⑴ 微生物檢驗樣品的採集步驟
微生物檢驗樣品的採集步驟
樣品的採集是微生物檢驗的重要組成部分,用於檢驗的樣品數量和狀況具有重要意義。這對取樣人員和制樣人員提出了很高的專業要求,既要保證樣品的代表性和一致性,又要保證整個微生物檢驗過程在無菌操作的條件下進行。微生物檢驗樣品的採集大致分為取樣、包裝密封、標識、樣品的運輸、接收、保存幾個環節。下面是我為大家帶來的關於微生物檢驗樣品的採集步驟的知識,歡迎閱讀。
樣品的取樣
取樣是指在一定質量或數量的產品中,取一個或多個代表性樣品,用於感官、微生物和理化檢驗的全過程。
首先在取樣之前應確認貨、證是否相符。其次取樣工具要達到無菌的要求,對取樣具和一些試劑材料應提前准備、滅菌。如果使用不合適的採集工具,可能會破壞樣品的完整性,甚至使樣品採集毫無意義。
應根據不同的樣品特徵和取樣環境,對取樣物品和試劑進行事先准備和滅菌等操作。另外要保證樣品能夠代表整批產品,其檢測結果應具有統計學有效性,樣品到達實驗室時的狀況應能反映出取樣時產品的真實情況。
取樣時應根據不同的產品類型、產品狀態等選擇不同的取樣方法和標准。
① 包裝食品:對於直接食用的小包裝食品,盡可能取原包裝,直到檢驗前不要開封,以防污染。對於桶裝或大容器包裝的液體食品,取樣前應搖動或用滅菌棒攪拌液體,盡量使其達到均質;取樣時應先將取樣用具浸入液體內略加漂洗,然後再取所需量的樣品,裝入滅菌容器的量不應超過其容量的3/4,以便於檢驗前將樣品搖勻;取完樣品後,應用消毒的溫度計插入液體內測量食品的溫度,並作記錄。盡可能不用水銀溫度計測量,以防溫度計破碎後水銀污染食品;如為非冷藏易腐食品,應迅速將所取樣品冷卻至0~4℃。對於大塊的桶裝或大容器包裝的冷凍食品,應從幾個不同部位用滅菌工具取樣,使樣品具有充分的代表性;在將樣品送達實驗室前,要始終保持樣品處於冷凍狀態樣品一旦融化,不可使其再凍,保持冷卻即可。
② 生產過程中的取樣:劃分檢驗批次,應注意同批產品質量的均一性;如用固定在貯液桶或流水作業線上的.取樣龍頭取樣時,應事先將龍頭消毒;當用自動取樣器取不需要冷卻的粉狀或固體食品時,必須履行相應的管理辦法,保證產品的代表性不被人為地破壞。
③ 液體產品:通常情況下,液態產品較容易獲得代表性樣品。液態產品一般盛放在大罐中,取樣時,可連續或間歇攪拌,對於較小的容器,可在取樣前將液體上下顛倒,使其完全混勻。較大的樣品(100~500ml)要放在已滅菌的容器中送往實驗室,實驗室在取樣檢測之前應將液體再徹底混勻一次。
④ 固體樣品:固態樣品常用的取樣工具有滅菌的解剖刀、勺子、軟木鑽、鋸子和鉗子等。麵粉或奶粉等易於混勻的食品,其成品質量均勻、穩定,可以抽取小樣品檢測(如100 g)。但散裝樣品就必須從多個點取樣,且每個樣品都要單獨處理,在檢測前徹底混勻,並從中取一份樣品進行檢測。肉類、魚類的食品既要在表皮取樣叉要在深層取樣。深層取樣時要小心不要被表面污染。有些食品,如鮮肉或熟肉可用滅菌的解剖刀或鉗子取樣;冷凍食品可在未解凍的狀態下可用鋸子、木鑽或電鑽(一般斜角鑽人)等獲取深層取樣樣品;全蛋粉等粉末狀樣品取樣時,可用滅菌的取樣器斜角插入箱底,樣品填滿取樣器後提出箱外,再用滅菌小勺從上、中、下部位取樣。
⑤ 表面取樣:通過惰性載體可以將表面樣品上的微生物轉移到合適的培養基中進行微生物檢驗,這種惰性載體既不能引起微生物死亡,也不應使其增殖。這樣的載體包括清水、拭子、膠帶等。取樣後,要使微生物長期保存在載體上,既不死亡又不增殖十分困難,所以應盡早地將微生物轉接到適當的培養基中。轉移前耽誤的時間越長,品質評價的可靠性就越差。表面取樣技術只能直接轉移菌體,不能做系列稀釋,只有在菌體數量較多時才適用。其最大優點是檢測時不破壞樣品。
⑥ 空氣樣品的採取:空氣的取樣方法有直接沉降法和過濾法。在檢驗空氣中細菌含量的各種沉降法中,平皿法是最早的方法之一,到目前為止,這種方法在判斷空氣中浮游微生物分次自沉現象方面仍具有一定的意義。過濾法是使定量的空氣通過吸收劑,然後將吸收劑培養,計算出菌落數。
樣品的包裝密封
為保證樣品的完整性,裝有樣品的包裝物應進行封口,以證實其可靠性,即從取樣地點至實驗室這段時間不發生任何變化。可採用自粘膠、特製的紙黏著劑或者石蠟等封口,封口處應留有填寫日期、檢驗人員和貨主簽字的地方,然後蓋上專用的印章。
樣品的標識
取樣過程中應對所取樣品進行及時、准確的標記。取樣結束後,應由取樣人寫出完整的取樣報告。樣品應盡可能在原有狀態下迅速運送或發送到實驗室。
保存的樣品應進行必要的清晰的標記,內容包括:樣品名稱,樣品描述,樣品批號,企業名稱,地址,取樣人,取樣時間,取樣地點,取樣溫度(必要時),測試目的等。標記應牢固並具防水性,確保字跡不會被擦掉或脫色。所有盛樣容器必須有和樣品一致的標記。在標記上應記明產品標志與號碼和樣品順序號以及其他需要說明的情況。標記應牢固並具防水性,確保字跡不會被擦掉或脫色。當樣品需要托運或由非專職取樣人員運送時,必須封死樣品容器。
樣品的運輸
取樣結束後應盡快將樣品送往實驗室檢驗。如不能及時運送,冷凍樣品應存放在-15℃以下的冰箱或冷庫內;冷藏和易腐食品存放在0~4℃ 冰箱或冷藏庫內;其他食品可放在常溫暗處。微生物檢驗樣品應在取樣後6 h以內送達實驗室進行檢驗。
樣品的運輸過程必須有適當的保護措施(如密封、冷藏等),以保證樣品的微生物指標不發生變化。運送冷凍和易腐樣品應在包裝容器內加適量的冷卻劑或冷凍劑,但樣品不可與冷卻劑或冷凍劑直接接觸,保證途中樣品不升溫或不融化,必要時可於途中補加冷卻劑或冷凍劑。運送水樣時應避免玻璃瓶搖動,水樣溢出後又迴流瓶內,從而增加污染。如不能由專人攜帶送樣時,也可托運。托運前必須將樣品包裝好,應能防破損,防凍結或防易腐和冷凍樣品升溫或融化。在包裝上應註明“防碎”、“易腐”、“冷藏”等字樣。同時做好樣品運送記錄,寫明運送條件、日期、到達地點及其他需要說明的情況,並由運送人簽字。
樣品的接收
在接收樣品時,實驗室應與送樣人共同相互確認樣品與委託單上的內容是否一致。確認內容一般包括:品名;檢驗目的;檢驗項目;形狀和包裝狀況(同體、粉狀、冷凍、冷藏、零售、批發、無菌包裝等都不同);抽樣數量(個數和質量);抽樣日期及送達日期;抽樣地點;隨貨樣附帶的許可申請單編號;生產國或者生產廠家名稱(進口商品);抽樣者的單位、姓名及有無封印;其他搬運、儲存、檢驗時的注意事項。
樣品的保存
實驗室接到樣品後應在36 h內進行檢測(貝類樣品通常要在6 h內檢測),對不能立即進行檢測的樣品,要採取適當的方式保存,使樣品在檢測之前維持取樣時的狀態,即樣品的檢測結果能夠代表整個產品。實驗室應有足夠和適當的樣品保存設施(如冰箱或冰櫃等)。保存的樣品應進行必要和清晰的標記,內容包括:樣品名稱,樣品描述,樣品批號,企業名稱、地址,取樣人,取樣時間,取樣地點,取樣溫度(必要時),測試目的等;樣品在保存過程中應保持密封性,防止引起樣品pH值的變化。
不同類型的樣品,保存方法不同:
① 易腐樣品:要用保溫箱或採取必要的措施使樣品處於低溫狀態(0~4℃),應在取樣後盡快送至實驗室,並保證樣品送至實驗室時不變質。易腐的非冷凍食品檢測前不應冷凍保存(除非不能及時檢測)。如需要短時間保存,應在0~4℃ 冷藏保存,但應盡快檢驗(一般不應超過36h),因為保存時間過長會造成樣品中嗜冷細菌的生長和嗜中溫細菌的死亡。
