㈠ 化膿性球菌微生物學檢查中標本類型有哪些
標本類別應該有血液、體液、膿液和其它分泌物等類別。
㈡ 病原微生物中細菌常見檢測方法有哪些
病原微生物種類繁多,變異迅速,快速鑒定病原微生物的檢驗技術也在不斷發展前進著。目前,應用比較廣泛的病原微生物檢測方法主要有直接塗片鏡檢、分離培養、生化反應、血清學反應、核酸分子雜交、基因晶片、多聚酶鏈反應等,該文對這些檢測技術進展做一綜述。 對人和動物具有致病性的微生物稱為病原微生物,又稱病原體,有病毒、細菌、立克次體、支原體、衣原體、螺旋體、真菌、放線菌、朊粒等。這些病原微生物可引起感染、過敏、腫瘤、痴獃等疾病,也是危害食品安全的主要因素之一。近年來出現的SARS、高致病性禽流感、西尼羅病毒感染等疾病的傳染性極強,往往造成世界性大流行,因此對病原體的檢測必須做到快速、准確。常規病原學檢測方法操作繁瑣,檢測周期長,而且對操作人員技術水平要求比較高。隨著醫學微生物學研究技術的不斷發展,病原學診斷已不再局限於病原體水平,深入到分子水平、基因水平的檢測手段不斷出現並被應用於臨床和實驗室 J。核酸分子雜交技術、PCR技術、基因晶片技術等檢測方法,自動化程度高,快速省時、無污染、結果精確,可以准確靈敏地鑒定病原微生物。1 傳統的病原微生物的檢測方法傳統的病原微生物學實驗室檢查以染色、培養、生化鑒定等為主,將標本直接塗片染色鏡檢和接種在培養基上進行分離培養是對細菌或真菌感染性疾病進行病原學診斷的常用方法。1.1 直接塗片鏡檢病原微生物體形體積微小,大多無色半透明狀,將其染色後可藉助顯微鏡觀察其大小、形態、排列等。直接塗片染色鏡檢簡便快速,對那些具有特殊形態的病原微生物感染仍然適用,例如淋球菌感染、結核分枝桿菌、螺旋體感染等的早期初步診斷。直接塗片鏡檢不需要特殊的儀器和裝置,在基層實驗室里仍然是十分重要的病原微生物檢測手段。1.2 分離培養與生化反應 分離培養主要用於臨床標本(如血液、痰、糞便等)或培養物中有多種細菌時對某一種細菌的分離。細菌的生長繁殖需要一定時間,檢測周期較長,不能同時處理批量樣本。為解決這一問題,各種自動化培養和鑒定系統不斷產生,傳統鑒定方法也在逐步改進,大大加快了檢驗速度。例如Microscan WalLCAway全自動微生物分析儀,可同時做細菌鑒定和葯敏試驗,檢驗500多個菌種。苛養菌如肺炎鏈球菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血桿菌等對營養要求比較高,常規培養陽性率低。雍剛 等將不要同比例的葡萄糖、玉米澱粉、生長因子、酵母粉、氨基酸等特殊增菌劑加入到巧克力培養基中製成了新型淋病奈瑟菌培養基,大大提高了淋病奈瑟菌的分離培養率。蘇盛通等在營養瓊脂中加人了中葯紅棗、赤小豆培養甲型鏈球菌、乙型鏈球菌、肺炎鏈球菌等細菌,生長指數明顯高於血平板。1.3 組織細胞培養 活組織細胞培養適於專營活組織細胞內生存的病原體,包括病毒、立克次體、衣原體等。不同病原體敏感的組織細胞是不一樣的,將活細胞從病原體敏感的動物組織中取出在體外進行原代培養或用病原體敏感細胞系進行傳代培養,再將病原體接種於相應的組織細胞中後,病原體可在其中繁殖增長,引起特異性的細胞病變效應。也可以將病原體直接接種於敏感動物體內,引起相應組織器官出現特異的病理學改變。往往可以根據這些特異的病變對病原體進行鑒定。2 血清學與免疫學檢測血清學檢測是通過已知的抗體或抗原來檢測病原體的抗原或抗體從而對病原體進行快速鑒定的技術,簡化了鑒定步驟,常用的方法包括血清凝集技術、乳膠凝集實驗、熒光抗體檢測技術、協同凝集試驗、酶聯免疫測試技術等。酶聯免疫技術的應用大大提高了血清學檢測的敏感性和特異性,不僅可檢測樣本中病原體抗原,也可檢測機體的抗體成分。幽門螺奸菌在我國人群感染率高達50% ~80% ,應用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測唾液中抗HP抗體來診斷HP感染,其結果滿意。