生物鹼用什麼色譜

Ⅰ 生物鹼的分離常用的方法是

你好，生物鹼的分離常用的方法主要有以下幾種：硅膠柱色譜法、大孔吸附柱色譜法、膜分離技術，望採納。

Ⅱ 茶葉生物鹼的分析方法

茶葉中生物鹼的測定最早採用滴定法, 此法也是測定生物鹼的經典方法，1949 年 Fungairino L 等報道了用重鉻酸鉀滴定測定茶葉、咖啡中的黃嘌呤鹼。1956 年 Fleischer G.等首次採用紙層析法, 分離鑒定了茶葉中咖啡鹼、可可鹼、茶鹼、anthine、3-甲基黃嘌呤、3, 8- 二甲基黃嘌呤和腺嘌呤。隨後國內外專家、學者在茶葉生物鹼( 主要是茶葉咖啡鹼、可可鹼和茶鹼) 的測定方法研究方面作了許多工作, 歸納起來茶葉中生物鹼的測定方法主要有：分光光度法、近紅外光譜法、薄層色譜法、液相色譜法、毛細管電泳法和質譜法等 。 紫外可見分光光度法具有色散波長范圍寬、本低、操作簡單、樣品易於制備和保存等優點，可用於茶葉生物鹼的總生物鹼含量測定；但由於存在靈敏度低、樣品量大、解析度不高等缺點，對各種結構相近的嘌呤生物鹼分辨較為困難，因此單獨應用於茶葉生物鹼的檢測已越來越少。
隨著現代分析檢測技術的發展，對茶葉生物鹼的檢測主要採用高效液相色譜HPLC、薄層色譜TLC、氣像色譜 GC、毛細管電泳CE等色譜法。其中 HPLC 具有分離效能高、分離速度快等優點，作為生物鹼含量測定的通用方法，是茶葉生物鹼等活性成分測定中應用最為廣泛的方法之一，其中反向高效液相色譜法分離效果好，應用最多。TLC 是一種開放系統的色譜，受外界影響因素較多，可能有較大的實驗誤差，使得實驗的難度提高而且重現性較差，但其具有經濟、快速、操作簡單等優點，而且能較好地檢出個別植物中微量的甲基黃嘌呤類生物鹼。GC 具有分離時間短、經濟、分析成分多等優點，但卻有精密度和重現性相對較差等缺點，且在定性分析時需要已知樣品或數據的色譜峰進行對照，在定量分析時需要已知純樣品檢測後輸出的信號進行矯正，因此已經較少單獨用於茶葉生物鹼等成分的測定。CE具有分離效率高、分析速度快、試劑用量少和成本低等優點；早期CE在茶葉有效成分檢測中主要採用光檢測法，有報道利用電化學檢測器法，可以提高靈敏度，快速、簡便並可同時測定茶葉中各種成分的含量 。
隨著色譜-質譜聯用等技術的迅速發展, 包括液相-質譜聯用、氣象-質譜聯用、毛細管電泳-質譜聯用、薄層色譜-質譜聯用等，尤其是前兩者的應用愈加廣泛，這類技術集色譜的分離能力和質譜的高靈敏、高專屬性於一體，成為分析檢測的重要工具，現開始廣泛應用於茶葉生物鹼的分析檢測中，使分析檢測的精密度和靈敏度都得到了很大程度的提高。
除了上述各種分析檢測技術外，熒光免疫測定、近紅外光譜法等也開始應用於茶葉生物鹼等化合物含量測定等領域。

