較小微生物細胞可用什麼計數

㈠ 微生物細胞大小測定和顯微計數方法各有哪些優缺點

常用測定微生物生長的方法有：
1)、稱乾重法.可用離心法或過濾法測定.優點：可適用於一切微生物,缺點：無法區別死菌和活菌.
2)、比濁法.原理：由於微生物在液體培養時,原生質的增加導致混濁度的增加,可用分光光度計測定.優點：比較准確.
3)、測含氮量,大多數微生物的含氮量占乾重的比例較一致,根據含氮量再乘以6.25即可測得其粗蛋白的含量.
4)、血球計數板法.優點：簡便、快速、直觀.缺點：結果包括死菌和活菌.
5)、液體稀釋法.對未知菌樣作連續的10倍系列稀釋,經培養後,記錄每個稀釋度出現生長的試管數,然後查MPN表,再根據樣品的稀釋倍數就可計算其中的活菌含量.優點：可計算活菌數,較准確.缺點：比較繁瑣.
6)、平板菌落計數法.取一定體積的稀釋菌液塗布在合適的固體培養基,經培養後計算原菌液的含菌數.優點,可以獲得活菌的信息.缺點：操作繁瑣,需要培養一定時間才能獲得,測定結果受多種因素的影響.

㈡ 微生物計數方法有哪些

微生物計數方法有：血細胞計數法、稀釋塗布平板法、濾膜法、比濁法、顯微鏡直接計數法等等。
1.血細胞計數法
將稀釋的菌液樣品滴在血細胞計數板上，在顯微鏡下計算4~5個中格的細菌數，並求出每個小格所含細菌的平均數，再以此為依據，估算總菌數。
①此法的缺點是不能區分死菌和活菌。
②對壓在小方格界線上的細菌，應當取平均值計數。
③此法可用於測定培養液中酵母菌種群數量的變化。
2.稀釋塗布平板法
原理：每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落。培養基表面生長的一個菌落，來源於樣品稀釋液中的一個活菌。
①這一方法常用來統計樣品中活菌的數目
②統計的菌落數往往比活菌的實際數目低，原因是當兩個活多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。因此統計結果一般用菌落數而不是用活菌數來表示。
③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含細菌、酵母、芽孢與孢子等的數量均可用此法測定。但不適於測定樣品中絲狀體微生物，例如放線菌或絲狀真菌或絲狀藍細菌等的營養體等。
④此法若不培養成菌落，可通過將一定量的菌液均勻地塗布在玻片上的一定面積上，經固定染色後在顯微鏡下計數，這樣又稱塗片計數法。染色可用台盼藍，台盼藍能使死細胞染成藍色，可分別計數死細胞和活細胞。

㈢ 微生物計數方法有哪些

??測定微生物細胞數目的方法有很多，介紹幾種1。血細胞計數法將稀釋的菌液樣品滴在血細胞計數板上，在顯微鏡下計算4~5個中格的細菌數，並求出每個小格所含細菌的平均數，再以此為依據，估算總菌數。①此法的缺點是不能區分死菌和活菌。②對壓在小方格界線上的細菌，應當取平均值計數。??③此法可用於測定培養液中酵母菌種群數量的變化2。稀釋塗布平板法原理：每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落。培養基表面生長的一個菌落，來源於樣品稀釋液中的一個活菌。①這一方法常用來統計樣品中活菌的數目②統計的菌落數往往比活菌的實際數目低，原因是當兩個活多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。??因此統計結果一般用菌落數而不是用活菌數來表示。③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含細菌、酵母、芽孢與孢子等的數量均可用此法測定。但不適於測定樣品中絲狀體微生物，例如放線菌或絲狀真菌或絲狀藍細菌等的營養體等。④此法若不培養成菌落，可通過將一定量的菌液均勻地塗布在玻片上的一定面積上，經固定染色後在顯微鏡下計數，這樣又稱塗片計數法。??染色可用台盼藍，台盼藍能使死細胞染成藍色，可分別計數死細胞和活細胞。3。濾膜法濾膜法是當樣品中菌數很低時，可將一定體積的湖水、海水或飲用水燈樣品通過膜過濾器。然後將濾膜乾燥、染色，並經處理使膜透明，再在顯微鏡下計算膜上（或一定面積上）的細菌數。??此法也可以通過培養觀察形成的菌落數來推算樣品中的菌數。例如測定飲用水中大腸桿菌的數目：將已知體積的水過濾後，將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養。在該培養基上大腸桿菌的菌落呈現黑色，可根據培養基上黑色菌落的數目，計算出水樣中大腸桿菌的數目。此法也是統計樣品中活菌的數目。??4。比濁法原理是在一定范圍內，菌是懸液中細胞濃度與混濁度成正比，即與光密度成正比，菌越多，光密度越大。因此可藉助與分光光度計，在一定波長下，測定菌懸液的光密度，以光密度表示菌量。實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內，否則不準確。??5。顯微鏡直接計數法在課本生物選修1生物技術實踐P22中「除了上述活菌計數法外，顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法。」這里說的顯微鏡直接計數，我認為應該是在稀釋塗布的基礎上不培養成菌落而通過染色的方法在顯微鏡下直接計數。再如濾膜法也一樣，可以有兩種情況。??另外，微生物計數法發展迅速，多種多樣的快速、簡易、自動化的儀器和裝置等方法可以用來統計微生物的數目。

