如何檢測真核生物基因變異

A. 基因突變和染色體變異的判斷方法

在真核生物的體內，染色體是遺傳物質DNA的載體。當染色體的數目發生改變時（缺少，增多）或者染色體的結構發生改變時，遺傳信息就隨之改變，帶來的就是生物體的後代性狀的改變，這就是染色體變異。
一個基因內部可以遺傳的結構的改變,
基因突變
基因突變是指基因的分子結構的改變，即基因中的脫氧核苷帶掘酸的排列順序發生了改變，從而導致遺傳信息的改變。基因突變的頻率很低差羨，但能產生新的基因，對生物的進化有重要意義。發生基因突變的原因是
DNA在復制時因受內部因素和外界因素的干擾而發生差錯。典型實例是鐮刀形細胞貧血症。基因突變是誘變育種的理論基礎。
染色體變異是指染色體的數目或結構發生改變。重點是數目的變化。染色體組的概念重在理解。一個染色體組中沒有同源染色體，沒有等位基因，但一個染色體組中所包含的遺傳信息是一套個體發育所需要的完整的遺傳信息，即常說的一個基因組。對二倍體生物蠢慶核來說，配子中的所有染色體就是一個染色體組。染色體組數是偶數的個體一般都具有生育能力，但染色體組數是奇數的個體是高度不孕的，如一倍體和三倍體等。

B. 怎麼判斷基因突變和染色體變異

首先：（1）基因衫耐頃突變：由於DNA分子中發生鹼基對的增添、缺失或改變，而引起的基因結構的改變。（2）染色體變異：在真核生物的體內，染色體是遺傳物質DNA的載體。當染色體的數目發生改變時（缺少，增多）或者染色體的結構發生改變時，遺傳信息就隨之改變，帶來的就是生物體的後代性狀的改變。
其次：（1）基因突變通常發生在DNA復制時期，即細胞分裂間期，包括有絲分裂間期和減數分裂間期；同時基因突變和脫氧核糖核酸的復制、DNA損傷修復、癌變和衰老都有關系，基因突變也是生物進化的重要因素之一 ；基因突變具有的特點為：A．稀有性 B. 共有性 C. 恆定性 D. 可逆性 E. 平行性 F. 重演性 G. 有利性 H. 有害性 ；【注意：突變（mutation）是遺傳物質中任何可檢測的能遺傳的改變，但不包括遺傳重組。突變可以發生在染色水平或者基因水平。突變可以是自發的，但也可被某些誘變劑（mutagen）誘發。】 （2）染色體結構變異的發生是內因和外因共同作用的結或陸果,外因有各種射線、化學葯劑、溫度的劇變等,內因有生物體內代謝過程的失調、衰老等。在這些因素的作用下, 染色體可能發生斷裂,斷裂端具有癒合與重接的畝悄能力;當染色體在不同區段發生斷裂後,在同一條染色體內或不同的染色體之間以不同的方式重接時,就會導致各種結構變異的出現; 特點：1.結構變化：缺失，重復，倒位，異位；2.數目變化：整體性變異與非整體性變異。【注意：染色體結構變異,使排列在染色體上的基因的數量和排列順序發生改變,從而導致性狀的變異,大多數染色體變異對生物體是不利的,有的甚至導致死亡；缺失對個體的生長和發育很不利： ①缺失純合體很難存活 ②缺失雜合體的生活力很低 ③含缺失染色體的染色體一般敗育 ④缺失染色體主要是通過雌配子傳遞的】
最後：總之，題目中是基因突變時，不會突出染色體的變化，多提到鹼基對的變化，當然啦，反之，強調染色體時多為染色體變異，還有可能是基因重組之類的。（要小心哦，區別開來很重要，建議多查看一些有關圖片，仔細區分，找找感覺！有幫助勒！加油哦，祝你成功！）

C. 如何用實驗區別基因突變和染色體變異

對染色體變異的判定，可以通過核型檢查即可，得樣品的核型分析結果，看其有無染色體的倍數、條數增減悔碰，單條染色體有無缺失或異常易位等。
而要判嘩前宏定是亂冊否是基因突變，則需要具體到某一個基因，比如您懷疑某個基因可能存在突變，則可以設計引物，做PCR或逆轉錄PCR，對該基因序列測序即可知道是否變異。如果沒有特定的懷疑對象，就不好找了。

