A. 生物檢測技術的內容
當前,生物檢測技術的方法和理論,經過多年的實踐,逐步發展成熟。目前生物檢測技術的一些已經被正式運用到了不同的生物學檢測領域,如葯品微生限度檢查法、無菌檢查法以及一些滅菌的方法已經成為各葯檢驗所、葯品生產企業和醫院制葯劑室葯品質量監測的常規內容,這些方法的應用對葯品安全使用起到了非常有效的保證作用。近幾年來,生物制劑發展迅速,其質量標準的研製和檢驗方法的確定離不開生物檢測技術。隨著醫葯工業的發展,當前葯品和生產企業正在逐步實施GMP認證,而生物檢測技術也是基本內容之一。
B. 致病菌感染的微生物學檢查基本程序是怎麼樣的
病原微生物種類繁多,變異迅速,快速鑒定病原微生物的檢驗技術也在不斷發展前進著。目前,應用比較廣泛的病原微生物檢測方法主要有直接塗片鏡檢、分離培養、生化反應、血清學反應、核酸分子雜交、基因晶元、多聚酶鏈反應等,該文對這些檢測技術進展做一綜述。 對人和動物具有致病性的微生物稱為病原微生物,又稱病原體,有病毒、細菌、立克次體、支原體、衣原體、螺旋體、真菌、放線菌、朊粒等。這些病原微生物可引起感染、過敏、腫瘤、痴獃等疾病,也是危害食品安全的主要因素之一。近年來出現的SARS、高致病性禽流感、西尼羅病毒感染等疾病的傳染性極強,往往造成世界性大流行,因此對病原體的檢測必須做到快速、准確。常規病原學檢測方法操作繁瑣,檢測周期長,而且對操作人員技術水平要求比較高。隨著醫學微生物學研究技術的不斷發展,病原學診斷已不再局限於病原體水平,深入到分子水平、基因水平的檢測手段不斷出現並被應用於臨床和實驗室 J。核酸分子雜交技術、PCR技術、基因晶元技術等檢測方法,自動化程度高,快速省時、無污染、結果精確,可以准確靈敏地鑒定病原微生物。1 傳統的病原微生物的檢測方法傳統的病原微生物學實驗室檢查以染色、培養、生化鑒定等為主,將標本直接塗片染色鏡檢和接種在培養基上進行分離培養是對細菌或真菌感染性疾病進行病原學診斷的常用方法。1.1 直接塗片鏡檢病原微生物體形體積微小,大多無色半透明狀,將其染色後可藉助顯微鏡觀察其大小、形態、排列等。直接塗片染色鏡檢簡便快速,對那些具有特殊形態的病原微生物感染仍然適用,例如淋球菌感染、結核分枝桿菌、螺旋體感染等的早期初步診斷。直接塗片鏡檢不需要特殊的儀器和設備,在基層實驗室里仍然是十分重要的病原微生物檢測手段。1.2 分離培養與生化反應 分離培養主要用於臨床標本(如血液、痰、糞便等)或培養物中有多種細菌時對某一種細菌的分離。細菌的生長繁殖需要一定時間,檢測周期較長,不能同時處理批量樣本。為解決這一問題,各種自動化培養和鑒定系統不斷產生,傳統鑒定方法也在逐步改進,大大加快了檢驗速度。例如Microscan WalLCAway全自動微生物分析儀,可同時做細菌鑒定和葯敏試驗,檢驗500多個菌種。苛養菌如肺炎鏈球菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血桿菌等對營養要求比較高,常規培養陽性率低。雍剛 等將不要同比例的葡萄糖、玉米澱粉、生長因子、酵母粉、氨基酸等特殊增菌劑加入到巧克力培養基中製成了新型淋病奈瑟菌培養基,大大提高了淋病奈瑟菌的分離培養率。蘇盛通等在營養瓊脂中加人了中葯紅棗、赤小豆培養甲型鏈球菌、乙型鏈球菌、肺炎鏈球菌等細菌,生長指數明顯高於血平板。