㈣ 微生物計數方法有哪些

測定微生物計數的方法有很多,主要有以下幾種： 1.血細胞計數法 將稀釋的菌液樣品滴在血細胞計數板上,在顯微鏡下計算4~5個中格的細菌數,並求出每個小格所含細菌的平均數,再以此為依據,估算總菌數. ①此法的缺點是不能區分死菌和活菌. ②對壓在小方格界線上的細菌,應當取平均值計數. ③此法可用於測定培養液中酵母菌種群數量的變化 2.稀釋塗布平板法 原理：每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落.培養基表面生長的一個菌落,來源於樣品稀釋液中的一個活菌. ①這一方法常用來統計樣品中活菌的數目 ②統計的菌落數往往比活菌的實際數目低,原因是當兩個活多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落.因此統計結果一般用菌落數而不是用活菌數來表示. ③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含細菌、酵母、芽孢與孢子等的數量均可用此法測定.但不適於測定樣品中絲狀體微生物,例如放線菌或絲狀真菌或絲狀藍細菌等的營養體等. ④此法若不培養成菌落,可通過將一定量的菌液均勻地塗布在玻片上的一定面積上,經固定染色後在顯微鏡下計數,這樣又稱塗片計數法.染色可用台盼藍,台盼藍能使死細胞染成藍色,可分別計數死細胞和活細胞. 3.濾膜法 濾膜法是當樣品中菌數很低時,可將一定體積的湖水、海水或飲用水燈樣品通過膜過濾器.然後將濾膜乾燥、染色,並經處理使膜透明,再在顯微鏡下計算膜上（或一定面積上）的細菌數. 此法也可以通過培養觀察形成的菌落數來推算樣品中的菌數.例如測定飲用水中大腸桿菌的數目：將已知體積的水過濾後,將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養.在該培養基上大腸桿菌的菌落呈現黑色,可根據培養基上黑色菌落的數目,計算出水樣中大腸桿菌的數目. 此法也是統計樣品中活菌的數目. 4.比濁法 原理是在一定范圍內,菌是懸液中細胞濃度與混濁度成正比,即與光密度成正比,菌越多,光密度越大.因此可藉助與分光光度計,在一定波長下,測定菌懸液的光密度,以光密度表示菌量.實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內,否則不準確. 5.顯微鏡直接計數法 在課本生物選修1生物技術實踐P22中「除了上述活菌計數法外,顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法.」這里說的顯微鏡直接計數,我認為應該是在稀釋塗布的基礎上不培養成菌落而通過染色的方法在顯微鏡下直接計數.再如濾膜法也一樣,可以有兩種情況. 另外,微生物計數法發展迅速,多種多樣的快速、簡易、自動化的儀器和裝置等方法可以用來統計微生物的數目.

