在微生物室接到一個標本應該怎麼做

⑴ 做微生物實驗的步驟

1、准備工作，培養基的配製及滅菌（121-126度滅30分鍾高壓蒸汽式滅菌），玻璃器皿的滅菌（170度滅2小時乾熱滅菌，也可用濕熱滅菌）若量大可加長滅菌時間。

⑵ 微生物檢驗標本採集規范

微生物檢驗標本採集規范

正確採集、運送、保存及處理微生物檢驗標本，對於保證微生物檢驗質量至關要，為了准確檢出病原菌，避免漏檢及誤診，臨床醫護人員及實驗室工作人員應掌握微生物檢驗標本採集、運送、保存及處理原則。下面是我為大家帶來的關於微生物檢驗標本採集規范的知識，歡迎閱讀。

標本採集的`一般原則：

1、早期採集：採集時間最好是病程早期，急性期，且必須在使用抗菌葯物(俗稱消炎葯)之前採集，確保病原菌的檢出;

2、無菌操作：採集標本時應盡量減少或避免感染部位附近皮膚或黏膜常居菌群污染和防止外源性細菌污染標本，採集的標本盛於無菌容器內送檢。盛裝標本的容器不能使用消毒劑處理，標本中也不得添加防腐劑，以免降低病原菌的分離率;

3、適量標本：標本量過少可能導致假陰性結果。

各種標本採集注意事項：

一、呼吸道標本採集

(1) 送檢指征：凡是發熱、咳嗽和咳痰，痰呈膿性，黏稠或血性，並伴有胸痛，氣急，外周血白細胞總數及中性粒細胞比例明顯增高，應採集痰液或下呼吸道標本。

(2) 標本採集時間：a、以晨痰為好，患者清晨用涼開水反復漱口後用力自氣管咳出第一口痰，將痰採集於無菌容器中盡快送檢。b、在應用抗菌葯物之前採集標本。

二、膿液及創傷感染分泌物標本採集

(1) 送檢指征：紅、腫、熱、痛和功能障礙是化膿性感染的五個典型特徵。

(2) 採集方法：a、開放性膿腫標本：包括眼、耳、扁桃體、術後切口感染等膿性分泌物。首先用無菌生理鹽水清洗病灶表面的污染雜菌，然後採取靠近組織部分膿液及病灶深部的分泌物立即送檢。b、閉鎖性膿腫標本：指有完整膿壁與體腔、與外界不相通的膿腫。閉鎖膿腫應採集滲出物和膿腫壁標本。注意不主張用拭子採集標本，對患者病灶局部及皮膚或黏膜消毒後，用無菌注射器將膿腫內容物吸出，然後切開膿腫，引流採集膿汁(大於1ml)用於檢驗。

(3) 送檢時間：標本採集後應在2小時內(室溫放置)送至細菌室。一般在患者使用抗菌葯物之前或停止用葯後1-2日採集。

三、泌尿生殖道標本採集

(1) 送檢指征：尿路感染、腎結核、泌尿系結石、肉眼膿尿或血尿，尿常規檢查有白細胞或亞硝酸鹽陽性，不明原因發熱，尿道口有膿性分泌物等。

(2) 採集時間及方法：應選擇在抗菌葯物應用之前採集尿液，通常應採集晨起第1次尿液送檢，確保尿液在膀胱內停留4小時以上。方法是患者留取標本的前一天晚上少飲水，晨起女性先用肥皂水清洗外陰部(男性翻轉包皮，清洗尿道口)，再以無菌鹽水沖洗尿道口，然後排尿棄去前段，留取中段尿10-15ml於滅菌容器中，立即加蓋送檢。