1.3 組織細胞培養 活組織細胞培養適於專營活組織細胞內生存的病原體,包括病毒、立克次體、衣原體等。不同病原體敏感的組織細胞是不一樣的,將活細胞從病原體敏感的動物組織中取出在體外進行原代培養或用病原體敏感細胞系進行傳代培養,再將病原體接種於相應的組織細胞中後,病原體可在其中繁殖增長,引起特異性的細胞病變效應。也可以將病原體直接接種於敏感動物體內,引起相應組織器官出現特異的病理學改變。往往可以根據這些特異的病變對病原體進行鑒定。2 血清學與免疫學檢測血清學檢測是通過已知的抗體或抗原來檢測病原體的抗原或抗體從而對病原體進行快速鑒定的技術,簡化了鑒定步驟,常用的方法包括血清凝集技術、乳膠凝集實驗、熒光抗體檢測技術、協同凝集試驗、酶聯免疫測試技術等。酶聯免疫技術的應用大大提高了血清學檢測的敏感性和特異性,不僅可檢測樣本中病原體抗原,也可檢測機體的抗體成分。幽門螺奸菌在我國人群感染率高達50% ~80% ,應用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測唾液中抗HP抗體來診斷HP感染,其結果滿意。乙型肝炎病毒(HBV)在我國人群中感染率極高,ELISA應用於乙型肝炎病人早期血清學診斷的效果最為明顯。臨床上致病菌往往和非致病菌混合在一起,如何從這些細菌中分離出目標菌是關鍵。免疫磁珠分離技術(IMBS)是近年來發展起來的在微生物檢測領域中一種新技術。其基本原理是將特定病原體的單抗或多抗或二抗偶聯到磁珠微球上,通過抗原抗體反應形成磁珠一目標病原體復合物或磁珠一一抗一目標病原體復合物,在外部磁場磁力的作用下,將目標病原體分離出來。目前已經開發出了針對各種病原體的免疫磁珠,如大腸埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、軍團菌等,廣泛應用到各級科研和實驗室 。經IMBS分離出的白色念珠菌可直接在顯微鏡下檢測,檢測時間縮短至4 h。IM—Bs還可以和其它檢測技術聯合來檢測病原菌,免疫磁珠分離得到的目標菌可繼續用於分離培養使大腸埃希菌0157最低檢測限由200 cfu·g 提高到2 cfu·g~;IMBS結合聚合酶鏈反應(IMBS—PCR)可對培養條件比較特殊的細菌如苛養菌、厭氧菌進行快速檢測,肉類中的產毒素型產氣莢膜梭菌經IMBS.PC
C. 體檢要做大腸桿菌檢查,當醫生給你一根棉簽和一根管子,你會怎麼做
大腸桿菌檢查也就是說是取糞便標本,正確的做法:如果此時你能拉出糞便,你只需要找到廁所,拉完後用棉簽取一點點(約黃豆大小),然後弄到管子裡面送去檢查;但如果拉不出糞便,你只能選擇用棉簽深入肛門幾厘米取出糞便樣本,再轉移到試管里,送去檢驗科檢查。
取標本是檢查非常關鍵的一環,所以也要做到規范才行。
D. 食品微生物檢測的程序
(1)採集樣品
采樣前要了解所采樣品的來源、加工、儲藏、包裝、運輸等情況,采樣時必須做到:使用的器械和容器需經滅菌,嚴格進行無菌操作;不得加防腐劑;液體樣品應攪拌均勻後才去采樣,固體樣品應在不同部位採取以使樣品具代表性;取樣後及時送檢。
國際食品微生物標准委員會(ICMSF)制定的食品微生物學分析采樣方法,目前已在國內外被逐步推廣採用。ICMSF根據以下原則來規定不同的采樣數:①各種微生物本身對人的危害程度各有不同;②食品經不同條件處理後,其危害程度可分為3種情況:危害度降低;危害度未變;危害度增加。依據ICMSF采樣方法規定,其中:n:指一批產品采樣個數;c:指該批產品中檢樣菌數超過限量的檢樣數;m:指合格菌數限量;M:指附加條件後判定為合格的菌數限量。
