通過哪些方法可獲得微生物的純培養

㈠ 如何獲得某一細菌的純培養（或病毒的純培養)簡述整個過程。

先對分泌物進行第一次培養後，挑出其中的可疑菌落，一環就夠了，然後接種到一個新的培養基再培養，這就是細菌的分離純化過程，也就是純培養，整個過程一定要注意無菌操作，挑選可以菌落時，一定要注意和雜菌區分。

很多細菌無法培養。能培養的細菌需要去查它的培養基配方，和培養時的條件。病毒一般是作為二元培養物而存在，也就是感染易感菌。當然也有許多並不不能培養。

(1)通過哪些方法可獲得微生物的純培養擴展閱讀：

純培養最重要的是在於微生物的生理研究，方法是依靠滅菌和分離，是由巴斯德（L．Pasteur）和柯赫（R．Koch）建立起來的。在自然界中，有的培養條件很困難，特別是具有密切共生關系的生物及進行寄生性營養的生物；也有一些在理論上不可能進行純粹培養的生物。

㈡ 怎樣獲得純培養物

利用固體培養基，讓微生物在培養基的表面生長，就可以獲得微生物的純培養，但是這需要進行一個操作，就是劃線分離。通過使用接種環劃線分離，劃線過程中，接種環上的細菌不斷減少，逐漸就可以分離出單個菌落，當然這是需要一個經驗和技巧的，經驗越豐富的人，通過劃線分離，獲得單個菌落的效果就越好。

㈢ 怎樣獲得某種微生物的純培養

常用的純培養物分離發法：
（1）稀釋塗布
（2）平板劃線
（3）單細胞直接分離：對於個頭大的細胞可以通過顯微操作儀直接進行分離
篩選過程：采樣：根據待分離的微生物性質選擇特定的環境取樣
富集：設計特定的有利於待分離菌株生長的環境，同時抑制其他菌株生長
初篩：設計選擇性培養基，稀釋塗布，挑選目標菌株（產透明圈等）劃線
復篩：將獲得的單菌落接種於復篩培養基，給於一定條件進行培養，對產物產率、性能等相關標准進行評價，即可挑出所需要的菌株

㈣ 獲得微生物純培養的方法及特點

一、固體培養基分離
1、稀釋倒平板
特點：菌落分離較為均勻，進行微生物計數結果相對准確。但操作相對麻煩，熱敏感菌有時易被燙死，而嚴格好氧菌也可能因被固定在培養基中生長受到影響。
2、塗布平板法
特點：操作相對簡單，是較常使用的常規方法。但有時會因塗布不均勻使某些部位的菌落不能分開，進行微生物計數時需對稀釋和塗布過程的操作特別注意，否則不易得到准確的結果。
3、平板劃線法
特點：操作簡單，多用於對已有純培養的確認和再次分離。
應用：這三種方法可用於所有能在固體培養基表面形成菌落的微生物的純培養分離。並且，通過選用適當的選擇平板及培養條件，可直接分離各種具有特定生理特徵的微生物。和厭氧罐或厭氧手套箱技術結合，這3種方法也可用於獲得各種厭氧菌的純培養。
4、稀釋搖管法
特點：稀釋倒平板法的一種變通形式，但由於菌落形成在瓊脂柱的中間，觀察和挑取都相對困難。
應用：在缺乏專業的厭氧操作設備的情況下對嚴格厭氧菌進行分離和觀察。
二、液體培養基分離
1、稀釋法
特點：工作量大，是否獲得純培養需依靠統計學的推測。
應用：不能或不易在固體培養基上生長的微生物進行純培養分離或數量統計。
2、富集培養
特點：一般不能直接獲得微生物的純培養，在通過富集培養使原本在自然環境中佔少數的微生物的數量大大提高後，需再通過平板法進行相應微生物純培養的分離和檢測。
應用：
（1）根據某種微生物的特殊生長要求，按照意願從自然界中對這種微生物進行有針對性的有效分離；
（2）分離培養出由科學家設計的特定環境中能生長的微生物，盡管我們並不知道什麼微生物能在這種特定的環境中生長。
三、顯微操作
單細胞（孢子）挑取
特點：分離過程直觀，可靠，但對儀器和操作技術要求較高，多限於高度專業化的科學研究。而挑取的微生物單細胞或孢子需經固體或液體培養基培養後才能獲得其純培養物。
應用：從樣品中直接分離所需的微生物細胞或孢子，獲得其純培養。