四、糞便標本採集

(1) 送檢指征：腹瀉、大便每日≥3次，糞便的形狀異常，可為稀便、水樣便、粘液便、膿血便及血便，可伴有惡心、嘔吐、食慾不振、發熱、腹痛及全身不適等。

(2) 採集方法：自然排便後，挑取有膿血或黏液部位的糞便，液狀糞便取絮狀物盛於無菌的容器中送檢。

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⑶ 請寫出製作微生物玻片標本的具體步驟。

製作微生物玻片標本通常採用塗片法，微生物包括細菌和真菌（或包括病毒），細菌個體小，通常用塗片法製作玻片標本。塗片法是裝片法製作玻片標本的一種方法。製作方法是，細菌可以用細菌液直接塗布在載玻片上，蓋上蓋片直接觀察或乾燥後染色觀察，染色觀察通常需要洗去染色液後觀察。製作真菌標本可以採用塗片法、撕片法、貼片法和切片法，單細胞或孢子或菌絲採用塗片法，大型真菌有較大的組織塊，可以採用撕片法（如撕取一部分蘑菇絲）、貼片法（將蘑菇的菌褶貼到載片上）和切片法（切片的方式觀察蘑菇的結構）。
製作植物玻片標本方法很多，根據材料不同和觀察目的不同採用不同方法。塗片法（觀察果實營養組織，如西瓜瓤）、撕片法（觀察洋蔥表皮、觀察導管）、切片法（觀察組織、器官結構）、磨片法（堅硬的果核磨成薄片觀察）。
切片法分為徒手切片、冰凍切片和石蠟切片等方法。

⑷ 院感物表采樣後，微生物室怎麼操作

物體表面的菌落總數樣本，一般是採集在10ml生理鹽水管中的。
在微生物室操作時，首先用力振搖試管進行混勻，然後無菌操作取1ml接種於無菌平皿內，傾入滅菌完畢並冷卻至45攝氏度左右的營養瓊脂，每個稀釋度做兩塊平皿，待瓊脂冷卻凝固後翻轉平板進行培養。

⑸ 微生物檢驗標本的正確採集及注意事項

微生物檢驗標本的正確採集及注意事項

正確採集臨床微生物標本，直接影響到微生物培養鑒定結果。可靠的檢驗結果可以指導臨床診斷治療，為臨床科學用葯和成功的感染控制提供依據，是正確、合理使用抗菌葯物，延緩細菌耐葯，減少抗菌葯物濫用和監測醫院感染的第一步，也是最重要的一步。下面是我為大家帶來的微生物檢驗標本的正確採集及注意事項的知識，歡迎閱讀。