(2)樣品送檢
採集好的樣品應及時送到食品微生物檢驗室,一般不應超過3h,如果路程較遠,可將不需冷凍的樣品保持在1~5℃的環境中,勿使凍結,以免細菌遭受破壞。
樣品送檢時,必須認真填寫申請單,以供檢驗人員參考。
檢驗人員接到送檢單後,應立即登記,填寫序號,並按檢驗要求,立即將樣品放在冰箱或冰盒中,並積極准備條件進行檢驗。
(3)樣品處理
樣品處理應在無菌室內進行,若是冷凍樣品必須事先在原容器中解凍,解凍溫度為2~5℃不超過18h或45℃不超過15min。
a.固體樣品
用無菌刀、剪或鑷子稱取不同部位的樣品,剪碎放入滅菌容器內,加一定量的水混勻,製成1: 10混懸液,進行檢驗。在處理蛋製品時,加入約30個玻璃球,以便震盪均勻。生肉及內臟,先進行表面消毒,再剪去表面樣品,採集深層樣品。
b.液體樣品
原包裝樣品用點燃的酒精棉球消毒瓶口,再用經石炭酸或來蘇兒消毒液消過毒的紗布將瓶口蓋住,用經火焰消毒的開關器開啟。搖勻後用無菌吸管吸取;含有二氧化碳的液體食品,按上述方法開啟瓶蓋後,將樣品倒入無菌磨口瓶中,蓋上消毒紗布,將蓋開一小縫,輕輕搖動,使氣體逸出後進行檢驗;將冷凍食品放入無菌容器內,融化後檢驗。
c.罐頭
罐頭進行密閉試驗、膨脹試驗和檢驗。將被檢驗罐頭置於85℃以上的水浴中,使罐頭沉入水面以下5 cm,觀察5 min,如有小氣泡連續上升,表面漏氣;另外將罐頭放在(37±2)℃環境下7d,如是水果、蔬菜罐頭,放在20~25℃環境下7d,觀察其蓋和底有無膨脹現象。檢驗時,先用酒精棉球擦去罐上油污,然後用點燃的酒精棉球消毒開口的一端,用來蘇兒消毒紗布蓋上,再用滅菌的開罐器打開罐頭,除去表層,用滅菌匙或吸管取出中間部分的樣品進行檢驗。
(4)檢驗
每種指標都有一種或幾種檢驗方法,可根據不同的食品、不同目的來選擇恰當的檢驗方法。通常所用的常規檢驗方法為現行國家標准,或國際標准,(如FAO標准、WHO標准等),或食品進口國的標准(如美國FDA標准、日本厚生省標准、歐共體標准等)。
食品衛生微生物檢驗室接到檢驗申請單,應立即登記,填寫試驗序號,並按檢驗要求立即將樣品放在冰箱或冰盒中,積極准備條件進行檢驗。
一般陽性樣品發出後3d(特殊情況可適當延長)方能處理樣品;進口食品的陽性樣品,需保存6個月方能處理。陰性樣品可及時處理。
(5)結果報告
樣品檢驗完畢後,檢驗人員應及時填寫報告單,簽名後送主管人核實簽字,加蓋單位印章,以示生效,並立即交給食品衛生監督人員處理。
E. 體檢有個叫常規生化全套,這個是怎麼進行檢查的只需要抽血拿給醫生就可以了嗎
生化全套檢查就是指用生物或化學的方法來對人進行身體檢查。
生化全套檢查內容包括:肝功能(總蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比,總膽紅素、直接、間接膽紅素,轉氨酶);血脂(總膽固醇,甘油三酯,高、低密度脂蛋白,載脂蛋白);空腹血糖;腎功能(肌酐、尿素氮);尿酸;乳酸脫氫酶;肌酸肌酶等。
中文名
生化全套檢查
分類
肝功能、血脂
釋義
用生物方法來對人進行身體檢查
機器
日立系列、東芝系列
常用儀器
日立系列、東芝系列、奧林巴斯系列、貝克曼系列、西門子
