微生物結果如何判定

A. 如何確定微生物二級，三級采樣方案的n，c，m，M

一、n、c、m和M的說明
n：指一批產品采樣個數。
c：指該批產品的檢樣菌數中，超過限量的檢樣數，即結果超過合格菌數限量的最大允許數
m：指合格菌數限量，將可接受與不可接受的數量區別開。
M：指附加條件，判定為合格的菌數限量，表示邊緣的可接受數與邊緣的不可接受數之間的界限。

二、以下圖給出的菌落總數和大腸菌群圖表為例說明：

樣品數為5個。
1、若所有的樣品的菌落總數均小於10000個，大腸菌群均小於10，合格。
2、若樣品的菌落總數有一個大於100000個，大腸菌群有一個大於100個，不合格。
3、若樣品的菌落總數有2個在10000-100000間，其它樣品的菌落總數小於10000個，大腸菌群有2個在10-100間，其它樣品的大腸菌群小於10個，合格。
4、若樣品的菌落總數有2個以上在10000-100000間，大腸菌群有2個以上在10-100間，不合格。

二級法只設有n、с及m值，三級法則有n、c、m及M值。M即附加條件後判定合格的菌數限量值。自然界中材料的分布曲線一般是正態分布，以其一點作為食品微生物的限量值，只設合格判定標准m值，超過m值的，則為不合格品，這是二級抽樣方案。設有微生物標准m及M值兩個限量如同二級法，超過m值的檢樣，即算為不合格品。其中以m值到M值的范圍內的檢樣數，作為c值，如果在此范圍內，即為附加條件合格，超過M值者，則為不合格。
參考：食品夥伴網論壇

B. 如何檢測出食品中的微生物是否超標

食品中的微生物超標主要影響：

1.會對食用者產生神經中毒的影響，短期包括言語、呼吸困難等。

2.未經消毒的乳產品和海產品中微生物超標則會造成嘔吐頭暈，同時會對孕婦體內胎兒和體質較差的老年人造成致死的危害。

3.此類食物大多會造成腹痛、腹瀉、痙攣。

造成影響的主要原因：

1.常見的微生物指標一般分為致病菌(如沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌、單核細胞增生李斯特氏菌等)、大腸菌群和菌落總數。

2.食品添加劑不合格，主要為超范圍和超量添加。

3.非食用物質不論使用量多少和對人體健康是有影響的。

檢測出食品中的微生物是否超標過程：

1.需要找食葯品監管局中有專業鑒定資格的人員來進行鑒定。

註：微生物和食品添加劑都有著嚴格的使用情況和使用界量。對此，企業生產商應時刻將老百姓的生命安全放置在第一位，同時希望大家也能增加相應知識，從而對突發事件可以良好的應對，避免自己和家人的生命受到傷害。

C. 當你在環境中得到一株微生物時，如何確認它是土著微生物還是外來微生物

先鑒定一下這種微生物是什麼菌株

而通過 實驗或者文獻調研，得到該環境中的微生物群落結構，此處必須要有重復哦。
如果該菌株在群落結構中大量出現，那肯定是土著，如果偶然出現或者沒有出現，那很有可能是外來微生物了。

PS：只有大量出現了，判定為土著微生物這種情況，結果靠譜；其他幾種情況，結果都不肯定。

D. 微生物如何判定水質

首先根據微生物數量，常用的指標是異養細菌數（指示有機污染）、糞大腸菌數（指示受生活污水污染）。
其次根據微生物群落，看優勢菌屬，對環境進行評價。
另外，還可以考慮微生物的二次生產力、胞外產酶等。

E. 如何快速判斷牛奶中微生物的污染程度

利用量天青試驗或美藍試驗可判斷牛奶的微生物污染程度，其原理和方法如下：

（1）刃天青（利色唑啉）還原試驗 刃天青易使牛奶呈藍色，如果奶不新鮮，因細菌生長而還原性增高，刃天青被還原。此還原分兩個階段，第一階段，刃天青逐漸由藍色變紅紫色以至最後變成紅色（利色魯芬）；第二階段，利色魯芬進一步被還原，變為淺紅色，以至最後變成無色的二氫利色魯芬。具體操作如下：