一、 血液標本的採集

1、 採集方法

（1）75%酒精清潔局部皮膚。

（2）待皮膚干後，再用2%—2。5%碘酒從穿刺點中心部位開始消毒，范圍不應小於5cm（直徑），且不能用手指觸摸消毒後的皮膚。

（3）皮膚碘酒干後（約1min），穿刺採集血液，采血量成人5—10ml，嬰幼兒1—5ml。

（4）采血後立即在床旁接種培養瓶，並迅速輕搖，充分混勻防止凝固，但又不可劇震以防溶血。

2、注意事項

（1）懷疑菌血症應盡早采血，體溫上升（38。5℃）采血可提高陽性率，但也要防止因等待而延誤時機。

（2）對已經使用抗菌葯物，而又不能停葯者，也應在下次用葯前采血。切忌不要在靜滴抗菌葯物的靜脈處採取血標本，也不能從靜脈導管及動脈插管中取血。

（3）培養基與血液之比以10：1為宜，以稀釋血液中的抗生素，抗體等殺菌物質;有人主張對接受抗菌葯物治療的病人，培養基與采血量之比可為20：1或大於這個比例。

（4）近年研究表明，將血液注入血培養基前，更換針頭反而易導致污染。

（5）每例至少採血兩次，間隔0。5—1h，以利於提高陽性率和區分感染菌與污染菌。

（6）疑為細菌性心內膜炎及布魯氏病的病人，以肘動脈或股動脈采血為宜，除在發熱期采血外，並要多次采血（24h 3—4次）和增加采血量（可增加10ml）。

（7）采血後立即送檢，如不能立即送檢可置室溫，而不能放置冰箱。

（8）如臨床表現很似敗血症，而血培養多次陰性者，提示考慮厭氧菌和真菌感染的可能。

二、骨髓的採集

1、採集方法

在病灶部位或髂前（後）上脊處嚴格消毒後抽取骨髓1ml，注入血培養瓶內。

2、注意事項

（1）骨髓內含有大量的單核巨噬細胞系統的細胞，因而骨髓培養對傷寒病人的.診斷較血培養優越。

（2）用於懷疑細菌性骨髓炎病人。

三、靜脈導管標本的採集

1、採集方法

（1）常規導管部位皮膚消毒。

（2）無菌方法從病人體內拔出靜脈導管，剪下導管尖端5cm，放入無菌瓶中。

（3）立即（15min內）送檢，避免標本乾燥。

2、注意事項

（1）剪下的導管立即接種血平皿，可提高陽性率。

（2）肉湯反復沖洗導管腔內，沖洗液做定量培養。

（3）有人將剪下的導管置肉湯增菌液或培養瓶中，此法不能區分導管感染菌與少量定植菌。

（4）衛生部在《醫學感染診斷標准》（試行）（2001年1月3日施行）中規定：導管管尖培養其接種方法應取導管尖端5cm，在血平板表面往返滾動一次。細菌≥15cfu/平板，即為陽性。

四、呼吸道

1、痰標本

（1）採集方法

①清晨起床後用涼開水漱口多次，以除去口腔內大量雜菌，用力咳出肺深部的膿痰，置於清潔乾燥容器中送檢。

②痰量極少者可用45℃ 3%—10%的氯化鈉溶液約25ml霧化。對於咯痰量少的幼兒，可輕輕壓迫胸骨上部的氣管，當其咯痰後用無菌棉棒採集標本。

③咳嗽無力或昏迷病人，可用吸痰管經鼻腔或口腔經氣管腔內吸引痰液送檢。

④氣管切開者可以深入透氣孔中取痰。

⑤可用支氣管鏡直接在病灶部位採集高濃度的病原菌。

⑥用無菌導管經鼻腔插入氣管鏡內，緩慢注入無菌蒸餾水5ml，取出導管。留取患者在3h內咳出的痰液，放入無菌容器中送檢。

⑦胃內采痰法。無自覺症狀的結核病人。有時可把痰誤咽入胃內，因而可採用胃內溶物做結核菌培養，其陽性結果比咯痰高10%左右，該方法於晨起空腹時，把滅菌的胃管，從鼻腔送入胃內，用20ml注射器抽取胃液。

（2）注意事項

①痰標本的採集以晨痰為准，此時患者痰量較多且含菌量也多。

②標本採集後立即送檢，若不能及時送檢者，可暫存2—8℃冰箱。若晚1—2h接種，會失去苛氧菌，並使得革蘭陰性菌過分生長。

③可接受的標本：痰;支氣管灌洗液，支氣管刷，支氣管活檢;肺吸出物和肺活檢。不能接受的標本：唾液;24h留的痰（結核桿菌培養除外）;拭子。

④ 痰標本的質量評價：（用顯微鏡篩選）在低倍鏡下，檢查鱗狀上皮細胞，至少10個視野，集中在有白細胞處，合格標本為白細胞與鱗狀上皮細胞比例大於2：1。

2、鼻拭子

（1）用濕的拭子（生理鹽水）;

（2）需插兩個鼻孔;

（3）深入3。3cm左右，轉動4—5次;

（4）以上用於診斷金黃色葡萄球菌暴發時的鼻帶菌者。

3、咽拭子、口腔拭子

（1）採集方法（到細菌室取專用拭子）

①患者清水漱口後，由檢查者將其舌外拉，用棉拭子將咽後壁或懸雍垂的後側反復擦拭數次;