檢查用途
1、用於常規體檢普查
2、疾病的篩查和確證試驗
生化全套檢查是對身體進行一次全面的檢查和對身體情況的一種了解,有時也可以檢查出來潛伏的疾病,如乙肝病毒攜帶者就需要定期的檢查,如肝功能檢查,防止病情突然發作,及時進行治療。
檢查項目
1.血清丙氨酸氨基轉移酶測定
2.血清天門冬氨醯基轉移酶測定
3.血清γ--谷氨醯基轉移酶測定
4.血清鹼性磷酸酶
5.血清總蛋白測定
6.血清白蛋白測定
7.球蛋白
8.A/G
9.血清總膽紅素測定
10.血清直接膽紅素測定
11.血清間接膽紅素測定
12.血清前白蛋白測定
13.ALT/AST
14.血清總膽固醇測定
15.血清甘油三酯測定
16.血清高密度脂蛋白膽固醇測定
17.血清低密度脂蛋白膽固醇測定
18.血清載脂蛋白A1測定
19.血清載脂蛋白B測定
20.血清載脂蛋白a測定
21.尿素測定
22.肌酐測定
23.尿酸測定
24.血清碳酸氫鹽測定
25.乳酸脫氫酶測定
26.血清肌酸激酶
27.血清肌酸激酶-MB同功酶活性測定
28.血清a羥基丁酸脫氫酶測定
29.鉀測定
30.鈉測定
31.氯測定
32.鈣測定
33.葡萄糖測定
臨床意義
1.血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT或GPT)測定的臨床意義:
升高:常見於急慢性肝炎、葯物性肝損害、脂肪肝、肝硬化、心肌梗塞、心肌炎及膽道疾病等。
2.血清天門冬氨酸氨基轉移酶(AST或GOT)測定的臨床意義:
升高:常見於心肌梗塞發病期、急慢性肝炎、中毒性肝炎、心功能不全、皮肌炎等。
3.血清總蛋白測定的臨床意義
F. 病原微生物中細菌常見檢測方法有哪些
1、快速測試片技術法
快速測試片是指以紙片、紙膜、膠片等作為培養基載體,將特定的培養基和顯色物質附著在上面,通過微生物在上面的生長、顯色來測定食品中微生物的方法。
細菌總數檢測紙片的研製始於 20 世紀 80 年代,其主要優點是簡便、實用、經濟、操作性強。近年來以濾紙和美國某公司的 Petrifilm 為載體的測試片已開始被廣泛應用。
2、生物電化學方法
生物電化學方法是指通過電極測定微生物產生或消耗的電荷,從而提供分析信號的方法。微生物在滋生代謝過程中,培養基的電化學性質如電流、電位、電阻和電導等會發生變化,所以可以通過檢測分析這些電化學參量的變化來實現對微生物的快速測定。
常見的有:阻抗分析法、電位分析法、電流分析法等。生物電化學方法具有測量快速、直觀、操作簡單、測量設備成本低和信號的可控性等特點。
3、微菌落技術
微菌落是指細菌生長繁殖早期在固相載體上所形成的只能藉助於顯微鏡觀察的微小菌落。微菌落技術具有快速、經濟、實用的特點,其研究始於 20 世紀50年代,定量測定技術從 20 世紀 70 年代開始,國外已有報道將該法應用於水、食品中細菌總數的快速檢測。
4、氣相色譜法
氣相色譜應用到微生物的檢測中,主要是依據不同微生物的化學組成或其產生的代謝產物各異,利用上述色譜檢測可直接分析各種體液中的細菌代謝產物、細胞中的脂肪酸、蛋白質、氨基酸、多肽、多糖等,以確定病原微生物的特異性化學標志成分,協助病原診斷和檢測。
5、高效液相色譜法
利用高效液相色譜檢測可分析各種體液中的細菌代謝產物、病原微生物等,以確定病原微生物的特異性化學標志成分,協助病原診斷和檢測。