② 冷凍樣品:要用保溫箱或採取必要的措施使樣品處於冷凍狀態,送至實驗室前樣品不能融解、變質。冰凍樣品要密閉後置於冷凍冰箱(通常為-l8℃),檢測前要始終保持冷凍狀態,防止樣品暴露在二氧化碳氣體中。
③ 其他樣品:應用塑料袋或類似的材料密封保存,注意不能使其吸潮或水分散失,並要保證從取樣到實驗室進行檢驗的過程中其品質不變。必要時可使用冷藏設備
;⑵ 檢驗科標本採集原則
檢驗科標本採集原則
檢驗結果是臨床醫師在診療過程中所需要的重要信息,臨床醫師可以根據這些檢驗結果及病人的臨床情況來區分疾病的不同階段,觀察疾病的變化,判斷預後或觀察療效。所以分析前階段樣本的質量保證是直接關繫到檢驗結果能否真實客觀地反應患者當前病情的一個重要環節。下面是我為大家帶來的檢驗科標本採集原則,歡迎閱讀。
一、病人准備
1.病人狀態
一般需在安靜狀態下採集標本,如患者處於高度緊張的狀態時,可使血紅蛋白、白細胞增高。由於勞累或受冷等刺激、也可見白細胞的增高。運動能影響許多項目的測定結果。活動的影響可分暫時和持續性兩類。暫時性影響如使血漿脂肪酸含量減少;丙氨酸、乳酸含量增高。持續性影響,如激烈運動後使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的測定值升高,有些恢復較慢,如ALT在停止運動1h後測定,其值仍可偏高30%~50%。
2.飲食
多數試驗要求在采血前禁食12h,因為飲食中的不同成分可直接影響實驗結果。
(1) 餐後血液中TG、ALT、GLU、BUN、Na等均可升高,進食高蛋白或高核酸食物,可以引起血中的尿素氮(BUN)和尿酸(UA)的增高。進食高脂肪食物後採集的血液樣本,其血清會出現渾濁,可影響許多檢驗測定的正確性。甚至喝含咖啡的飲料,可引起澱粉酶(AMS)、AST谷丙轉氨酶(ALT)、鹼性磷酸酶(ALP)等升高。但空腹時間過長,會使GLU,蛋白質降低,而膽紅素升高。
(2) 高脂餐後2~4h采血,多數人ALP含量增高,主要來自腸源性同工酶,且與血型有密切關系,O型或B型兼為Le+分泌型者增高更為明顯。
(3) 高蛋白質飲食可使血漿尿素、血氨增加,但不影響肌酐含量。
(4) 高比例不飽脂肪酸食物,可減低膽固醇含量;香蕉、菠蘿、番茄可使尿液5-羥色胺增加數倍。
(5) 含咖啡因飲料,可使血漿游離脂肪酸增加,並使腎上腺和腦組織釋放兒茶酚胺。食物如含有動物血液,可引起糞隱血假陽性。
(7) 飲酒後使血漿乳酸、尿酸鹽、乙醛、乙酸等增加,長期飲酒者高密度脂蛋白膽固醇偏高、平均血細胞體積增加、谷氨醯轉肽酶亦較不飲酒的病人為高,甚至可以將這三項作為嗜酒者的篩選檢查。
吸煙:癮大者血液一氧化碳血紅蛋白含量可達8%,而不吸煙者含量在1%以下。此外,兒茶酚胺、血清可的松亦較不吸煙者為高,血液學方面亦有變化,白細胞數增加、嗜酸粒細胞減少、中性粒細胞及單核細胞增多、血紅蛋白偏高、平均紅細胞體積偏高。吸煙組血漿硫氰酸鹽濃度明顯高於非吸煙組。
3.葯物
葯物對檢驗的影響非常復雜,在采樣檢查之前,以暫停各種葯物為宜,如某種葯物不可停用,則應了解可能對檢驗結果產生的影響。慶大黴素、氨芐青黴素可使谷丙轉氨酶活性增高、咖啡因可使膽紅素增加、維生素C可使血糖、膽固醇、甘油三脂、尿酸嚴重降低。
4.體位
體位影響血液循環,由於血液和組織間液因體位不同而平衡改變,則細胞成分和大分子物質的改變較為明顯,例如由卧位改為站位,血漿ALB、TP、酶、Ca、膽紅素、Tch及TG等濃度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由於體位的`因素,在確立參考值時,應考慮門診和住院病人可能存在的結果差異,故採集標本時要注意保持正確的體位和保持體位的一致性。
5.時間
病人准備還應考慮病人的生物鍾規律,特別是激素水平分析,如女性生殖激素與月經周期密切相關;膽固醇則在經前期最高,排卵時最低;纖維蛋白原在經前期最高,血漿蛋白則在排卵時減少。生長激素於入睡後會出現短時高峰。膽紅素、血清鐵以清晨最高;血漿蛋白在夜間降低;血Ca往往在中午出現最低值。故采血時間應在相同時間進行。
二、標本採集
標本採集是直接關系檢驗結果的基本要素,如果標本採集不當,即使最好的儀器設備也難以彌補在採集標本時引入的誤差和錯誤。
現將各種標本的採集要點分述如下:
(一) 血液標本
1.標本採集注意事項:
(1) 采靜脈血時止血帶結扎過久,可引起誤差。如以結扎1min的樣品結果為基數,則結扎3min,可使血漿總蛋白增加5%,膽固醇增加5%,鐵增加6%,膽紅素增加8%,乳酸則不能使用止血帶。
(2) 血清標本應避免溶血。許多物質紅細胞內和血清中(血漿)的含量是不一樣的。如ALT紅細胞內比血清高出數倍。血鉀、AST高出幾十倍,而HDH則高出百倍以上,一旦溶血,特別是嚴重溶血,造成血清(漿)中這些物質的測定值增高,干擾測定結果。
(3) 要特別注意采血不能在輸液的同側進行,更應杜絕在輸液管內采血,因輸液成分會影響檢測結果(使相應的結果偏高,如輸K+、Glu時,可使所測K+、Glu明顯增高),或使血液稀釋結果偏低。
細胞培養的樣品要採用無菌技術,防止污染。
(4) 標本採集後,必須在試管或容器上帖上檢驗申請單號碼、住院病人應有床號、姓名,且應當場核對無誤。
(5) 采血順序 摘自北京協和醫院檢驗科《檢驗樣本留取及採集指南》
推薦採用直針采血方式,順序如下:
①血培養管,②凝血項目管(藍帽),③血沉管(黑帽),④血清管(紅帽或黃帽),⑤肝素血漿管(綠帽),⑥EDTA 管(紫帽),⑦ 抑制血糖酵解管(灰帽)
註:採用注射器採集血培養時,厭氧瓶優先。
特殊情況採用蝶翼方式采血,且無血培養管時,順序如下:
①白帽管(棄置管,也可送檢生化免疫項目),②凝血項目管(藍帽),③血沉管(黑帽),④血清管(紅帽或黃毛),⑤肝素血漿管(綠帽),⑥EDTA 管(紫帽),⑦ 抑制血糖酵解管(灰帽)
註:採用蝶翼方式採集血培養時,需氧瓶優先。
在實際工作中,如患者靜脈條件較差,有可能采血不足,血培養優先考慮需氧管,其它管應首先考慮凝血(藍帽)和血沉(黑帽)檢測管,因為這兩種標本對血量要求最嚴格,且二者抗凝劑均為枸櫞酸鈉。
(二) 尿液標本
根據採集時間可分為清晨空腹尿、隨機尿、計時尿(2h、3h、12h、24h等)、午後尿、餐後尿、症狀典型時尿等。
(1) 晨尿為住院病人留尿的主要方法,早晨起床後收集第一次尿,可用尿常規檢驗。
(2) 隨機尿多為門診就診病人的留尿檢驗方法。
(3) 餐後尿為收集進餐後2h尿,主要用於了解葡萄糖代謝情況,用以篩查隱性糖尿病或輕症糖尿病。
(4) 計時尿應於計時開始時排空尿液,然後於規定時間內至截止時間留尿,計時尿多用於腎功能和有形成分排出率的評估,亦用於計算澱粉酶或肌酐的排出率。
(三) 糞便標本
採集後及時送檢,如作原蟲阿米巴檢查應保持一定的溫度,且立即送檢,立即檢查,如檢查蟯蟲則不必送檢糞樣,而應於晨起時排便前用棉拭擦肛門周圍,可得蟲卵。糞便標本應不污染容器外表,一般以無濾漏容器留取5~10g即可。
(四) 腦脊液、漿膜腔液、關節液
均由臨床醫師穿刺采樣,檢驗科應提供專用的各種試管或容器,及時送送檢。
(五) 痰液標本