②化膿性扁桃體炎、口腔念珠菌病時，直接用棉拭子在病灶部位擦拭;

③插入運送培養基中立即送檢，防止乾燥。

（2）注意事項

①棉拭子應避免觸及舌、口腔黏膜和唾液;

②採集標本前數小時不可用消毒葯物漱口或接觸病灶局部。

五、胃腸道

1、糞便

（1）採集方法

選取膿血、黏液糞便2—3g，液體糞便取絮狀物1—2ml。盛於滅菌瓶中或蠟紙盒中及時送檢。

（2）注意事項

①標本要採集新鮮的，陳舊標本影響陽性檢出率;

②切忌糞尿混合;

③若要分離阿米巴，標本要立即送檢並注意保溫;

④運送培養基可提高陽性率;

⑤分離難辨梭菌時需選不成形或水樣便;

⑥霍亂弧菌、大腸桿菌Ο157感染的腹瀉便則為水樣便或血性便;

⑦標本在病理早期或治療前採集;

⑧一般認為用抗菌葯三天後，標本培養病原菌陰性。

2、肛拭子

在無法獲得糞便的情況下，可用經無菌甘油水或無菌生理鹽水濕潤的肛拭子插入肛門4—5cm（幼兒2—3cm）處，輕輕旋轉擦取直腸表面黏液後取出，置運送培養基中送檢。

六、泌尿道

根據衛生部《醫學感染診斷標准》（試行）通知，泌尿系統臨床診斷為：患者出現尿頻、尿急、尿痛等尿路刺激症狀，或有下腹觸痛、腎區叩痛、伴或不伴發熱，並具有下列情況之一：

（1）尿檢白細胞男性≥5個/高倍視野，女性≥10個/高倍視野，插導尿管患者應結合尿培養;

（2）臨床已診斷為泌尿道感染，或抗菌治療有效而認定的泌尿道感染。

1、中段尿

（1）採集方法

①女性 采樣前用肥皂水或0。1%的高錳酸鉀溶液沖洗外陰，用手指陰x分開排尿，棄其前段尿，不終止排尿，留取中段尿10ml於滅菌容器內。

②男性 用肥皂水清洗尿道口，或0。1%的碘伏溶液消毒尿道口，滅菌紗布擦乾，上翻包皮，棄其前段尿，不終止排尿，留取中段尿10ml於滅菌容器內。

（2）注意事項

①導尿雖然可以減少污染，但是多次重復導尿可以造成逆行性感染，因此近年來大多採用中段尿。

②女性病人最好採取膀胱截石位由護士採取標本，減少污染。

③採集標本以晨起第一次尿液為佳。

④採集標本後，若不能在1h內送檢，暫放4℃冰箱，但不能超過8h。若尿液標本在室溫下放置超過2h，即使接種培養結果細菌數≥104 cfu/ml獲103cfu/ml，也不能作為診斷依據，應重新留取標本送檢。

⑤疑為尿道炎時可將最初3—4ml尿液收集在滅菌容器內。該尿中即使有少數細菌，如反復檢查為同一細菌，也應考慮為病原菌。

⑥兒童在多數情況下，僅沖洗外陰是不夠的，故採集標本較為困難。如果尿內細菌明顯增多，可以高度懷疑為尿路感染，無菌則可否定。

⑦若細菌培養結果為兩種或兩種以上細菌，需考慮污染可能，建議重新留取標本送檢。

⑧尿液中不得加入防腐劑，消毒劑否則影響陽性檢出率。

2、膀胱穿刺採集法

避免污染是很困難的，培養結果與病情不符時，或尿厭氧菌培養，或嬰幼兒中段尿採集困難時，可以用恥骨上穿刺膀胱內采尿。

3、留置導尿者採集法

拔去閉式引流的集尿袋，棄去導尿管前段尿液，留無污染的膀胱內尿液10ml送檢。不可從集尿袋下端留取標本。

七、腦脊液

1、採集方法

由臨床醫師以無菌方法收集腦脊液3—5ml（細菌1ml，真菌2ml抗酸桿菌2ml，病毒1ml）盛於無菌試管或小瓶中立即送檢。

2、注意事項

（1）採集標本後立即送檢，因腦膜炎奈瑟菌離體後迅速自溶，肺炎鏈球菌及流感嗜血桿菌也易死亡;

