空氣微生物采樣應如何布點

1. 微生物的采樣方法（詳細點！）

常用的空氣微生物采樣方法有四種：沉降法、固體撞擊法、液體撞擊法、濾過法。

最常用的是平板沉降法，其採集步驟是：在采樣前先用紫外線對所要采樣的房間照30分鍾，使室內處於相對清潔、靜止狀態，然後將及時領取的新鮮營養瓊脂平板，置室內四角及中央各一個，將平板蓋打開扣於無菌巾上，暴露20分鍾，加蓋及時送檢，以防污染。

1.2 采樣方法
在0.33hm2左右的采樣區域內，按15m×15m的面積劃分為12個樣方。1998年6月在每個樣方中分別確定生長水平中等的Ⅰ度(1年生)、Ⅱ度（3年生）、Ⅲ度（5年生）竹各3株，分別在毛竹基部挖開，順竹蔸取連在根上粒徑小於1cm土壤作為根區土壤，並分別將Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度各3株竹的根區土樣混合成一個樣品，作為該樣方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度竹的根區土樣。同時在每個樣方的竹林中多點採集和根區土深度一致的林間土樣1個，採集時盡量避開竹鞭，各點均離竹鞭5厘米以上。
1.3 分析方法
土樣帶回室內後分成兩份，1份鮮樣分析土壤微生物三大類；另1份風干、去雜、過篩後測定土壤各類酶活性。土壤微生物計數採用平板法[12]，細菌採用牛肉蛋白腖培養基；真菌採用馬丁氏瓊脂培養基；放線菌採用高澤1號瓊脂培養基。土壤過氧化氫酶採用容量法；蔗糖酶採用二硝基水楊酸比色法；脲酶採用苯酚——次氯酸比色法；蛋白酶採用茚三酮比色法；磷酸酶採用磷酸苯二鈉比色法。〔13〕

2. 空氣采樣的方法

可直接採集少量氣樣。這種方法測得的結果是瞬時濃度或短時間內的平均濃度，能較快地獲得結果。常用的采樣容器有注射器、塑料袋、采樣管、真空瓶(管)等。
(一)注射器采樣
常用l00mL注射器，采樣時，先用現場空氣抽洗3～5次，然後抽取100 mL，用橡皮帽密封進氣口，將注射器進氣口朝下，垂直放置，使注射器內壓
力約大於大氣壓。樣品存放時間不宜長，一般應當天分析完。
(二)塑料袋采樣
選擇與氣樣中污染組分不發生化學反應、不吸附、不滲漏的塑料袋。常用的有聚四氟乙烯袋、聚乙烯袋及聚酯袋等。為減小對被測組分的吸附，可在袋的內壁襯銀、鋁等金屬膜。采樣時，先用二聯球打進現場氣體沖洗3～5次，再充滿氣樣，夾封進氣口，帶回盡快分析。
(三)采氣管采樣
采氣管是兩端具有旋塞的管式玻璃容器，其容積為l00～500 mL。采樣時，打開兩端旋塞，將二聯球或抽氣泵接在管的一端，迅速抽進比采氣管容
積大6～10倍的欲采氣體，使采氣管中原有氣體被完全置換出，關上兩端旋塞，采氣體積即為采氣管的容積。
(四)真空瓶采樣
真空瓶是一種用耐壓玻璃或不銹鋼製成的采氣瓶，容積為500～1000 mL。采樣前先用抽真空裝置將采氣瓶內抽至剩餘壓力1 330 Pa左右；如瓶內預先裝人吸收液，可抽至溶液冒泡為止，關閉旋塞。采樣時，打開旋塞，被采空氣即充人瓶內，關閉旋塞，則采樣體積為真空采氣瓶的容積。由於真空瓶瓶塞磨口處易漏氣，抽真空後瓶口拉封，到現場采樣時，從瓶口斷痕線處弄斷，空氣即充進瓶內，然後套上橡皮小帽，帶回實驗室分析。如果采氣瓶內真空度達不到l 330 Pa，實際采樣體積應根據剩餘壓力進行計算。