採集晨間第一口痰,多用於細胞學及微生物學檢查。采樣前應先反復漱口,經深呼吸數次後用力咳痰,不可吐入唾液。微生物培養取樣應在抗生素等葯物治療開始之前,如已使用用抗菌葯物,則應選血液葯物濃度最低水平時采樣。
(六) 陰道分泌物
由婦產科醫師采樣後即時送檢,否則影響滴蟲動力,易於漏檢。
(七) 其他標本
根據具體檢驗項目而定,臨床醫師在開申請單前,應同檢驗科相關部門聯系並詢問詳細後,註明檢查要求,再采樣並及時送檢。
總之,各種檢驗標本的採集合適與否,直接關系檢驗質量,應予以重視。
三、標本保存和運送
標本保存和運送是檢驗質量保證的重要環節之一。由於採集的標本受各種因素的影響,可能使檢驗結果受或大或小的誤差,因此必須正確掌握標本保存和運送。標本採集後盡量立即送檢,如在室溫放置時間過長會造成血液成分的變化(如血糖及酶活性降低),也可造成溶血現象。
(1) 采樣後須立即送檢的常規項目:血氨、血沉、血氣分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各種細菌培養,特別是厭氧菌培養。
(2) 采樣後0.5h內送檢的常規項目:血糖、電解質、血液細胞學、凝血試驗、體液細胞學、塗片找細菌、黴菌等。
(3) 采樣後1~2 h內送檢的常規項目:各種蛋白質類、色素類、激素類、脂類、酶類、抗原、抗體測定等。
;⑶ 微生物檢驗標本的正確採集及注意事項
微生物檢驗標本的正確採集及注意事項
正確採集臨床微生物標本,直接影響到微生物培養鑒定結果。可靠的檢驗結果可以指導臨床診斷治療,為臨床科學用葯和成功的感染控制提供依據,是正確、合理使用抗菌葯物,延緩細菌耐葯,減少抗菌葯物濫用和監測醫院感染的第一步,也是最重要的一步。下面是我為大家帶來的微生物檢驗標本的正確採集及注意事項的知識,歡迎閱讀。
一、 血液標本的採集
1、 採集方法
(1)75%酒精清潔局部皮膚。
(2)待皮膚干後,再用2%—2。5%碘酒從穿刺點中心部位開始消毒,范圍不應小於5cm(直徑),且不能用手指觸摸消毒後的皮膚。
(3)皮膚碘酒干後(約1min),穿刺採集血液,采血量成人5—10ml,嬰幼兒1—5ml。
(4)采血後立即在床旁接種培養瓶,並迅速輕搖,充分混勻防止凝固,但又不可劇震以防溶血。
2、注意事項
(1)懷疑菌血症應盡早采血,體溫上升(38。5℃)采血可提高陽性率,但也要防止因等待而延誤時機。
(2)對已經使用抗菌葯物,而又不能停葯者,也應在下次用葯前采血。切忌不要在靜滴抗菌葯物的靜脈處採取血標本,也不能從靜脈導管及動脈插管中取血。
(3)培養基與血液之比以10:1為宜,以稀釋血液中的抗生素,抗體等殺菌物質;有人主張對接受抗菌葯物治療的病人,培養基與采血量之比可為20:1或大於這個比例。
(4)近年研究表明,將血液注入血培養基前,更換針頭反而易導致污染。
(5)每例至少採血兩次,間隔0。5—1h,以利於提高陽性率和區分感染菌與污染菌。
(6)疑為細菌性心內膜炎及布魯氏病的病人,以肘動脈或股動脈采血為宜,除在發熱期采血外,並要多次采血(24h 3—4次)和增加采血量(可增加10ml)。
(7)采血後立即送檢,如不能立即送檢可置室溫,而不能放置冰箱。
(8)如臨床表現很似敗血症,而血培養多次陰性者,提示考慮厭氧菌和真菌感染的可能。
二、骨髓的採集
1、採集方法
在病灶部位或髂前(後)上脊處嚴格消毒後抽取骨髓1ml,注入血培養瓶內。
2、注意事項
(1)骨髓內含有大量的單核巨噬細胞系統的細胞,因而骨髓培養對傷寒病人的.診斷較血培養優越。
(2)用於懷疑細菌性骨髓炎病人。
三、靜脈導管標本的採集
1、採集方法
(1)常規導管部位皮膚消毒。
(2)無菌方法從病人體內拔出靜脈導管,剪下導管尖端5cm,放入無菌瓶中。
(3)立即(15min內)送檢,避免標本乾燥。
2、注意事項
(1)剪下的導管立即接種血平皿,可提高陽性率。
(2)肉湯反復沖洗導管腔內,沖洗液做定量培養。
(3)有人將剪下的導管置肉湯增菌液或培養瓶中,此法不能區分導管感染菌與少量定植菌。
(4)衛生部在《醫學感染診斷標准》(試行)(2001年1月3日施行)中規定:導管管尖培養其接種方法應取導管尖端5cm,在血平板表面往返滾動一次。細菌≥15cfu/平板,即為陽性。
四、呼吸道
1、痰標本
(1)採集方法
①清晨起床後用涼開水漱口多次,以除去口腔內大量雜菌,用力咳出肺深部的膿痰,置於清潔乾燥容器中送檢。
②痰量極少者可用45℃ 3%—10%的氯化鈉溶液約25ml霧化。對於咯痰量少的幼兒,可輕輕壓迫胸骨上部的氣管,當其咯痰後用無菌棉棒採集標本。
③咳嗽無力或昏迷病人,可用吸痰管經鼻腔或口腔經氣管腔內吸引痰液送檢。
④氣管切開者可以深入透氣孔中取痰。
⑤可用支氣管鏡直接在病灶部位採集高濃度的病原菌。
⑥用無菌導管經鼻腔插入氣管鏡內,緩慢注入無菌蒸餾水5ml,取出導管。留取患者在3h內咳出的痰液,放入無菌容器中送檢。
⑦胃內采痰法。無自覺症狀的結核病人。有時可把痰誤咽入胃內,因而可採用胃內溶物做結核菌培養,其陽性結果比咯痰高10%左右,該方法於晨起空腹時,把滅菌的胃管,從鼻腔送入胃內,用20ml注射器抽取胃液。
(2)注意事項
①痰標本的採集以晨痰為准,此時患者痰量較多且含菌量也多。
②標本採集後立即送檢,若不能及時送檢者,可暫存2—8℃冰箱。若晚1—2h接種,會失去苛氧菌,並使得革蘭陰性菌過分生長。
③可接受的標本:痰;支氣管灌洗液,支氣管刷,支氣管活檢;肺吸出物和肺活檢。不能接受的標本:唾液;24h留的痰(結核桿菌培養除外);拭子。
④ 痰標本的質量評價:(用顯微鏡篩選)在低倍鏡下,檢查鱗狀上皮細胞,至少10個視野,集中在有白細胞處,合格標本為白細胞與鱗狀上皮細胞比例大於2:1。
2、鼻拭子
(1)用濕的拭子(生理鹽水);
(2)需插兩個鼻孔;
(3)深入3。3cm左右,轉動4—5次;
(4)以上用於診斷金黃色葡萄球菌暴發時的鼻帶菌者。
3、咽拭子、口腔拭子
(1)採集方法(到細菌室取專用拭子)
①患者清水漱口後,由檢查者將其舌外拉,用棉拭子將咽後壁或懸雍垂的後側反復擦拭數次;
②化膿性扁桃體炎、口腔念珠菌病時,直接用棉拭子在病灶部位擦拭;
③插入運送培養基中立即送檢,防止乾燥。
(2)注意事項
①棉拭子應避免觸及舌、口腔黏膜和唾液;
②採集標本前數小時不可用消毒葯物漱口或接觸病灶局部。
五、胃腸道
1、糞便
(1)採集方法
選取膿血、黏液糞便2—3g,液體糞便取絮狀物1—2ml。盛於滅菌瓶中或蠟紙盒中及時送檢。
(2)注意事項
①標本要採集新鮮的,陳舊標本影響陽性檢出率;
②切忌糞尿混合;
③若要分離阿米巴,標本要立即送檢並注意保溫;
④運送培養基可提高陽性率;
⑤分離難辨梭菌時需選不成形或水樣便;
⑥霍亂弧菌、大腸桿菌Ο157感染的腹瀉便則為水樣便或血性便;
⑦標本在病理早期或治療前採集;
⑧一般認為用抗菌葯三天後,標本培養病原菌陰性。
2、肛拭子
在無法獲得糞便的情況下,可用經無菌甘油水或無菌生理鹽水濕潤的肛拭子插入肛門4—5cm(幼兒2—3cm)處,輕輕旋轉擦取直腸表面黏液後取出,置運送培養基中送檢。
六、泌尿道
根據衛生部《醫學感染診斷標准》(試行)通知,泌尿系統臨床診斷為:患者出現尿頻、尿急、尿痛等尿路刺激症狀,或有下腹觸痛、腎區叩痛、伴或不伴發熱,並具有下列情況之一:
(1)尿檢白細胞男性≥5個/高倍視野,女性≥10個/高倍視野,插導尿管患者應結合尿培養;
(2)臨床已診斷為泌尿道感染,或抗菌治療有效而認定的泌尿道感染。
1、中段尿
(1)採集方法
①女性 采樣前用肥皂水或0。1%的高錳酸鉀溶液沖洗外陰,用手指陰x分開排尿,棄其前段尿,不終止排尿,留取中段尿10ml於滅菌容器內。
②男性 用肥皂水清洗尿道口,或0。1%的碘伏溶液消毒尿道口,滅菌紗布擦乾,上翻包皮,棄其前段尿,不終止排尿,留取中段尿10ml於滅菌容器內。
(2)注意事項
①導尿雖然可以減少污染,但是多次重復導尿可以造成逆行性感染,因此近年來大多採用中段尿。
②女性病人最好採取膀胱截石位由護士採取標本,減少污染。
③採集標本以晨起第一次尿液為佳。
④採集標本後,若不能在1h內送檢,暫放4℃冰箱,但不能超過8h。若尿液標本在室溫下放置超過2h,即使接種培養結果細菌數≥104 cfu/ml獲103cfu/ml,也不能作為診斷依據,應重新留取標本送檢。
⑤疑為尿道炎時可將最初3—4ml尿液收集在滅菌容器內。該尿中即使有少數細菌,如反復檢查為同一細菌,也應考慮為病原菌。
⑥兒童在多數情況下,僅沖洗外陰是不夠的,故採集標本較為困難。如果尿內細菌明顯增多,可以高度懷疑為尿路感染,無菌則可否定。
⑦若細菌培養結果為兩種或兩種以上細菌,需考慮污染可能,建議重新留取標本送檢。
⑧尿液中不得加入防腐劑,消毒劑否則影響陽性檢出率。
2、膀胱穿刺採集法
避免污染是很困難的,培養結果與病情不符時,或尿厭氧菌培養,或嬰幼兒中段尿採集困難時,可以用恥骨上穿刺膀胱內采尿。
3、留置導尿者採集法
拔去閉式引流的集尿袋,棄去導尿管前段尿液,留無污染的膀胱內尿液10ml送檢。不可從集尿袋下端留取標本。
七、腦脊液
1、採集方法
由臨床醫師以無菌方法收集腦脊液3—5ml(細菌1ml,真菌2ml抗酸桿菌2ml,病毒1ml)盛於無菌試管或小瓶中立即送檢。
2、注意事項
(1)採集標本後立即送檢,因腦膜炎奈瑟菌離體後迅速自溶,肺炎鏈球菌及流感嗜血桿菌也易死亡;
(2)疑為上述細菌感染時,應注意保溫,不可置冰箱或低溫保存。
八、膽汁
1、十二指腸引流法
在無菌操作下,將十二指腸導管吞咽至十二指腸乳頭部(距齒65—70cm)時,收集A液(來自總膽管,為橙黃或金黃色),隨之注入25%硫酸鎂溶液40ml,經1—2min後再採取B液(來自膽囊,為棕黃綠色),隨後收取C液(來自肝膽管,為檸檬色),一般認為B液做細菌培養意義較大。
2、膽囊穿刺法
膽囊造影術時,可同時採取膽汁。
3手術採取法
由總膽管、膽囊直接穿刺採取膽汁。
以上採集之標本應立即送檢,否則置於4℃冰箱內,採集時需小心,避免被唾液、十二指腸液細菌污染。
九、穿刺液標本
穿刺液包括胸水、腹水、心包液、關節液、鞘膜液。
1、採集方法
由臨床醫師行穿刺術抽取。胸腹水可收集5—10ml,心包液、關節液收集2—5ml,置於無菌含抗凝劑的試管或小瓶中,充分混勻後,立即送檢。抗凝劑10%EDTA二鈉鹽,標本與抗凝劑之比10:1。
2、注意事項
⑴標本採集應在患者用葯之前或停止用葯1—2天後進行;
⑵不能立即送檢可置4℃冰箱保存;
⑶疑為淋病性關節炎患者的關節液,採集後立即送檢,或床旁培養為佳;
⑷不能用棉拭子浸蘸標本送檢。
十、膿汁及病灶分泌物
1、傷口
⑴表面傷口拭子採集方法及注意事項
① 僅限於皮膚與皮下組織,包括手術切口、褥瘡潰瘍、新生兒臍炎、嬰兒膿瘡病。
②用無菌生理鹽水或75%的酒精擦去病灶表面滲液;
③用無菌棉拭子抹去及較深部的膿汁分泌物或組織送檢;
④採集褥瘡潰瘍標本時應採集褥瘡邊緣的膿性分泌物,拭子放在運送培養基中立即送檢,不要採集創口表面的滲液。
⑵傷口、膿腫、竇道、壞疽組織採集方法及注意事項
①閉鎖性膿腫用碘酒和酒精消毒皮膚後,用滅菌注射器穿刺抽取全部膿液送檢,疑為厭氧菌感染時,排去針管內空氣將針頭插入滅菌橡膠塞內送檢;
②傷口處若有膿及滲出物要用無菌棉簽深入各種竇道中擦拭,用小刀刮取,穿刺抽吸或手術切除獲得深處傷口標本;
③當創傷出血時,敷有葯物在2h以內及燒傷在12h內均不應採集標本,此時獲得陽性結果機會甚少。
④採集標本注意觀察膿汁及分泌物性狀、色澤、氣味等。可為培養鑒定提供依據。
⑶燒傷創面
①燒傷創面需要膿性分泌物,焦痂迅速分離變棕黑、黑或紫羅蘭色,燒傷邊緣水腫。患者發燒>38℃或低體溫<36℃,合並低血壓。
②用無菌生理鹽水沖洗傷口創面。
③由於創面部位不同,細菌種類也不盡相同,要用滅菌棉拭子採集多個部位的炎症區送檢。
④採集痂下變黑或變性的不健康區邊緣或引流液等做定量培養及組織活檢。
2、厭氧傷口拭子
⑴厭氧專用棉棒或玻璃棒觸及深部膿汁;
⑵可用注射器抽吸,排去針管內空氣將針頭插入滅菌橡膠塞內送檢;
⑶立即送檢,送檢過程中必須保持在無氧條件;
⑷不宜做厭氧菌培養的有痰、喉拭子、鼻咽拭子、齒齦拭子、直腸、陰道和宮頸拭子以及回腸、結腸造瘺術的流出物,胃、小腸及大腸內容物等。
3、尿道口分泌物拭子
⑴男性用無菌紗布擦拭和清洗尿道口,然後採取從尿道口溢出的膿性分泌物;
⑵採集前列腺液時,先將尿道、膀胱沖洗,然後從肛門用手指按摩前列腺,促使前列腺液溢出;
⑶女性病人先用滅菌紗布或棉拭子仔細擦拭或清洗尿道口,然後從陰道內診壓迫尿道,使分泌物溢出;
⑷取子宮頸分泌物,先用內窺鏡擴張陰道,然後從宮頸口用滅菌棉拭子採取分泌物,盡量避免被陰道宮頸附近正常菌群的污染。
4、蜂窩織炎
⑴用無菌生理鹽水或酒精消毒皮膚;
⑵用細針在炎症最顯著處穿刺吸引;
⑶抽少量滅菌生理鹽水在針管內;
⑷注入無菌試管內送檢。
5、組織標本
⑴活體組織採取的微量標本,可直接接種在培養基內;
⑵表淺組織可直接用棉拭子擦拭、小刀颳去;
⑶較大組織塊的表面可採用燒灼或浸入沸水中5—10s,然後用滅菌剪刀切開,取其中的膿汁;
⑷深部組織標本可經皮膚穿刺或手術切取送檢;
⑸組織標本不可用福爾馬x固定;
⑹有時也可將沾有膿汁的最內層敷料放入無菌平皿內送檢。
十一、眼標本採集
⑴一般細菌,以無菌棉拭子採集眼分泌物,尤其膿性分泌物;
⑵沙眼衣原體,首先擦去眼結膜上面的分泌物,然後用無菌小刀刮取穹窿部及眼結膜上皮細胞,用鏈黴素處理後備用;
⑶對於剛治療或葯物沖洗過的患者最好12—24h後採集標本;
⑷對於淚囊炎患者可稍加擠壓後以無菌棉拭子採集標本。
;⑷ 食品安全及食品安全問題,如何樣本採集與前處理
採集病原微生物樣本應當具備下列條件:
(一)具有與採集病原微生物樣本所需要的生物安全防護水平相適應的設備;
(二)具有掌握相關專業知識和操作技能的工作人員;
(三)具有有效的防止病原微生物擴散和感染的措施;
(四)具有保證病原微生物樣本質量的技術方法和手段。
採集高致病性病原微生物樣本的工作人員在採集過程中應當防止病原微生物擴散和感染,並對樣本的來源、採集過程和方法等作詳細記錄。
第十條 運輸高致病性病原微生物菌(毒)種或者樣本,應當通過陸路運輸;沒有陸路通道,必須經水路運輸的,可以通過水路運輸;緊急情況下或者需要將高致病性病原微生物菌(毒)種或者樣本運往國外的,可以通過民用航空運輸。
⑸ 微生物檢驗標本採集和運送原則
采樣時機
抗生素使用前(停用抗生素3至5天或下次用葯前)采樣
采樣方法