①吸取10毫升奶樣於試管中，加0.05%的刃天青溶液1毫升混勻，用滅菌塞塞好。

②將試管置於37℃的水浴鍋中，緩慢轉動試管使受熱均勻。

③於水浴開始後的20分鍾，第一次觀察試管內容物的顏色變化，記錄結果。

④繼續水浴保溫至60分鍾，進行第二次觀察，記錄結果。

⑤根據兩次觀察結果按下表判定奶的等級質量。

奶的等級質量標准

F. 的微生物該按什麼指標來判定

【答】生活飲用水的微生物，在國家標准GB5049-2006 里有明確規定。
【1】在常規指標的微生物指標里，有4項指標。具體是：總大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希氏菌、菌落總數。
【2】在非常規指標的微生物指標里，有2項指標。具體是：賈第鞭毛蟲、隱孢子蟲。
有機物廢水一般都可以用，另外，廢水中不能含有毒物質或過多重金屬離子。比如說食品廢水、生活污水或其它經過前處理後適合微生物生長的廢水都可以使用。相關水處理問題你可以到環保通跟小夥伴們一起討論

G. 微生物基因序列對比差異大於多少可判定為不同種屬

1.DNA
G­­­­­­­­­+Cmol％
GC含量差異即可確定DNA的不同,這是真菌分類鑒定的重要遺傳指標之一.一般認為，G+C
mol%差別大於20%是不同屬的菌；差別在10%～15%之間是同屬不同種，差別在5%以內則可能是種內不同菌株.但是G­­­­­­­­­+Cmol％相同也不能判斷屬於同一個種，因此，G­­­­­­­­­+Cmol％只具有否定價值
所以最重要的方法是核酸雜交技術,其中應用最多的是DNA-DNA雜交,即:
2.採用示蹤物標記的一條DNA分子與另一條在適當條件下雜交，可獲得兩者間的雜交百分率即DNA同源性，以此判斷兩菌株是否屬同一種。一般在相同的菌種中，DNA/DNA雜交的成功率高達80%以上，若低於20%基本可考慮為無關菌系，65%～80%之間的菌有較多的同源性，提示為同一屬的不同種。但如結果在20%～25%范圍時則難以作出判斷，應並用其它方法分析確定
3.對屬或屬以上水平的分類則採用DNA/rRNA雜交，因為rRNA在進化過程中保守性更強。例如,Kurtzman等在對黃麴黴群中各菌種的DNA關系研究中，黃麴黴和寄生麴黴顯示79%的DNA雜交率，而集峰麴黴和黃麴黴的DNA雜交率只有39%。Kurtzman根據這些研究結果建議把黃麴黴和寄生麴黴劃為黃麴黴的兩個變種，而集峰麴黴則劃分為一個新種。
但由於該技術操作復雜、費時，並且在細菌分類上其應用價值沒有測定rRNA序列有意義，所以該技術沒有被廣泛應用。

H. 微生物檢驗之生化實驗

微生物檢驗之生化實驗大全

不同的細菌具有各自的獨特的酶系統，因而對底物的分解能力各異，其代謝的產物也不相同。這些代謝產物又具有不同的生物化學特性，可利用生物化學的方法測定這些代謝產物以鑒定細菌。掌握各種生化反應的原理和應用是細菌鑒定的基礎。生理生化特性的測定主要根據Shirling & Gottlieb《InternationalJournal of Systematic Bacteriology》中鑒定的有關試驗。下面是我為大家帶來的微生物鑒定之生化實驗大全的知識，歡迎閱讀。

