① 申請微生物實驗室CMA認證大概要多久
CMA是計量校準的資質
要看實驗室運營了多少時間才可以申請
通常是幾個月到一年
全世界最多這類檢測認證機構在中國,全中國最集中檢測認證機構的在廣東;
廣東最為活躍最多機構都集中在深圳無論服務、價格、周期還是合理程度都最佳;
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② 做微生物實驗室一般需要投入多少資金
微生物實驗室的設計與建設
我單位微生物實驗室主要負責各類食品中微生物項目的檢測,主要檢測項目有菌落總數、大腸菌群、黴菌、酵母、乳酸菌、雙歧桿菌、罐頭商業無菌、致病菌(如沙門氏菌、志賀氏菌、溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌等)。
根據這些項目,在實驗室設計時均衡考慮,最終確定「回」字型設計方案。各個房間的用途及要求如下:
1.平面布局
微生物實驗室自成一區,與其他實驗室分開,門口設有門禁,只有相關人員刷卡後才能進入。
微生物實驗室面積310㎡,設有一間局部百級的細菌檢測室,一間真菌檢測室,一間致病菌檢測室,一間洗刷消毒室,一間黴菌培養室,一間細菌培養室,一間微生物儀器鑒定室,一間培養基制備室,一間菌種保存室。
微生物實驗室主潔凈實驗室自成一區,安排在實驗室的靠邊角落處。用密封門限制人員的進出,把有潔凈要求的房間設置在人員干擾少的地方,把輔助房間設置在外部。
考慮微生物試驗操作流程,把檢測室與洗刷消毒室和培養室相鄰,方便人流與物流的分離。為控制人員的出入(人流),只設有一個密封門進入微生物實驗室主潔凈區,操作人員進入物流走廊然後進入准備間,並從准備間分別經過一更、緩沖進入操作區;經過更衣、風淋、緩沖進入局部百級實驗室。物流則由六個傳遞窗實現。
整個平面布局完全能夠滿足國家相關規范及實驗室使用的要求,充分利用了空間,按照實驗操作流程配備了各種功能的房間,操作線路方便快捷。
2.圍護結構、裝潢裝飾
實驗室主題框架為彩鋼板玻璃隔斷,顏色為啞白色。隔斷普通玻璃厚度為8MM,為防止沉積灰塵,窗料使用R25MM鋁合金圓弧壓線;所有二維連接處的內側均使用R50MM鋁合金內圓角,暴露在外的二維連接線的外側則用R100MM鋁合金外角連接;彩鋼板的三維連接處使用三維接點過度,而彩鋼板與牆角地面則用鋁合金槽連接。吊頂材料亦為彩鋼板。
微生物檢測室地面為環氧樹脂材料,具有無縫隙、耐腐蝕、平整、容易清洗的特徵。地面地腳線用陰角鋁材裝飾,美觀且嚴密性好。整個實驗室通過科學設計,精心施工,使實驗室內形成堅固、無縫、平滑、美觀、不反光、不積塵、不生銹、防潮、抗菌、性能優良的無菌表面和內殼。
緩沖間
回字形走廊
3.實驗室基本配置
實驗室除了解決空氣凈化的問題以外,設計時還考慮了一些必備的實驗室器具。
互鎖式傳遞窗:保證了實驗室物流的安全性。
窗內有紫外燈可將污染過的物品拿出實驗室前進行消毒。還保證了室外和室內空氣的隔絕,方便實驗人員的物品傳遞;
互鎖門:本設計為潔凈室設置的電子互鎖,當其中一扇門未關時,另外一扇門將無法打開,這樣就對進入潔凈室內的氣流起到緩沖作用。互鎖門還設有應急開關,當發生意外時,按應急開關方便實驗室人員盡快撤離現場;
多功能微電腦控制儀:包括溫度調節和顯示、送排風機的起停、照明開關、紫外燈控制等等;
微壓差表:可顯示室內外壓差量,並人為按要求控制壓差;
人體熱釋紅外感應器:可感應人體熱量,自動開啟風機送出潔凈風並自動延時關閉,方便實驗人員使用和節省電源;
洗眼器和感應水龍頭:實驗人員眼睛萬一接觸危險物質時沖洗眼睛,感應水龍頭可自動感應人體熱量,放水並自動關閉。
洗眼器
傳遞窗
無菌室微電腦控制器和壓力控制器
4.凈化空調系統與潔凈度技術指標
根據中華人民共和國衛生行業標准《微生物和生物醫學實驗室安全通用准則》以及國家標准《實驗室生物安全通用要求》,生物安全實驗室分為一級、二級、三級、四級,習慣上稱為P1、P2、P3、P4。
二級生物安全實驗室對人體、動植物或環境具有中等危害或具有潛在致病因子,對健康成人、動物和環境不會造成嚴重危害,具有有效的預防和治療措施。P2萬級實驗室即潔凈度10000級,是指大於等於0.5μm的塵粒數在350000至3500000粒/立方米;大於等於5μm的塵粒數在3000至30000粒/立方米。
