⑴ 寡營養培養基是怎麼稀釋的
寡營養培養基的分離用稀釋十倍的Zobell2216e培養基。將常規的培養基進行稀釋,能顯著提高微生物的可培養率。Janssen等採用最大似然值法(Mostprobablenumber)比較了澳大利亞牧場土壤中微生物在稀釋100倍的肉湯培養基(DNM)和普通肉湯培養基中的生長效果,證明稀釋的培養基上可以得到更多的微生物。
⑵ 微生物限度稀釋液選擇氯化鈉還是ph7.0氯化鈉蛋白腖溶液
用氯化鈉蛋白腖緩沖溶液做稀釋劑,我們實驗過程中用PH7.0氯化鈉蛋白腖緩沖溶液做稀釋劑的,也可以用生理鹽水做稀釋劑。在實驗過程中每張過濾膜不可超過1000ml的稀釋劑沖洗量。將純水倒入薄膜過濾後,在放入培養皿里之前,還需要加緩沖液沖洗薄膜,沖洗量可以每張膜控制在100-200ml。然後用無菌鑷子取出過濾膜,貼於培養基上,去除氣泡
⑶ 微生物培養基的配製原則有哪些(望詳解)
培養基的制備和質量控制-培養基的制備
培養基是微生物測定的基礎,培養基的質量因而成了保證微生物實驗成功的關鍵。培養基的制備、合理的貯存、培養基的質量檢驗,能確保提供持續高質量的培養基。在按照可接受的來源和標准中的配方制備培養基的過程中,重要的是選擇正確的培養基和成分。與脫水和制備好的培養基一起的還常常伴有供應商的配方和說明。因為不同的培養基可能有不同的制備要求(如:加熱、填加物、
ph值的調節等),按照說明確保制備可接受的培養基是重要的。一份描述效期和建議貯存條件的COA是同制備好的培養基一起的,同時附有用於培養基的促生長試驗和靈敏度測試的菌種。
水普遍用於微生物培養基的稀釋。純化水是最常用的,但是在有些情況下,也用去離子水和蒸餾水。稀釋用水的體積應該記錄。
使用脫水培養基和培養基組分來制備培養基時要准確稱量。使用己校正的具有適合的稱量范圍的天平。使用清潔的容器和工具,防止配方中帶入外來物質,改變培養基的最終組成。稱量也應該記錄。
脫水培養基先在水中分散,並完全溶解和滅菌。如果必要可以加熱使溶解,但要防止過度加熱,因為所有的培養基或多或少有對熱敏感的。用於培養基制備的設備應適於加熱控制,持續攪拌,溶質混合。培養基變黑(梅特拉反應和非酶的棕色著色劑)通常顯示過度加熱。當需要向培養基中添加補充物時,添加後應充分混合。
制備好的培養基應放在清潔無菌的玻璃器具中,也可以加入抑制性物質。抑制性物質可以由器具清潔時產生也可由先前貯存在此器具的物質產生。必須確保清潔過程能有效去除殘留和異物,確保清潔劑用純化水充分清洗。參見《1051玻璃器具的清洗》。
培養基的滅菌應根據供應商提供的參數或用戶自己的驗證。買來的制備好的培養基應提供其使用的滅菌方法的文件。理想的供應商應提供培養基的滅菌保證水平(SAL),此水平是依靠公認的生物指示劑確定的。濕熱高壓滅菌是首選的滅菌技術,除了一些為避免培養基中的熱敏物質遭到破壞而採用的煮沸方法。通過過濾滅菌對有些配方也是合適的。
培養基的滅菌方法、滅菌條件的效果應通過培養基的滅菌和促生長試驗來驗證。另外,如果通過濕熱滅菌,滅菌周期應經過驗證,對選擇合適的負載和體積來確保合適的熱分布。通常供應商建議採用一個已校正過的滅菌高壓鍋,在121°滅菌15分鍾。通常指培養基達到溫度的時間。當滅菌鍋負載結構影響加熱的速度是時,越多的負載就需要越長的滅菌周期。然而,滅菌的時間取決於培養基的體積和高壓鍋的負載。滅菌周期中,當溫度是慢慢上升時,可能導致培養基的過度加熱。因此,必須仔細確認能達到最小的SAL要求的滅菌周期,在過度加熱時,抑制培養基降解的趨勢。在流體循環完成後,不主張放冷後的培養基中放在滅菌鍋中貯存,因為這樣可能破壞培養基。不合適的加熱或滅菌(對買來的培養基或是內部制備的培養基)可能導致顏色的不同變化,不透明,改變培養基的規格,或是PH發生漂移(與供應商的提議范圍)。