Ⅲ 液相色譜法測定生物鹼為什麼採用內標法

液相色譜法測定生物鹼採用內標法的原因在於內標法的測定的結果較為准確，由於內標物與被測組分的峰面積的比值不受進樣量波動影響，因而在一定程度上消除了操作條件等的變化所引起的誤差。
內標法是色譜分析中一種比較准確的定量方法，尤其在沒有標准物對照時，此方法更顯其優越性。內標法是將一定重量的純物質作為內標物加到一定量的被分析樣品混合物中，然後對含有內標物的樣品進行色譜分析，分別測定內標物和待測組分的峰面積及相對校正因子，按公式即可求出被測組分在樣品中的百分含量。
液相色譜法就是用液體作為流動相的色譜法。液相色譜不能由色譜圖直接給出未知物的定性結果，而必須由已知標准作對照定性。當無純物質對照時，定性鑒定就很困難，這時需藉助質譜、紅外和化學法等配合。液相色譜法的分離機理是基於混合物中各組分對兩相親和力的差別。根據固定相的不同，液相色譜分為液固色譜、液液色譜和鍵合相色譜。應用最廣的是以硅膠為填料的液固色譜和以微硅膠為基質的鍵合相色譜。根據固定相的形式，液相色譜法可以分為柱色譜法、紙色譜法及薄層色譜法。按吸附力可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜和凝膠滲透色譜。

Ⅳ 生物鹼薄層色譜和紙色譜常用的顯色劑是

生物鹼薄層色譜和紙色譜常用的顯色劑是?
答:生物鹼薄層色譜和紙色譜常用的顯色劑是改良碘化鉍鉀。

Ⅳ 生物鹼色譜法檢識可用於哪些目的

生物鹼的色譜檢識方法在中葯研究和實際工作中應用很廣泛，常用的有薄層色譜法、紙色譜法、高效液相色譜法和氣相色譜法等。

(一)薄層色譜
1、吸附薄層色譜法
（1）吸附劑：硅膠、氧化鋁
（2）展開劑
（3）顯色觀察
多數生物鹼的簿層色譜需用政良碘化鉍鉀試劑噴灑，顯示桔紅色斑點。

（4）應用范圍
硅膠和氧化鋁薄層色譜適用於分離和檢識脂性生物鹼。
2、分配薄層色譜法
當用硅膠或氧化鋁吸附薄層色譜法檢識生物鹼效果不理想時，可考慮用分配薄層色譜法。特別是用於分離有些結構十分相近的生物鹼，可獲得滿意的效果。

（1）支持劑：硅膠、纖維素。
（2）固定相
對於脂溶生物鹼的分離，多以甲醯胺為固定相；水溶性生物鹼或生物鹼鹽則以水作固定相。

（3）展開劑
分離脂溶性生物鹼，應以親脂性有機溶劑作展開劑。分離水溶性生物鹼，則應以親水性的溶劑作展開劑，如baw系統[正丁醇-乙酸-水（4：1：5），上層]。

（4）應用范圍
以甲醯胺為固定相的薄層色譜，適於分離弱極性或中等極性的生物鹼，以水為固定相的薄層色譜，適於分離水溶性的生物鹼。

3、薄層色譜的顯色觀察薄層展開後，有色生物鹼可直接觀察斑點；具有熒光的生物鹼在紫外光下顯示熒光斑點；絕大多數生物鹼的薄層色譜可用改良碘化鉍鉀試劑顯色，顯示橘紅色斑點。應注意有些生物鹼與改良碘化鉍鉀試劑不顯色，可選擇某些特殊顯色劑。

(二)紙色譜
1、固定相：①水；②甲醯胺；③酸性緩沖液。
2、展開劑：以水作固定相的紙色譜，宜用親水性溶劑系統作展開劑，如baw[正丁醇-乙酸-水（4：1：5），上層]；以甲醯胺和酸性緩沖液作固定相的紙色譜，多以親脂性有機溶劑系統作展開劑。

3、顯色劑
4、應用范圍：紙色譜法多用於水溶性生物鹼、生物鹼鹽和弱親脂性生物鹼的分離檢識。

（三）高效液相色譜
（四）氣相色譜
氣相色譜主要適用於揮發性化合物的分析，如麻黃生物鹼、煙鹼等。

Ⅵ 生物鹼的薄層色譜和紙色譜常用的顯色劑是

生物鹼的薄層色譜和紙色譜常用的顯色劑是改良的碘化鉍鉀。根據查詢相關資料信息，上海科哲生化是中國薄層色譜儀器的優質品牌，專注於薄層色譜，是國內知名薄層色譜掃描儀生產商，生物鹼的薄層色譜和紙色譜常用的顯色劑是改良的碘化鉍鉀。