D. 目的基因的鑒定方法有哪些

基因的鑒定方法：
間接識別法
在基因的間接識別法（Extrinsic Approach）中，人們利用已知的mRNA或蛋白質序列為線索在DNA序列中搜尋所對應的片段。由給定的mRNA序列確定唯一的作為轉錄源的DNA序列；而由給定的蛋白質序列，也可以由密碼子反轉確定一族可能的DNA序列。因此，在線索的提示下搜尋工作相對較為容易，搜尋演算法的關鍵在於提高效率，並能夠容忍由於測序不完整或者不精確所帶來的誤差。BLAST是目前以此為目的最廣泛使用的軟體之一。
若DNA序列的某一片段與mRNA或蛋白質序列具有高度相似性，這說明該DNA片段極有可能是蛋白編碼基因。但是，測定mRNA或蛋白質序列的成本高昂，而且在復雜的生物體中，任意確定的時刻往往只有一部分基因得到了表達。這意味著從任何單個細胞的mRNA和蛋白質上都只能獲得一小部分基因的信息；要想得到更為完整的信息，不得不對成百上千個不同狀態的細胞中的mRNA和蛋白質測序。這是相當困難的。比如，某些人類基因只在胚胎或胎兒時期才得到表達，對它們的研究就會受到道德因素的制約。
盡管有以上困難，對人類自身和一些常見的實驗生物如老鼠和酵母菌，人們已經建立了大量轉錄和蛋白質序列的資料庫。如RefSeq資料庫，Ensembl資料庫等等。但這些資料庫既不完整，也含有相當數量的錯誤。
從頭計演算法
鑒於間接識別法的種種缺陷，僅僅由DNA序列信息預測蛋白質編碼基因的從頭計演算法（Ab Initio Approach）就顯得十分重要了。一般意義上基因具有兩種類型的特徵，一類特徵是「信號」，由一些特殊的序列構成，通常預示著其周圍存在著一個基因；另一類特徵是「內容」，即蛋白質編碼基因所具有的某些統計學特徵。使用Ab Initio方法識別基因又稱為基因預測。通常我們仍需藉助實驗證實預測的DNA片段是否具有生物學功能。
在原核生物中，基因往往具有特定且容易識別的啟動子序列（信號），如Pribnow盒和轉錄因子。與此同時，構成蛋白質編碼的序列構成一個連續的開放閱讀框（內容），其長度約為數百個到數千個鹼基對（依據該長度區間可以篩選合適的密碼子）。除此之外，原核生物的蛋白質編碼還具有其他一些容易判別的統計學的特徵。這使得對原核生物的基因預測能達到相對較高的精度。
對真核生物（尤其是復雜的生物如人類）的基因預測則相當有挑戰性。一方面，真核生物中的啟動子和其他控制信號更為復雜，還未被很好的了解。兩個被真核生物基因搜尋器識別到的訊號例子有CpG islands及poly(A) tail的結合點。
另一方面，由於真核生物所具有的splicing機制，基因中一個蛋白質編碼序列被分為了若干段（外顯子），中間由非編碼序列連接（基因內區）。人類的一個普通蛋白質編碼基因可能被分為了十幾個外顯子，其中每個外顯子的長度少於200個鹼基對，而某些外顯子更可能只有二三十個鹼基對長。帶唯歲因而蛋白質編碼的一些統計學特徵變得難於判別。
高級的基因識別演算法常使用更加復雜的概率論模型，如隱馬爾可夫模型。山巧Glimmer是一個廣泛應用的高級基因識別程序，它對原核生物基因的預測已非常精確，相比之下，對真核生物的預測則效果有限。GENSCAN計劃是一個著名的例子。
比較基因組學
由於多個物種的基因組序列已完全測出，使得比較基因組學得以發展，並產生了新的基因識別的方法。該方法基於如下原理：自然選擇的力量使得基因和DNA序列上具有生物學功能的其他片段較其他部分有較慢的變異速率，在前者的變異更有可能對生物體的生存產生負面影響，因而難以得到保存。因此，通過比較相關的物種的DNA序列，我們能夠取得預測基因的新線索。2003年，通過對若干種酵母基蠢睜因組的比較，人類對原先的基因識別結果作了較大的修改；類似的方法也正在應用於人類的基因組研究，並可能在將來的若干年內取得成果。

