處理過程食品溫升很小，這樣有利於維持食品的質量；而且輻射過的食品不會留下任何殘留物。

5、過濾除菌法：是用物理阻留的方法將液體或空氣的細菌除去，從而達到無菌目的，過濾除菌的原理有慣性撞擊截留作用、攔截截留作用、布朗擴散截留作用等。

6、化學試劑滅菌法：是指用化學葯品直接作用於微生物而將其殺死的方法，該方法可以分為氣體滅菌法和液體滅菌法，氣體滅菌法是指採用氣態殺菌劑進行滅菌的方法，比如臭氧、甲醛等；液體滅菌法是指採用殺菌劑容易如進行消毒的方法。

二、6種滅菌方法的適用范圍

1、乾熱滅菌法：適用於高溫下不損壞、不變質、不蒸發物品的滅菌，不耐濕熱的器械的滅菌，用於蒸汽或者氣體不能穿透物品的滅菌，比如玻璃、油脂、粉劑和金屬等製品的消毒滅菌。

2、濕熱滅菌法：適用於耐高溫、耐濕熱物品，如培養基、動物屍體等，比如實驗室內常見壓力蒸汽滅菌器。

3、間歇滅菌法：適用於不耐高溫、熱敏感物料和制劑的滅菌。

4、輻射滅菌法：適用於食品、化妝品、葯品、日用品、醫療產品和電子塑膠等領域，主要作用是產品消毒滅菌處理，通過射線作用於產品在不拆外包裝的前提下可以有效降低或者殺滅產品內部不同類形的微生物。

5、過濾除菌法：適用於血清、毒素、抗生素等不耐熱生物製品及空氣除菌。

6、化學試劑滅菌法：適用於環境消毒以及不耐加熱滅菌的醫用器具、設備和設施等的消毒，也用於粉末注射劑。

C. 微生物的幾種滅菌方法

方法較多，方法有化學試劑滅菌、射線滅菌、乾熱滅菌、濕熱滅菌和過濾除菌等。

1、化學滅菌法是指用化學葯品直接作用於微生物而將其殺死的方法。

對微生物具有殺滅作用的化學葯品稱為殺菌劑，可分為氣體滅菌劑和液體滅菌劑。殺菌劑僅對微生物繁殖體有效，不能殺滅芽孢。化學殺菌劑的殺滅效果主要取決於微生物的種類與數量，物體表面的光潔度或多孔性以及殺菌劑的性質等。化學滅菌的目的在於減少微生物的數目，以控制一定的無菌狀態。

2、乾熱滅菌法是指在乾燥環境（如火焰或乾熱空氣）進行滅菌的技術。一般有火焰滅菌法和乾熱空氣滅菌法。適用於乾燥粉末、凡士林、油脂等。

3、過濾除菌法是用物理阻留的方法將液體或空氣的細菌除去，以達到無菌目的。所用的器具是含有微小孔徑的濾菌器。主要用於血清、毒素、抗生素等不耐熱生物製品及空氣的除菌。常用的濾菌器有薄膜濾菌器(0.45μm和0.22μm孔徑)、陶瓷濾菌器、石棉濾菌器、燒結玻璃濾菌器等。