Ⅶ 常用的生物鹼提取,分離方法是什麼

一、生物鹼的提取：
1.水或酸水提取法
（1）生物鹼在植物體內都以鹽的形式存在，常以無機酸水提取。使生物鹼的大分子有機酸鹽變為小分子無機酸鹽，增大在水中的溶解度，且方法比較簡便。
（2）常用0.1%～l%的硫酸、鹽酸或醋酸、酒石酸溶液作為提取溶劑，採用浸漬法或滲漉法提取。
（3）主要缺點是提取液體積較大，濃縮困難，且水溶性雜質多。故用酸水提取後，一般可採用下列純化和富集生物鹼的方法：
1）陽離子樹脂交換法
生物鹼鹽在水中可解離出生物鹼陽離子，能和陽離子交換樹脂發生離子交換反應，被交換到樹脂上。交換完全後，用中性水或乙醇洗除柱中的雜質。最後，再用適當的方法（酸水或酸性乙醇）將生物鹼從樹脂上洗脫下來。
2）萃取法
將酸水提取液鹼化，生物鹼游離後，如沉澱，過濾即得；如不沉澱，以適當親脂性有機溶劑萃取，回收溶劑，即得總生物鹼。
2.醇類溶劑提取法
（1）游離生物鹼或其鹽均可溶於甲醇、乙醇，可用醇迴流或滲漉、浸漬等方法提取。
（2）優點：適應性廣，不同鹼性的生物鹼和鹽均可用，提取出來的水溶性雜質較少。缺點：脂溶性雜質多。
（3）還可配合酸水-鹼化-萃取法處理去除脂溶性雜質。
具體方法是醇提液回收醇後加稀酸水攪拌，濾過，濾液調鹼性後以親脂性有機溶劑萃取，回收溶劑即得總生物鹼。
3.親脂性有機溶劑提取法
（1）大多數游離生物鹼都是親脂性的，故可用氯仿、苯、乙醚等提取游離生物鹼。可採用浸漬、迴流或連續迴流法提取。
（2）但一般要將葯材用少量鹼水濕潤後提取，以便使生物鹼游離，也可增加溶劑對植物細胞的穿透力。
（3）揮發性生物鹼如麻黃鹼可用水蒸氣蒸餾法提取。可升華的生物鹼如咖啡鹼可用升華法提取。
二、生物鹼的分離：
1.利用鹼性差異進行分離
（1）總鹼中各生物鹼的鹼性不同，可用pH梯度萃取法進行分離。
（2）將總生物鹼溶於氯仿等親脂性有機溶劑，以不同酸性緩沖液依pH由高至低依次萃取，生物鹼可按鹼性由強至弱先後成鹽依次被萃取出而分離，分別鹼化後以有機溶劑萃取即可。
（3）將總生物鹼溶於酸水，逐步加鹼使pH值由低至高，每調一次pH值，即用氯仿等有機溶劑萃取，則各單體生物鹼依鹼性由弱至強先後成鹽依次被萃取出而分離。
2.利用溶解度差異進行分離
（1）游離生物鹼：如苦參中苦參鹼和氧化苦參鹼的分離，可利用氧化苦參鹼極性稍大難溶於乙醚，苦參鹼可溶於乙醚的性質，將苦參總鹼溶於氯仿，再加入10倍量以上乙醚，氧化苦參鹼即可析出沉澱。漢防己中漢防己乙素極性大於甲素，故在冷苯中的溶解度小於甲素，藉此可用冷苯法將兩者分離。
（2）生物鹼鹽：不同的生物鹼與不同酸生成的鹽是溶解度也不同：如麻黃中分離麻黃鹼、偽麻黃鹼，即利用二者草酸鹽的水溶性不同，提取後經處理得到的甲苯溶液，經草酸溶液萃取後濃縮，草酸麻黃鹼溶解度小而析出結晶，草酸偽麻黃鹼溶解度大而留在母液中。
3.利用特殊官能團進行分離
（1）酚性或含羧基生物鹼在鹼性條件下成鹽溶於水，可與一般生物鹼分離。
（2）內酯或內醯胺結構的生物鹼可在鹼性水液中加熱開環生成溶於水的羧酸鹽而與其他生物鹼分離，在酸性下又環合成原生物鹼而沉澱。
4.利用色譜法進行分離
（1）吸附柱色譜：常用氧化鋁或硅膠作為吸附劑，有時也用纖維素、聚醯胺等。
（2）分配柱色譜：對某些結構特別相近的生物鹼，可採用分配色譜法。
（3）其他：高效液相色譜、制備性薄層色譜、干柱色譜、中壓或低壓柱色譜等也常用於分離生物鹼。