碳水化合物代謝實驗

糖(醇、苷)類發酵實驗

(1)原理：

細菌分解糖的能力與該菌是否含有分解某種糖的酶密切相關，故分解糖的能力各不相同，細菌分解糖類後的終產物亦不一致，在含糖培養基中加入指示劑，若細菌分解糖則產酸或產酸產氣，使培養基顏色改變，從而判斷細菌是否分解某種糖或其他碳水化合物

(2)基本培養基：

在培養基中加入0.5%～1%的糖類(單糖、雙糖、或者多糖)、醇類(甘露醇、肌醇)苷類(水楊苷、菊糖等)。培養基可為液體、半固體、固體或微量生化管幾種類型。

(3)實驗方法：

取某一種細菌的24h純培養物分別接種到葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、蔗糖等培養基內，37℃培養24h，觀察結果並記錄。

(4)結果判定：

如果接種進去的細菌可發酵某種糖或醇，則可產酸，使培養基由紫色變成黃色，如果不發酵，則仍保持紫色。如，發酵的同時又產生氣體，則在微量發酵管頂部積有氣泡。

(5)應用：

是鑒定細菌最主要最基本的實驗，特別是對腸桿菌科細菌的鑒定尤為重要。

氧化型與發酵型(O/F)的測定

(1)原理：

細菌在分解葡萄糖的過程中，必需有氧的參加的，稱為氧化型，細菌在分解葡萄糖的過程中，可以進行無氧降解的，稱為發酵型。發酵型細菌無論在有氧或者無氧的環境中都能分解葡萄糖。不分解葡萄糖的細菌稱為產鹼型。這在區別微球菌與葡萄球菌、腸桿菌科成員中尤其有意義。

(2)培養基：

培養基蛋白腖2g，氯化鈉5g，磷酸氫二鉀0.3g，葡萄糖10g，瓊脂3g，1%溴麝香草酚藍3mL，蒸餾水1000mL。將蛋白腖、鹽、瓊脂和水混合，加熱溶解，校正pH至7.2，然後加葡萄糖和指示劑，加熱溶解;分裝試管，3～4mL/管;115℃，高壓蒸汽滅菌20min，取出後冷卻成瓊脂柱。

(3)實驗方法：

挑取18～24h的幼齡斜面培養物，穿刺接種，每種細菌接種兩管，於其中1管覆蓋1mL滅菌的液體石蠟，37℃培養24小時或更長時間。

(4)結果判定。

Β-半乳糖苷(ONPG)實驗

(1)原理：

有的細菌可以產生β一半乳糖苷酶，能分解鄰-硝基酚-β-D-半乳糖苷，而生成黃色的鄰-硝基酚，在很低濃度下也可以檢測出。

(2)培養基：

鄰硝基酚β-半乳糖苷0.6g，0.01mol/L pH7.5磷酸緩沖液1000mL，pH7.5的滅菌1%蛋白腖水300mL。先將前兩種成分混合溶解，過濾除菌，在無菌條件下與1%蛋白腖水混合，分裝試管，每管2～3mL，無菌檢驗後備用。

(3)實驗方法：

取一環細菌純培養物接種在ONPG培養基上置37℃培養1～3h或24h，如有β-半乳糖苷酶，會在3h內產生黃色的鄰硝基酚;如無此酶，則在24h內不變色。

七葉苷水解實驗

(1)原理：

有的細菌可以將七葉苷分解為七葉素和葡萄糖，七葉素與培養基中的枸櫞酸鐵的二價鐵離子反應，生成黑色的化合物，使培養基呈黑色。

(2)應用：

主要用於腸球菌與其它鏈球菌的鑒別，前者陽性，後者陰性，也可用於革蘭氏陰性桿菌及厭氧菌的鑒別。

甲基紅實驗

(1)原理：

細菌分解培養基中的葡萄糖產酸，當產酸量大，使培養基的pH降至4.5以下時，加入甲基紅指示劑而變紅，為甲基紅試驗陽性。若細菌分解葡萄糖產酸量少，或產生的酸進一步轉化為其它物質(如，醇、酮、醛、氣體和水等)則培養基的pH值仍在pH6.2以上，故加入甲基紅試劑呈黃色，為陰性。