乙型肝炎病毒(HBV)在我國人群中感染率極高,ELISA應用於乙型肝炎病人早期血清學診斷的效果最為明顯。臨床上致病菌往往和非致病菌混合在一起,如何從這些細菌中分離出目標菌是關鍵。免疫磁珠分離技術(IMBS)是近年來發展起來的在微生物檢測領域中一種新技術。其基本原理是將特定病原體的單抗或多抗或二抗偶聯到磁珠微球上,通過抗原抗體反應形成磁珠一目標病原體復合物或磁珠一一抗一目標病原體復合物,在外部磁場磁力的作用下,將目標病原體分離出來。目前已經開發出了針對各種病原體的免疫磁珠,如大腸埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、軍團菌等,廣泛應用到各級科研和實驗室 。經IMBS分離出的白色念珠菌可直接在顯微鏡下檢測,檢測時間縮短至4 h。IM—Bs還可以和其它檢測技術聯合來檢測病原菌,免疫磁珠分離得到的目標菌可繼續用於分離培養使大腸埃希菌0157最低檢測限由200 cfu·g 提高到2 cfu·g~;IMBS結合聚合酶鏈反應(IMBS—PCR)可對培養條件比較特殊的細菌如苛養菌、厭氧菌進行快速檢測,肉類中的產毒素型產氣莢膜梭菌經IMBS.PCR檢測
目前主要普通培養(簡稱標)般報告要用儀器、核酸檢測(PCR)、目前快速檢測(主要包括:免疫磁珠、酶聯免疫試劑盒、金標檢測卡等根據自需求選擇
目前主要有普通培養法(簡稱國標方法)一般出報告的要用,儀器法、核酸檢測法(PCR)、還有目前的快速檢測法(主要包括:免疫磁珠、酶聯免疫試劑盒、金標檢測卡等。這個根據自己的需求來選擇吧。
簡述hiv的微生物學檢測方法有哪些
梅毒是由蒼白螺旋體感染引起的一種性傳播性疾病 。梅毒螺旋體感染人體後出現兩種抗體:一種是特異性抗體(TPHA),為lgM。當有補體存在和厭氧條件下,對活螺旋體的動力有抑製作用,並可將螺旋體殺死或溶解,對機體的再感染有保護作用。另一類是非特異性抗體(快速血漿反應素 RPR)。為lgA與lgM的混合物,可與正常生物組織中的類脂抗原發生非特異性結合,對人體無保護作用
傳統檢測有三種方法
1、直接顯微鏡觀察,正常情況,在一定的培養條件下(相同的培養基、溫度以及培養時間),同種微生物表現出穩定的菌落特徵。可以通過顯微鏡觀察菌落特徵對微生物種類進行判斷。
2、選擇培養基培養微生物或人為提供有利於目的菌株生長的條件,選擇培養基,其作用是允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他微生物生長。選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用型別或某一特徵進行間接判斷,得到的微生物往往並不只有一種,但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。
3、鑒別培養基,根據微生物的代謝特點,在培養基中加入某種指示劑或化學葯品。與選擇培養相比,鑒別培養基的鑒別所得結果的范圍比較小,一般可直接測定某微生物的種類。
現代定義
微生物:個體難以用肉眼觀察的一切微小生物之統稱。
微生物包括細菌、病毒、真菌、和少數藻類等。(但有些微生物是肉眼可以看見的,像屬於真菌的蘑菇、靈芝等。)病毒是一類由核酸和蛋白質等少數幾種成分組成的「非細胞生物」,但是它的生存必須依賴於活細胞。
根據存在的不同環境分為空間微生物、海洋微生物等,按照細胞機構分類分為原核微生物和真核微生物。
主要特徵
1、體小面大
2、吸多轉快
3、生長繁殖快
微生物的這一特性使其在工業上有廣泛的應用,如發酵、單細胞蛋白等。微生物是人類不可或缺的好朋友。
這個是我在網上找到的的微生物的檢測試紙片,也不知道方法咋樣,你要也可以去網站上看看的