採集無菌部位的標本應嚴格無菌操作,非無菌部位盡量減少正常菌群的污染,采樣量足。
采樣容器
專用的無菌,防滲漏,有蓋,無酸、鹼、防腐劑及消毒劑污染。
送檢
盡快送檢,一般不超過2小時。
若不能及時送檢可於4-8℃保存,但對可疑淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌等對外界環境敏感的苛養菌感染的患者標本應室溫保存。
當標本量小於1ml時應於15~30分鍾內送檢,防止揮發和乾燥。
微生物檢查的標本採集和運送原則
1.發現感染應及時採集微生物標本作病原學檢查。
2.盡量在抗菌葯物使用前,或停葯3至5天後採集標本,如不能停用抗菌葯物,應於下次抗菌葯物應用前採集。應在感染的急性期或傷口局部治療前採集標本。
3.選擇正確的解剖部位,並以適當的技術、方法與容器收集足量的標本。
4.采樣時應嚴格執行無菌操作,將污染可能降至最低。
5.收集真正感染的病灶處的標本,且避免鄰近區域常居菌群的污染。
6.採用專用無菌容器收集標本。容器須滅菌處理,防止滲漏,但不得使用消毒劑。標本中不可添加防腐劑。
7.采樣後應立即送檢,最好在2h內。如不能及時送檢,應將標本置於適當的儲存環境待送,但不超過24小時。對可疑淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌等對外界環境敏感的苛養菌感染的患者標本應室溫保存。當標本量小於1ml時應於15~30分鍾內送檢,防止揮發和乾燥。
8.盡量不要以一般棉花拭子收集標本,應使用專用的纖維拭子。
9.每份標本都應貼上標簽並標明必要信息,在檢驗申請單上填寫足夠的有關臨床資料。(要標明病區、病人姓名、感染狀況、近期抗菌葯物使用情況、標本來源、檢驗目的、採集部位、採集及送檢時間等)
10.同一天同一檢測目的、相同標本(血液標本除外)一般只需送檢一次(份)。塗片檢查最好和細菌培養同時做!
拓展:
1.糖類的分解:細菌分泌胞外酶,將菌體外的多糖分解成單糖(葡萄糖)後再吸收。各種細菌將多糖分解為單糖,進而轉化為丙酮酸,這一過程是一致的。丙酮酸的利用,需氧菌和厭氧菌則不相同。需氧菌將丙酮酸經三羧酸循環徹底分解成CO2和水。厭氧菌則發酵丙酮酸,產生各種酸類(如甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、乳酸、琥珀酸等)、醛類(如乙醛)、醇類(如乙醇、乙酸甲基甲醇、異丙醇、丁醇等)、酮類(如丙酮)。不同細菌具有不同的酶,對糖類的分解能力和代謝產物也不同,藉此可以鑒別細菌。
2.蛋白質的分解:蛋白質分子在細菌分泌的蛋白質水解酶的作用下,在肽鍵處斷裂,生成多肽和二肽。多肽和二肽在肽酶的作用下水解,生成各種氨基酸。二肽和氨基酸可被細菌吸收,氨基酸在體內脫氨基酶的作用下,經脫氨基作用生成氨。不同種細菌在不同的條件下所進行的脫氨基作用的方式(氧化脫氨基、水解脫氨基、還原脫氨基)及代謝產物也不同。可藉此鑒別細菌。如有些細菌能使色氨酸氧化脫氨基,生成吲哚、C02和H20.細菌還可以用脫羧酶使氨基酸脫羧,生成胺類(如組胺)和C02.
3.細菌對其他物質的分解:細菌除能分解糖和蛋白質外,對一些有機物和無機物也可分解利用。各種細菌產生的.酶不同,其代謝的基質不同,代謝的產物也不一樣,故可用於鑒別細菌。
(1)對其他有機物的分解:如變形桿菌具有尿素酶,可以水解尿素,產生氨。乙型副傷寒沙門菌和變形桿菌都具有脫硫氫基作用,使含硫氨基酸(胱氨酸)分解成氨和H2S.
(2)對其他無機物的分解:產氣腸桿菌分解檸檬酸鹽生成碳酸鹽,並分解培養基中的銨鹽生成氨。細菌還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,氨和氮氣的作用,稱為硝酸鹽還原作用。
4.細菌合成代謝產物的意義
(1)熱原質:大多數為革蘭陰性菌合成的菌體脂多糖。注入人體或動物體內能引起發熱反應,故稱熱原質。
(2)毒素和侵襲性酶:細菌產生毒素,包括內毒素和外毒素。內毒素為草蘭陰性菌的脂多糖。外毒素是革蘭陽性菌產生的蛋白質,毒性強且有高度的選擇性。有些細菌還能產生具有侵襲性的酶,如卵磷脂酶、透明質酸酶等。毒素和侵襲襲性酶在細菌致病性中甚為重要。
(3)色素:有水溶性色素(銅綠假單胞菌的色素)和脂溶性色素(金黃色葡萄球菌的色素)。不同細菌產生不同的色素,在鑒別細菌上有一定意義。
(4)抗生素:是由某些微生物代謝過程中產生的、能抑制或殺死另一些微生物和癌細胞的微量生物活性物質。
(5)細菌素:某些細菌菌株產生的一類具有抗菌作用的蛋白質,細菌素作用范圍狹窄,僅對與產生該種細菌素的細菌有近緣關系的細菌才能起作用,如大腸菌素、綠膿菌素、變形菌素和弧菌素等。
⑹ 微生物標本採集方法及注意事項
一、糞便標本採集和處理
(1)採集方法
1.自然排便法:取新鮮糞便的黏液、膿血、或絮狀物等有意義成分,2~3g或 1~2 m1,盛無菌容器內或置於保存液或增茵液內送檢;若疑似霍亂者應置於鹼性蛋白腖水中(PH8.6)。
2. 直腸拭子法:難以獲得糞便或排便困難患者及幼兒可採用此法,將拭子前端用無菌甘油或生理鹽水濕潤,然後插入肛門約 4~5cm(幼兒 2~3cm),輕輕在直腸內旋轉。擦取直腸表面粘液後取出,盛於無菌試管中或保存液中送檢。
(2) 注意事項
1.盡可能在抗生素使用之前採集標本。
2.所挑取的糞便不應接觸其他部位(如便盆),糞便樣本中不應混入尿液及其他異物,採集過程應盡量無菌操作。
3.不應用廁紙收集糞便。
4.對同一病人在同一天不宜重復送檢。
5.宜在感染急性期(通常是5d-7d內)採集標本。
6.下列腹瀉患者應連續3d送檢標本
--社區獲得性腹瀉(入院前或72h內出現症狀)
--醫院腹瀉(入院72h後出現症狀),且至少有下列情況之一:大於65歲並伴有內科疾病、HIV感染、粒缺(中性粒細胞<0.5)及疑似院內暴發。
--懷疑腸道感染的非腹瀉性表現。
7.腸炎和發熱病人建議做血培養。
8.傷寒沙門菌感染時骨髓培養高出血培養。
9新鮮糞便標本應在採集後盡快送檢,不應超過2h。
(3)標本拒收
乾燥的.拭子、含鋇糞便、黃軟成形便、干便、明顯污染的糞便、一日內重復送檢的標本,應設法與臨床醫師聯系,可要求重新留取標本,並做好記錄,在沒有與醫師溝通之前標本不應丟棄,仍按實驗室標本保存原則存放。
二 、尿液標本採集和處理
(1)採集方法
1. 中段尿採集法: 清晨起床後用肥皂水清洗尿道口和外陰部,再用清水沖洗尿道口周圍,然後排尿棄去前段尿液,收集中段尿 5~10ml盛於帶蓋的無菌容器內立即送檢,採集後於0.5h內進行接種。
2. 恥骨上膀胱穿刺法:評估膀胱內細菌感染的「金標准」。培養結果與臨床病情矛盾時可採用此法,一般較少應用。
3. 導尿法:採用無菌技術用注射器經導尿管抽取尿液,導取 10~15ml 尿液,置無菌容器中送檢,尿液標本不能通過收集袋引流管口流出的方式採集。長期留置導尿管的患者進行常規尿培養意義不大,這些患者通常會培養出大量定植菌。
(2)注意事項
正常人的尿液是無菌的,除外尿道有正常菌群外,還有條件致病菌,而這些細菌又是尿路感染中常見的致病菌,故應該注意無菌採集。
(3)標本拒收
1.標本取自導尿患者尿袋。
2.標本送檢時容器有滲漏。
3.未用無菌容器採集標本。
