微生物檢驗中如何保持無菌狀態

❶ 微生物檢測應注意什麼事項

1、工作室要矮小平整、光滑、無凹凸不平或稜角、四壁及屋頂用不透水之材質，便於擦洗及殺菌。

2、室內採光面積應大，從室外應能看到室內的情況。

3、為保證無菌室的潔凈，無菌室周圍需設緩沖走廊，走廊旁再設緩沖間，其面積可小於無菌室。

4、無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設有日光燈及紫外燈，殺菌紫外燈離工作台以一米為宜，其電源開關應設在室外。

5、無菌室與緩沖間進出口應設推拉門，門與窗平齊，門縫要封緊，兩門要錯開，以免空氣對流造成污染。

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❷ 微生物日常檢驗過程中的注意事項

微生物日常檢驗過程中的注意事項

在微生物檢驗操作過程中，要保證檢測環境(如超凈台、檢測室)以及所用工器具的潔凈程度，同時保證人員各種操作的規范性，盡量保證其無菌性，防止因人為原因操作失誤而出現誤差結果，同時在適宜溫度進行培養，為合理決策和指導生產提供依據。下面是我為大家帶來的關於微生物日常檢驗過程中的注意事項的知識，歡迎閱讀。

培養基的滅菌及使用

1.每次配製時，要注意其生產日期是否在保質期內，查看其開瓶日期及瓶口密封性，保證其未變質，並且未吸潮。

2.培養基配製時，稱量要准確，包括鹽水的分裝要准確。

3.一定要保證現配製現滅菌，未滅菌的配好培養基不能長時間放置，更不可隔夜。

4.滅菌時要保證恆溫、恆壓，同時要保證有效的滅菌時間。

5.滅菌過的培養基要冰箱保存，可保存一周，一般不超過 3 天。而且要遵循“先入先出”原則，先配製的要先使用。

6.在使用時，要根據當班次的使用量，用水浴鍋先將培養基溶化為液態，然後及時調低水浴溫度(先化好的可從水浴取出，放在水浴鍋鍋蓋上)待用，千萬不可長時間使培養基處於高溫狀態。

7.做產品微生物檢測時，傾倒培養基溫度在 45℃左右，不可過燙，避免將菌燙死;也不可過涼，化好的培養基又結塊凝固，不便於觀察結果。

8.每瓶培養基均要做空白。

9.盡量集中做樣，避免頻繁打開同一瓶培養基瓶塞，增大培養基的污染幾率，出現誤差結果。

10.培養基剩餘過少時，可先將其傾倒成空白用板。

檢測環境的維持

一、大環境(檢測室)

1.檢測時，窗戶和空調要關閉，或用酒精對房間進行噴霧消毒，避免房間內空氣流通影響超凈台內部環境(最好在有通排風系統的恆溫恆濕無菌間進行操作)。

2.如果在原來的原料微生物檢測室進行檢測，要定期開啟紫外燈，對房間進行殺菌。

二、小環境(超凈工作台)

1.定期清潔初效過濾器，要及時更換。

2.檢測前，將超凈台內部進行清潔，用 75%酒精進行擦拭消毒，並提前半小時將超凈台紫外燈打開，對超凈台內部環境進行殺菌。

3.關紫外燈，開風機，調整合適進風量，風量不可過低。

4.每次檢測後，要對超凈台內部進行清理、清潔，並用 75%酒精進行擦拭消毒。

5.紫外燈根據其使用壽命要及時更換。

6.檢測同時，要做上相應菌落檢測的`環境空白。

7.檢測區域的選擇：

a、一般在距離超凈台外沿的 1/3-2/3 區域進行無菌操作;

b、要在酒精燈火焰的外焰保護區域進行操作。

工器具的潔凈度

1.玻璃器皿：採用乾熱滅菌方式進行滅菌。

2.檢測用剪刀、勺子等物品要做到檢測專用，不可與其它操作器具混用，使用時，先用75%酒精消毒，再採用灼燒方式進行滅菌。

3.接種針(環)採用灼燒方式進行滅菌，但要注意檢測時要先將接種針(環)進行冷卻。

樣品的採集及檢測

一、保證采樣器具的無菌性

1.玻璃器皿：採用乾熱滅菌方式進行滅菌，保證恆溫、時間足夠(但不可時間過長，容易導致玻璃器皿易裂紋而報廢)。

2.取樣筐：使用前要用75%酒精進行噴灑消毒。

3.取樣勺：要保證其清潔消毒，清潔後用75%酒精進行擦拭消毒。

4.取樣袋：可先用酒精進行擦拭消毒，再在超凈台用紫外燈照射消毒，(包裝車間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒)。

5.電子稱表面用 75%酒精消毒。

二、人員操作

1.保證手部的清洗、消毒：取樣前及檢測前都要先洗手再消毒。

2.取樣要具有代表性(隨機樣、目的樣、綜合樣)且要標示清楚。

3.取樣完畢，不可在車間逗留，要及時將樣品放入超凈台，對其外表面進行紫外燈照射消毒。

4.在要求的檢測區域進行操作。

5.檢測前，要用 75%酒精棉球對樣品袋口部進行擦拭消毒，再開口。

6.往鹽水瓶加樣品時，要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口。

7.樣品計量要准確，稀釋倍數也要准確(1mL 吸管不允許將管口敲掉)，進行 100 倍稀釋時，1mL 吸管要伸入鹽水中，不可以將樣品從管壁流下去，同時要避免將管底部捅破。

8.鹽水溫度以 40℃左右為宜，不能過熱，會將部分微生物燙死;也不能溫度太低，不能將樣品溶解完全。

9.進行稀釋時，要搖勻，保證溶液的均一性。

10.傾倒平皿時，要注意培養基瓶口不要接觸到平皿;傾倒的培養基要適量，不可以太少，在培養過程中易幹掉，微生物亦死亡，以 15mL 左右為宜。

11.做大腸菌群樣時，要提前將乳糖膽鹽培養基培養管按需要量備好，放入超凈台對外表面進行紫外線滅菌。

12.接二步時，要注意先將接種針(環)進行冷卻，避免出現接不上菌落的情況，導致無法判斷、確認。

13.檢測完畢，及時放入相應培養箱進行培養，並清理清潔超凈台。

微生物的培養

1.在培養過程中，要隨時監控培養箱溫度，保證其在適宜的溫度進行培養。

2.要按照《微生物檢驗規范》要求及時觀察結果，出現異常，要及時分析原因進行反饋。

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❸ 微生物實驗中無菌操作具體有哪些要求

無菌操作需在火焰旁進行，手不可觸摸試管口端，以防燙傷；接種時接種環不要碰觸試管口邊，
防止污染；塞蓋不可放在桌面上，應該用右手手緣或右手指間夾住，或玻璃蓋放後火焰滅菌蓋上。操作台及不可高溫蒸汽滅菌物品使用前和使用後用75%酒精消毒。
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