『壹』 怎麼用顯微鏡檢測細菌有效菌數
一般來說觀察細菌都是昌亮有規定的,要求耐滾寬在多大的面積內,觀測出細菌個數。你可以先通過顯微鏡專用的分化尺與目鏡刻度尺配合使用來測量每單位面積內的細菌個數。具體的設備要有的,否則很難評判的。專業一點價格大概在3000左右,普通一點的備敏600-1500不等
『貳』 測定微生物數量的方法
現在用的多的就是這幾種,樓主挑著看吧
細菌計數1.計數器測定法:
即用血細胞計數器進行計數。取一定體積的樣品細胞懸液置於血細胞計數器的計數室內,用顯微鏡觀察計數。由於計數室的容積是一定的(O.1mm3),因而根據計數器刻度內的細菌數,可計算樣品中的含菌數。本法簡便易行,可立即得出結果。
本法不僅適於細菌計數,也適用於酵母菌及黴菌孢子計數。
2、電子計數器計數法:
電子計數器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,小孔僅能通過一個細胞,當一個細胞通過這個小孔時,電阻明顯增加,形成一個脈沖,自動記錄在電子記錄裝置上。
該法測定結果較准確,但它只識別顆粒大小,而不能區分是否為細菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。
3、活細胞計數法
常用的有平板菌落計數法,是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然後將定量的稀釋液進行平板培養,根據培養出的菌落數,可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高,是一種檢測污染活菌數的方法,也是目前國際上許多國家所採用的方法。使用該法應注意:①一般選取菌落數在30~300之間的平板進行計數,過多或過少均不準確;②為了防止菌落蔓延,影響計數,可在培養基中加入O.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC);③本法限用於形成菌落的微生物。
廣泛應用於水、牛奶、食物、葯品等各種材料的細菌檢驗,是最常用的活菌計數法。
4、比濁法
比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定范圍內與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計測定菌液,用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。
此法簡便快捷,但只能檢測含有大量細菌的懸浮液,得出相對的細菌數目,對顏色太深的樣品,不能用此法測定。
5、測定細胞重量法
此法分為濕重法和乾重法。濕重法系單位體積培養物經離心後將濕菌體進行稱重;乾重法系單位體積培養物經離心後,以清水洗凈放人乾燥器加熱烘乾,使之失去水分然後稱重。
此法適於菌體濃度較高的樣品,是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法。
6、測定細胞總氮量或總碳量
氮、碳是細胞的主要成分,含量較穩定,測定氮、碳的含量可以推知細胞的質量。此法適於細胞濃度較高的樣品。
7、顏色改變單位法(colour change unit,簡稱CCU)
這種方法通常用於很小,用一般的比濁法無法計數的微生物,比如支原體等,因為支原體的液體培養物是完全透明的,呈現為清亮透明紅色,因此無法用比濁法來計數,由於支原體固體培養很困難,用cfu法也不容易計數,因此需要用特殊的計數方法,即CCU法。它是以微生物在培養基中的代謝活力為指標,來計數微生物的相對含量的,下面以解脲脲原體為例單介紹其操作:,簡
(1)取12隻無菌試管,每一管裝1.8ml解脲脲原體培養基。
(2)在第一管加入0.2ml待測解脲脲原體菌液,充分混勻,從中吸取0.2ml加入第二管,依次類推,10倍梯度稀釋,一直到最末一管
(3)於37度培養,以培養基顏色改變的最末一管作為待測菌液的CCU,也就是支原體的最大代謝活力,比如第六管出現顏色改變,他的相對濃度就是10的6次方CCU/ml.