㈤ 微生物細胞生長的測定方法

微生物生長的測定方法有多種，根據研究對象或目的選擇。(一)微生物細胞數目的檢測方法1．總細胞計數法 顯微鏡直接記數法和比濁法(1)血球計數板法 血球汁數板中央有一個體積一定的計數室( 0.1mm3)。將菌懸液或孢子懸液在顯微鏡下計數，然後再按一定公式計算出細菌總數。 (2)塗片計數法 將一定體積(0.1ml)的樣品，均勻地塗在載片的一定面積內(1cm2)。在顯微鏡下計算細胞數量，推算1cm2所含細胞數目。（3）比濁法：菌體細胞培養液混濁，在一定范圍內，菌體數量與渾濁成正比，故可通過分光光度計或比色計求出渾濁度，通過與標准曲線對比，求出樣品中菌液濃度，算出個體數。特點：所得結果包括死菌和活菌。2. 活菌計數法（平板菌落記數法）：是通過測定樣品在培養基上形成的菌落數來間接確定其活菌數的方法．故又稱平板計數法。特點：計算的結果是活菌落。注意：樣品稀釋度。一個活細胞形成一個菌落。（1）塗布平板法 用滅菌的塗布器將一定體積(不大於0.1ml)的適當稀釋度的菌液塗布在瓊脂培養基的表面，然後保溫培養有到菌落出現，記錄菌落的數目並換算成每毫升試樣中的活細胞數量。（2）倒平板法 將樣品稀釋到一定濃度，取一定體積(0.1—1ml)倒入冷卻至45℃的固體培養基混合，製成平板，培養後，出現菌落，由菌落數推算出的菌總數。3 濾膜過濾法：樣品同過微孔濾膜後，細菌收集在濾膜上，然後將濾膜放在培養基中培養，通過菌落計數求出樣品活菌落。 (二)微生物生長量和生理指標的測定方法測定微生物生長量及相關的生理指標，常用以下方法：1．濕重法：將單位體積微生物培養液離心，收集沉澱物，然後再稱重。2．乾重法：將離心得到的細胞沉澱物，置於100---105℃的烘箱中乾燥過夜除去水分，然後再稱重。特點：適合與菌體濃度高的樣品。表示菌體生長量。3、測定細胞內菌種化學成分：方法難，操做困難，但較准確。細胞內菌種化學成分多少（∝），反映群體中菌體數量的多少。（1） 測定含氮量：N在細胞內穩定，測定總N量，粗蛋白=N*6.25g。（2） 測定DNA：微生物細胞DNA含量穩定，採用熒光指示劑或染色劑與菌體DNA作用熒光比色或分光光度法測得DNA的含量。（3） 其他生理指標：如測定碳、磷、RNA、ATP、DAP(二氨基庚二酸)的含量等。 (二)絲狀微生物菌絲長度的測定方法 對於絲狀微生物。特別是絲狀真菌，通常是通過測定菌絲的長度變化來反映它們的生長速率。方法有： 1．培養基表面菌體生長速率測定法 主要測定一定時間內在瓊脂培養基表面的菌落直徑的增加值。 2．培養料中菌體速率測定法主要測定一定時間內在固體培養料中菌絲體向前延伸的距離。如：栽培食用菌的培養料。 3．單個菌絲頂端生長速率測定法 在顯微鏡下藉助目鏡測微尺測定在一定時間內單個菌絲的伸長長度。

㈥ 微生物計數方法有哪些我想知道詳細的操作步驟

微生物的顯微直接計數法

一、實驗目的
了解血球計數板的構造、計數原理和計數方法，掌握顯微鏡下直接計數的技能。
二、實驗原理
測定微生物細胞數量的方法很多，通常採用的有顯微直接計數法和平板計數法。
顯微計數法適用於各種含單細胞菌體的純培養懸浮液，如有雜菌或雜質，常不易分辨。菌體較大的酵母菌或黴菌孢子可採用血球計數板，一般細菌則採用彼得羅夫·霍澤（Petrof Hausser）細菌計數板。兩種計數板的原理和部件相同，只是細菌計數板較薄，可以使用油鏡觀察。而血球計數板較厚，不能使用油鏡，計數板下部的細菌不易看清。
血球計數板是一塊特製的厚型載玻片，載玻片上有4條槽而構成3個平台。中間的平台較寬，其中間又被一短橫槽分隔成兩半，每個半邊上面各有一個計數區（圖21-1），計數區的刻度有兩種：一種是計數區分為16個大方格（大方格用三線隔開），而每個大方格又分成25個小方格；另一種是一個計數區分成25個大方格（大方格之間用雙線分開），而每個大方格又分成16個小方格。但是不管計數區是哪一種構造，它們都有一個共同特點，即計數區都由400個小方格組成。
計數區邊長為1mm，則計數區的面積為l mm2，每個小方格的面積為1/400mm2。蓋上蓋玻片後，計數區的高度為0.1mm，所以每個計數區的體積為0.1mm3，每個小方格的體積為1/4000mm3。
使用血球計數板計數時，先要測定每個小方格中微生物的數量，再換算成每毫升菌液（或每克樣品）中微生物細胞的數量。
已知：1mm3體積=10 mm×10 mm×10 mm= 1000mm3
所以：1mm3體積應含有小方格數為1000mm3/1/4000mm3=4×106個小方格，即系數K=4×106 。
因此：每ml菌懸液中含有細胞數= 每個小格中細胞平均數（N）×系數（K）×菌液稀釋倍數（d）
三、實驗器材
1．活材料：釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）斜面或培養液。
2．器材：顯微鏡、血球計數板、蓋玻片（22mm×22mm）、吸水紙、計數器、滴管、擦鏡紙。
四、實驗方法
1．視待測菌懸液濃度，加無菌水適當稀釋（斜面一般稀釋到10-2），以每小格的菌數可數為度。
2．取潔凈的血球計數板一塊，在計數區上蓋上一塊蓋玻片。
3．將酵母菌懸液搖勻，用滴管吸取少許，從計數板中間平台兩側的溝槽內沿蓋玻片的下邊緣摘入一小滴（不宜過多），讓菌懸液利用液體的表面張力充滿計數區，勿使氣泡產生，並用吸水紙吸去溝槽中流出的多餘菌懸液。也可以將菌懸液直接滴加在計數區上，不要使計數區兩邊平台沾上菌懸液，以免加蓋蓋玻片後，造成計數區深度的升高。然後加蓋蓋玻片（勿使產生氣泡）。4．靜置片刻，將血球計數板置載物台上夾穩，先在低倍鏡下找到計數區後，再轉換高倍鏡觀察並計數。由於生活細胞的折光率和水的折光率相近，觀察時應減弱光照的強度。
5．計數時若計數區是由16個大方格組成，按對角線方位，數左上、左下、右上、右下的4個大方格（即100小格）的菌數。如果是25個大方格組成的計數區，除數上述四個大方格外，還需數中央l個大方格的菌數（即80個小格）。如菌體位於大方格的雙線上，計數時則數上線不數下線，數左線不數右線，以減少誤差。
6．對於出芽的酵母菌，芽體達到母細胞大小一半時，即可作為兩個菌體計算。每個樣品重復計數2—3次（每次數值不應相差過大，否則應重新操作），求出每一個小格中細胞平均數（N），按公式計算出每ml（g）菌懸液所含酵母菌細胞數量。
7．測數完畢，取下蓋玻片，用水將血球計數板沖洗干凈，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免損壞網格刻度。洗凈後自行晾乾或用吹風機吹乾，放入盒內保存。
五、實驗作業：
將實驗結果填入下表中：
計數次數 每個大方格菌數 稀 釋
倍 數 試管斜面中的總菌數 平均值
1 2 3 4 5
第一次
第二次