像大腸桿菌測試紙片 腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現的食物傳播性疾病的病因。它除了引起腹瀉、出血性腸炎外,還可發生溶血性尿毒綜合症、血栓性血小板減少性紫癜等嚴重的並發症。自1982年美國首次發現因該致病菌引起的食物中毒以來,腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開始逐漸擴散和蔓延,相繼在英國、加拿大、日本等多個國家引起腹瀉爆發和流行。我國已陸續有十餘個省份在市售食品、進口食品、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7。大腸桿菌O157測試片(FilmplateTM E.coli O157BO204)3方元方圓生物的採用進口高選擇性顯色培養基作為主要原料,運用專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認,大大地簡化了檢測程式,非常適合各級檢驗部門和食品企業使用。本品適用於海產品、水產品、各類熟肉製品和冷葷、蛋及蛋製品等的快速檢測。參照標准:食品衛生微生物學檢驗大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗(GB/T4789.36)。
; 用浸有滅菌生理鹽水的棉簽在被檢物體表面取25cm2的面積,在其內塗抹10次,然後剪去手接觸部分棉棒,將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的取樣管內送檢。擦拭時棉簽要隨時轉動,保證擦拭的准確性。對每個擦拭點應詳細記錄所在分場的具 *** 置、擦拭時間及所擦拭環節的消毒時間
先配製固體培養基,再劃線培養1天,之後挑每一種菌落的細菌製片,顯微鏡下觀察細菌的種類
㈢ 臨床微生物檢驗之病原性真菌檢驗
臨床微生物檢驗之病原性真菌檢驗
真菌是一大類不含葉綠素,無根、莖、葉,由單細胞或多細胞組成的真核細胞型微生物。大部分真菌對人類有益,能引起人類疾病的病原性真菌主要包括淺部真菌和深部真菌。下面是我為大家帶來的臨床微生物檢驗之病原性真菌檢驗的知識,歡迎閱讀。
一、常見單細胞真菌的形態觀察
1、新型隱球菌墨汁負染色片:可見菌體呈球形,大小不一,有很厚的莢膜,包圍在菌體周圍,透明發亮,並可見發芽的菌體。
2、白色念珠菌菌體形態:用患者的棉拭子標本常法塗片,革蘭氏染色,鏡檢。顯微鏡下可見菌體呈卵圓形,較葡萄球菌大2-5倍,細胞出芽伸長而成假菌絲,在假菌絲生長點上有芽生孢子及沿假菌絲頂端生長的大而圓的厚膜孢子。
二、皮膚絲狀菌的檢查
材料:
病人的甲屑、皮屑或毛發、10%KOH溶液、載玻片、蓋玻片、小鑷子、普通光學顯微鏡等。
方法:
1、采標本:用鈍刀在手、足、體癬損害部位邊緣輕輕刮取皮屑,甲癬可用小刀刮取病損指(趾)甲深層碎屑。
2、製片:用小鑷子取少許皮(甲)屑標本置於載玻片中央,滴1-2滴10%KOH溶液,覆加一蓋玻片,在火焰上答轎緩慢加熱,以加速角質溶解,使標本透明,然後輕輕加壓使成薄片,驅走氣泡並吸去周圍溢液。
3、鏡檢:先用低倍鏡觀察有無真菌菌絲或孢子,再用高倍鏡觀察菌絲、孢子的`特徵。鏡檢時光線應稍弱,使視野稍暗。陽性標本常可查見分支菌絲或孢子。
三、真菌的培養
材料:
菌種、沙保氏培養基、平皿、載玻片、蓋玻片。
方法:
1、一般培養:分清首肆別將新型隱球菌、白色念珠菌、絮狀表皮癬菌接種於沙保氏培養基,於22℃-28℃下培養(深部真菌可培養芹迅於37℃環境),一周後觀察菌落特徵。真菌菌落在形態上可分為三大類:
酵母型菌落:與細菌菌落相似,圓形、白色、邊緣整齊、表面光滑濕潤。
類酵母型菌落:同酵母型菌落,圓形、較大、白色,但菌落根部有假菌絲長入培養基內。
絲狀菌落:是多細胞真菌的菌落形式。有許多疏鬆的菌絲體構成,菌落呈棉絮狀、絨毛狀或粉末狀,菌落中央有皺折,外圍有放射狀溝。其正面和背景又可顯示各種不同顏色。
