如何指導做徽生物檢測

『壹』 怎樣做好微生物檢驗的工作

怎樣做好微生物檢驗質量控制
微生物學檢驗室內質量控制包括：①對細菌檢驗人員的要求；②操作手冊；③儀器設備的功能監測；④培養基的質量控制；⑤試劑、染色液及抗血清的質量控制；⑥標本檢驗的質量控制；⑦標准菌株的來源和保存及室內質量的全面控制七個方面。
質量控制：滿足質量要求的操作技術和活動。
質量保證：為了滿足實驗室質量要求
，制定相應的計劃，實施證明（記錄）所進行的一系列的系統活動。
外部質量控制：通過互相校準和/或檢驗對實驗室的操作和結果所進行的控制。
內部質量控制：實驗室內部採取的以對比分析、跟蹤以及相關方法，對實驗室工作的連續性控制計劃。

『貳』 做微生物實驗的步驟

操作步驟
1．塗片將培養14—16小時的枯草芽孢桿菌和培養24小時的大腸桿菌分別作塗片（注意塗片切不可過於濃厚），乾燥、固定。固定時通過火焰1—2次即可，不可過熱，以載玻片不燙手為宜。
2．染色
（1）初染
加草酸銨結晶紫一滴，約一分鍾，水洗。
（2）媒染
滴加碘液沖去殘水，並覆蓋約一分鍾，水洗。
（3）脫色
將載玻片上面的水甩凈，並襯以白背景，用95％酒精滴洗至流出酒精剛剛不出現紫色時為止，約20—30秒鍾，立即用水沖凈酒精。
（4）復染
用番紅液染1—2分鍾，水洗。
（5）鏡檢
乾燥後，置油鏡觀察。革蘭氏陰性菌呈紅色，革蘭氏陽性菌呈紫色。以分散開的細菌的革蘭氏染色反應為准，過於密集的細菌，常常呈假陽性。
（6）同法在一載玻片上以大腸桿菌與枯草芽孢桿菌混合製片，作革蘭氏染色對比。
革蘭氏染色的關鍵在於嚴格掌握酒精脫色程度，如脫色過度，則陽性菌可被誤染為陰性菌；而脫色不夠時，陰性菌可被誤染為陽性菌。此外，菌齡也影響染色結果，如陽性菌培養時間過長，或已死亡及部分菌自行溶解了，都常呈陰性反應。

『叄』 做微生物檢驗要注意什麼

1、室驗需在潔凈台進行
2、操作前用75%酒精擦潔凈檯面及四周，放好需用的實驗器材及各種溶液，開紫外燈消毒30分鍾，在關掉紫外燈30分鍾後方能進入。
2、進入無菌室前應用肥皂洗手，然後用75%酒精球棉將手擦乾凈。3、進入無菌間必須穿的專用工作服、帽及拖鞋、口罩，應放在無菌室緩沖間，工作前經紫外線消毒後使用。
4、操作開始前用0.1%的新潔爾滅或75%的酒精對手、手臂及所要用到的超凈台檯面進行消毒。
5、使用的吸管、平皿及培養基等必須經消毒滅菌，打開包裝未使用的器皿，不能放置再用，消毒用器皿放置不得超過一周。6、從包裝中取出吸管時，吸管尖部不能觸及外露部位及試管或平皿邊。7、接種樣品必須在酒精燈前操作，接種樣品時，吸管從包裝中取出後及打開試管塞都要通過火焰消毒。8、實驗完畢，清潔操作檯面。
9、用過的器材進行整理，污染細菌的器材需經高壓滅菌或煮沸消毒。
11、實驗過程中，及時用0.1%的新潔爾滅溶液對手、手臂及可能被污染了的區域進行消毒。
12、換下的隔離衣、帽等進行紫外線，拖鞋放回原處。13、用畢，再開紫外燈消毒 30分鍾。

『肆』 微生物檢驗時的注意事項

微生物檢驗時的注意事項

微生物(microorganism)，包括細菌、病毒、真菌以及一些小型的原生動物等在內的一大類生物群體，個體微小，與人類生活密切相關。廣泛涉及健康、醫葯、工農業、環保等諸多領域。在中國大陸地區的教科書中，均將微生物劃分為以下8大類：細菌、病毒、真菌、放線菌、立克次體、支原體、衣原體、螺旋體。下面是我為大家帶來的微生物檢驗的注意事項的知識，歡迎閱讀。