凈化空調系統能夠做到控制實驗室內溫度、塵埃、細菌、有害氣體的濃度和氣流分布,保證室內人員所需新風量和室內合理的氣流流向,並能維持整個微生物實驗室合適的梯度壓力和定向流動,全面實現「無菌環境保障體系」的目的,減少實驗全過程中一切潛在的感染危險。
5.相關設備
新加坡 ESCO二級生物安全櫃
ULPA超高效過濾器,針對0.12um顆粒系可以達到99.9999%截流效率;高品質高風量風機,自動風量風壓平衡補償;背板及側壁一體圓弧成型無死角,側壁負壓腔;人體工程學10度傾斜角設計,增加操作舒適性;人性化擱手架設計,降低工作疲勞強度;底部檯面不銹鋼一體化設計;
安全櫃的各項氣流數值可在液晶控制屏上實時顯示,並擁有風速自動補償功能;安全櫃裝配功能完善的Sentinel微電腦控制系統,操作人員可根據實際要求自主設定各項參數;Sentinel控制器擁有最新的智能硬體診斷系統,可即時對安全櫃操作系統進行檢測並提供錯誤診斷報告;
靈敏的聲光警報系統可監控安全櫃運行的各項參數,一旦出現任何不安全的狀況,例如前窗處於非安全高度或者風速過低,系統都將給予聲/光警報;安全櫃控制系統將紫外線殺菌燈與前窗位置進行互鎖;ULPA過濾器和UV紫外燈的使用壽命顯示;採用Isocide抗菌塗層可抑制細菌在櫃體表面滋生; 適用范圍:生物安全等級P1~P3級的樣品,允許樣品含有揮發性有毒化學物質或化學氣體,應用於高危險微生物以及有害物質。
日本HIRAYAMA全自動高壓蒸汽滅菌器
電子鎖門,雙感應排氣系統,自動程序啟動,自動保溫,滅菌容積達到50L,自動化程度高,安全、方便、快捷。
超凈工作台
生物顯微鏡和熒光顯微鏡
6.其他功能區域設置
准備間
緩沖間風淋裝置
每個無菌室後面都設有維修通道
③ 我們學校想要建一個微生物實驗室,都需要什麼儀器,大概多少錢
如果只是建微生物實驗室的話需要的儀器大致有:高壓滅菌鍋、恆溫培養箱、恆溫振盪器、分析天平、普通天平、PH計、超凈工作台、移液器等,一般學校不會單獨建微生物實驗室的,如果再加上光照培養箱和光照培養架,就能完成組培實驗,在組培和微生物的基礎上再加上PCR儀、離心機、水浴鍋,電泳儀基本上就能完成高中階段所有的試驗了。希望對你有幫助,價錢要根據平行班的人數和實驗室大小來定,希望對您有幫助,詳細的可與川布蘭聯系9613O7997這個是QQ號。他們是專門建實驗室的,希望對你有幫助。
④ 微生物培養一般需要多長時間
微生物培養一般需要多長時間
微生物有多種培養方法,但具體使用應根據廢水水質、氣候、實際許可的條件等具體工況來確定。傳統的活性污泥培養和馴化過程可以總結為非同步馴化法、同步馴化法和接種馴化法。接種馴化法培養時間較短,是常用的活性污泥培菌方法,適用於大部分工業廢水處理廠。污泥的馴化不是依據微生物處於哪個生長周期,而是在於馴化過程中微生物是否適應水質變化。馴化成功與否的主要標志為出水水質是否達到要求。我之前在SBR中培養的活性污泥,從接種到馴化成功花了10天的時間(比較順利的情況下)。如果在馴化時間一般保持在10~20天左右。易凈水網為你解答,希望可以對你有所幫助。
⑤ 細菌培養及鑒定需要幾天
得看具體的菌株和鑒定方法,一般的真菌,5至7天能長好形態均勻的菌落;鑒定的話,形態鑒定比較復雜,分子鑒定較為簡便,一般一天能搞定
⑥ 應用質譜儀鑒定細菌需要多長時間
基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)是20世紀80年代發展起來的一種新型軟電離有機質譜, 作為一種新興的蛋白質組學檢測技術, 現已廣泛應用於生命科學及相關領域。同時作為一項新興的微生物鑒定技術, 受到了國內外的廣泛關注。與傳統的生化表型鑒定方法和分子生物學方法相比, MALDI-TOF MS具有操作簡單、快速、准確和經濟的特點。早在1975年, ANHALT等[1]利用質譜儀結合高溫裂解技術第1次完成了細菌的鑒定, 從此拉開了質譜鑒定細菌的「 序幕」 。隨著質譜檢測技術的不斷完善和發展, 近年來, MALDI-TOF MS已經成功應用於微生物的鑒定, 顯示了其在細菌、酵母菌等鑒定方面均具有良好的應用價值。眾多的研究表明, MALDI-TOF MS技術對培養出的純菌落進行菌種鑒定具有很高的穩定性及准確性, 對常見細菌和酵母菌的屬的鑒定率能達到97%~99%, 種的鑒定率也能達到85%~97%; 另外, MALDI-TOF MS大大縮短了細菌鑒定的時間, 而且其成本也較常規鑒定方法低[2, 3]。除此之外, MALDI-TOF MS已經能夠成功地用於部分微生物亞種水平的鑒定和細菌耐性的檢測, 但這種方法在大多數情況下是應用於培養出的純菌落的鑒定[3]。