(3)微生物實驗室滅菌的方法有哪些擴展閱讀：

滅菌的基本要求：

重復使用的診療器械、器具和物品，使用後應先清潔，再進行消毒或滅菌。

被朊病毒、氣性壞疽及突發不明原因的傳染病病原體污染的診療器械、器具和物品，應執行WS/T 367第11章的規定。

耐熱、耐濕的手術器械，應首選壓力蒸汽滅菌，不應採取化學消毒劑浸泡滅菌。

環境與物體表面，一般情況下先清潔，再消毒；當受到患者血液、體液等污染時，先去除污染物，再清潔與消毒。

醫療機構消毒工作中使用的消毒產品應經衛生行政部門批准或符合相應標准技術規范，並應遵循批准使用的范圍、方法和注意事項。

D. 微生物學實驗常用的滅菌方法有哪些

一般分為濕熱滅菌法和乾熱滅菌法兩種。

一、濕熱滅菌法是指用飽和水蒸氣、沸水或流通蒸汽進行滅菌的方法，由於蒸汽潛熱大，穿透力強，容易使蛋白質變性或凝固，所以該法的滅菌效率比乾熱滅菌法高，是最常用的滅菌方法。濕熱滅菌法可分為：煮沸滅菌法、巴氏消毒法、高壓蒸汽滅菌法、流通蒸汽滅菌法、和間歇蒸汽滅菌法。

（1）煮沸滅菌法：將水煮沸至100攝氏度，保持5-10分鍾可殺死細菌繁殖體，保持1-3小時可殺死芽胞。在水中加入百分之一至百分之二的碳酸氫鈉時沸點可達105攝氏度，能增強殺菌作用，還可去污防銹。此法適用於食具、刀箭、載玻片及注射器等。

（2）巴氏消毒法：一種低溫消毒法，因巴斯德首創而得名。有兩種具體方法，一是低溫維持法：62攝氏度維持30分鍾；二是高溫瞬時法：75攝氏度作用15-30秒。該法適用於食品的消毒。

（3）流通蒸氣滅菌法：利用常壓下的流通蒸汽進行滅菌。

（4）間歇蒸汽滅菌法

（5）高壓蒸汽滅菌法：103.4千帕蒸汽壓溫度達121.3攝氏度，維持15-20分鍾。

二、乾熱滅菌法是指在乾燥環境（如火焰或乾熱空氣）進行滅菌的技術。一般有火焰滅菌法和乾熱空氣滅菌法。

（1）火焰滅菌法：是指用火焰直接燒灼的滅菌方法。該方法滅菌迅速、可靠、簡便，適合於耐火焰材料（如金屬、玻璃及瓷器等）物品與用具的滅菌，不適合葯品的滅菌。

（2）乾熱空氣滅菌法：是指用高溫乾熱空氣滅菌的方法。該法適用於耐高溫的玻璃和金屬製品以及不允許濕熱氣體穿透的油脂（如油性軟膏機制、注射用油等）和耐高溫的粉末化學葯品的滅菌，不適合橡膠、塑料及大部分葯品的滅菌。

E. 實驗室常用的滅菌方法有哪些

（1）加熱滅菌法

利用高溫來殺死微生物（超過最高生長溫度）的方法。加熱滅菌的原理：當高溫作用於微生物時，首先引起細胞內生理生化反應速率加快，機體內對溫度敏感的物質如蛋白質、核酸等，隨著溫度的增高而遭受不可逆的破壞，盡而導致細胞內原生質體的變化、酶結構的破壞，從而使細胞失去了生活機能上的協調，停止了生長發育。隨著高溫的繼續作用，細胞內原生質便發生凝固，酶結構完全破壞，活動消失，生化反應停止，滲透交換等新陳代謝活動消失，細胞死亡。加熱滅菌可分乾熱滅菌和濕熱滅菌兩大類。

1）乾熱滅菌 利用灼燒或乾熱空氣滅菌而沒有飽和水蒸氣參加的滅菌法稱為乾熱滅菌法。由於乾熱滅菌使用方便，方法簡單，故在生產上廣泛應用。如火焰滅菌法：直接利用火焰把微生物燒死，故又稱焚燒滅菌法。採用此法滅菌既徹底又迅速，但只適用於金屬制的接種工具、試管口及污染物品等的處理。熱空氣滅菌法：即在電熱恆溫乾燥箱中利用乾熱空氣來滅菌。