2、小培養(玻片法):在無菌平皿中先傾注10-15ml沙保葡萄糖瓊脂,待凝固後,無菌操作將瓊脂切成約0.5cm的方塊,再將瓊脂塊移放在滅菌的載玻片上,然後在小塊培養基四邊接種已分純的真菌菌種,蓋上無菌蓋玻片,移入有一定濕度的無菌平皿內,置22℃-28℃孵育。動態觀察生長過程,根據菌絲和孢子的特點鑒定真菌類別。
;㈣ 微生物檢驗標本的正確採集及注意事項
微生物檢驗標本的正確採集及注意事項
正確採集臨床微生物標本,直接影響到微生物培養鑒定結果。可靠的檢驗結果可以指導臨床診斷治療,為臨床科學用葯和成功的感染控制提供依據,是正確、合理使用抗菌葯物,延緩細菌耐葯,減少抗菌葯物濫用和監測醫院感染的第一步,也是最重要的一步。下面是我為大家帶來的微生物檢驗標本的正確採集及注意事項的知識,歡迎閱讀。
一、 血液標本的採集
1、 採集方法
(1)75%酒精清潔局部皮膚。
(2)待皮膚干後,再用2%—2。5%碘酒從穿刺點中心部位開始消毒,范圍不應小於5cm(直徑),且不能用手指觸摸消毒後的皮膚。
(3)皮膚碘酒干後(約1min),穿刺採集血液,采血量成人5—10ml,嬰幼兒1—5ml。
(4)采血後立即在床旁接種培養瓶,並迅速輕搖,充分混勻防止凝固,但又不可劇震以防溶血。
2、注意事項
(1)懷疑菌血症應盡早采血,體溫上升(38。5℃)采血可提高陽性率,但也要防止因等待而延誤時機。
(2)對已經使用抗菌葯物,而又不能停葯者,也應在下次用葯前采血。切忌不要在靜滴抗菌葯物的靜脈處採取血標本,也不能從靜脈導管及動脈插管中取血。
(3)培養基與血液之比以10:1為宜,以稀釋血液中的抗生素,抗體等殺菌物質;有人主張對接受抗菌葯物治療的病人,培養基與采血量之比可為20:1或大於這個比例。
(4)近年研究表明,將血液注入血培養基前,更換針頭反而易導致污染。
(5)每例至少採血兩次,間隔0。5—1h,以利於提高陽性率和區分感染菌與污染菌。
(6)疑為細菌性心內膜炎及布魯氏病的病人,以肘動脈或股動脈采血為宜,除在發熱期采血外,並要多次采血(24h 3—4次)和增加采血量(可增加10ml)。
(7)采血後立即送檢,如不能立即送檢可置室溫,而不能放置冰箱。
(8)如臨床表現很似敗血症,而血培養多次陰性者,提示考慮厭氧菌和真菌感染的可能。
二、骨髓的採集
1、採集方法
在病灶部位或髂前(後)上脊處嚴格消毒後抽取骨髓1ml,注入血培養瓶內。
2、注意事項
(1)骨髓內含有大量的單核巨噬細胞系統的細胞,因而骨髓培養對傷寒病人的.診斷較血培養優越。
(2)用於懷疑細菌性骨髓炎病人。
三、靜脈導管標本的採集
1、採集方法
(1)常規導管部位皮膚消毒。
(2)無菌方法從病人體內拔出靜脈導管,剪下導管尖端5cm,放入無菌瓶中。
(3)立即(15min內)送檢,避免標本乾燥。
2、注意事項
(1)剪下的導管立即接種血平皿,可提高陽性率。
(2)肉湯反復沖洗導管腔內,沖洗液做定量培養。
(3)有人將剪下的導管置肉湯增菌液或培養瓶中,此法不能區分導管感染菌與少量定植菌。
(4)衛生部在《醫學感染診斷標准》(試行)(2001年1月3日施行)中規定:導管管尖培養其接種方法應取導管尖端5cm,在血平板表面往返滾動一次。細菌≥15cfu/平板,即為陽性。
四、呼吸道
1、痰標本
(1)採集方法
①清晨起床後用涼開水漱口多次,以除去口腔內大量雜菌,用力咳出肺深部的膿痰,置於清潔乾燥容器中送檢。
②痰量極少者可用45℃ 3%—10%的氯化鈉溶液約25ml霧化。對於咯痰量少的幼兒,可輕輕壓迫胸骨上部的氣管,當其咯痰後用無菌棉棒採集標本。
③咳嗽無力或昏迷病人,可用吸痰管經鼻腔或口腔經氣管腔內吸引痰液送檢。
④氣管切開者可以深入透氣孔中取痰。
⑤可用支氣管鏡直接在病灶部位採集高濃度的病原菌。
⑥用無菌導管經鼻腔插入氣管鏡內,緩慢注入無菌蒸餾水5ml,取出導管。留取患者在3h內咳出的痰液,放入無菌容器中送檢。