（2）疑為上述細菌感染時，應注意保溫，不可置冰箱或低溫保存。

八、膽汁

1、十二指腸引流法

在無菌操作下，將十二指腸導管吞咽至十二指腸乳頭部（距齒65—70cm）時，收集A液（來自總膽管，為橙黃或金黃色），隨之注入25%硫酸鎂溶液40ml，經1—2min後再採取B液（來自膽囊，為棕黃綠色），隨後收取C液（來自肝膽管，為檸檬色），一般認為B液做細菌培養意義較大。

2、膽囊穿刺法

膽囊造影術時，可同時採取膽汁。

3手術採取法

由總膽管、膽囊直接穿刺採取膽汁。

以上採集之標本應立即送檢，否則置於4℃冰箱內，採集時需小心，避免被唾液、十二指腸液細菌污染。

九、穿刺液標本

穿刺液包括胸水、腹水、心包液、關節液、鞘膜液。

1、採集方法

由臨床醫師行穿刺術抽取。胸腹水可收集5—10ml，心包液、關節液收集2—5ml，置於無菌含抗凝劑的試管或小瓶中，充分混勻後，立即送檢。抗凝劑10%EDTA二鈉鹽，標本與抗凝劑之比10：1。

2、注意事項

⑴標本採集應在患者用葯之前或停止用葯1—2天後進行;

⑵不能立即送檢可置4℃冰箱保存;

⑶疑為淋病性關節炎患者的關節液，採集後立即送檢，或床旁培養為佳;

⑷不能用棉拭子浸蘸標本送檢。

十、膿汁及病灶分泌物

1、傷口

⑴表面傷口拭子採集方法及注意事項

① 僅限於皮膚與皮下組織，包括手術切口、褥瘡潰瘍、新生兒臍炎、嬰兒膿瘡病。

②用無菌生理鹽水或75%的酒精擦去病灶表面滲液;

③用無菌棉拭子抹去及較深部的膿汁分泌物或組織送檢;

④採集褥瘡潰瘍標本時應採集褥瘡邊緣的膿性分泌物，拭子放在運送培養基中立即送檢，不要採集創口表面的滲液。

⑵傷口、膿腫、竇道、壞疽組織採集方法及注意事項

①閉鎖性膿腫用碘酒和酒精消毒皮膚後，用滅菌注射器穿刺抽取全部膿液送檢，疑為厭氧菌感染時，排去針管內空氣將針頭插入滅菌橡膠塞內送檢;

②傷口處若有膿及滲出物要用無菌棉簽深入各種竇道中擦拭，用小刀刮取，穿刺抽吸或手術切除獲得深處傷口標本;

③當創傷出血時，敷有葯物在2h以內及燒傷在12h內均不應採集標本，此時獲得陽性結果機會甚少。

④採集標本注意觀察膿汁及分泌物性狀、色澤、氣味等。可為培養鑒定提供依據。

⑶燒傷創面

①燒傷創面需要膿性分泌物，焦痂迅速分離變棕黑、黑或紫羅蘭色，燒傷邊緣水腫。患者發燒>38℃或低體溫<36℃，合並低血壓。

②用無菌生理鹽水沖洗傷口創面。

③由於創面部位不同，細菌種類也不盡相同，要用滅菌棉拭子採集多個部位的炎症區送檢。

④採集痂下變黑或變性的不健康區邊緣或引流液等做定量培養及組織活檢。

2、厭氧傷口拭子

⑴厭氧專用棉棒或玻璃棒觸及深部膿汁;