2）濕熱滅菌 即利用蒸汽進行滅菌的方法。濕熱滅菌又分為高壓、常壓、間歇滅菌和巴氏滅菌4種。

①高壓蒸汽滅菌 由於高壓蒸汽具有較強的穿透力和較常壓高的溫度，能大大縮短滅菌時間，提高工作效率，加之蛋白質在濕熱條件下容易變性，在熱蒸汽條件下，細菌的芽孢在120℃，經20～30分鍾可全部被殺死。如滅菌材料體積較大，不易被穿透時，可將壓力增加到0.152兆帕，延長至1～2小時。在高壓蒸汽滅菌中，滅菌溫度隨蒸汽壓力的增加而升高（圖2-6）。

圖2-7 簡易常壓滅菌法

③常壓間歇蒸汽滅菌法 這是利用常壓蒸汽反復幾次滅菌的方法。具體做法是將待滅菌物品放在鍋內，100℃處理1小時左右，殺死微生物的營養細胞，讓其冷卻至30℃左右，此時芽胞會萌發，再以同樣方法加熱處理，反復3次，可達到滅菌目的。該方法可用於不耐高溫的葯品、營養物、特殊培養基的滅菌。

④低溫巴氏滅菌法 即在60～70℃下，經一定時間，殺死有害微生物的方法。適應於不耐高溫的物品消毒。有些培養基，在高溫下遭到破壞，用此法既可殺死致病微生物的營養體，又能使培養基的成分不致受到嚴重破壞。食用菌生產中培養料堆積發酵工藝，就是利用這個原理殺死其中的病蟲、雜菌。

（2）過濾除菌法

又分液體過濾和空氣過濾兩種，就是採用機械的方法，設計一種濾孔比細菌還小的篩子，做成各種過濾器，通過機械過濾，只讓液體培養基或空氣從篩孔流出，各種微生物菌體則留在篩子上，從而達到除菌的目的。這種方法適用於對熱不穩定的體積小的液體培養基（如動物血清、蛋白質、酶、維生素等）及氣體的滅菌。超凈工作台的工作原理就是將帶菌空氣通過過濾滅菌形成無菌空氣，從風洞中吹出，來造成工作台范圍的無菌狀態。過濾滅菌的最大優點是不破壞培養基中各種物質的化學成分。常用的過濾器有用硅藻土製的、石棉製的、陶瓷土製的，也有用火棉膠、硝化纖維素濾膜製成的。

（3）輻射滅菌法

利用輻射產生的能量進行殺菌的方法稱輻射滅菌。輻射可分電離輻射和非電離輻射兩種，α-射線、β-射線、γ-射線、X-射線、中子和質子、微波等屬電離輻射，紫外線、臭氧、日光為非電離輻射。

1）紫外線滅菌 紫外線殺菌的原理是利用紫外線的輻射作用。用燈管直接照射細菌使其發生光化學反應，將細菌細胞質誘導形成胸腺嘧啶雙聚體，從而抑制DNA的復制而發生變性、致死。另一方面，空氣在紫外線照射下產生的臭氧（O₃），也具有一定的殺菌作用。紫外線的有效作用距離為1.2～2.0米。紫外燈一般懸吊在接種室或培養室的上方，個數依房間大小而定，容1～2個人操作的接種室，安裝一個30瓦的紫外燈就可以了。在每次接種前，應將所需的器具一起放入接種室（箱）內，然後打開紫外燈照射。如果接種室體積較大，開燈照射2小時才能達到滅菌效果；如果較小，只需開燈半小時左右既可達到滅菌效果。由於紫外線穿透力弱，即使是普通玻璃也不能濾過，因此，只適於空氣或物體表面的滅菌。紫外線對人體皮膚，尤其是眼睛有殺傷作用，應避免直視，工作時應將紫外燈關閉。紫外線消毒時工作場所如果處在稍暗無光的情況下，能提高殺菌效果。細菌接受致死量紫外線照射後，隨即給予可見光照射，部分細菌有復活的可能。幹細胞比濕細胞對紫外線的抗性強，孢子比其營養細胞對紫外線更具抗性。