如果能夠從臨床樣本中直接檢測細菌/真菌, 突破細菌/真菌培養陽性率低、培養時間長的瓶頸, 為細菌/真菌感染性疾病的診療提供更快、更准確的病原學依據, 將對臨床及時控制細菌/真菌感染性疾病起到更大的作用。國內外學者已嘗試將質譜技術應用於臨床樣本的直接檢測, 並取得了顯著的進展。本文就MALDI-TOF MS技術在臨床樣本的直接檢測應用作一綜述。
一、MALDI-TOF MS檢測原理
MALDI-TOF MS技術用於微生物鑒定的實質就是檢測具有屬、種或亞型特異性的生物標志的質量信號, 主要是微生物菌體內高豐度、表達穩定和進化保守的核糖體蛋白。MALDI-TOF MS 儀器主要由基質輔助激光解吸離子源(MALDI)和飛行時間質量檢測器(TOF)兩部分組成。MALDI的原理是用一定強度的激光照射樣本與基質形成的共結晶薄膜, 基質從激光中吸收能量而汽化, 並迅速降解, 使樣本分解吸附, 基質和樣本之間發生電荷轉移從而使樣本分子發生電離; TOF的原理是帶有電荷的樣本分子在電場作用下加速飛過飛行管道, 因為離子的質荷比與離子的飛行時間呈正比, 所以不同質量的離子因達到檢測器的飛行時間不同而被檢測, 以離子峰為縱坐標、離子質荷比為橫坐標形成特徵性的質量圖譜。將不同種屬微生物經MALDI-TOF分析所形成的質量圖譜與資料庫中的參考圖譜進行比較, 從而實現對目標微生物種或菌株的區分和鑒定[2]。
二、MALDI-TOF MS直接檢測臨床樣本的流程
臨床樣本直接檢測的流程主要包括3個部分:臨床樣本的預處理、樣本上機檢測和對比蛋白質指紋圖譜資料庫得出鑒定結果。由於目前報道最多的臨床樣本是陽性血培養瓶和中段尿樣本, 下面將以這二者為例介紹其直接檢測的流程, 其它臨床樣本的檢測流程與之類似。
(一)臨床樣本預處理
MALDI-TOF MS直接用於臨床樣本的檢測有2個基本的要求:(1)臨床樣本中細菌的量。為了得到准確的鑒定圖譜, MALDI-TOF MS技術對置於靶板上的細菌的最低檢測限約為(1× 10^4)~(1× 10^6)cfu/mL。若要直接檢測擬似血流感染的血液樣本以及擬似泌尿系統感染的中段尿等臨床樣本中的病原菌, 首先必須富集細菌; (2)臨床樣本的質。由於血液和血培養瓶中的大分子成分如血紅蛋白和其它蛋白成分、尿液中的白細胞等有機成分會干擾細菌的譜峰, 所以直接檢測前需要採取預處理措施去除這些干擾因素。
1.陽性血培養瓶直接檢測 直接檢測陽性血培養瓶的細菌濃度常常需要1× 10^7 cfu/mL[2, 4]。由於在血流感染患者血液中的細菌量常常很低(最低可< 1~10 cfu/mL), 因此對血樣本的直接檢測需要一個增菌的過程, 即採用血培養瓶增菌。目前已報道的陽性血培養病原菌預處理程序各不相同, 但預處理過程主要包含了以下2個步驟:(1)將細菌從血細胞中分離出來。先應用溫和去污劑(如吐溫-80、十二磺基硫酸鈉、皂素等)將血液中的血細胞溶解, 然後通過不同的流程(離心、洗滌)去除其它的干擾因素, 純化要鑒定的細菌樣本; (2)將菌體中的蛋白質抽提出來。最常用的是混合溶劑處理法, 使用甲酸/乙腈溶液對樣本進行處理來抽提蛋白, 利用2種溶劑的混合作用將菌體表面的蛋白和存在於細胞
⑦ 微生物的菌種鑒定方法與步驟(鑒定到「株」一級)
首先如果你的菌株是自然界中分離得到,就只能鑒定到種,不能鑒定到株,因為多多少少和其他株系的細菌有區別,即便你做了一些特徵的鑒定,發現和某一株細菌一模一樣,你也沒有理由說你的細菌就是那一株細菌,因為你不可能把所有的特徵都做完,株和株之間的關系就相當於不同的人之間的關系,世界上不可能有完全相同的兩個人。除非你知道你的細菌本來就是某一株細菌擴增出來的(而且要保證沒有變異,否則就是一個新株),可是這樣就沒必要鑒定了。
菌種鑒定一般就只要提取基因組DNA,然後PCR擴增16srDNA片段,上GeneBank或者Eztaxon對比即可。一般序列相似度在97%以上就可以認為是同種細菌(當然也有例外,DNA序列僅僅是一個參考指標)。