⑵可用注射器抽吸，排去針管內空氣將針頭插入滅菌橡膠塞內送檢;

⑶立即送檢，送檢過程中必須保持在無氧條件;

⑷不宜做厭氧菌培養的有痰、喉拭子、鼻咽拭子、齒齦拭子、直腸、陰道和宮頸拭子以及回腸、結腸造瘺術的流出物，胃、小腸及大腸內容物等。

3、尿道口分泌物拭子

⑴男性用無菌紗布擦拭和清洗尿道口，然後採取從尿道口溢出的膿性分泌物;

⑵採集前列腺液時，先將尿道、膀胱沖洗，然後從肛門用手指按摩前列腺，促使前列腺液溢出;

⑶女性病人先用滅菌紗布或棉拭子仔細擦拭或清洗尿道口，然後從陰道內診壓迫尿道，使分泌物溢出;

⑷取子宮頸分泌物，先用內窺鏡擴張陰道，然後從宮頸口用滅菌棉拭子採取分泌物，盡量避免被陰道宮頸附近正常菌群的污染。

4、蜂窩織炎

⑴用無菌生理鹽水或酒精消毒皮膚;

⑵用細針在炎症最顯著處穿刺吸引;

⑶抽少量滅菌生理鹽水在針管內;

⑷注入無菌試管內送檢。

5、組織標本

⑴活體組織採取的微量標本，可直接接種在培養基內;

⑵表淺組織可直接用棉拭子擦拭、小刀颳去;

⑶較大組織塊的表面可採用燒灼或浸入沸水中5—10s，然後用滅菌剪刀切開，取其中的膿汁;

⑷深部組織標本可經皮膚穿刺或手術切取送檢;

⑸組織標本不可用福爾馬x固定;

⑹有時也可將沾有膿汁的最內層敷料放入無菌平皿內送檢。

十一、眼標本採集

⑴一般細菌，以無菌棉拭子採集眼分泌物，尤其膿性分泌物;

⑵沙眼衣原體，首先擦去眼結膜上面的分泌物，然後用無菌小刀刮取穹窿部及眼結膜上皮細胞，用鏈黴素處理後備用;

⑶對於剛治療或葯物沖洗過的患者最好12—24h後採集標本;

⑷對於淚囊炎患者可稍加擠壓後以無菌棉拭子採集標本。

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⑹ 觀察水中的微生物十怎樣做一個標本觀察

初學者可以製作 洋蔥內表皮細胞

准備

1.擦拭載玻片， 在上面滴清一滴清水

2.製作臨時裝片 用鑷子撕取洋蔥內表皮 ， 展平 ，放在載玻片上， 蓋蓋玻片

3.染色 在載玻片一旁滴一滴碘液，在另一邊用吸水紙吸取 其他的植物也類似，如用鋒利刀片切幼嫩的莖或者葉片，記住要薄，多切幾片，放在清水裡，再用毛筆去蘸取，放在載玻片上， 我是學生物的，你有這些儀器已經可以做簡單的顯微觀察了．例如，洋蔥表皮細胞觀察和細胞失水實驗 方法是，現在載波片上滴一滴清水（有條件的用蒸餾水），然後取新鮮的洋蔥，在紫色區用鑷子撕下一小塊表皮，在水滴上展平，蓋上蓋玻片，注意斜著蓋這樣可以不留氣泡，蓋好後就可以放在載物台上進行觀察，注意細胞形態，如果需要更進一步還可以在載玻片一側滴上一滴鹽水或是糖水，將玻片傾斜，讓鹽水將整個洋蔥切片浸潤，然後觀察，可以看到細胞失水；再用清水洗玻片再觀察，細胞重新吸水還原．

1.對光

2.撕取植物表皮薄膜放置載玻片上

3.蓋上蓋玻片（注意從一側，慢慢放下，避免氣泡出現）

4.滴碘酒，再從另一側拿吸水紙吸引

5.可以觀察了!