㈤ 一株細菌被其他微生物污染如何重新獲得其純培養物利用何種方法對該菌株進行

用「微生物分離純化」的方法。
微生物分離純化是研究微生物的基本方法。將特定的微生物個體從群體中或從混雜的微生物群體中分離出來的技術叫做分離；在特定環境中只讓一種來自同一祖先的微生物群體生存的技術叫作純化。
分離技術主要是稀釋和單細胞培養。稀釋是在液體中或在固體表面上高度稀釋微生物群體，使單位體積或單位面積僅存留一個單細胞，並使此單細胞增殖為一個新的群體。最常用的為「平板劃線法」。液體培養後的培養液經適當稀釋後，用「平板塗布法」，也可以得到純培養微生物。

㈥ 設計一個如何獲得微生物的純培養的實驗

具體看你要培養什麼類型的微生物呢？
大致就分以下幾步吧1.培養基的配製2.菌種的接種操作3,菌種的保藏
以細菌培養為例，實驗操作
1、制備牛肉膏蛋白腖固體培養基
⑴制備流程：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板
⑵實驗注意事項
①全程要求無菌操作：無菌技術除了用來防止實驗室的培養物被其他外來微生物污染外，還能有效避免操作者自身被微生物感染。
②50℃左右開始倒平板：培養基用高壓滅菌鍋滅菌後，需冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板。感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進行倒平板了。操作時使錐形瓶的瓶口通過火焰灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養基。
③冷卻後倒置的原因：平板冷凝後，培養皿蓋上會凝結小水珠，凝固後的培養基表面的濕度也比較高。將平板倒置，即可以使培養皿表面的水分更好的揮發，又可以防止培養皿蓋上的水珠落入培養基，造成污染。
④在倒平板過程中，不能將培養基濺在培養皿蓋與皿底之間的部位，因為空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養基上滋生。
2、純化大腸桿菌的接種方法（即微生物的接種方法）
微生物最常用的接種方法是平板劃線法和稀釋塗布平板法。
⑴平板劃線法
①原理
連續劃線：通過接種環在瓊脂固體培養基表面連續劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面。由於劃線後，線條末端細菌數目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數目隨著劃線次數的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。
②特點
操作簡單，但是單菌落不易形成。
③操作注意事項
A、第一次劃線及每次劃線之前接種環都需要灼燒滅菌，劃線操作結束時仍需灼燒接種環，每次灼燒的目的不同。
Ⅰ 第一次灼燒目的：避免接種環上可能存在的微生物污染培養物。
Ⅱ 每次劃線前灼燒：殺死上次劃線結束後接種環上殘留的菌種，使每次劃線的菌種來自上次劃線末端。
Ⅲ 劃線結束灼燒：殺死接種環上殘留的菌種，避免細菌污染環境和感染操作者。
B、灼燒接種環之後，要冷卻後才能伸入菌液，以免溫度太高，殺死菌種。
C、劃線時最後一個區域不要與第一個區域相連。
⑵稀釋塗布平板法
①原理
將菌液進行一系列的梯度稀釋，然後將不同稀釋度的菌液分別塗布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養皿表面形成單個菌落。
②特點
操作復雜，但是但菌落容易分離
③操作注意事項
A、將塗布器末端浸在盛有體積分數為70%的酒精的燒杯中。取出時，要讓多餘的酒精在燒杯中滴盡，然後將沾有少量酒精的塗布器在火焰上引燃。且待酒精燃盡後，冷卻8～10s後，方能進行塗布。
B、操作中一定要注意防火！不要將過熱的塗布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精。
C、在所用操作過程中都應在火焰附近進行。應從操作的各個細節上保證「無菌」。如：對塗布器等接種器皿進行消毒和滅菌、酒精燈與培養皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等。
3、結果分析與評價
⑴培養基制備成功的標准
如果未接種的培養基在恆溫箱中保溫1～2天後無菌落生長，說明培養基的制備是成功的，否則實驗失敗需要重新制備。
⑵接種操作成功的標准
如果培養基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，並符合大腸桿菌的菌落特點，則說明接種操作是符合要求的；如果培養基上出現了其他菌落，則說明接種過程中，無菌操作還未達到要求，實驗失敗，需要分析原因，再次制備。
⑶及時細致地觀察與記錄
培養12h與24h後的大腸桿菌菌落的大小會有明顯不同，及時觀察記錄的同學會發現這一點，並能觀察到其他一些細微變化。可用圖表來記錄菌落的顏色、大小、形狀、數目等。
4、要點：菌種的保藏
⑴目的
菌種放在低溫環境中保藏的目的是降低新陳代謝速率，延緩菌種衰老。
⑵方法
①臨時保藏法：適用於頻繁使用的菌種。
方法：將菌種接種到固體斜面培養基上，在適宜的溫度下培養。當菌落長成以後，將試管置於4℃的冰箱中保藏。
缺點：保存時間不長，菌種容易被污染或產生變異。
②甘油冷凍管藏法：適用於需要長期保存的菌種。
方法：在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油後滅菌。將1mL培養的菌液轉移到甘油瓶中，與甘油充分混勻後，放在-20℃的冷凍箱中保藏。