E. 怎麼判斷基因突變和染色體變異

染色體和基因是完全不同的東西也~一個蚯蚓一個七巧板~ 咯~還是給你概念吧~染色體鑒定：（1）最初細胞質存在著無著絲點的斷片。
（2）缺失雜合體中，聯會時形成環狀或瘤狀突起，但易與重復相混淆，必須：
①參照染色體的正常長度
②染色粒和染色節的正常分布
③著絲點的正常位置
（3）當頂端缺失較長時，可在雙線期檢查缺失雜合體雜交尚未完全端化的二價體，注意非姐妹染色單體的末端是否有長短。
遺傳效應：缺失對個體的生長和發育不利：
①缺失純合體很難存活
②缺失雜合體的生活力很低
③含缺失染色體的染色體一般敗育
④缺失染色體主要是通過雌配子傳遞的
基因不論是真核生物還是原核生物的突變，也猛睜不論是什麼類型的突變，都具有隨機性、低頻性和可逆性等共同的特性。
①隨機性。指基因突變的發生在時間上、在發生這一突變的個體上、在發生突變的基因上，都是隨機的。在高等植物中所發現的無數突變都說明基因突變的隨機性。在細菌中則情況遠為復雜。
②低頻性。突變是極為稀有的，基因以極低的突變率（生物界總體平均為0.0001%）發生突變。
③可逆性。突變基因又可以通過突變而成為野生型基因，這一過程稱為回復突變 。正向突變率總是高於回好知跡復突變率，一個突變基因內部只有一個位置上的結構改變 才能使它恢復原狀。
④少利多害性。一般基因突變會產生不利的影響，被淘汰或是死亡，但有極少數會使物種增強適應性。
⑤不定向性。例如控制黑毛Ａ基因可能突變為控制白毛的a+或控制綠毛的a-
⑥有益性。一般基因突變是有害的，但是有極為少數的是有益突變。例如一隻鳥的嘴巴很短，突然突變變種後，嘴巴會變長，這樣會容易捕捉食物或水。
一般，基因突變後身體會發出抗體、抗原或其他修復體自行修復。可是有一些突變是不可回轉性的。突變可能導致立即死亡，也可以導致慘重後果，如器官無法正常運作，友並DNA嚴重受損，身體免疫力低下等。如果是有益突變，可能會發生奇跡，如身體分泌中特殊變種細胞來保護器官，身體，或在一些沒有受骨骼保護的部位長出骨骼。基因與DNA就像是每個人的身份證，可他又是一個人的先知，因為它決定著身體的衰老、病變、死亡的時間。

F. 檢測基因表達的方法

主要用探針檢測mRNA或用抗體檢測出表達的蛋白質(轉錄水平上對特異mRNA的檢測和翻譯水平上對特異蛋白質的檢測)

一、外源基因轉錄水平的鑒定

基因表達分為轉錄及翻譯兩咐源階段，轉錄是以DNA（基因）為模板生成mRNA的過程，翻譯是以mRNA為模板生成蛋白質的過程，檢測外源基因的表達就是檢測特異mRNA及特異蛋白質的生成。所以基因表達檢測分為兩個水平。

即轉錄水平上對特異mRNA的檢測和翻譯水搭旦平上對特異蛋白質的檢測。轉錄水平上的檢測主要方法是Northern雜交，它是以DNA或RNA為探針，檢測RNA鏈。和Southern雜交相同，Northern雜交包括斑點雜交和印跡雜交。

也可用RT-PCR（reverse transcribed PCR）方法檢測外源DNA在植物體內的轉錄表達。其原理是以植物總RNA或mRNA為模板進行反轉錄，然後再經PCR擴增。

如果從細胞總RNA提取物中得到特異的cDNA擴增條帶，則表明外源基因實現了轉錄。此法簡單、快速，但對外源基因轉錄的最後決定，還需與Northern雜交的實驗結果結合。