一般來說,比濁法和菌落計數法就可以滿足絕大多數細菌的計數,但是對支原體這樣比較特殊的微生物,用CCU法比較合適。
『叄』 如何檢測菌落總數
菌落總數檢測一般步驟為:
采樣 — 樣品制備與稀釋 — 倒平板 — 塗布平板 — 倒置培養 — 菌落計數 — 計算菌落總數
樣品制備,需要對樣品進行均質,根據客戶需要檢測的樣品不同。WIGGENS提供不同的均質設備,如均質機,拍打式均質器等;
樣品的稀釋,國標中採用1:10的十倍稀釋方法,SOCOREX提供各種手動精密移液器,瓶口分液器,移液管控制器為液體操作提供了保證。
倒平板,扒敬使用的培養基為含有瓊脂的固體培養基。培養基在配備的過程中需要經過煮沸和保溫的步驟。WIGGENS紅外加熱磁力攪拌器,直接使用紅外輻射方式進行加熱,1L培養基只需要10分鍾即春運慎可煮沸,極大節約了客戶培養基制備時間。在倒平板之前,需要恆溫培養基46±1 ℃, WIGGENS恆溫水浴鍋,可以為用戶提供的溫度控制和恆溫條件;
塗布平板,培養基在培養皿中冷卻成固態之後,將稀釋後的樣品用移液器取悄頃1mL,滴到培養基表面,用塗布棒塗勻。WIGGENS有專用的培養皿轉盤,可以有效的將樣品液均勻的塗布在培養基表面。
倒置培養,將塗布完畢的平板,放入恆溫培養箱中進行培養,一般培養時間約為48h。WIGGENS恆溫培養箱內容積50-140L各種規格的台式及落地式培養箱,先進的設計及數據介面,可以直接通過電腦編程式控制制及信息處理,非常適合規范化培養要求。
菌落數計算,經過48小時的培養之後,在培養基表面會長出菌斑,每個菌斑代表一個微生物。一般在培養皿中菌落數為30-300個之間,為有效菌落數。低於30個,會因為樣本量不足,隨機性大;超過300個,會因為菌落數太多,過於密集產生菌斑重疊等現象,不利於准確計數。WIGGENS菌落計數器,是帶有非閃爍式環形光源,放大鏡,壓力感測器,計數筆等,可以讓使用者輕松計數。
計算菌落總數,培養皿中的菌落數需要通過公式換算。 WIGGENS菌落計數器,配套軟體可以直接通過壓力感測器進行培養皿中菌落計數,通過軟體內嵌程序直接計算出被檢測樣品中菌落總數。
『肆』 如何測量微生物的菌數
關於細菌數量的統計,廣義的細菌是指所有的微生物,包括細菌(bacteria)、黴菌(filamentous fungi)和酵母(yeast),細菌是原核微生物,黴菌和酵母是真核微生物,為什麼要區分開,後面會提到;狹義的細菌就是指的上面的bacteria。傳統的對微生物數量統計的方法通常是使用塗布平板法,這個方法統計的微生物數量跟實際微生物數量還是有差別的,因為微生物分為可培養微生物與不可培養微生物,據文獻報道,不可培養微生物佔到自然界90%以上,因此稀釋塗平板法的統計結果,我們自己心裡有數就好。
『伍』 細菌總數怎麼檢測
細菌總數檢測目前國標規定的方法為平板計數法,其檢驗方法是:
在玻璃平皿內,接種一毫升水樣或祥搭稀釋水樣於加熱液化的營養瓊脂培養基中,冷卻凝固後在37°C培養24小時,培養基上胡宴旦的菌落數或乘以水樣的稀釋倍數即為細菌總數。
有的國家把培養溫度定為35°C或其他溫度,也有把培養時間定為48小時的。這褲擾種方法精度高,但耗時長,難以滿足實際工作需要。
為了簡化檢測程序、縮短檢測時間,國內外學者進行了大量的快速檢測方法的研究,提出了阻抗檢測法、Simplate TM全平器計數法、微菌落技術、紙片法等檢測方法,取得了一定的成果,但檢測時間仍在4 h以上。
本研究在分析了已有研究成果的基礎上,提出了在濾膜上染色後,直接計數的細菌總數檢測方法,具體步驟為:
用集菌儀進行細菌收集→在膜上進行染色→在油鏡下計數→按公式計算出菌液濃度。實驗結果表明,該方法與傳統的平板培養法無顯著性差異,檢測時間約1 h,是一種快速的細菌總數檢測方法。
(5)微生物檢查如何查看個數擴展閱讀:
水中通常存在的細菌大致可分為三類:
1、天然水中存在的細菌。普通的是熒光假單孢桿菌、綠膿桿菌,一般認為這類細菌對健康人體是非致病的。
2、土壤細菌。當洪水時期或大雨後地表水中較多。它們在水中生存的時間不長,在水處理過程中容易被去除。腐蝕水管的鐵細菌和硫細菌也屬此類。
3、腸道細菌。它們生存在溫血動物的腸道中,故糞便中大量存在。水體中發現這類細菌,可以認為已受到糞便的污染。致病性腸道細菌有沙門氏桿菌(傷寒和副傷寒菌)、B型炭疽菌、痢疾志賀氏菌和霍亂弧菌等。
『陸』 細菌總數是怎麼檢驗的
細菌總數是水質參數之一,指單位體積水中的細菌總量。其檢驗方法是:在玻璃平皿內,接種一毫升水樣或稀釋水樣於加熱液化的營養瓊脂培養基中,冷卻凝固後在37°C培養24小時,培養基上的菌落數或歲或乘以水樣的稀釋倍數即為細菌總數。有的國家把培養溫度定為35°C或其他溫度,也有把培養時間定為48小時的。
水中通常存在的細菌大致可分為三類:
(1)天然水中存在的細菌。普通的是熒光假單孢桿菌、綠膿桿菌,一般認為這類細菌對健康人體是非致病的。乎並伍
(2)土壤細菌。當洪水時期或大雨後地表水中較多。它們在水中生存的時間不長,在水處理過程中容易被去除。腐蝕水管的鐵細菌和硫細菌也屬此類。
(3)腸道細菌。它們生存在溫血動物的蔽物腸道中,故糞便中大量存在。水體中發現這類細菌,可以認為已受到糞便的污染。致病性腸道細菌有沙門氏桿菌(傷寒和副傷寒菌)、志賀氏菌(痢疾菌)和霍亂弧菌等。
『柒』 微生物檢驗取樣數量如何確定
問題不夠清楚哦,你要測定什麼,微生物限度,還是已知菌的檢測?我只能舉例說明哦,是關於葯品的。不明白的你可以Hi我,或追問。我根據你的問題按步驟來回答。一、取樣1、供試品應隨機抽樣。一般抽樣量(2個以上最小包裝單位)為檢驗量的3倍量。2、對異常的供試品應針對性的抽樣。抽樣時,凡發現有異常或可疑的樣品,應選取有疑問的樣品,但機械損傷、明顯破裂的包裝不得作為樣品。凡能從葯品、瓶口(外蓋內側及瓶口周圍)、外觀看出長蟎、發霉、蟲蛀及變質的葯品,可直接判為不合格,無需在抽樣檢驗。不能以外觀有上述情況而檢查內容物合格,來判斷該葯品合格。3、供試品收檢後應及時檢驗,若有困難,應存放在該品種規定的儲存條件下(一般為陰涼乾燥處),勿冷藏或冷凍,以防供試品內污染菌因保存條件不妥引起致死、損傷或繁殖。4、供試品在檢驗之前,應保持原包裝狀態,嚴禁開啟,包裝已開啟的樣品不得作為供試品。5、供試品的取樣必須在凈化條件下無菌操作,嚴防再污染。(原料葯、裝量大的葯)6、有劑型檢驗量均需取自2個以上包裝單位(中葯蜜丸、膜劑,除需取自2個以上包裝外,還應取4丸、片以上樣品)。7、固體及半固體(粘稠性供試品)制劑檢驗量為10克。8、液體制劑檢驗量為10毫升。9、膜劑除另有規定外,中葯膜劑檢驗量為30~50cm2 ,化學膜劑及生化葯膜劑檢驗量為 100cm2 。10、貴重的或微量包裝的供試品檢驗量可以酌減,除另有規定外,口服固體制劑不低於3克,液體制劑採用原液者不得少於6毫升,採用供試液者不得少於3毫升,外用葯品不得少於5克。二、培養基的制定1、一般如果是微生物限度的話,有兩種培養基:檢測細菌用營養瓊脂培養基,檢測黴菌及酵母菌用玫瑰紅鈉瓊脂培養基。2、另外,如果還有致病菌要求的話,通常革蘭氏陰性腸道菌用伊紅美藍瓊脂培養基(EMB瓊脂),沙門氏菌用沙門氏志賀氏菌屬瓊脂(SS 瓊脂),霍亂弧菌用硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖瓊脂培養基(TCBS瓊脂),等等……3、最後的觀察:通常是計數,如樓上所說的數個數。然後就是菌落形態的觀察,主要有大小、顏色、厚度、邊緣狀態等等。不過看到你對樓上的追問,我在想,你是不是想問對未知微生物的鑒定,譬如泥土裡的微生物種類、空氣中的微生物種類等?那是微生物的分離和鑒定,不叫檢測吧。那樣的話一般是用營養瓊脂培養基和馬丁氏瓊脂培養基。