⑦胃內采痰法。無自覺症狀的結核病人。有時可把痰誤咽入胃內,因而可採用胃內溶物做結核菌培養,其陽性結果比咯痰高10%左右,該方法於晨起空腹時,把滅菌的胃管,從鼻腔送入胃內,用20ml注射器抽取胃液。
(2)注意事項
①痰標本的採集以晨痰為准,此時患者痰量較多且含菌量也多。
②標本採集後立即送檢,若不能及時送檢者,可暫存2—8℃冰箱。若晚1—2h接種,會失去苛氧菌,並使得革蘭陰性菌過分生長。
③可接受的標本:痰;支氣管灌洗液,支氣管刷,支氣管活檢;肺吸出物和肺活檢。不能接受的標本:唾液;24h留的痰(結核桿菌培養除外);拭子。
④ 痰標本的質量評價:(用顯微鏡篩選)在低倍鏡下,檢查鱗狀上皮細胞,至少10個視野,集中在有白細胞處,合格標本為白細胞與鱗狀上皮細胞比例大於2:1。
2、鼻拭子
(1)用濕的拭子(生理鹽水);
(2)需插兩個鼻孔;
(3)深入3。3cm左右,轉動4—5次;
(4)以上用於診斷金黃色葡萄球菌暴發時的鼻帶菌者。
3、咽拭子、口腔拭子
(1)採集方法(到細菌室取專用拭子)
①患者清水漱口後,由檢查者將其舌外拉,用棉拭子將咽後壁或懸雍垂的後側反復擦拭數次;
②化膿性扁桃體炎、口腔念珠菌病時,直接用棉拭子在病灶部位擦拭;
③插入運送培養基中立即送檢,防止乾燥。
(2)注意事項
①棉拭子應避免觸及舌、口腔黏膜和唾液;
②採集標本前數小時不可用消毒葯物漱口或接觸病灶局部。
五、胃腸道
1、糞便
(1)採集方法
選取膿血、黏液糞便2—3g,液體糞便取絮狀物1—2ml。盛於滅菌瓶中或蠟紙盒中及時送檢。
(2)注意事項
①標本要採集新鮮的,陳舊標本影響陽性檢出率;
②切忌糞尿混合;
③若要分離阿米巴,標本要立即送檢並注意保溫;
④運送培養基可提高陽性率;
⑤分離難辨梭菌時需選不成形或水樣便;
⑥霍亂弧菌、大腸桿菌Ο157感染的腹瀉便則為水樣便或血性便;
⑦標本在病理早期或治療前採集;
⑧一般認為用抗菌葯三天後,標本培養病原菌陰性。
2、肛拭子
在無法獲得糞便的情況下,可用經無菌甘油水或無菌生理鹽水濕潤的肛拭子插入肛門4—5cm(幼兒2—3cm)處,輕輕旋轉擦取直腸表面黏液後取出,置運送培養基中送檢。
六、泌尿道
根據衛生部《醫學感染診斷標准》(試行)通知,泌尿系統臨床診斷為:患者出現尿頻、尿急、尿痛等尿路刺激症狀,或有下腹觸痛、腎區叩痛、伴或不伴發熱,並具有下列情況之一:
(1)尿檢白細胞男性≥5個/高倍視野,女性≥10個/高倍視野,插導尿管患者應結合尿培養;
(2)臨床已診斷為泌尿道感染,或抗菌治療有效而認定的泌尿道感染。
1、中段尿
(1)採集方法
①女性 采樣前用肥皂水或0。1%的高錳酸鉀溶液沖洗外陰,用手指陰x分開排尿,棄其前段尿,不終止排尿,留取中段尿10ml於滅菌容器內。
②男性 用肥皂水清洗尿道口,或0。1%的碘伏溶液消毒尿道口,滅菌紗布擦乾,上翻包皮,棄其前段尿,不終止排尿,留取中段尿10ml於滅菌容器內。
(2)注意事項
①導尿雖然可以減少污染,但是多次重復導尿可以造成逆行性感染,因此近年來大多採用中段尿。
②女性病人最好採取膀胱截石位由護士採取標本,減少污染。
③採集標本以晨起第一次尿液為佳。
④採集標本後,若不能在1h內送檢,暫放4℃冰箱,但不能超過8h。若尿液標本在室溫下放置超過2h,即使接種培養結果細菌數≥104 cfu/ml獲103cfu/ml,也不能作為診斷依據,應重新留取標本送檢。
⑤疑為尿道炎時可將最初3—4ml尿液收集在滅菌容器內。該尿中即使有少數細菌,如反復檢查為同一細菌,也應考慮為病原菌。
⑥兒童在多數情況下,僅沖洗外陰是不夠的,故採集標本較為困難。如果尿內細菌明顯增多,可以高度懷疑為尿路感染,無菌則可否定。
⑦若細菌培養結果為兩種或兩種以上細菌,需考慮污染可能,建議重新留取標本送檢。
⑧尿液中不得加入防腐劑,消毒劑否則影響陽性檢出率。