㈦ 你認為所有的微生物細胞都可以利用血球計數板進行計數嗎為什麼

不能，稍微小點的細菌用血球板計數就不準。
血球計數板在顯微鏡下直接進行測定。它觀察在一定的容積中的微生物的個體數目，然後推算出含菌數，簡便快捷。但是在計數時包括死活細胞均被計算在內，還有微小雜物也被計算在內。這樣得出結果往往偏高，因此適用於對形態個體較大的菌體或孢子進行計數。

㈧ 測定微生物的生物量有哪些主要方法

測定微生物的生物量有哪些主要方法
測定的方法主要有四種：

1.直接計數測定：根據微生物種類，有血球計數板和細菌計數板；

2.比濁法：根據菌懸液的濃度在一定范圍內與光密度成正比，可以用分光光度計測OD值，用OD值表示樣品菌液濃度；

3.核酸計數法：熒光定量PCR技術；

4.活菌計數法：MPN和平板計數法由於測定方法的限制。新鮮土樣經氯仿熏蒸後（24h），土壤微生物死亡細胞發生裂解，釋放出微生物生物量碳，用一定體積的LK2SO4溶液提取土壤，借用有機碳自動分析儀測定微生物生物量碳含量。根據熏蒸土壤與未熏蒸土壤測定有機碳的差值及轉換系數（KEC），從而計算土壤微生物生物量碳。

㈨ 測定微生物的生物量有哪些主要方法

一般都會用到可見分光光度法，原理是微生物的濃度與吸光度成正比。還有10倍，100倍。。梯度稀釋到一定范圍後顯微鏡觀察進行細胞計數。
1.直接計數測定 根據微生物種類,有血球計數板和細菌計數板；或者用電子計數器計數
2.比濁法 根據菌懸液的濃度在一定范圍內與光密度成正比,可以用分光光度計測OD值,用OD值表示樣品菌液濃度
3.核酸計數法 熒光定量PCR技術
4.活菌計數法 MPN和平板計數法
由於測定方法的限制,前幾種計數結果不太准確,目前應用廣泛的是第四種
對糞大腸菌群和光合細菌可用MPN,對其他微生物可用平板計數法

㈩ 高中生物幾個計數法。

1、取樣器取樣法是用來調查土壤小動物的種類時的取樣方法；

2、目測估計法和記名統計法 是調查土壤小動物的時候 具體計數的方法.一個准確一個模糊；

3、顯微計數法 是在顯微鏡下觀察並計算某種微生物的數量的方法；

4、稀釋塗布平板法是用稀釋後 在培養基上形成 菌落的方法來計算 細菌等微生物的數量的方法。

(10)較小微生物細胞可用什麼計數擴展閱讀：

血球計數法是種統計培養液中微生物的多少的方法，而稀釋塗布平板法是一種接種方法。

血球計數法是在顯微鏡下直接進行測定，方便快捷並且儀器損耗較小。缺點是在一定的容積中的微生物的個體數目包括死活細胞均被計算在內，還有微小雜物也被計算在內。這樣得出結果往往偏高。

這種方法常用於形態個體較大的菌體或孢子，若是觀測細菌或是黴菌，就要換成油鏡。

稀釋塗布平板法將待測樣品製成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布於平板中的培養基內。經培養後，由單個細胞生長繁殖形成菌落。