(2)實驗方法：

一種細菌的24h培養物，接種於葡萄糖蛋白腖水培養基中，置37℃培養48～72h，取出後加甲基紅試劑3～5滴，凡培養液呈紅色者為陽性，橙色者為可疑，黃色者為陰性。

(3)應用：

主要用於鑒別大腸埃希菌與產氣腸桿菌，前者為陽性後者為陰性。

V-P實驗

(1)原理：

有些細菌能分解葡萄糖產生丙酮酸, 丙酮酸脫羧產生乙醯甲基甲醇，乙醯甲基甲醇在鹼性環境中，被空氣中的氧氧化為二乙醯,二乙醯與培養基內蛋白腖中精氨酸所含的胍基發生反應生成紅色的化合物。若培養基中的胍基含量過少，則可加入少量含胍基的化合物等。

(2)V-P試劑：

肌酸0.3%或原粉，40%的NaOH溶液。

(3)實驗方法：

接種實驗菌於葡萄糖蛋白腖水培養基(與甲基紅實驗相同)中，每次兩個重復，置適溫培養2-6d，取培養液和40%NaOH等量相混，加入少許肌酸，10min如培養液出現紅色，即為實驗陽性反應，有時需要放置更長時間才出現紅色反應。

(4)應用：

本實驗常與甲基紅實驗一起用，因為前者陽性的細菌，後者通常為陰性。

蛋白質和氨基酸的代謝實驗

明膠液化實驗

(1)原理：

某些可以產生一種胞外蛋白水解酶(明膠酶)，能使明膠分解為氨基酸，使明膠失去凝固能力而液化，因而使半固體的明膠培養基成為流動的液體。

(2)實驗方法：

取18～24h的斜面培養物穿刺接種，並有兩支未接種的空白對照。

(3)結果觀察：

於30℃培養20天後觀察，明膠液化的為陽性。由於室溫下明膠培養基呈液狀，因此在觀察結果時，應將其放置於4℃的冰箱中30分鍾後拿出觀察。若明膠仍能全部凝固，為陰性，有部分或全部不能凝固為陽性。

吲哚實驗

(1)原理：

某些細菌具有色氨酸酶，能分解蛋白腖水中的色氨酸產生吲哚，當加入吲哚試劑(對二甲氨基苯甲醛)後則形成紅色的玫瑰吲哚。

(2)培養基：

蛋白腖水培養基。

(3)實驗方法：

將待檢菌接種於富含色氨酸的蛋白腖水培養基中，35℃孵育24~48h，沿試管壁慢慢加入吲哚試劑，觀察結果。

(4)結果：

於兩液面接觸處出現紅色為陽性，無色為陰性。

(5)應用：

主要用於腸桿菌科細菌的.鑒定，如大腸埃希菌與產氣腸桿菌，肺炎克雷伯菌和產酸克雷伯菌等的鑒別。

硫化氫試驗

(1)原理：

某些細菌能分解培養基中的含硫氨基酸產生硫化氫，硫化氫遇亞鐵離子或鉛離子則結合形成黑色沉澱物(硫化鐵或硫化鉛沉澱)。

(2)實驗方法：

將待檢菌穿刺接種於醋酸鉛培養基中，於35℃孵育24h -48h，觀察有無黑色沉澱出現。

(3)結果：

培養基變黑為陽性，不變為陰性。

(4)應用：

主要用於鑒別腸桿菌科中屬及種的鑒別，如沙門菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬、愛德華菌屬等為陽性，其它菌屬大多為陰性。但沙門菌屬中亦有部分硫化氫陰性菌株，如甲型副傷寒、仙台、豬霍亂沙門菌等。