2、膀胱穿刺採集法
避免污染是很困難的,培養結果與病情不符時,或尿厭氧菌培養,或嬰幼兒中段尿採集困難時,可以用恥骨上穿刺膀胱內采尿。
3、留置導尿者採集法
拔去閉式引流的集尿袋,棄去導尿管前段尿液,留無污染的膀胱內尿液10ml送檢。不可從集尿袋下端留取標本。
七、腦脊液
1、採集方法
由臨床醫師以無菌方法收集腦脊液3—5ml(細菌1ml,真菌2ml抗酸桿菌2ml,病毒1ml)盛於無菌試管或小瓶中立即送檢。
2、注意事項
(1)採集標本後立即送檢,因腦膜炎奈瑟菌離體後迅速自溶,肺炎鏈球菌及流感嗜血桿菌也易死亡;
(2)疑為上述細菌感染時,應注意保溫,不可置冰箱或低溫保存。
八、膽汁
1、十二指腸引流法
在無菌操作下,將十二指腸導管吞咽至十二指腸乳頭部(距齒65—70cm)時,收集A液(來自總膽管,為橙黃或金黃色),隨之注入25%硫酸鎂溶液40ml,經1—2min後再採取B液(來自膽囊,為棕黃綠色),隨後收取C液(來自肝膽管,為檸檬色),一般認為B液做細菌培養意義較大。
2、膽囊穿刺法
膽囊造影術時,可同時採取膽汁。
3手術採取法
由總膽管、膽囊直接穿刺採取膽汁。
以上採集之標本應立即送檢,否則置於4℃冰箱內,採集時需小心,避免被唾液、十二指腸液細菌污染。
九、穿刺液標本
穿刺液包括胸水、腹水、心包液、關節液、鞘膜液。
1、採集方法
由臨床醫師行穿刺術抽取。胸腹水可收集5—10ml,心包液、關節液收集2—5ml,置於無菌含抗凝劑的試管或小瓶中,充分混勻後,立即送檢。抗凝劑10%EDTA二鈉鹽,標本與抗凝劑之比10:1。
2、注意事項
⑴標本採集應在患者用葯之前或停止用葯1—2天後進行;
⑵不能立即送檢可置4℃冰箱保存;
⑶疑為淋病性關節炎患者的關節液,採集後立即送檢,或床旁培養為佳;
⑷不能用棉拭子浸蘸標本送檢。
十、膿汁及病灶分泌物
1、傷口
⑴表面傷口拭子採集方法及注意事項
① 僅限於皮膚與皮下組織,包括手術切口、褥瘡潰瘍、新生兒臍炎、嬰兒膿瘡病。
②用無菌生理鹽水或75%的酒精擦去病灶表面滲液;
③用無菌棉拭子抹去及較深部的膿汁分泌物或組織送檢;
④採集褥瘡潰瘍標本時應採集褥瘡邊緣的膿性分泌物,拭子放在運送培養基中立即送檢,不要採集創口表面的滲液。
⑵傷口、膿腫、竇道、壞疽組織採集方法及注意事項
①閉鎖性膿腫用碘酒和酒精消毒皮膚後,用滅菌注射器穿刺抽取全部膿液送檢,疑為厭氧菌感染時,排去針管內空氣將針頭插入滅菌橡膠塞內送檢;
②傷口處若有膿及滲出物要用無菌棉簽深入各種竇道中擦拭,用小刀刮取,穿刺抽吸或手術切除獲得深處傷口標本;
③當創傷出血時,敷有葯物在2h以內及燒傷在12h內均不應採集標本,此時獲得陽性結果機會甚少。
④採集標本注意觀察膿汁及分泌物性狀、色澤、氣味等。可為培養鑒定提供依據。
⑶燒傷創面
①燒傷創面需要膿性分泌物,焦痂迅速分離變棕黑、黑或紫羅蘭色,燒傷邊緣水腫。患者發燒>38℃或低體溫<36℃,合並低血壓。
②用無菌生理鹽水沖洗傷口創面。
③由於創面部位不同,細菌種類也不盡相同,要用滅菌棉拭子採集多個部位的炎症區送檢。
④採集痂下變黑或變性的不健康區邊緣或引流液等做定量培養及組織活檢。
2、厭氧傷口拭子
⑴厭氧專用棉棒或玻璃棒觸及深部膿汁;
⑵可用注射器抽吸,排去針管內空氣將針頭插入滅菌橡膠塞內送檢;
⑶立即送檢,送檢過程中必須保持在無氧條件;
⑷不宜做厭氧菌培養的有痰、喉拭子、鼻咽拭子、齒齦拭子、直腸、陰道和宮頸拭子以及回腸、結腸造瘺術的流出物,胃、小腸及大腸內容物等。
3、尿道口分泌物拭子
⑴男性用無菌紗布擦拭和清洗尿道口,然後採取從尿道口溢出的膿性分泌物;
⑵採集前列腺液時,先將尿道、膀胱沖洗,然後從肛門用手指按摩前列腺,促使前列腺液溢出;
⑶女性病人先用滅菌紗布或棉拭子仔細擦拭或清洗尿道口,然後從陰道內診壓迫尿道,使分泌物溢出;
⑷取子宮頸分泌物,先用內窺鏡擴張陰道,然後從宮頸口用滅菌棉拭子採取分泌物,盡量避免被陰道宮頸附近正常菌群的污染。