一、培養基的滅菌及使用

(1)每次配置時，要注意其生產日期是否在保質期內，查看其開瓶日期及瓶口密封性，保證其未變質，並且未吸潮。

(2)培養基配置時，稱量要准確，包括鹽水的分裝要准確。

(3)一定要保證現配製現滅菌，未滅菌的配好培養基不能長時間放置，更不可隔夜。

(4)滅菌時要保證恆溫、恆壓，同時要保證有效滅菌時間。

(5)滅菌過的培養基要冰箱保存，可保存一周，一般不超過 3 天。而且要遵循“先入先出”原則，先配製的要先使用。

(6)在使用時，要根據當班次的.使用量，用水浴鍋先將培養基溶化為液態，然後及時調低水域溫度(先化好的可從水域取出，放在水浴鍋鍋蓋上)待用，千萬不可長時間使培養基處於高溫狀態。

(7)做產品微生物檢測時，傾倒培養基溫度在 45℃左右，不可過燙，避免將菌燙死;也不可過涼，化好的培養基又結塊凝固，不便於觀察結果。

(8)每瓶培養基均要做空白。

(9)盡量集中做樣，避免頻繁打開同一瓶培養基瓶塞，增大培養基的污染幾率，出現誤差結果。

(10)培養基剩餘過少時，可先將其傾倒成空白用板。

二、 做樣環境的維持

(1)大環境(房間)

1)做樣時，窗戶和空調要關閉，或用酒精對房間進行噴霧消毒，避免房間內空氣流通影響超凈台內部環境(最好在有通排風系統的恆溫恆濕無菌間進行操作)。

2)如果在原來的原料微生物檢測室進行做樣，要定期開啟紫外燈，對房間進行殺菌。

(2)小環境(超凈台)

1)定期清潔初效過濾器，要及時更換。

2)做樣前，將超凈台內部進行清潔，用 75%酒精進行擦拭消毒，並提前半小時將超凈台紫外燈打開，對超凈台內部環境進行殺菌。

3)關紫外燈，開風機，調整合適進風量，風量不可過低。

4)每次做樣後，要對超凈台內部進行清理、清潔，並用 75%酒精進行擦拭消毒。

5)紫外燈根據其使用壽命要及時更換。

6)做樣同時，要做上相應菌落檢測的環境空白。

7)做樣區域的選擇：

a、一般在距離超凈台外沿的 1/3-2/3 區域進行無菌操作;

b、要在酒精燈火焰的外焰保護區域進行操作。

三、 工器具的潔凈度

(1)玻璃器皿：採用乾熱滅菌方式進行滅菌。

(2)做樣用剪刀、勺子等物品要做到做樣專用，不可與其它操作器具混用，使用時，先用75%酒精消毒，再採用灼燒方式進行滅菌。

(3)接種針(環)採用灼燒方式進行滅菌，但要注意做樣時要先將接種針(環)進行冷卻。

四、樣品的採集及檢測

(1)保證采樣器具的無菌性

1)玻璃器皿：採用乾熱滅菌方式進行滅菌，保證恆溫、時間足夠(但不可時間過長，導致玻璃器皿易裂紋而報廢)。

2)取樣筐：使用前要用 75%酒精進行噴灑消毒

3)取樣勺、濃奶取樣提子：要保證其清潔消毒，清潔後用 75%酒精進行擦拭消毒。

4)取樣袋：可現用酒精進行擦拭消毒，再在超凈台用紫外燈照射消毒，(包裝車間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒)。

5)電子稱表面用 75%酒精消毒。

(2)人員操作

1)保證手部的清洗、消毒：取樣前及做樣前都要先洗手再消毒。

2)取樣要具有代表性(隨機樣、目的樣、綜合樣)且要標示清楚。

3)取樣完畢，不可在車間逗留，要及時將樣品放入超凈台，對其外表面進行紫外燈照射消毒。

4)在要求的做樣區域進行操作。

5)做樣前，要用 75%酒精棉球對樣品袋口部進行擦拭消毒，再開口。

6)往鹽水瓶加樣品時，要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口。

7)樣品計量要准確，稀釋倍數也要准確(1mL 吸管不允許將管口敲掉)，進行 100 倍稀釋時，1mL 吸管要伸入鹽水中，不可以將樣品管壁流下去，同時要避免將管底部捅破。