㈦ 實驗室微生物菌種純化方法

1、傾注平板法
首先把微生物懸液通過一系列稀釋，取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40~50°左右的營養瓊脂培養基充分混合，然後把這混合液傾注到無菌的培養皿中，待凝固之後，把這平板倒置在恆箱中培養。單一細胞經過多次增殖後形成一個菌落，取單個菌落製成懸液，重復上述步驟數次，便可得到純培養物 2、塗布平板法
首先把微生物懸液通過適當的稀釋，取一定量的稀釋液放在無菌的已經凝固的營養瓊脂平板上，然後用無菌的玻璃刮刀把稀釋液均勻地塗布在培養基表面上，經恆溫培養便可以得到單個菌落。3、平板劃線法
最簡單的分離微生物的方法是平板劃線法。用無菌的接種環取培養物少許在平板上進行劃線。劃線的方法很多，常見的比較容易出現單個菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、放射法、四格法等。當接種環在培養基表面上往後移動時，接種環上的菌液逐漸稀釋，最後在所劃的線上分散著單個細胞，經培養，每一個細胞長成一個菌落。
4、富集培養法
富集培養法的方法和原理非常簡單。我們可以創造一些條件只讓所需的微生物生長，在這些條件下，所需要的微生物能有效地與其他微生物進行競爭，在生長能力方面遠遠超過其他微生物。所創造的條件包括選擇最適的碳源、能源、溫度、光、pH、滲透壓和氫受體等。在相同的培養基和培養條件下，經過多次重復移種，最後富集的菌株很容易在固體培養基上長出單菌落。如果要分離一些專性寄生菌，就必須把樣品接種到相應敏感宿主細胞群體中，使其大量生長。通過多次重復移種便可以得到純的寄生菌。
5、厭氧法
在實驗室中，為了分離某些厭氧菌，可以利用裝有原培養基的試管作為培養容器，把這支試管放在沸水0浴中加熱數分鍾，以便逐出培養基中的溶解氧。然後快速冷卻，並進行接種。接種後，加入無菌的石蠟於培養基表面，使培養基與空氣隔絕。另一種方法是，在接種後，利用N2或CO2取代培養基中的氣體，然後在火焰上把試管口密封。有時為了更有效地分離某些厭氧菌，可以把所分離的樣品接種於培養基上，然後再把培養皿放在完全密封的厭氧培養裝置中。

㈧ 微生物培養的方法有哪些

微生物培養法是在人為條件下繁殖微生物的方法。根據微生物的種類以及對養料、溫度、氧氣、水分、酸鹼度等環境條件的要求不同，並聯系生產和實驗上的具體要求，可有不同的培養方法。可分好氣培養法和厭氣培養法兩類。中海生物技術的培養基一是好氣微生物培養法，常用：
①搖床培養法，即將微生物接種於盛有液體培養基的三角瓶後，放在恆溫培養室中的搖床上作有節奏的振盪，使空氣不斷進入培養液中，促其良好生長;
②淺盤培養法，又稱表面培養法，在盤內放一淺層培養基，使微生物能夠充分接觸空氣，而有利於生長繁殖，但此法所需空間大，並且容易污染雜菌;
③深層培養法，適用於好氣微生物的大規模發酵培養，在大容積的液體培養基中，通入無菌空氣，並不斷攪拌，可使微生物充分接觸空氣，迅速繁殖並積累代謝產物。二是厭氣微生物培養法，實驗室常用化學還原劑或抽氣機吸除培養基中的分子氧，也有用靜止狀態的深層培養法。在生產中常用密封式發酵罐或不通風的固體發酵法。

㈨ 分離純化微生物的方法有哪些各方法適用分離什麼菌種

主要有：劃線法、倒平板法、塗布法，根據分離的菌種選擇不同的培養基。

稀釋混合倒平板法、稀釋塗布平板法、平板劃線分離法、稀釋搖管法、液體培養基分離法、單細胞分離法、選擇培養分離法等。其中前三種方法最為常用，不需要特殊的儀器設備，分離純化效果好。

從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。在分子生物學的研究及應用中，不僅需要通過分離。

分離技術

主要是稀釋和選擇培養，稀釋是在液體中或在固體表面上高度稀釋微生物群體，使單位體積或單位面積僅存留一個單細胞，並使此單細胞增殖為一個新的群體。最常用的為平板劃線法。

如果所要分離的微生物在混雜的微生物群體中數量極少或者增殖過慢而難以稀釋分離時，需要結合使用選擇培養法，即選用僅適合於所要分離的微生物生長繁殖的特殊培養條件來培養混雜菌體，改變群體中各類微生物的比例，以達到分離的目的。為保證分離到的微生物是純培養，分離時必須用。

以上內容參考：網路-微生物分離純化