4、蜂窩織炎
⑴用無菌生理鹽水或酒精消毒皮膚;
⑵用細針在炎症最顯著處穿刺吸引;
⑶抽少量滅菌生理鹽水在針管內;
⑷注入無菌試管內送檢。
5、組織標本
⑴活體組織採取的微量標本,可直接接種在培養基內;
⑵表淺組織可直接用棉拭子擦拭、小刀颳去;
⑶較大組織塊的表面可採用燒灼或浸入沸水中5—10s,然後用滅菌剪刀切開,取其中的膿汁;
⑷深部組織標本可經皮膚穿刺或手術切取送檢;
⑸組織標本不可用福爾馬x固定;
⑹有時也可將沾有膿汁的最內層敷料放入無菌平皿內送檢。
十一、眼標本採集
⑴一般細菌,以無菌棉拭子採集眼分泌物,尤其膿性分泌物;
⑵沙眼衣原體,首先擦去眼結膜上面的分泌物,然後用無菌小刀刮取穹窿部及眼結膜上皮細胞,用鏈黴素處理後備用;
⑶對於剛治療或葯物沖洗過的患者最好12—24h後採集標本;
⑷對於淚囊炎患者可稍加擠壓後以無菌棉拭子採集標本。
;㈤ 臨床病原體檢測通常可採集的標本有哪些
且對混有雜菌和混合感染的標本不易明確其結果,報告可能的病原菌和直接葯敏結果。直接鏡檢對於確定進一步檢出步驟及鑒定方法也很有幫助.鑒定。對於散寬某些感染標本中發現的細菌臨床微生物學實驗室接到標本後應立即進行微生物學檢驗。 3,其臨床意義的確定有賴於定量培養法,有些標本如尿液。主要包括直接鏡檢,直接鏡檢還可評價標本是否符合檢驗要求,如尿路感染的尿液中檢出大腸埃希菌、生化反應.分離培養:通常由正派中常無菌部位採取的標本接種血平板,故分離出純培養物後應再作體外葯物敏感試驗,但據鏡檢結果和臨床信息提示可能有病原菌存在、生物發光測定法和基因或蛋白微型陣列晶元技術等、進行分離培養和鑒定、聯合葯敏試驗和檢測細菌產生的抗生素滅活酶等,分別取0,直接將臨床標本接種於平板。即取一定量的標本如液體標本用液體培養基作一系列稀釋。若原始培養為陰性。 (四)常規檢驗 1、酶免疫技術、PCR技術。核酸檢測包括核酸探針雜交、菌落特點、檢測特異性抗原或病原體成分.1ml塗布於血瓊脂平板或傾注培養、血清學試驗,離心濃縮或溶解離心法處理。目前尚有某些微量鑒定系統:常用方法包括抑菌試驗、殺菌試驗,則應再採集大量標本。 (二)快速診斷 快速檢測病原體成分主要是指特異性抗原和核酸檢測,也可能是污染菌或正常菌群。如用於鑒定腸桿菌科的20E。 對於存在正常菌群部位採集的標本.體外純菌葯物敏感性試驗,分離時應採用選擇培養基以利於病原菌生長。特異性抗原檢測包括免疫熒光技術。 (三)直接葯敏試驗 直接葯敏試驗即在分離培養病原體的同時、化學發光;最後鑒定和細菌葯敏結果一般不超過3天,大部分細菌可於24~48h生長良好,鑒定非發酵菌的20NE及鑒定厭氧菌的20A等、體外葯敏試驗等,35℃24h後計算每克標本所含細菌數。 2、腦脊液等經過離心濃縮後鏡檢出其初步結果對有些病人標本有診斷參考價值、簡便、動物接種等鑒定,還規定除血培養外。但因其在試驗時接種量難以標准化;組織標塵掘山本稱量後製成懸液、對流免疫電泳,在18~24h內可獲得結果,置於空氣或含5%~10%CO2的氣缸中培養,可能是病原菌、膠乳凝集試驗。 (一)直接鏡檢 標本經塗片染色或制備濕片鏡檢。其他快速檢測法還有氣-液相色譜法,所有送檢標本必須在24h內預報,值得推廣,說明標本是否合格,取沉澱接種營養豐富的需氧或厭氧培養基來培養:分離出的細菌一般應經過細菌形態,用抗生素紙片作葯物敏感性試驗,10-3等,10-2;初步鑒定和直接葯敏結果於24h或次晨報告,其鑒定快速、化學發光免疫測定等。另外,也可加某些抗生素抑制污染菌的生長,並稀釋成l0-1。 (五)報告 直接鏡檢要求2h報告,發現微生物情況和特點
㈥ 臨床微生物檢驗的常見標本有哪些
這個可多了,血液、尿液、腦脊液、骨髓液、痰液、關節液、胸水、腹水、膿液分泌物,等等
㈦ 微生物檢測包括哪些啊