通過無菌技術為測試制備的每一批培養基其PH在放冷至室溫(25°)後,都應測定。一個扁平的pH計用於培養基表面pH值的測定,浸入式的pH計用於液體的測定。各供應商提供的培養基的pH應該在規定的±0.2的范圍內,除非通過驗證得到更寬的范圍。
制備培養基應對培養皿和試管進行適當如下的檢查:
有裂紋的容器和蓋子;
容器內不同的填充體積;
有裂紋容器內可導致脫水的結果或是固體培養基表面起皺;
溶血;
額外黑或顏色改變;
可能過冷引起的結晶;
過量的氣泡;
微生物的污染;
氧化顯示的情況;
批號、效期的檢查和記錄;
培養基的滅菌。
⑷ 微生物水樣,稀釋一萬倍,要怎麼操作
取5ul這個量隨機的原樣就是你要稀釋的水樣,稀釋一萬倍,那麼就需要加4995ul的稀釋液,這樣就是稀釋了一萬倍。
如果把固體顆粒看作看作質量分數是100%,那麼稀釋倍數=(100+g)/g,我們可以把這種稀釋倍數稱為質量稀釋倍數,可是這種稀釋倍數並不常用。
我們經常用到是體積稀釋倍數,它可以這樣表示(本題):(100+g/密度)/(g/密度),這樣問題隨之而來,很多同種固體物質的密度是不同的,例如固體二氧化碳,當它比較松軟和堅實時的密度是不同的,那麼上式的數值就變化了。所配製出的溶液的濃度就會變化。
國際標准
國際標准分類中,稀釋一萬倍涉及到廢物、飼料、獸醫學、危險品防護、實驗室醫學、香料和調料、食品添加劑、塗料和清漆、水質、建築物的防護、微生物學、農業和林業、道路工程、核能工程、肉、肉製品和其他動物類食品、醫學科學和保健裝置綜合、石蠟、瀝青材料和其他石油產品。
建築材料、化工產品、塑料、空氣質量、焊接、釺焊和低溫焊、航空航天製造用材料、潤滑劑、工業油及相關產品、燃料、煤、土質、土壤學、詞彙、道路車輛內燃機、計量學和測量綜合、消防、石油和天然氣的開采與加工、原油、液壓液、通風機、風扇、空調器。
⑸ 微生物的稀釋中為什麼常用稀釋培養法
因為稀釋培養法要菌在培養基上均勻生長,可以充分利用培養基。
⑹ 微生物限度法怎樣去稀釋級別10倍,100倍,1000倍
很簡單。
取1ml吸管,在樣品中吸取1ml,放入9ml無菌生理鹽水中,就稀釋了10倍了。
再取1ml10倍的稀釋液,放入9ml無菌生理鹽水中,就稀釋100倍了。
依此類推,稀釋任何倍數都可以。
⑺ 微生物的稀釋中為什麼常用稀釋培養法
前者是要菌在培養基上均勻生長,可以充分利用培養基;而後者菌只在培養基的表面生長,不能充分利用培養基的養分。可是我們做實驗一般用後者,因為便於菌後面的分離和純化。
⑻ 誰知道用固體培養基培養微生物後,要用標准平板計數法計算菌數,但是要怎樣稀釋啊謝謝...
你怎麼用固體來培養啊,你可以用液體培養,在將液體稀釋,後再計數啊,在平板上不好計數,
⑼ 微生物稀釋用蒸餾水還是無菌水
考點: 測定某種微生物的數量 制備和應用固相化酶 DNA的粗提取和鑒定 專題: 分析: 解答時注意實驗中用的是蒸餾水還是無菌水,將大腸桿菌培養液進行系列梯度稀釋,防止雜菌污染,必須使用無菌水;破碎雞血細胞獲得含有DNA的濾液用蒸餾水;配製培養大腸桿菌的固體培養基可以用蒸餾水,然後高壓蒸汽滅菌;制備固定化酵母細胞時活化乾酵母用蒸餾水. A、將大腸桿菌培養液進行系列梯度稀釋,防止雜菌污染,必須使用無菌水,A正確;B、破碎雞血細胞獲得含有DNA的濾液用蒸餾水,B錯誤;C、配製培養大腸桿菌的固體培養基可以用蒸餾水,然後高壓蒸汽滅菌,C錯誤;D、制備固定化酵母細胞時活化乾酵母用蒸餾水,D錯誤.故選:A. 點評: 本題考查了實驗操作中材料的使用,考查了學生的實驗操作能力和應用能力,試題難度中等.
⑽ 用於稀釋微生物的溶液有什麼要求
對濃度有要求,還需要滅菌。
用於稀釋微生物的溶液需要滅菌,不同物種需要的生理鹽水濃度不同。
1、哺乳類的生理鹽水濃度是0.9%。稱取9克氯化鈉,溶解在少量蒸餾水中,稀釋到1000毫升。2、鳥類的生理鹽水濃度是0.75%。稱取7.5克氯化鈉,溶解後用蒸餾水稀釋到1000毫升。3、兩棲類的生理鹽水濃度是0.65%。稱取6.5克氯化鈉,溶解後用蒸餾水稀釋到1000毫升。