尿素分解試驗

(1)原理：

某些細菌具有尿素分解酶，能分解尿素產生大量的氨，使培養基呈鹼性。

(2)培養基：

尿素培養基。

(3)實驗方法：

將待檢菌接種於尿素培養基，於35℃孵育18~24h小時觀察結果。

(4)結果：

培養基呈鹼性，使酚紅指示劑變紅為陽性，不變為陰性。

(5)應用：

主要用於腸桿菌科中變形桿菌屬細菌的鑒定。奇異變形桿菌和普通變形桿菌脲酶陽性，另外雷氏普羅威登菌和摩根菌為陽性，而斯氏和產鹼普羅威登菌陰性。

苯丙氨酸脫氨酶試驗

(1)原理：

測定細菌是否產生苯丙氨酸脫氨酶。細菌產生的苯丙氨酸脫氨酶使苯丙氨酸脫氨後生成苯丙酮酸，加入氯化鐵試劑後產生綠色反應。

(2)培養基：

苯丙氨酸瓊脂培養基。

(3)實驗方法：

將待檢菌大量接種入苯丙氨酸瓊脂培養基中，35℃孵育18~24h，滴加10% 三氯化鐵試劑3~4滴，自斜面上方流下。

(4)結果：

有綠色出現為陽性。應立即觀察結果，延長反應時間會引起退色。

(5)應用：

主要用於腸桿菌科細菌的鑒定。變形桿菌屬、普羅威登菌屬、摩根菌屬均為陽性，腸桿菌科其它細菌均為陰性。

氨基酸脫羧酶試驗

(1)原理：

某些細菌可產生氨基酸脫羧酶，能分解氨基酸使其脫羧生成胺和二氧化碳。由於胺的生成使培養基變為鹼性，可用指示劑指示出來。

(2)培養基：

氨基酸脫羧酶培養基和氨基酸對照培養基。

(3)實驗方法：

將待檢菌分別接種於1支氨基酸(賴氨酸，鳥氨酸或精氨酸)脫羧酶試驗管1支氨基酸脫羧酶對照管(無氨基酸)，各覆蓋至少12.5px高度的無菌石蠟油，35℃孵育1~4d，每日觀察結果。

(4)結果：

對照管應為黃色，若為溴甲酚紫指示劑，則測定管呈紫色則為陽性，若測定管呈黃色為陰性。若對照管呈現紫色則試驗無意義，不能做出判斷。

(5)應用：

主要用於腸桿菌科細菌的鑒別。如，沙門菌屬中除傷寒和雞沙門菌外，其餘沙門菌的賴氨酸和鳥氨酸脫羧酶均為陽性。志賀菌屬除宋內和鮑氏志賀菌外，其他志賀菌均為陰性。

碳源和氮源的利用實驗

唯一碳源利用實驗

(1)原理：

在基礎培養基只提供一種待檢測碳源，若菌株生長則表明菌株能以此種碳源為唯一碳源，否則不能。

(2)培養基：

基本培養基：

(NH4)2HPO41g;NaCl 1g;MgSO47H2O 0.2 g;KH2PO40.5 g;瓊脂20g;蒸餾水1000mL;pH7.0-7.2。

各種碳源的終濃度如下：

糖類及其衍生物(醇類，糖苷類等)：1%，w/v;多醇和甘油：1%，w/v;苯甲酸鹽，二酸鹽，其它單酸鹽：0.1%，w/v。糖類及其衍生物和多醇要求過濾除菌，鹽類可加入培養基一起滅菌。

(3)實驗方法：

將純的菌株接種到培養基後培養14~28d，觀察其生長情況，以不加碳源的培養基作對照。能夠生長為陽性。

唯一氮源利用實驗

(1)原理：

在基礎培養基只提供一種待檢測氮源，若菌株生長則表明菌株能以此種氮源為唯一碳源，否則不能

(2)培養基：

基礎培養基：

D-Glucose1g;MgSO47H2O0.05 g;NaCl 0.05 g;FeSO47H2O 0.001 g;KH2PO4 0.01 g。不同氮源按0.5%的濃度加入。