食品中微生物指標的常見檢驗項目如下:菌落總數、大腸菌群計數、大腸桿菌計數、腸道致病菌(沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌)、副溶血性弧菌、單核細胞增生李斯特氏菌、雙岐桿菌、空腸彎麴菌、黴菌計數和酵母計數。
一般食品中活菌數達到108cfu.g⁻¹時,則可認為食品處於初期腐敗階段。
(7)臨床微生物檢驗常見標本有哪些擴展閱讀
微生物檢驗方法包括顯微鏡檢、染色技術、培養基制備技術、接種、分離純化和培養技術等。
接種,將微生物接到適於它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程。
分離純化,在進行菌種鑒定時,所用的微生物一般均要求為純的培養物。得到純培養的過程。
培養,根據培養時是否需要氧氣,可分為好氧培養和厭氧培養。根據培養基的物理狀態,可分為固體培養和液體培養兩大類。
㈧ 病原微生物中細菌常見檢測方法有哪些
1、快速測試片技術法
快速測試片是指以紙片、紙膜、膠片等作為培養基載體,將特定的培養基和顯色物質附著在上面,通過微生物在上面的生長、顯色來測定食品中微生物的方法。
細菌總數檢測紙片的研製始於 20 世紀 80 年代,其主要優點是簡便、實用、經濟、操作性強。近年來以濾紙和美國某公司的 Petrifilm 為載體的測試片已開始被廣泛應用。
2、生物電化學方法
生物電化學方法是指通過電極測定微生物產生或消耗的電荷,從而提供分析信號的方法。微生物在滋生代謝過程中,培養基的電化學性質如電流、電位、電阻和電導等會發生變化,所以可以通過檢測分析這些電化學參量的變化來實現對微生物的快速測定。
常見的有:阻抗分析法、電位分析法、電流分析法等。生物電化學方法具有測量快速、直觀、操作簡單、測量設備成本低和信號的可控性等特點。
3、微菌落技術
微菌落是指細菌生長繁殖早期在固相載體上所形成的只能藉助於顯微鏡觀察的微小菌落。微菌落技術具有快速、經濟、實用的特點,其研究始於 20 世紀50年代,定量測定技術從 20 世紀 70 年代開始,國外已有報道將該法應用於水、食品中細菌總數的快速檢測。
4、氣相色譜法
氣相色譜應用到微生物的檢測中,主要是依據不同微生物的化學組成或其產生的代謝產物各異,利用上述色譜檢測可直接分析各種體液中的細菌代謝產物、細胞中的脂肪酸、蛋白質、氨基酸、多肽、多糖等,以確定病原微生物的特異性化學標志成分,協助病原診斷和檢測。
5、高效液相色譜法
利用高效液相色譜檢測可分析各種體液中的細菌代謝產物、病原微生物等,以確定病原微生物的特異性化學標志成分,協助病原診斷和檢測。
㈨ 微生物檢驗包括哪些項目
微生物檢測有一般微生物如細菌總數、黴菌和酵母計數檢測,以及致病菌檢測,在一定的培養條件下(相同的培養基、溫度以及培養時間),同種微生物表現出穩定的菌落特徵。
根據微生物的代謝特點,在培養基中加入某種指示劑或化學葯品。與選擇培養相比,鑒別培養基的鑒別所得結果的范圍比較小,一般可直接測定某微生物的種類。
選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特徵進行間接判斷,得到的微生物往往並不只有一種,但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。
微生物檢驗范圍
國內外開展微生物檢驗的食品種類較多,食品分類方法也不盡相同。總的來看涉及微生物檢驗的食品種類主要有:奶製品、預烹煮食品、飲用水、蛋製品、水果、穀物、嬰幼兒食品、肉及肉製品、軟體動物、禽肉、貝類、白明膠、香草(葯)。
即食食品、罐頭食品、調味品,粉類製品、豆製品、冷凍飲品、糖果、海鮮、甜點、蔬菜、藻類、食療食品、米面製品等。
我國開展微生物檢驗的重點食品種類為:奶製品、罐頭食品、調味品、蛋製品、澱粉類製品、發酵和非發酵性豆製品、冷凍飲品、糖果、飲用天然礦泉水等,其中食糖以及保健品的微生物檢驗為我國所獨有。