2）微波滅菌 由於微生物的細胞中都含有70%～90%的水分，水分子在微波電場中被極化，並隨著電場方向的改變而轉動，在轉動過程中分子之間高速度摩擦產生熱能，這種熱能不同於外部加熱，可在短時間里使細胞爆破而物體本身的溫度卻只有極微增加，從而達到滅菌效果。用YM7601型微波爐只需60秒鍾就能殺死食品中192萬個大腸桿菌。

3）臭氧發生器消毒 臭氧（O₃）具有強烈的氧化作用，能破壞微生物的細胞膜與核酸。O₃也是一種暫態物質，常溫下能自然分解，還原成氧。其滅菌原理實際上和紫外線消毒極相似。

F. 微生物學實驗室常用的滅菌方法有哪些

1 最常用的是高壓蒸汽滅菌，屬於濕熱滅菌；
2 火焰灼燒、高溫烘烤等，乾熱滅菌；
3 化學法滅菌，如福爾馬林、次氯酸鈉、酒精等；
4 過濾除菌，如細菌過濾器；

G. 微生物的幾種滅菌方法

乾熱滅菌（如電熱鼓風乾燥箱,直接火焰灼燒等）
濕熱滅菌 （高壓蒸汽滅菌鍋、煮沸滅菌等））
物理滅菌 （紫外線等）
化學滅菌 （各種消毒劑如酒精 次氯酸鈉 過氧乙酸等等）
過濾除菌 （微孔濾膜）

H. 微生物滅菌方法有哪些

在微生物學的實驗中，常用的滅菌方法有乾熱滅菌法、濕熱滅菌法、物理滅菌法、化學滅菌法、過濾除菌法。以濕熱滅菌法為例，它是指用飽和的水蒸氣、沸水或流通蒸汽進行滅菌的方法，由於蒸汽的潛熱較大且穿透力較強，因此它容易使蛋白質變性或者凝固，所以這種方法的滅菌效率比較高，屬於常用的滅菌方法。

I. 微生物實驗滅菌方法

滅菌常用的方法有化學試劑滅菌、射線滅菌、乾熱滅菌、濕熱滅菌和過濾除菌等。可根據不同的需求，採用不同的方法，如培養基滅菌一般採用濕熱滅菌，空氣則採用過濾除菌。
這個個滅菌的方法根據不同的情況而選著適宜的滅菌方式，一般微生物實驗都是採用濕熱滅菌即：高壓蒸汽滅菌

J. 微生物實驗室常用的滅菌方法有哪些

常用的滅菌方法主要包括以下三種：乾熱滅菌；濕熱滅菌；紫外滅菌
1.乾熱滅菌法
1.1灼燒與火焰滅菌：灼燒主要用於接種工具滅菌,在火焰上灼燒即可達滅菌目的,火焰滅菌通常用於無菌操作中試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等實驗物品的滅菌,防止管口污染。
1.2干烤滅菌：利用熱輻射及乾熱空氣進行滅菌.將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷製品包裝後,在烤箱內加熱至160℃,保溫2h可完全滅菌.但不宜超過170℃.此外降溫過速,驟冷易引起玻璃器皿炸裂.乾熱滅菌時裝入干烤箱內的物品切勿緊密,應有空隙,利於熱空氣流動,過密,致使溫度不均,部分物品滅菌不徹底.
2.濕熱滅菌法
通過加壓提高蒸汽溫度,用高壓蒸汽滅菌,溫度高,滅菌效果最好.
注意事項：1.完全排除高壓滅菌器內的冷空氣.有冷空氣存在時,在同一表壓下所達到的溫度值要低,而冷空氣排出越少,溫度就低得越多.在高壓蒸汽滅菌時,為保證達到規定的溫度,必須將冷空氣完全排除.否則,雖然壓力達到,而溫度達不到規定的要求,滅菌就不徹底.
3.紫外線
殺菌譜廣,但穿透力弱,影響因素多,殺菌效能受到一定限制.
紫外線消毒效果與紫外線強度、照射時間、溫度與濕度等因素有關.紫外燈殺菌的溫度以20~40℃,相對濕度40%~60%為宜.