(3)實驗方法：

將純的菌株接種到培養基後培養14~28d，觀察其生長情況，以不加氮源的培養基作對照。能夠生長為陽性。

各種酶類實驗

氧化酶試驗

(1)原理：

氧化酶(即細胞色素氧化酶)，是細胞色素氧化酶系統中的最終呼吸酶。具有氧化酶的細菌，首先使細胞色素C氧化，再由氧化型細胞色素C再使對苯二胺氧化，生成有色的醌類化合物。因此，本試驗結果與細胞色素C的存在有關。

(2)實驗方法：

菌落法：直接滴加試劑於被檢菌落上;濾紙法：取潔凈濾紙一小塊，蘸取菌少許，然後加試劑;試劑紙片法：將濾紙片浸泡於試劑中製成試劑紙片，取菌塗於試劑紙上。

(3)結果：

細菌在與試劑接觸10秒內呈深紫色，為陽性。無色為陰性。為保證結果的准確性，分別以銅綠假單胞菌和大腸埃希菌作為陽性和陰性對照。

(4)應用：

主要用於腸桿菌科細菌和假單胞菌屬的鑒別，前者陰性，而後者陽性。奈瑟菌屬、莫拉菌屬細菌也呈陽性反應。

過氧化氫酶試驗(觸酶試驗)

(1)原理：

具有過氧化氫酶的細菌，能催化過氧化氫成為水和原子態氧，繼而形成氧分子，出現氣泡。

(2)實驗方法：

取潔凈玻片1張，用接種環挑取細菌，加3%過氧化氫數滴，立即觀察結果。

(3)結果：

若立即出現大量氣泡為陽性。無氣泡為陰性。

(4)應用：

革蘭陽性球菌中，葡萄球菌和微球菌均產生過氧化氫酶，但鏈球菌科陰性，故該試驗常用於革蘭陽性球菌的初步分群。

硝酸鹽還原實驗

(1)原理：

硝酸鹽還原反應包括兩個過程：一是在合成代謝過程中，硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨，再由氨轉化為氨基酸和細胞內其它含氮化合物;二是在分解代謝過程中，硝酸鹽或亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶系統中的終末受氫體。硝酸鹽還原過程可因細菌不同而異。有的細菌僅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，如大腸埃希菌等;有的細菌可使其還原為亞硝酸鹽和離子態的銨;有的細菌能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮，如假單胞菌;有的細菌還可以將其還原產物在合成性代謝中完全利用。

(2)實驗方法：

將待檢菌接種於硝酸鹽培養基(內含小倒管)中，35℃孵育1~4d。將甲、乙等量混合液(用時混合)(約0.1ml)加於試管內，立即觀察結果。

(3)結果：

出現紅色為陽性反應。若加入試劑後無顏色反應，可能是：

①硝酸鹽沒有被還原，試驗陰性;

②硝酸鹽被還原為氨和氮等其他物質而導致假陰性結果，這時應在試管內加入少許鋅粉，如出現紅色則表明試驗確實為陰性。若仍不產生紅色，表明試驗為假陰性。

若要觀察是否有氮氣產生，可於培養基管內加1隻小導管，有氣泡產生，則表示有氮氣生成。

(4)應用：

本試驗廣泛用於細菌鑒定。腸桿菌科細菌均能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽;銅綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌等假單胞菌屬均可產生氮氣;有些厭氧菌如韋榮菌等試驗也為陽性。