二、外源基因表達蛋白的檢測

表達蛋白的檢測方法有三種：

1、生化反應檢測法：主要通過酶反應來檢測；

2、免疫學檢測法：通過目的蛋白（抗原）與其抗體的特異性結合進行檢測，具體方法有Western雜交、酶聯免疫吸附法（ELISA）及免疫沉澱法；

3、生物學活性的檢測。

Western雜交是將聚丙烯醯胺凝膠（SDS-PAGE）電泳分離抗原（Antigen）固定在固體支持物上（如硝酸纖維素膜，NC膜）。不同分子量大小的蛋白質在凝膠中遷移率不同，據此可確定特定的抗原存在與否以及相對豐度，或者蛋白質是否遭到降解等。

蛋白質電泳後轉到NC膜，放在蛋白質（如牛血清蛋白BSA）或奶粉溶液中，溫育，以封閉非特異性位點，然後用含有放射性標記或酶標記的特定抗體雜交，抗原-抗體結合，再通過放射性自顯影或顯色觀察。

(6)如何檢測真核生物基因變異擴展閱讀

外顯子與內含子表達過程中的相對性 從內含子與外顯子的定義來看，兩者是不能混淆的，但是真核生物的外顯子也並非都「顯」（編碼氨基酸），除了tRNA基因和rRNA基因的外顯子完全「不顯」之外，幾乎全部的結構基因的首尾兩外顯子都只有部分核苷酸順序編碼氨基酸，還有完全不編碼基酸的外顯子，如人類G6PD基因的第一外顯子核苷酸順序。

已發現一個基因的外顯子可以是另一基因的內含子，所這亦然。以小鼠的澱粉酶基因為例，來源於肝的與來源於唾液腺的是同一基因。澱粉酶基因包括4個外顯子，肝生成的澱粉酶不保留外顯子1，而唾液腺中的澱粉酶則保留了外顯子1的50bp順序，但把外顯子2與前後兩段內含子一起剪切掉，經過這樣剪接，外顯子2就變成唾液澱粉酶基因中的內含子。

同一基因在不同組織能生成不同的基因產物來源於不同組織的類似蛋白，可以由同一基因編碼產生，這種現象首先是由於基因中的增強子等有組織特異性，它能與不同組織中的組織特異因子結合，故在不同組織中同一基因會產生不同的轉錄物與轉錄後加工作用。

此外真核生物基因可有一個以一的poly(A)位點，因此能在不同的細胞中產生具有不同3』末端的前mRNA，從而會有不同的剪接方式。由於大多數真核生物基因的轉錄物是先加poly(A)尾巴，然後再行剪衡枝態接，因此不同組織、細胞中會有不同的因子干預多聚腺苷酸化作用，最後影響剪接模式。

G. 基因突變，基因重組，染色體變異都能用顯微鏡看到嗎

電子顯微鏡可以，光學森輪顯微鏡不可以

基因突變：基因組DNA分子發生的突然的、可遺傳的變異現象此凳信（gene mutation）。
基因重組：指在生物體進行有性生殖的過程中，控制不同性狀的基因重新組合。
染色體變異：在真核生物的體內，染色體是遺傳物質DNA的載體。當染色體的數目發生改變時（缺少，增多）或者染色體的結構發生改變時，遺傳信息就隨之改變，帶來的就是生物體的後代性狀的改變，這就是染色體變異。它粗並是可遺傳變異的一種。根據產生變異的原因，它可以分為結構變異和數量變異兩大類。

H. 怎麼判斷基因突變和染色體變異

1基因突變所有生物叢燃歲（包括病毒）均可發生，具段大有普遍性，染色體變異真核生物細胞增殖過程均可發生2基因突變產生新的基因（產生了它的等位基因）、新的基因型、新的性狀，基因的分子結構發生改變，產生了滲睜新的基因，改變了基因的「質」，出現了新性狀，但沒有改變基因的「量」。染色體變異不產生新的基因，但會引起基因數目或順序變化，染色體結構或數目發生改變，沒有產生新的基因，基因的數量可發生改變