8)鹽水溫度以 40℃左右為宜，不能過熱，將部分微生物燙死，也不能溫度太低，不能將奶粉溶解完全。

9)進行稀釋時，要搖勻，保證溶液的均一性。

10)傾倒平皿時，要注意培養基瓶口不要接觸到平皿;傾倒的培養基要適量，不可以太少，在培養過程中幹掉，微生物亦死亡，以 15mL 左右為宜。

11)做大腸菌群樣時，要提前將乳糖膽鹽培養基培養管按需要量備好，放入超凈台對外表面進行紫外線滅菌。

12)接二步時，要注意先將接種針(環)進行冷卻，避免出現接不上菌落的情況發生，導致無法判斷、確認。

13)做樣完畢，及時放入相應培養箱進行培養，並清理清潔超凈台。

五、 微生物的培養

(1)在培養過程中，要隨時監控培養箱溫度，保證其在適宜的溫度進行培養。

(2)要按照《微生物檢驗規范》要求及時觀察結果，出現異常，要及時分析原因進行反饋。

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『伍』 請教表面微生物檢測如何操作

1、采樣與檢測方法：1.1表面微生物的采樣與測試方法1.1.1樣品採集：用浸有滅菌生理鹽水的棉簽在被檢物體表面取25cm2的面積，在其內塗抹10次，然後剪去手接觸部分棉棒，將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水。

『陸』 微生物檢測應注意什麼事項

1、工作室要矮小平整、光滑、無凹凸不平或稜角、四壁及屋頂用不透水之材質，便於擦洗及殺菌。

2、室內採光面積應大，從室外應能看到室內的情況。

3、為保證無菌室的潔凈，無菌室周圍需設緩沖走廊，走廊旁再設緩沖間，其面積可小於無菌室。

4、無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設有日光燈及紫外燈，殺菌紫外燈離工作台以一米為宜，其電源開關應設在室外。

5、無菌室與緩沖間進出口應設推拉門，門與窗平齊，門縫要封緊，兩門要錯開，以免空氣對流造成污染。

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『柒』 微生物鏡檢的化驗怎麼做

做微生物鏡檢首先要對微生物進行培養，
1.一般適溫培養18-24h，
2.革蘭氏染色：1）塗片固定。 2）草酸銨結晶紫染1分鍾。 3）自來水沖洗。 4）加碘液覆蓋塗面染約1分鍾。 5）水洗，用吸水紙吸去水分。 6）加95%酒精數滴，並輕輕搖動進行脫色，20秒後水洗，吸去水分。 7）蕃紅染色液（稀）染2分鍾後，自來水沖洗。
3.乾燥，鏡檢。

『捌』 純化水中的微生物檢測怎麼做 要詳細

1檢測前的准備
1.1儀器：微生物限度檢驗儀
微生物限度培養器
1.2培養基：TGYA瓊脂培養基、R2A瓊脂培養基
上述培養基均須做培養基的促生長試驗，TGYA瓊脂培養基的促生長試驗參見微生物計數操作檢查法SOP07-QC-3-017，R2A瓊脂培養基促生長試驗中選擇的菌種是銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄糖球菌，操作方法同微生物計數操作檢查法SOP07-QC-3-017中培養基的促生長試驗。
75%的酒精
1.3開啟凈化工作台，把微生物限度檢驗儀連接電源。

2檢測
2.1薄膜過濾法
使用孔徑大小不超過0.45μm的薄膜過濾器。
2.2在凈化工作台下，用火焰噴槍對泵頭端面和過濾片進行消毒。把微生物限度培養器固定在微生物限度檢驗儀上，打開微生物限度培養器蓋子。
2.3取50ml的純化水，倒入微生物限度培養器中，打開微生物限度檢驗儀開關，立即過濾。過濾完成後，取下過濾器，在過濾器膜的另一面中，傾注TGYA瓊脂培養基，蓋上蓋子。
2.4取50ml的純化水，倒入微生物限度培養器中，打開微生物限度檢驗儀開關，立即過濾。過濾完成後，取下過濾器，在過濾器膜的另一面中，傾注R2A瓊脂培養基，蓋上蓋子。
2.5每個樣品過濾後均做2單個培養，檢測完畢，取一微生物限度培養器固定在微生物限度檢驗儀上，注入100ml的75%酒精過濾，關閉儀器、電源。

3培養
傾注TGYA瓊脂培養基的，在30℃-35℃培養48h-72h，並計數。傾注R2A瓊脂培養基的，在20℃-25℃培養5d-7d，並計數。
分別計算和報告兩種培養基每1ml純化水中的cfu值。

『玖』 做微生物實驗的步驟

1、准備工作，培養基的配製及滅菌（121-126度滅30分鍾高壓蒸汽式滅菌），玻璃器皿的滅菌（170度滅2小時乾熱滅菌，也可用濕熱滅菌）若量大可加長滅菌時間。