澱粉酶實驗

(1)原理：

有些細菌具有合成澱粉酶的能力，可以分泌胞外澱粉酶，澱粉酶可以使澱粉水解為麥芽糖和葡萄糖，澱粉水解後遇碘不在變藍。

(2)培養基：

澱粉瓊脂培養基。

(3)實驗方法：

在澱粉培養基上接種實驗菌株後，30℃培養1～2周後將平板取出，滴加少量盧戈氏碘液於平板上。觀察菌苔周圍的培養基有無色透明圈出現。

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I. 微生物檢驗中菌落總數的不確定度如何評定

微生物檢驗中菌落總數的不確定度如何評定

在ISO/IEC17025《校準和檢測實驗室能力的通用要求》中明確指出實驗室出具的檢測報告應包含有關評定校準或測試結果的不確定度說明，故對測量結果進行不確定度的評定成為檢測實驗室的重要內容。下面是我為大家帶來的關於微生物檢驗中菌落總數的不確定度如何評定的知識，歡迎閱讀。

1 .檢驗方法

依據 GB 4789.2-2010 《食品安全國家標准 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》中要求以無菌操作取檢樣25 g(ml)剪碎放於含有225 ml滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液中，經振搖或研磨做成1︰10的均勻稀釋樣液，按照標准要求制備10倍系列稀釋樣品勻液。根據污染情況的估計，選擇2～3個稀釋度，每個稀釋度作2個平皿，每個平皿注入培養基約15~20 ml，並轉動培養皿使混合均勻，待瓊脂凝固後，翻轉平板，置36℃±1℃溫箱內培養48 h±2 h。計數後以同稀釋度的各平板平均菌落總數報告。

2. 數學模型

設菌落總數為A，檢測結果為X，則A=X CFU/g(ml)。

3 .計算不確定度

3.1 在微生物檢驗中，樣品中細菌分布的均勻性和重復測量帶來的不確定度是影響檢驗結果准確度的主要原因，而B類不確定度分量對合成不確定度影響較少。按 GB 4789.2-2010 《食品安全國家標准 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》中方法，同一樣品每個稀釋度作兩個平衡樣，因此可以採用合並樣本標准差求檢測結果的不確定度 見表1。

3.2 從檢驗結果可知，如直接用貝塞爾公式計算合並樣本標准差，由於數據的.散發性較大，計算出的合並樣本標准差很大，當樣本均值較小時其不確定度則會過大，此時可以對上述數據取對數後，計算出樣本檢驗結果對數值的均值和殘差，將中間計算結果 見表2。根據貝賽爾公式，可計算出檢測結果對數值的合並樣本標准差：

取置信水平P=95%，自由度ν=19，查t分布表得：

分布於X±0.043之間。當檢測結果以平衡樣結果平均值表示時，相對於對數值的取值再取反對數得其取值區間。這個取值區間適合於任何一次檢測。

3.3 例1：3#樣品，對數值的平均值為2.708，取值區間為2.665～2.751，取反對數得平衡樣平均值的取值區間為462～564 cfu/g(ml)，菌落總數的取值區間為460～560 cfu/g(ml)。

例2：12#樣品，對數值的平均值為3.203，取值區間為3.160～3.246，取反對數得平衡樣平均值的取值區間為1445～1762u/g(ml)，菌落總數的取值區間為1400～1800 cfu/g(ml)。

例3：18#樣品，對數值的平均值為4.0115，取值區間為3.9685～4.0545，取反對數得平衡樣平均值的取值區間為9 300～11 337 u/g(ml)，菌落總數的取值區間為9 300～11 000 cfu/g(ml)。

4 .小結

從以上計算結果可知，由於檢驗結果的散發性較大，如直接用貝賽爾公式計算合並樣本標准差所得到的不確定度不適合每一個樣本。當檢驗結果取對數後，用合並樣本標准差求檢驗結果的不確定度則使用方便，並且適合於每一個樣本。隨著檢驗結果的不斷增加，可隨時加入到合並樣本中，重新計算合並樣本標准差，更新其不確定度的取值范圍。

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J. 討論細菌生物化學實驗有哪些各種生物化學實驗的陽性和陰性結果如何判斷

細菌生化實驗一、實驗目的 1、證明不同微生物對各種有機大分子的水解能力不同, 從而... 檸檬酸鹽試驗及硫化氫試驗結果,以 「+」表示陽性反應.「-」表示陰性