Ⅷ 生物鹼薄層色譜和紙色譜常用的顯色劑是

生物鹼薄層色譜和紙色譜常用的顯色劑是碘化鉍鉀。碘化鉍鉀與生物鹼的顯色原理是，化反應，碘化鉍鉀在酸性溶液中與生物鹼反應生成白色或淡黃色沉澱。

Ⅸ HPLC用於分析生物鹼應該注意什麼

1、生物鹼HPLC的分析模式
根據HPLC分析生物鹼時所使用固定相性質、流動相組成及極性不同,其分析模式大致可分為：正相吸附色譜法、正相硅膠反相洗脫系統色譜法、反相色譜法及離子交換色譜法.
正相吸附色譜法：通常以硅膠基質為吸附固定相,流動相為不同極性的有機溶劑或不同比例混合溶劑,分離過程主要依靠生物鹼與吸附劑吸附作用的差異實現,為了改善分離,提高溶洗脫能力,常於流動相中加濃氨液、二乙胺、三乙胺等.該法應用於生物鹼分析的文獻較少.
正相硅膠一反相洗脫系統色譜法(NS-RE)：通常採用未經化學改性的普通硅膠為固定相,以極性有機溶劑(甲醇、乙腈)和高pH緩沖溶液為流動相,分析包括生物鹼在內的鹼性葯物.該法柱效高,峰形對稱,是簡便有效的方法.在實際應用中,流動相的組成是主要的影響因素,流動相中除含有調節pH 的緩沖鹽外,有時還要三乙胺、溴化四丁基銨等競爭離子或烷基磺酸鈉等對離子.因此,影響保留與分離的主要因素是流動相pH、競爭離子種類及濃度 .
反相高效液相色譜法(RP-HPLC)：近年來RP-HPLC應用於生物鹼分析方面的文獻很多,已成為常規的方法.但普通存在色譜峰的展寬拖尾,導致分離效能低,這主要緣於生物鹼結構中鹼性氮原子與固定相未鍵台酸性硅醇基的相互作用.即使是所測生物鹼在較低濃度下,仍常產生峰漂移及峰對稱性差等現象.針對此缺陷,研究工作者從適用於鹼性物質分析的反相填料的設計選擇,流動相中緩沖鹽的使用,流動相添加劑(離子對試劑、有機胺改性劑)等幾方面進行了較為廣泛細致的研究,並取得了一定的進展.
離子交換色譜法：該法以陽離子交換樹脂為固定相,利用質子化的生物鹼陽離子與離子交換劑交換能力的差異而達到分離生物鹼的目的,有關生物鹼高效液相離子交換色譜法的應用報道較少.
2、生物鹼HPLC分析檢測方法
目前,生物鹼HPLC分析檢測方式多以紫外法為主,在定性分析方面,紫外法檢測選擇性低,定性專屬性差.隨著二極體陣列檢測器使用的普及,顯著提高了液相分析檢測的選擇性.此外,根據生物鹼的理化性質,其它檢測方式如熒光法、電化學法、蒸發光散射法亦得到了應用.近年來,液相色譜-質譜聯用技術已應用於生物鹼分析,增強了對生物鹼的定性檢測能力,提高了檢測靈敏度.新的介面技術及離子化方法的發展．使得HPLC-MS在生物鹼的分析中得到較廣泛的應用,近年的文獻報道日漸增多.
3、生物鹼HPLC分析的樣品處理方法
因生物鹼常具有一定的鹼性,一般常用鹼化液液萃取或酸水提取等方法從中草葯、中成葯及生物樣品等較復雜體系中提取純化,以達到富集和去除雜質的目的.近年來,固相萃取(SPE)技術及超臨界流體萃取等現代提取純化技術亦應用於樣品的提取純化.