4.除恥骨上膀胱穿刺法外,採用其他方法採集標本申請做厭氧菌培養
三、 痰及下呼吸道標本採集和處理
(1)採集方法
1.自然咳痰法:①晨痰為佳;②先冷開水洗漱、清潔、口腔和牙齒;③再用力咳出呼吸道深部的痰,吐至無菌容器中;④痰量不得少於1ml;⑤痰咳出困難 時可先霧化吸入 NaCl溶液(100g/L,加溫到45℃)使痰容易咳出。查結核分枝桿菌,應留取24小時痰。
2. 小兒取痰法:用彎壓舌板向後壓舌,將拭子深入咽部,小兒因壓舌板刺激引起咳嗽,噴出的肺或氣管分泌物粘在拭子上即可送檢。
3.支氣管鏡、支氣管穿刺、支氣管肺胞灌洗等採集法,此採集方法必須由醫生操作。
(2)注意事項
1.痰經過口腔,所以患者應用清水漱口數次,盡量排除口腔內大量雜菌。
2.用無菌防漏容器收集標本,應在2h內(室溫)送至微生物實驗室。若延長送檢,將導致非苛養的口咽部定植菌過度生長,有臨床意義的病原菌數量相對減少。
(3)篩選並拒收的標本
1.24h內重復採集的痰細菌培養標本。
2.唾液。
3.未經保護套管收集的支氣管刷培養標本。
4.痰的厭氧菌培養標本。
四、血培養標本採集和處理
(1)血培養標本採集指征
對入院的危重患者未進行系統性抗生素治療前,應及時進行血液培養,患者出現以下體征可作為血培養的重要指征:
1.發熱(≥38℃)或低熱(≤36℃)
2. 寒熱
3. 白細胞增多(>10×109/L,特別是在有「核左移」未成熟的或帶狀的白細胞增多時)
4.粒細胞減少(成熟的多核白細胞<1×109/L)
5. 血小板減少
6.皮膚粘膜出血
7.昏迷
8.多器官衰竭
(2)注意事項
1.血液在正常情況下為無菌標本,應嚴格按照無菌操作,避免雜菌污染。
2.培養瓶分為需氧瓶和厭氧瓶兩種。每瓶需要 8~10ml。兒童瓶為需氧瓶每瓶需血液1~3ml.
3.血瓶接種順序:用注射器或針采血時,應先接種厭氧瓶;用蝶形針采血時,應先接種需氧瓶;采血量不夠時先接種需氧瓶,剩餘量再接種厭氧瓶。
4.采血後盡快送至微生物室,如有耽擱,室溫放置,不要冷藏。
⑺ 在食品微生物檢驗中,對樣品的採集方案有哪些要求
食品衛生微生物檢驗樣品的採集和處理
一、范圍
適用於各類食品樣品的采樣。
二、采樣用品
滅菌探子、鏟子、匙、采樣器、試管、吸管、廣口瓶、剪子、開罐器等。
三、樣品的採集
在食品檢驗中,所採集的樣品必須有代表性。食品中因其加工批號、原料情況(來源、種類、地區、季節等)、加工方法、運輸、保藏條件、銷售中的各個環節(例如有無防蠅、防污染、防蟑螂及防鼠等設備)及銷售人員的責任心和衛生認識水平等均可影響食品衛生質量,因此必須考慮周密。
1、采樣數量
每批樣品要在容器的不同部位採取,一般定型包裝食品採取一袋/瓶(不少於250g)及散裝食品採取250g.
2、采樣方法
(1)
采樣必須在無菌操作下進行。
(2)
根據樣品種類,袋裝、瓶裝和罐裝食品,應采完整的未開封的樣品。如果樣品很大,則需要無菌采樣器
取樣;固體粉末樣品,應邊取邊混合;液體樣品通過振搖混勻;冷凍食品應保持冷凍狀態(可放在冰內、冰箱的冷盒內或低溫冰箱內保存),非冷凍食品需在1℃~5℃中保存。
3、
采樣標簽
采樣前或後應貼上標簽,每件樣品必須標記清楚(如品名、來源、數量、采樣地點、采樣人及采樣時間等)。
四、送檢
樣品送到微生物檢驗室應越快越好。如果路途遙遠,可將不需冷凍樣品保持在1℃~5℃環境中(如冰壺)。如需保持冷凍狀態,則需保存在泡沫塑料隔熱箱內(箱內有乾冰可維持在0℃以下)。送檢時,必須認真填寫申請單,以供檢驗人員參考。
五、檢驗
微生物檢驗室接到送檢申請單,應立即登記,填寫實驗序號,並按檢驗要求,立即將樣品放在冰箱或冰盒中,積極准備條件進行檢驗。
各食品微生物檢驗室必須備有專用冰箱存放樣品。一般陽性樣品,發出報告後3d(特殊情況
適當延長),方能處理樣品。進口食品的陽性樣品,需保存6個月,方能處理。陰性樣品可及時處理。
檢驗完後,檢驗人員應及時填寫原始記錄,簽名後,送質控辦出具檢驗報告。
⑻ 食品檢驗樣品採集需要遵循的原則
滿意請採納
食品檢驗樣品的採集
采樣(Sampling)從產品中抽取少量的、有一定代表性的樣品,供檢驗分析用,這一過程稱為采樣。
一、食品檢驗樣品採集的原則
1. 采樣前的一些准備工作
– 乾冰:製冷劑。也可以用濕冰。
– 盒子或製冷皿:貯藏、運輸樣品。
– 滅菌容器:從塑料袋到滅菌的加侖漆桶等。
– 取樣工具:茶匙、角匙、尖嘴鉗、鑷子、 量筒和燒杯等。
– 滅菌手套:
– 無菌棉拭子:一般用於拭取儀器設施和工廠環境區域。
– 滅菌全包裝袋:裝樣品用。
• 當樣品收集時,樣品採集時的條件例如產品的溫度、地點等,連同扦樣樣品號嘜頭,一並記錄入檢驗員的注釋說明中。
• 當採集無菌樣品時,一條最重要的規則是:千萬別污染樣品。這需要樣品採集人非常小心地採集所有附加樣品,確保不違反這條規則。
2. 食品檢樣採集的原則
1)所采樣品應具有代表性。
2)采樣必須符合無菌操作的要求,防止一切外來污染
– 一件用具只能用於一個樣品,防止交叉污染。
3)在保存和運送過程中應保證樣品中微生物的狀態不發生變化
– 採集的非冷凍食品一般在0~5℃冷藏,不能冷藏的食品立即檢驗。一般在36h內進行檢驗。
4)采樣標簽應完整、清楚
– 每件樣品的標簽須標記清楚,盡可能提供詳盡的資料。
二、食品檢驗樣品的採集方法
一)取樣方案
一般說來,進出口貿易合同對食品抽樣量有明確規定的,按合同規定抽樣;無具體抽樣規定的,可根據檢驗目的、產品及被抽樣品的性質和分析方法確定抽樣方案。
目前最為流行的抽樣方案為(國際食品微生物學標准委員會)ICMSF推薦的抽樣方案和隨機抽樣方案。
無論採取何種方法抽樣,每批貨物的抽樣數量不得少於5件。對於需要檢驗沙門氏菌的食品,抽樣數量應適當增加,最低不少於8件。
二)樣本選擇
三)抽樣(采樣)方法
國際食品微生物標准委員International Commission on Microbiological Specifications for Foods, ICMSF
ICMSF方法是從統計學角度來考慮,對一批產品檢查多少個檢樣才能夠有代表性,才能客觀地反映該批產品質量的設想采樣的
ICMSF提出的采樣基本原則,是根據以下考慮來規定不同的采樣數:
(1) 各種微生物本身對人的危害程度各有不同;
(2) 食品經不同條件處理後,其危害程度可分為3種情況:危害度降低;危害度未變;危害度增加。
ICMSF是將微生物的危害度、食品的特性及處理條件三者綜合在一起進行食品中微生物危害度分類的。這個設想是很科學的,符合實際情況的,對生產廠及消費者來說都是比較合理的。
ICMSF的采樣方案:ICMSF方法中包括二級法及三級法2種。二級法只設有n、c及m值,三級法則有n、c、m及M值。
– n:系指一批產品的采樣個數。 c:系指該批產品中檢樣菌數超過限量的檢樣數。
– m:系指合格菌數限量。 M:系指附加條件後判定為合格的菌數限量 。
在中等或嚴重危害的情況下使用二級抽樣方案,對健康危害低的則建議使用三級抽樣方案。
1)二級法:
只設定合格判定標准m值,超過m值的,則為不合格品。通過檢查在檢樣中是否有超過m值的,來判定該批是否合格。