3. 空氣微生物采樣研究的方法～

空氣浮游微生物采樣器是根據顆粒撞擊原理和等速采樣理論設計。被采樣的帶有微生物的空氣在抽氣泵作用下，高速噴射並撞擊到裝有培養基的培養皿上，經培養後形成菌落予以計數。

對固體撞擊式采樣法與平板沉降法進行初步實驗。結果表明，使用固體撞擊式采樣法測定空氣微生物的含量總數與平板沉降法采獲的總數結果差異有顯著性,平板沉降法只能收集到較大顆粒的微生物，不能作精確的定量計數，它可作為一般衛生學的檢驗手段。固體撞擊式采樣法對懸浮於空氣中小顆粒微生物捕獲率高於沉降法，並能較准確地表達出空氣中細菌的實際含量，是一種較理想的的采樣方法。

4. 怎樣的取樣閥用怎樣的微生物取樣方法

微生物取樣方法
舉例一：
一、 空氣采樣及檢驗方法
1培養基：普通營養瓊脂平板，按GB4789.28中3.7條配製
2采樣（空氣沉降法）
2.1布點：面積小於30平方米的車間，設一對角線，在線上取3點，即中心一點，兩端在距牆1米處各取一點；面積大於30平方米的車間，設東、西、南、北、中5個點，其中東、西、南、北點均距牆1米。
2.2采樣高度：與地面垂直高度80-150厘米。
2.3采樣方法；用直徑為9厘米的普通營養瓊脂平板在采樣點上暴露20分鍾蓋上送檢培養。 3培養：於37℃培養24小時。
4檢測頻率：每周
空氣質量標准：
生車間、熟車間、成品車間：低於100個
半成品庫、成品庫：低於10個
二、設備的采樣與檢驗方法
根據生產過程所要求的重點衛生部位，實驗室對其進行塗抹采樣，進行細菌總數檢驗。 1采樣方法
1.1塗抹法（適用於表面平坦的設備和工器具產品接觸面）
取經過滅菌的鋁片框（框內面積為50平方厘米）放在需檢查的部位上，用無菌棉球蘸上無菌生理鹽水擦拭鋁片中間方框部分，擦完後立即將棉球投入盛有10毫升無菌生理鹽水的試管中，此液每毫升代表5平方厘米。
1.2貼紙法（適用於表面不平坦的設備和工器具接處面）
將無菌規格紙（5×5厘米，紙質要薄而軟）用無菌生理鹽水泡濕後，於需測部分分別貼上兩張

5. 空氣微生物的采樣

100多年來，研究者設計了多種多樣的采樣器 ，歸納起來可分為五類，即慣性撞擊類、過濾阻留類、靜電沉著類、溫差迫降類和生物采樣類 。 1 自然沉降法。它是利用空氣微生物粒子的重力作用，在一定的時間內，讓所處區域的空氣中微生物顆粒逐步沉降到帶有培養介質的平皿內的一種采樣方法。自然沉降法粗糙，不能測定空氣流量和懸浮在空氣中的小粒子上的細菌，但對於那些因菌粒子沉著而致的污染，例如傷口的污染仍有一定的價值。
2 射流撞擊式采樣器(裂隙式采樣器)。這是當今微生物采樣器中應用最廣泛、品種最多的一類采樣器。它是利用各種抽氣裝置，以每分鍾恆定氣流量，使空氣通過狹小噴嘴，以便空氣和懸浮於其 中的微生物粒子形成高速氣流，在離開噴嘴時氣流射向採集面，氣體沿採集面拐彎而去，而顆粒則按慣性繼續直線前進 ，撞擊並粘附於採集面上，從而被捕獲。這類采樣器能作空氣微生物的定量測定。按其所用的撞擊面不同，又分為固體撞擊式采樣器和液體撞擊式采樣器兩種。
3 離心撞擊式采樣器 離心撞擊式采樣器是利用氣體在旋轉徑路中運動時所產生的離心力，使粒子獲得一定動量，並因其慣性而偏離氣體流線，撞擊沉著在附近的採集面上。 生物類采樣器即用敏感的動物和植物來進行空氣微生物的檢測。