如生食魚片中細菌總數標准為n=5,c=0,m=100cfu / g。其中m=100cfu / g即為限量標准,n=5即取樣5個,c=0即表示在該批5個檢樣中,若未見有超過m值為100cfu / g的檢樣,則該批產品為合格品。
cfu:colony forming unit, 菌落形成單位
2)三級法:
設有微生物標准值m及M值,如同二級法,超過m值的檢樣為該檢樣不合格。所有檢樣均小於m值,該批產品為合格;在m值到M值范圍內的檢樣數在c值范圍內,即為附加條件合格,否則為不合格;凡有檢樣超過M值者,則該批產品為不合格。
如澳大利亞冷凍糖制食品的大腸菌群標准為n=5,c=2,m=100,M=1000,其含義是從一批產品中,取5個檢樣,若所有檢樣大腸菌群結果均小於m=100,則判定為該批產品合格;若≤2個檢樣的結果位於m與M值之間(即100~1000之間),則判定為附加條件合格;若有3個及以上檢樣的結果位於m與M值之間,判定為該批產品不合格;若有任一檢樣大腸菌群數超過M值(即1000)者,則判定該批產品不合格。
表3-1 ICMSF按微生物的危害度及食品處理進行情況分類
二)樣本選擇
樣本選擇可以分為有針對性選擇和隨機選擇兩種。
1、在現場抽樣時,可利用隨機抽樣表進行隨機抽樣。
2、有針對性選擇是根據已掌握的情況,如懷疑某種食物可能是食物中毒的原因食品,或者感觀上已初步判定出該食品存在衛生質量問題,而有針對性地選擇採集樣本。
三)抽樣(采樣)方法
隨機采樣,即用一種能使總體的每一部分有同等機會出現在樣品中的方法,從大批樣品中抽出若幹部分。
代表性采樣(針對性采樣),即使用系統抽樣法采樣,以使所取的每一部分代表食品的相應部分。
隨機抽樣表系用計算機隨機編制而成,包括1千、1萬或10萬個數字。其使用方法如下:
a.先將一批產品的各單位產品(如箱、包、盒等)按順序編號。如將一批600包的產品編為1、2……600。
b.隨意在表上點出一個數。查看該數字所在的行和列。如點在第18行、第10列的數字上。
c.根據單位產品編號的最大位數(比如,最大為三位數),查出所在行的連續列數字,則編號與該數相同的那一份單位產品,即為一件應抽取的樣品。
d.繼續查下一行的相同連續列數字。該數字所代表的單位產品為另一件應抽取的樣品。
e.依次按上述方法查下去。當遇到所查數超過最大編號數量,則捨去此數,繼續查下一行相同列數,直到完成應抽樣品件數為止。
三)抽樣(采樣)方法
1)、重量法 採取一定重量的食品作為一個樣品。採取屠宰後兩腿內側肌或背最長肌100g/只;蛋、蛋製品樣品,每份不少於200g。
2)、拭子法 拭子法采樣不損害肉的完整性,操作簡便。但是檢出的活菌總數不高。
3)、灌洗法 對於全凈膛光禽最好在洗滌後立即采樣。本法比拭子法檢出率高。
抽樣方法對抽樣方案的有效執行和保證樣品的有效性代表性至關重要。
抽樣必須遵循無菌操作程序,抽樣工具如整套不銹鋼勺子、鑷子、剪刀等應當高壓滅菌,防止一切可能的外來污染。容器必需清潔、乾燥、防漏、廣口、滅菌,大小適合盛放檢樣。抽樣全過程中,應採取必要的措施防止食品中固有微生物的數量和生長能力發生變化。 應注意產品的均質性和來源,確保檢樣的代表性。
微生物檢驗時樣品的制備 均勻食品:用四分法縮分;肉類、水產類食品:滅菌剪刀剪碎,四分法縮分。
⑼ 醫學檢驗標本採集原則
醫學檢驗標本採集原則
檢驗結果是臨床醫師在診療過程中所需要的重要信息,臨床醫師可以根據這些檢驗結果及病人的臨床情況來區分疾病的不同階段,觀察疾病的變化,判斷預後或觀察療效。所以分析前階段樣本的質量保證是直接關繫到檢驗結果能否真實客觀地反應患者當前病情的一個重要環節。下面是我為大家帶來的關於醫學檢驗標本採集原則的知識,歡迎閱讀。
一、病人准備
1.病人狀態
一般需在安靜狀態下採集標本,如患者處於高度緊張的狀態時,可使血紅蛋白、白細胞增高。由於勞累或受冷等刺激、也可見白細胞的增高。運動能影響許多項目的測定結果。活動的影響可分暫時和持續性兩類。暫時性影響如使血漿脂肪酸含量減少;丙氨酸、乳酸含量增高。持續性影響,如激烈運動後使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的測定值升高,有些恢復較慢,如ALT在停止運動1h後測定,其值仍可偏高30%~50%。
2.飲食
多數試驗要求在采血前禁食12h,因為飲食中的不同成分可直接影響實驗結果。
(1) 餐後血液中TG、ALT、GLU、BUN、Na等均可升高,進食高蛋白或高核酸食物,可以引起血中的尿素氮(BUN)和尿酸(UA)的增高。進食高脂肪食物後採集的血液樣本,其血清會出現渾濁,可影響許多檢驗測定的正確性。甚至喝含咖啡的飲料,可引起澱粉酶(AMS)、AST谷丙轉氨酶(ALT)、鹼性磷酸酶(ALP)等升高。但空腹時間過長,會使GLU,蛋白質降低,而膽紅素升高。
(2) 高脂餐後2~4h采血,多數人ALP含量增高,主要來自腸源性同工酶,且與血型有密切關系,O型或B型兼為Le+分泌型者增高更為明顯。
(3) 高蛋白質飲食可使血漿尿素、血氨增加,但不影響肌酐含量。
(4) 高比例不飽脂肪酸食物,可減低膽固醇含量;香蕉、菠蘿、番茄可使尿液5-羥色胺增加數倍。
(5) 含咖啡因飲料,可使血漿游離脂肪酸增加,並使腎上腺和腦組織釋放兒茶酚胺。食物如含有動物血液,可引起糞隱血假陽性。
(7) 飲酒後使血漿乳酸、尿酸鹽、乙醛、乙酸等增加,長期飲酒者高密度脂蛋白膽固醇偏高、平均血細胞體積增加、谷氨醯轉肽酶亦較不飲酒的病人為高,甚至可以將這三項作為嗜酒者的篩選檢查。
吸煙:癮大者血液一氧化碳血紅蛋白含量可達8%,而不吸煙者含量在1%以下。此外,兒茶酚胺、血清可的松亦較不吸煙者為高,血液學方面亦有變化,白細胞數增加、嗜酸粒細胞減少、中性粒細胞及單核細胞增多、血紅蛋白偏高、平均紅細胞體積偏高。吸煙組血漿硫氰酸鹽濃度明顯高於非吸煙組。
3.葯物
葯物對檢驗的影響非常復雜,在采樣檢查之前,以暫停各種葯物為宜,如某種葯物不可停用,則應了解可能對檢驗結果產生的影響。慶大黴素、氨芐青黴素可使谷丙轉氨酶活性增高、咖啡因可使膽紅素增加、維生素C可使血糖、膽固醇、甘油三脂、尿酸嚴重降低。
4.體位
體位影響血液循環,由於血液和組織間液因體位不同而平衡改變,則細胞成分和大分子物質的改變較為明顯,例如由卧位改為站位,血漿ALB、TP、酶、Ca、膽紅素、Tch及TG等濃度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由於體位的因素,在確立參考值時,應考慮門診和住院病人可能存在的結果差異,故採集標本時要注意保持正確的體位和保持體位的一致性。
5.時間
病人准備還應考慮病人的生物鍾規律,特別是激素水平分析,如女性生殖激素與月經周期密切相關;膽固醇則在經前期最高,排卵時最低;纖維蛋白原在經前期最高,血漿蛋白則在排卵時減少。生長激素於入睡後會出現短時高峰。膽紅素、血清鐵以清晨最高;血漿蛋白在夜間降低;血Ca往往在中午出現最低值。故采血時間應在相同時間進行。
二、標本採集
標本採集是直接關系檢驗結果的基本要素,如果標本採集不當,即使最好的儀器設備也難以彌補在採集標本時引入的誤差和錯誤。
現將各種標本的採集要點分述如下:
(一) 血液標本
1.標本採集注意事項:
(1) 采靜脈血時止血帶結扎過久,可引起誤差。如以結扎1min的樣品結果為基數,則結扎3min,可使血漿總蛋白增加5%,膽固醇增加5%,鐵增加6%,膽紅素增加8%,乳酸則不能使用止血帶。
(2) 血清標本應避免溶血。許多物質紅細胞內和血清中(血漿)的含量是不一樣的。如ALT紅細胞內比血清高出數倍。血鉀、AST高出幾十倍,而HDH則高出百倍以上,一旦溶血,特別是嚴重溶血,造成血清(漿)中這些物質的`測定值增高,干擾測定結果。
(3) 要特別注意采血不能在輸液的同側進行,更應杜絕在輸液管內采血,因輸液成分會影響檢測結果(使相應的結果偏高,如輸K+、Glu時,可使所測K+、Glu明顯增高),或使血液稀釋結果偏低。
細胞培養的樣品要採用無菌技術,防止污染。
(4) 標本採集後,必須在試管或容器上帖上檢驗申請單號碼、住院病人應有床號、姓名,且應當場核對無誤。
(5) 采血順序
推薦採用直針采血方式,順序如下:
①血培養管,②凝血項目管(藍帽),③血沉管(黑帽),④血清管(紅帽或黃帽),⑤肝素血漿管(綠帽),⑥EDTA 管(紫帽),⑦ 抑制血糖酵解管(灰帽)
必須指出的是,各種標本都必須嚴格貼好標簽。
(二) 尿液標本
根據採集時間可分為清晨空腹尿、隨機尿、計時尿(2h、3h、12h、24h等)、午後尿、餐後尿、症狀典型時尿等。
(1) 晨尿為住院病人留尿的主要方法,早晨起床後收集第一次尿,可用尿常規檢驗。
(2) 隨機尿多為門診就診病人的留尿檢驗方法。
(3) 餐後尿為收集進餐後2h尿,主要用於了解葡萄糖代謝情況,用以篩查隱性糖尿病或輕症糖尿病。
(4) 計時尿應於計時開始時排空尿液,然後於規定時間內至截止時間留尿,計時尿多用於腎功能和有形成分排出率的評估,亦用於計算澱粉酶或肌酐的排出率。
(三) 糞便標本
採集後及時送檢,如作原蟲阿米巴檢查應保持一定的溫度,且立即送檢,立即檢查,如檢查蟯蟲則不必送檢糞樣,而應於晨起時排便前用棉拭擦肛門周圍,可得蟲卵。糞便標本應不污染容器外表,一般以無濾漏容器留取5~10g即可。
(四) 腦脊液、漿膜腔液、關節液
均由臨床醫師穿刺采樣,檢驗科應提供專用的各種試管或容器,及時送送檢。
(五) 痰液標本
採集晨間第一口痰,多用於細胞學及微生物學檢查。采樣前應先反復漱口,經深呼吸數次後用力咳痰,不可吐入唾液。微生物培養取樣應在抗生素等葯物治療開始之前,如已使用用抗菌葯物,則應選血液葯物濃度最低水平時采樣。
(六) 陰道分泌物
由婦產科醫師采樣後即時送檢,否則影響滴蟲動力,易於漏檢。
(七) 其他標本
根據具體檢驗項目而定,臨床醫師在開申請單前,應同檢驗科相關部門聯系並詢問詳細後,註明檢查要求,再采樣並及時送檢。
總之,各種檢驗標本的採集合適與否,直接關系檢驗質量,應予以重視。
三、標本保存和運送
標本保存和運送是檢驗質量保證的重要環節之一。由於採集的標本受各種因素的影響,可能使檢驗結果受或大或小的誤差,因此必須正確掌握標本保存和運送。標本採集後盡量立即送檢,如在室溫放置時間過長會造成血液成分的變化(如血糖及酶活性降低),也可造成溶血現象。
(1) 采樣後須立即送檢的常規項目:血氨、血沉、血氣分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各種細菌培養,特別是厭氧菌培養。
(2) 采樣後0.5h內送檢的常規項目:血糖、電解質、血液細胞學、凝血試驗、體液細胞學、塗片找細菌、黴菌等。
(3) 采樣後1~2 h內送檢的常規項目:各種蛋白質類、色素類、激素類、脂類、酶類、抗原、抗體測定等。
;⑽ 下呼吸道感染微生物檢驗的標本留取和運送的要求
下呼吸道感染微生物檢驗的標本留取和運送的要求
你對下呼吸道感染微生物檢驗的標本留取和運送的要求了解嗎?你知道下呼吸道感染微生物檢驗的標本留取和運送的要求是怎樣的嗎?下面是我為大家帶來的下呼吸道感染微生物檢驗的標本留取和運送的要求的知識,歡迎閱讀。
1.纖維支氣管鏡標本的採集要求
纖維支氣管鏡可採集到感染部位的標本,包括BAL、BS、PSB及支氣管穿刺活檢標本,均應由呼吸科醫師或經培訓醫師採集;為防止污染,應採用吸入麻醉劑,勿從支氣管鏡的工作腔中吸取灌洗液標本;標本採集順序為:BS、BAL、PSB和活檢標本,應避免帶血。
2.痰、氣管吸出物標本的留取
當有下呼吸道細菌感染指征時,患者在醫護人員的指導下先用無菌生理鹽水漱口,可減少口腔污染菌的數量,如有假牙應先摘掉;咳出清晨第一口深部痰,留至帶螺旋蓋的防漏無菌痰杯內。僅當插管患者出現肺炎症狀時(如發熱或浸潤)採集氣管吸出物,因氣管在插管24 h後即有定植菌,在無肺部感染症狀時吸痰送檢,培養結果往往與疾病不符。嬰幼兒和小齡兒童可吸取氣管和支氣管的分泌物,常用於診斷細菌性肺炎。
3.標本的運送要求
臨床採集的標本均應盡快送至實驗室,實驗室對來自急診、新入院患者和有創方法採集的標本(如:BAL和肺活檢標本)要盡快處理,以保證致病菌的活性,避免造成重復採集標本。通常做細菌學檢驗的標本應在2 h內(室溫)送至微生物實驗室。延誤送檢將導致口咽部定植菌過度生長,有臨床意義的病原菌數量減少。如需遠程運送,建議將標本放置2-8 ℃環境(不超過24 h),但培養分離到肺炎鏈球菌等苛養菌的機會和數量將會減少。實驗室應在報告中對標本延遲送檢或經低溫冷藏予以說明,並指出可能對培養結果造成的影響。
4.拒收的標本
實驗室接收標本後,首先篩選並拒收以下不合格標本:24 h內重復採集的痰培養標本、唾液、鼻沖洗液和分泌物、鼻孔拭子、咽部標本、未經保護套管收集的支氣管刷培養標本及痰的厭氧菌培養標本。除支氣管穿刺吸出物、PSB、活檢標本、胸水或其他未經污染的標本外,其餘類型的標本均不適合做厭氧菌培養。
5.塗片革蘭染色判斷標本的.合格性
肺部感染的最常見機制是肺泡內吸入了口咽部定植菌,培養方法的局限性在於敏感性低,且無法判斷分離菌是感染或定植。因此,實驗室需藉助塗片革蘭染色方法評估痰標本的質量。此外,塗片還可提高下呼吸道感染病原學診斷的特異性和敏感性,並發現培養不能生長的細菌,是既快速又低成本的方法,但需要實驗室人員的豐富經驗。
通常標本中上皮細胞的數量代表污染程度,白細胞內或外的優勢菌(非黏附在鱗狀上皮細胞上)有助於預測肺部致病菌。可接受做培養的痰、支氣管吸出物標本包括塗片革蘭染色所見:(1)<10個鱗狀上皮細胞(SEC)/低倍視野(LPF),大量多形核白細胞(WBC>25個/LPF),且存在肺泡巨噬細胞和柱狀上皮細胞均提示來自深部痰標本;(2)WBC>25個/LPF,SEC<25個/LPF;(3)WBC∶SEC>10∶1,單一形態的細菌量達到3+-4+。不適合做培養的判斷:當SEC>10個/LPF,提示標本被唾液污染;還包括當吸痰塗片未見細菌時。
6.塗片可提示與感染相關的信息
通過塗片革蘭染色,實驗室應報告臨床提示感染的信息,雖然由兩種致病菌同時引起的感染不常見,但當兩種形態的細菌均與白細胞相關時要報告;即使塗片未見細菌時仍有助於評價患者狀況,可能隱藏著某些特殊菌,如軍團菌、內源性真菌、結核分枝桿菌或其他可引起非典型肺炎的致病菌;質量合格的標本中,塗片有正常菌群及多種細菌(通常白細胞內有空泡或液泡),特別當培養生長正常菌群時,報告要提示有吸入性肺炎等。
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